陳冬亮 劉素梅

（江蘇省如皋市高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)畜牧獸醫(yī)站，江蘇如皋 226557）

ELISA技術(shù)在畜產(chǎn)品安全檢測中的應(yīng)用

陳冬亮 劉素梅

（江蘇省如皋市高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)畜牧獸醫(yī)站，江蘇如皋 226557）

ELISA技術(shù)及酶聯(lián)免疫吸附試驗技術(shù)，主要是使用固相載體吸附抗原，利用免疫酶在載體上進(jìn)行染色，最后利用分光光度計或者肉眼來判定底物顯色的結(jié)果，從而完成檢測。隨著社會經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人們的生活水平有了翻天覆地的變化，對食品質(zhì)量的要求也越來越高，因此更加先進(jìn)準(zhǔn)確地對食品中的有害物質(zhì)進(jìn)行檢測也顯得尤為重要。目前，對畜產(chǎn)品安全檢測的方法大多費時、費力，且費用昂貴，ELISA因其簡單便捷、準(zhǔn)確低廉的優(yōu)點越來越受到有關(guān)機構(gòu)的青睞，具有推廣價值。

ELISA技術(shù) 畜產(chǎn)品 安全檢測

ELISA技術(shù)是通過將抗體分子共價結(jié)合或者酶分子與抗體結(jié)合從而實現(xiàn)安全檢測，通過這種結(jié)合防護(hù)抗體原有的免疫學(xué)特性不會受到影響，酶的生物學(xué)活性也不會受到干擾，因此，ELISA技術(shù)的特異性和敏感性較高，對可溶性抗原抗體系統(tǒng)的檢測幾乎不會出現(xiàn)疏漏。同時，ELISA技術(shù)的安全性高，不會產(chǎn)生過多的污染，在進(jìn)行檢測時可以減少有機溶劑的劑量，從而對工作人員和環(huán)境不會造成威脅。本文簡單地介紹了ELISA技術(shù)在畜產(chǎn)品安全檢測中的應(yīng)用，希望借此促進(jìn)ELISA技術(shù)的推廣。

1 ELISA技術(shù)的應(yīng)用

1.1 檢測藥物殘留

畜產(chǎn)品的藥物殘留是目前畜產(chǎn)品安全的一個重點問題，主要是因為在進(jìn)行養(yǎng)殖時，為了防止牲畜生病，從而投放了部分藥品，以致牲畜體內(nèi)殘留著未能代謝出體外的藥物。如果殘留的藥物超過了規(guī)定的安全標(biāo)準(zhǔn)或者對牲畜使用了違禁藥品，那么將會給消費者的生命安全帶來嚴(yán)重的威脅。目前畜產(chǎn)品的藥物殘留主要包括激素類、抗生素、呋喃類、磺胺類、轉(zhuǎn)基因類、喹諾酮類藥品。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，ELISA技術(shù)不斷得到改進(jìn)和糾正，可以更加準(zhǔn)確地對畜產(chǎn)品中的藥物殘留進(jìn)行檢測，因其靈敏度高、操作便捷、價格低廉等優(yōu)點，是目前運用的最廣泛的檢驗法方之一。ELISA技術(shù)在進(jìn)行樣品檢測時，前期的準(zhǔn)備工作相當(dāng)簡便，并且可以同時進(jìn)行多個樣品的檢測，分析時間也較短，因此在進(jìn)行大批量的檢測工作時，具有高效安全的特性，而且其他檢測中所要使用到的甲醇、乙腈等有機溶劑在ELISA檢測中的用量大大降低，因此可以有效地減少對環(huán)境造成的污染。例如使用ELISA技術(shù)對豬肉、乳產(chǎn)品等進(jìn)行檢測時，檢出限可以達(dá)到2.0μg/kg。

激素類藥物對人體的損害非常大，對兒童、孕婦等特殊人群的損害更加嚴(yán)重，其中己烯雌酚是曾經(jīng)被大量使用的激素藥物，如今國際社會已經(jīng)對此激素進(jìn)行了嚴(yán)格的限制，目前我國水產(chǎn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)已經(jīng)將己烯雌酚的限量值規(guī)定在1μg/kg以內(nèi)。采用ELISA技術(shù)進(jìn)行己烯雌酚的檢測時，檢出限可以達(dá)到187.5ng/kg，符合國內(nèi)外對己烯雌酚殘留的檢出規(guī)定，相比其他檢測技術(shù)而言，靈敏度更高。

1.2 檢測生物毒素

生物毒素主要是由于牲畜通過食物鏈等原因從而使其殘留在體內(nèi)的生物活性物質(zhì)，不光會對生物本身造成一定的損害，同樣會對人體造成損害。目前較為常見的生物毒素包括藻類毒素和真菌毒素。目前ELISA技術(shù)在生物毒素的檢測中得到了迅速地發(fā)展，對于不同的毒素都有專門的ELISA試劑盒。

例如，黃曲霉素是生物毒素中較為嚴(yán)重的一種，且在牲畜體內(nèi)出現(xiàn)的頻率較高，如果長期食用會對人體造成嚴(yán)重的損害，甚至?xí)种掳┳饔?。?998年，我國便使用ELISA技術(shù)對飼料中的黃曲霉素B1進(jìn)行檢測，并將檢出限定位0.01μg/kg，整個檢測時間耗時2h左右，因此檢測便捷高效，而且由于黃曲霉素B1的成功檢測，對于黃曲霉素族中的其他毒素也有了相應(yīng)的檢測方法，成功地降低了生物毒素殘留的可能性。

1.3 檢測農(nóng)藥殘留

由于水源污染，同樣會給畜產(chǎn)品安全造成威脅。由于農(nóng)藥對蟲害病的有效性，因此農(nóng)藥被不斷地開發(fā)，尤其是有機磷農(nóng)藥被大量運用，從而使土壤、食物和水源中混入了大量的農(nóng)藥殘留，不光對環(huán)境造成污染，而且對人類的生命安全造成了嚴(yán)重威脅。我國目前在對污染物進(jìn)行監(jiān)測時依然優(yōu)先對敵百蟲、硫磷等農(nóng)藥進(jìn)行監(jiān)測。ELISA技術(shù)在對農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測時同樣具有方便快捷的特點，對殺蟲劑、除草劑、除菌劑等農(nóng)藥的檢測具有較高的靈敏度。

在農(nóng)業(yè)種植中，除草劑和殺蟲劑是使用率較高的農(nóng)藥，為我國農(nóng)產(chǎn)品的豐收帶來了幫助，但是如果使用不當(dāng)，同樣會造成大量的農(nóng)藥殘留，給消費者帶來一定的隱患。ELISA技術(shù)目前在對農(nóng)藥殘留的檢測范圍也在不斷擴(kuò)大，例如目前我國通過對殺蟲脒特異性抗體的研究和制備，從而建立起相應(yīng)的ELISA檢測法，從而有效地對殺蟲脒殘留情況進(jìn)行檢測。

1.4 檢測微生物

目前食品安全的一個主要影響因素就是微生物，所以畜產(chǎn)品同樣面臨著微生物污染的可能性。對畜產(chǎn)品進(jìn)行微生物檢測主要是對產(chǎn)品中帶有的致病菌和一般污染進(jìn)行監(jiān)測。常規(guī)的檢測方法需要較長的時間進(jìn)行微生物的分離培養(yǎng)和試驗，而ELISA技術(shù)則大大縮短了檢測時間。

例如在魚蝦貝類的養(yǎng)殖業(yè)中，由于環(huán)境的污染，沙門氏菌污染的情況比較嚴(yán)重。而利用ELISA技術(shù)，對沙門氏菌進(jìn)行監(jiān)測，可以在不與其他腸道桿菌發(fā)生交叉反應(yīng)的情況下，檢出99個菌株。對各種畜產(chǎn)品進(jìn)行監(jiān)測時，ELISA技術(shù)的檢測結(jié)果也不會受到產(chǎn)品本身成分的影響，并且2-3天就可以得到檢測結(jié)果。

另外還有一些病菌，例如大腸埃希菌在一定條件下會呈現(xiàn)出無法培養(yǎng)的狀態(tài)，但是通過環(huán)境的改變?nèi)杂锌赡軓?fù)蘇，造成對人體的損害，因此需要尋找更加準(zhǔn)確合適的方法進(jìn)行監(jiān)測。而根據(jù)相關(guān)研究表明，免疫學(xué)技術(shù)對于這類病菌的檢測具有優(yōu)勢，ELISA技術(shù)的發(fā)展正是為該種病菌的檢測提供了條件，具有很好的發(fā)展?jié)摿Α?/p>

1.5 檢測轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品

轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品近些年的發(fā)展非常迅速，但是轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品本身是將真菌、病毒、細(xì)菌等物質(zhì)植入到動植物體內(nèi)，從而使植物發(fā)生基因重組。目前對于轉(zhuǎn)基因的安全性并無定論，因此許多國家都對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品有嚴(yán)格的規(guī)定，我國也不例外。目前我國對于轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的檢測同樣可以利用ELISA技術(shù)，能夠快速進(jìn)行檢測和篩選工作。例如對于轉(zhuǎn)基因魚的檢測時，利用地高辛標(biāo)記的PCRELISA技術(shù)，可以快速檢測轉(zhuǎn)基因魚所帶有的另外兩種外源基因。該項技術(shù)將ELISA量化檢測技術(shù)、核酸雜交鑒定和PCR技術(shù)進(jìn)行了有機結(jié)合，從而保持了PCR檢測的優(yōu)點，同時增加了ELISA的靈敏性，使檢測的時間大大縮短，從而有效地對轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品進(jìn)行高效的檢測。

2 發(fā)展前景展望

ELISA技術(shù)雖然起步較晚，但是發(fā)展十分迅速，被廣泛運用于各個領(lǐng)域的檢測，從而使越來越多的ELISA商業(yè)試劑盒被生產(chǎn)出來。目前我國在畜產(chǎn)品的ELISA檢測中，仍然沒有形成統(tǒng)一的規(guī)定，檢測方法沒有形成完整的體系，從而使ELISA技術(shù)的優(yōu)點沒有很好地顯露出來。ELISA技術(shù)簡單快捷、準(zhǔn)確高效，因此在畜產(chǎn)品的安全檢測中擁有很大的發(fā)展空間，對于某一種畜產(chǎn)品的檢測，要繼續(xù)推進(jìn)樣品的純化率，并且對穩(wěn)定性和重現(xiàn)性進(jìn)一步提高，有效地降低檢測的成本，從而更好突破ELISA技術(shù)自身的局限性。

3 結(jié)語

ELISA技術(shù)相比傳統(tǒng)的檢測技術(shù)在畜產(chǎn)品安全檢測中具有快捷簡便、高效準(zhǔn)確、價格低廉等優(yōu)點，具有很好的發(fā)展前景，因此值得進(jìn)一步大力推廣，提升檢測效率和質(zhì)量。

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