劉思敏 黃金龍 梁文豪 羅賢宇 邢德剛

(廣東藥科大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，廣東 廣州 510006)

消化道腫瘤患者腸道菌群的變化

劉思敏 黃金龍1梁文豪2羅賢宇2邢德剛2

(廣東藥科大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，廣東 廣州 510006)

目的 探究消化道腫瘤患者腸道菌群的變化。方法 選取消化道腫瘤患者的糞便標(biāo)本，運(yùn)用傳統(tǒng)梯度稀釋法進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)。結(jié)果 消化道腫瘤患者與正常組相比，需氧菌中的腸球菌、大腸桿菌計(jì)數(shù)明顯增多(P<0.05)，葡萄球菌顯著增加(P<0.01)。厭氧菌中的雙歧桿菌、乳酸桿菌計(jì)數(shù)顯著性減少(P<0.05)，擬桿菌顯著增加(P<0.01)。結(jié)論 消化道腫瘤患者出現(xiàn)明顯腸道菌群失調(diào)。

消化道腫瘤；腸道菌群

人體腸道內(nèi)含有800多種菌屬，7 000多種菌株，構(gòu)成了腸道微生物組〔1〕。腸道菌群中絕大多數(shù)與宿主細(xì)胞是共生關(guān)系，參與食物分解、防御反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)和新陳代謝等重要生理過程。研究顯示腸道微生態(tài)是惡性腫瘤發(fā)生和進(jìn)展的關(guān)鍵調(diào)控因素〔2〕。腸道菌群與惡性腫瘤之間的關(guān)系至今還未被完全闡明，但越來越多的證據(jù)揭示了腸道微生態(tài)與局部炎癥、代謝產(chǎn)物和基因組穩(wěn)定性的聯(lián)系，這些因素可能在癌變過程中發(fā)揮重要作用〔3,4〕。本研究擬分析消化道腫瘤患者的主要腸道菌群。

1 資料與方法

1.1 對象 廣東藥科大學(xué)附屬第一和第二醫(yī)院2015年5月至2016年12月消化道腫瘤確診患者共56例，其中男35例，女21例，年齡30～65歲，平均(56.70±10.46)歲;排除標(biāo)準(zhǔn)：①近期遭遇過重大生活事件者；②有精神疾病或心理疾病相關(guān)家族史或出現(xiàn)腦部轉(zhuǎn)移等腦部器質(zhì)變化者；③伴有其他嚴(yán)重軀體性疾病者；④近1 w內(nèi)接受過手術(shù)治療者。選正常人群為對照組(30例)，男15例，女15例，年齡30～60歲，平均(52.10±9.49)歲。兩組年齡及性別比無顯著差異(P>0.05)。

1.2 方法 稱取標(biāo)本，加入生理鹽水稀釋，標(biāo)本稀釋呈梯度系列10-1、10-2、10-3、10-4、10-5，連同原液共6個(gè)稀釋度。取上述標(biāo)本系列稀釋液分別接種于培養(yǎng)基平板上，每個(gè)平板3個(gè)稀釋度。將厭氧菌培養(yǎng)基放在35℃、5%CO2的孵育箱中培養(yǎng)48 h；將葡萄球菌、腸球菌培養(yǎng)基放在35℃孵育箱中培養(yǎng)24 h，一般腸桿菌培養(yǎng)18 h。菌落經(jīng)涂片、革蘭染色鑒定，細(xì)菌確定后，根據(jù)平板上的活菌計(jì)數(shù)以及稀釋度，按照活菌計(jì)數(shù)公式計(jì)算?；罹鋯挝?CFU/ml)=(標(biāo)本質(zhì)量+稀釋量)/標(biāo)本質(zhì)量×稀釋度×菌落個(gè)數(shù)(或×10)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS19.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

消化腸道腫瘤患者需氧菌中的腸球菌數(shù)量為(7.16±0.38)、大腸桿菌為(6.86±0.28)，與對照組(6.36±0.49)、(6.14±0.25)相比明顯增加(P<0.05)，葡萄球菌數(shù)量(8.34±1.01)與對照組(6.98±0.79)相比也顯著增加(P<0.01)，厭氧菌中的雙歧桿菌(6.96±1.77)、乳酸桿菌(6.45±0.06)與對照組(8.25±0.47)、乳酸桿菌數(shù)量(7.30±1.05)相比明顯減少(P<0.05)，而擬桿菌數(shù)量(8.90±1.17)與對照組(6.66±1.34)相比顯著增加(P<0.01)。

3 討 論

人類腸道通常居住大約1千億個(gè)細(xì)菌，近年來科學(xué)家對腸道菌群的生理功能和病理地位越來越重視。研究表明，腸道菌群可能不僅參與代謝性疾病如肥胖、糖尿病、冠心病等的發(fā)生和發(fā)展，還是惡性腫瘤的起始與發(fā)生過程中潛在的調(diào)控因素〔5～7〕。Dapito等〔4〕研究顯示，無病原體的動(dòng)物模型腫瘤發(fā)生率明顯減少。Grivennikov等〔8〕通過清除小鼠的腸道菌群，也觀察到肝臟和結(jié)腸的腫瘤發(fā)生率減少。近年來研究發(fā)現(xiàn)，消化道腫瘤如胃癌、肝癌、大腸癌和結(jié)直腸癌都與腸道菌群有重要關(guān)聯(lián)〔8〕。本實(shí)驗(yàn)患者表現(xiàn)為厭氧菌和需氧菌比值下降。厭氧菌是與宿主共生的生理性菌群，需氧菌是與宿主共棲的條件致病菌〔9〕。厭氧菌和需氧菌比值維持在正常水平是正常生命活動(dòng)的必要條件之一。厭氧菌和需氧菌比值下降，腸道菌群發(fā)生失調(diào)，可能導(dǎo)致腸道免疫功能下降以及細(xì)菌代謝紊亂，免疫功能下降使機(jī)體正常微生物的宿主排斥外來微生物定位停留的阻抗力下降。細(xì)菌代謝紊亂也有可能是消化腸道腫瘤患者惡化的促發(fā)因素，有研究表明腸道里細(xì)菌產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物可以促發(fā)惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展〔10〕。消化腸道腫瘤確診后檢測腸道群菌的變化，將對消化腸道腫瘤尋找最佳治療方法有重要的意義。

1 Ley RE,Peterson DA,Gordon JI.Ecological and evolutionary forces shaping microbial diversity in the human intestine〔J〕.Cell,2006;124:837-48.

2 Festi D,Schiumerini R,Birtolo C.Gut microbiota and its pathophysiology in disease paradigms〔J〕.Dig Dis,2011;29:518-24.

3 Authur JC,Perezchanonae E,Muhlbauer M,etal.Intestinal inflammation targets cancer-inducing activity of the microbiota〔J〕.Science,2012;338(6103): 120-3.

4 Dapito DH,Mencina,Gwak GY,etal.Promotion of hepatocellular carcinoma by the intestinal microbiota and TLR4〔J〕.Cancer Cell,2012;21(4): 504-16.

5 Zhao L,Shen J.Whole body systems approaches for gut microbiota targeted,preventive healthcare〔J〕.J Biotechnol,2010;149(3):183-90.

6 Hope ME,Hold GL,Kain R,etal.Sporadic colorectal cancer role of the commensal microbiota〔J〕.FEMS Microbiol Lett,2005;244(1):1-7.

7 Schwabe RF,Jobin C.The microbiome and cancer〔J〕.Nat Rev Cancer,2013;13(11):800-12.

8 Grivennikov SI,Wang K,Mucida D,etal.Adenoma-linked barrier defects and microbial products drive IL-23/IL-17-mediated tumour growth〔J〕.Nature,2012;491(7423):254-8.

9 牛 輝.消化道腫瘤患者腸道微生態(tài)的研究〔D〕.昆明:昆明醫(yī)學(xué)院,2010.

10 Zhu Y.Gut microbiota and probiotics in colon tumorigenesis〔J〕.Cancer Lett,2011;309:119-27.

〔2017-02-20修回〕

(編輯 郭 菁/滕欣航)

廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目資助(2013B021800270)

邢德剛(1969-)，男，教授，主要從事胃腸動(dòng)力學(xué)研究。

劉思敏(1977-)，女，講師，主要從事臨床檢驗(yàn)研究。

R735.34

A

1005-9202(2017)09-2187-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.09.047

1 廣東藥科大學(xué)附屬第二醫(yī)院(廣州新海醫(yī)院)

2 廣東藥科大學(xué)基礎(chǔ)學(xué)院