黃振君，李 宣，宋艷志，李 靜，孫 晶，鄧意輝

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唾液酸修飾的地塞米松棕櫚酸酯脂質(zhì)體抗小鼠體內(nèi)S180腫瘤作用的研究

黃振君，李 宣，宋艷志，李 靜，孫 晶，鄧意輝*

（沈陽(yáng)藥科大學(xué)藥學(xué)院，遼寧沈陽(yáng) 110016）

目的 將糖皮質(zhì)激素（glucocorticoids，GC）靶向遞送至腫瘤微環(huán)境，并抑制其中的炎性反應(yīng)以實(shí)現(xiàn)腫瘤治療。方法制備唾液酸（sialic acid，SA）修飾的GC類藥物地塞米松棕櫚酸酯脂質(zhì)體，使用小鼠S180肉瘤模型，以質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%葡萄糖、非靶向的乳劑和脂質(zhì)體為對(duì)照，采用多個(gè)參數(shù)綜合評(píng)價(jià)不同劑量SA修飾脂質(zhì)體的體內(nèi)抗腫瘤作用。結(jié)果非靶向乳劑和脂質(zhì)體均具有一定的腫瘤抑制作用，而SA修飾的脂質(zhì)體抗腫瘤療效更優(yōu)。不同劑量靶向脂質(zhì)體的腫瘤治療作用以5.0 mg·kg-1為最佳。該組的腫瘤體積抑瘤率為(83.4 ± 4.0)%，腫瘤曲線下面積抑瘤率為79.9%，試驗(yàn)期內(nèi)小鼠生存率為83.3%。結(jié)論利用GC抗炎活性能發(fā)揮較好的腫瘤治療作用，而腫瘤微環(huán)境和機(jī)體免疫系統(tǒng)是其中的兩個(gè)關(guān)鍵因素。

藥劑學(xué)；靶向脂質(zhì)體；機(jī)體免疫系統(tǒng)；糖皮質(zhì)激素；抗炎作用；腫瘤微環(huán)境

在過(guò)往的數(shù)百年中，隨著人們對(duì)腫瘤認(rèn)識(shí)的加深，腫瘤的治療策略也取得了一定進(jìn)展[1]。雖然目前臨床形勢(shì)不容樂(lè)觀，但人們從未放棄對(duì)根本解決腫瘤問(wèn)題的執(zhí)著追求。近年來(lái)，研究者們已經(jīng)逐漸將目光聚焦到與腫瘤密切相關(guān)的微環(huán)境上[2]。文獻(xiàn)報(bào)道，腫瘤微環(huán)境一旦形成，便伴隨著大量炎性相關(guān)因子的產(chǎn)生[3]。眾多免疫細(xì)胞亦趨化而至，它們大部分是腫瘤生長(zhǎng)的“幫兇”，甚至是主導(dǎo)者[3-5]。值得注意的是，腫瘤微環(huán)境與炎癥部位的免疫細(xì)胞類型幾乎一致，表明腫瘤與炎癥關(guān)系密切[3, 6]?；谝陨险J(rèn)識(shí)，作者提出，干預(yù)腫瘤部位炎性反應(yīng)將成為極具潛力的腫瘤治療手段。

糖皮質(zhì)激素（glucocorticoids，GC）作為抗炎藥物已有超過(guò)半個(gè)世紀(jì)的臨床應(yīng)用歷史[7]。近年來(lái)，將GC包封進(jìn)入長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體中用于腫瘤治療的研究取得了一定進(jìn)展[8-10]。但在臨床上，GC的應(yīng)用局限于腫瘤的輔助治療[7]。究其原因，GC不僅是一個(gè)抗炎藥物，還是一個(gè)強(qiáng)烈的免疫抑制劑；它不僅抑制了腫瘤微環(huán)境的炎性反應(yīng)，還制約了機(jī)體免疫系統(tǒng)正常功能的發(fā)揮。該事實(shí)表明，機(jī)體免疫系統(tǒng)在腫瘤治療中發(fā)揮著不可缺少的作用。因此，使用GC治療腫瘤時(shí)應(yīng)減少其對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)功能的干擾。在此方面，靶向藥物遞送系統(tǒng)的應(yīng)用或能奏效。本課題組前期研究表明，唾液酸（sialic acid，SA）修飾的馬來(lái)酸匹杉瓊脂質(zhì)體靶向于腫瘤微環(huán)境中的腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（tumor associated macrophages，TAMs），不僅獲得了良好的抗腫瘤療效，且試驗(yàn)動(dòng)物的生存質(zhì)量得到保障[11]?；谝陨铣晒?，作者在本研究中使用SA修飾的靶向脂質(zhì)體包載GC類藥物地塞米松棕櫚酸酯（dexamethasone palmitate，DMP），采用免疫功能正常的小鼠建立S180腫瘤模型，考察SA修飾DMP脂質(zhì)體的體內(nèi)抗腫瘤效應(yīng)，并探究抑制腫瘤微環(huán)境炎性反應(yīng)與保全機(jī)體免疫系統(tǒng)在腫瘤治療中的重要作用，以期為腫瘤靶向藥物遞送及腫瘤免疫療法提供新思路。

1 儀器與材料

DF-101S集熱式恒溫加熱磁力攪拌器（鞏義英峪予華儀器廠），JY92-2D超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)（寧波新芝科器研究所），NICOMP-380激光粒度測(cè)定儀（美國(guó)Particle Sizing Systems公司），BS124s電子分析天平（德國(guó)Sartorius公司），聚碳酸酯膜（上海豪夏科技有限公司），XDS-1B倒置顯微鏡（重慶光電儀器有限公司）。

唾液酸-十八胺(sialic acid-octadecylamine，SA-ODA，自制），地塞米松棕櫚酸酯(自制），氫化大豆磷脂（hydrogenated soybean phosphatidylacholine，HSPC，德國(guó)Lucas Meyer公司），膽固醇（cholesterol，CH，南京新百藥業(yè)有限公司），二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇（2000）單甲醚（-(carbonyl-methoxy polyethylene glycol-2000)-1,2-distearoyl- sn-glycero-3-phosphoethanol- amine，DSPE-PEG2000，美國(guó)Genzyme公司），利美達(dá)松?地塞米松棕櫚酸酯注射液（韓國(guó) Mitsubishi Tanabe Pharma公司），質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%葡萄糖注射液（山東辰欣藥業(yè)有限公司），滅菌注射用水（石家莊石藥集團(tuán)有限公司），其余試劑（分析純，市售）。

小鼠肉瘤S180細(xì)胞株（中國(guó)醫(yī)科大學(xué)）。昆明種小鼠，體質(zhì)量18~22 g，雄性，沈陽(yáng)藥科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào) 211002300002467。

2 方法與結(jié)果

2.1 DMP脂質(zhì)體的制備

按表1處方稱取脂質(zhì)體膜材及藥物DMP置于10 mL西林瓶中，以處方量體積10%的無(wú)水乙醇于65 ℃水浴攪拌溶解。待膜材及藥物溶解后，敞開(kāi)體系，繼續(xù)攪拌，以揮除大部分無(wú)水乙醇。將預(yù)熱至相同溫度的200 mmol·L-1檸檬酸-檸檬酸鈉溶液（pH值4.0）以4 mL· min-1的速度注入膜材中。65 ℃水浴攪拌20 min，得到脂質(zhì)體初品。將初品探頭超聲，超聲功率和時(shí)間為200 W 2 min 、400 W 4 min，然后依次通過(guò)0.80、0.45和0.22 μm微孔濾膜，即得非靶向的DMP脂質(zhì)體（non-targeted DMP liposome，NT-DMP-L）及SA修飾的DMP靶向脂質(zhì)體（SA-modified DMP liposome，SA-DMP-L）混懸液（含DMP 2.5 g·L-1）。

Table 1 Compositions of liposomal DMPs

將NT-DMP-L以及SA-DMP-L以蒸餾水稀釋至適宜濃度后，動(dòng)態(tài)光散射法測(cè)定脂質(zhì)體的平均粒徑，測(cè)定波長(zhǎng)為632.8 nm，測(cè)定角為90°。結(jié)果NT-DMP-L和SA-DMP-L的平均粒徑分別為（127.4 ± 3.2）nm和（120.3 ± 2.5）nm。

2.2 S180瘤株的接種

將液氮中保存的S180細(xì)胞凍存管取出后迅速置于37 ℃溫水中復(fù)蘇。將復(fù)蘇的S180細(xì)胞懸液接種于小鼠腹腔內(nèi)，每只0.2 mL，7 d后，無(wú)菌條件下抽取腹水。于倒置顯微鏡下計(jì)數(shù)，腫瘤細(xì)胞活度大于95%，加生理鹽水稀釋成細(xì)胞混懸液，調(diào)整稀釋倍數(shù)使混懸液的腫瘤細(xì)胞數(shù)為每毫升1.8×107個(gè)。將腫瘤細(xì)胞混懸液接種于正常小鼠右前腋窩的皮下組織，每只0.2 mL，共接種36只。

2.3 給藥方案

將36只接種S180腫瘤的小鼠隨機(jī)分為6組，每組6只。分別為對(duì)照組（control，質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%葡萄糖注射液，10 mL·kg-1）、非靶向的利美達(dá)松市售乳劑組（NT-DMP-E，劑量為5.0 mg·kg-1DMP）、非靶向脂質(zhì)體組（NT-DMP-L，劑量為5.0 mg·kg-1DMP）、靶向脂質(zhì)體低劑量組（SA-DMP-L(l)，2.5 mg·kg-1DMP）、靶向脂質(zhì)體中劑量組（SA-DMP-L(m)，5.0 mg·kg-1DMP）和靶向脂質(zhì)體高劑量組（SA-DMP-L(h)，10.0 mg·kg-1DMP）。各組小鼠均于腫瘤體積達(dá)到100 mm3后，即接種后第6天開(kāi)始尾靜脈注射給藥，每3天1次，共給藥4次（即接種后第6、9、12、15天）。治療期間每天記錄小鼠死亡情況，隔天稱量小鼠體質(zhì)量并測(cè)量腫瘤長(zhǎng)徑（a）和短徑（b），計(jì)算腫瘤體積（）。

2.4 評(píng)價(jià)指標(biāo)

腫瘤體積（tumor volume，，mm3）：=0.5′a′b2；

腫瘤生長(zhǎng)曲線下面積（area under tumor growth curve，AUTGC，mm3·d）：使用Graphpad Prism version 5.1軟件的area under curve積分方法進(jìn)行計(jì)算；

體積抑瘤率（tumor inhibition rate determined by tumor volume，TIRV，%）：TIRV=（control groupBBBBBBB B-treated group）/control group′100%；

腫瘤生長(zhǎng)曲線下面積抑瘤率（tumor inhibition rate determined by area under tumor growth curve，TIRAUTGC，%）：TIRAUTGC=（control group-treated group）/control group′100%；

生存分析（survival analysis）：使用Graphpad Prism version 5.1軟件的Kaplan-Meier方法進(jìn)行生存分析；

體質(zhì)量（body mass，g）。

2.5 S180小鼠體內(nèi)抗腫瘤效應(yīng)綜合評(píng)價(jià)

2.5.1腫瘤生長(zhǎng)曲線的制備與腫瘤抑制率的測(cè)定

將各治療組所記錄的腫瘤體積對(duì)接種后天數(shù)作圖，結(jié)果見(jiàn)圖1、2。

?—Control; ?—NT-DMP-E; p—NT-DMP-L; ?—SA-DMP-L(m)

?—Control; ?—SA-DMP-L(l); p—SA-DMP-L(m); ?—SA-DMP-L(h)

由圖1可見(jiàn)，相比對(duì)照組，NT-DMP-E、NT-DMP-L和SA-DMP-L(m)治療組能不同程度地抑制S180荷瘤小鼠的腫瘤生長(zhǎng)。其腫瘤抑制作用強(qiáng)弱順序?yàn)椋篠A-DMP-L(m) > NT-DMP-L > NT-DMP-E，說(shuō)明DMP脂質(zhì)體的抗腫瘤效應(yīng)要優(yōu)于DMP乳劑，且SA的修飾能顯著提高該脂質(zhì)體的腫瘤抑制活性（< 0.05）。圖2則進(jìn)一步反映了SA-DMP-L抗腫瘤作用的量效關(guān)系。3個(gè)給藥劑量中，給藥劑量為5.0 mg·kg-1的SA-DMP-L(m)組腫瘤療效最佳。后兩者抗腫瘤作用強(qiáng)弱順序?yàn)椋篠A-DMP-L(h) > SA-DMP-L(l)，但這種優(yōu)勢(shì)隨著時(shí)間延長(zhǎng)逐漸減弱。第15天后SA-DMP-L(h)組平均腫瘤體積開(kāi)始較快速地增長(zhǎng)，至第20天時(shí)，與SA-DMP-L(l)組平均腫瘤體積相當(dāng)。具體的腫瘤抑制率數(shù)據(jù)見(jiàn)表2。

Table 2 Tumor inhibition rates of S180-bearing mice treated with DMP formulations. (Data were presented as (±s, n=1-6)

表2 地塞米松棕櫚酸酯脂質(zhì)體治療的S180荷瘤小鼠腫瘤抑制率(±s, n=1~6)

Table 2 Tumor inhibition rates of S180-bearing mice treated with DMP formulations. (Data were presented as (±s, n=1-6)

Treatment groupφTIRV / %TIRAUTGC / % NT-DMP-E25.9 ± 34.025.9 NT-DMP-L42.3 ± 10.841.6 SA-DMP-L(l)56.3 ± 6.852.2 SA-DMP-L(m)83.4 ± 4.079.9 SA-DMP-L(h)58.3 ± 11.066.6

由表2可知，無(wú)論是以體積抑瘤率計(jì)還是以腫瘤生長(zhǎng)曲線下面積抑瘤率計(jì)，各給藥組的腫瘤抑制率大小順序均為：SA-DMP-L(m) > SADMP-L(h) > SA-DMP-L(l) > NT-DMP-L > NT-DMP-E。然而，以體積抑瘤率評(píng)價(jià)時(shí)，SA-DMP-L(h)組相比SA-DMP-L(l)組的優(yōu)勢(shì)并不明顯；而以腫瘤生長(zhǎng)曲線下面積抑瘤率評(píng)價(jià)時(shí)，SA-DMP-L(h) 優(yōu)于SA-DMP-L(l)。

2.5.2 生存分析

將各治療組所記錄的小鼠生存率對(duì)接種后天數(shù)作圖，結(jié)果見(jiàn)圖3。

?—Control; ?—NT-DMP-E; p—NT-DMP-L; ?—SA-DMP-L(l); ?—SA-DMP-L(m); ?—SA-DMP-L(h)

采用Kaplan-Meier方法進(jìn)行生存分析，結(jié)果顯示對(duì)照組、NT-DMP-E組、NT-DMP-L組和SA-DMP-L(l)組的中位生存時(shí)間分別為18.5、18.5、19和18 d，這4組間并無(wú)顯著性差異（> 0.05）。而SA-DMP-L(m)組和SA-DMP-L(h)組20 d的生存率分別為83.3%和66.7%，與對(duì)照組比較，顯著延長(zhǎng)了荷瘤小鼠的生存時(shí)間（< 0.05）。

2.5.3 體質(zhì)量試驗(yàn)

將所記錄的各治療組荷瘤小鼠體質(zhì)量對(duì)接種后天數(shù)作圖，結(jié)果見(jiàn)圖4、5。

?—Control; ?—NT-DMP-E; p—NT-DMP-L; ?—SA-DMP-L(m)

?—Control; ?—SA-DMP-L(l); p—SA-DMP-L(m); ?—SA-DMP-L(h)

由圖4可見(jiàn)，相比對(duì)照組，NT-DMP-E、NT-DMP-L和SA-DMP-L(m)治療組均抑制了荷瘤小鼠體質(zhì)量的增長(zhǎng)，且此三組間，DMP對(duì)小鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)的抑制作用無(wú)顯著性差異（> 0.05）。圖5則反映了不同劑量SA-DMP-L對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響。結(jié)果顯示，SA-DMP-L對(duì)荷瘤小鼠體質(zhì)量的影響具有明顯的劑量依賴性，即隨著DMP劑量的增長(zhǎng)，SA-DMP-L對(duì)小鼠體質(zhì)量的抑制作用也將增強(qiáng)。這種對(duì)小鼠體質(zhì)量增長(zhǎng)的抑制作用在高劑量（10 mg·kg-1DMP）時(shí)表現(xiàn)得非常顯著（< 0.01 v.s. Control）。

3 討論

3.1 腫瘤模型的選擇

異種移植性腫瘤模型是目前抗腫瘤藥物或制劑評(píng)價(jià)中應(yīng)用廣泛的腫瘤模型，它通過(guò)將腫瘤移植于免疫缺陷動(dòng)物而建立，如嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷（severe combined immunodeficiency，SCID）小鼠和無(wú)胸腺裸鼠（nude mouse）。這種建立于免疫缺陷動(dòng)物的腫瘤模型，弱化甚至忽視了機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)腫瘤治療的影響。由于免疫系統(tǒng)在腫瘤治療中扮演著關(guān)鍵角色，并且臨床上腫瘤患者的免疫功能健全，因此在選擇評(píng)價(jià)抗腫瘤藥物及制劑的模型時(shí)，需要充分考慮藥物或制劑、腫瘤及機(jī)體免疫系統(tǒng)三者的關(guān)系及相互作用。本研究探討具有免疫抑制作用的GC在腫瘤治療中的作用，并期待能為臨床應(yīng)用提供參考，故而選擇免疫功能正常的小鼠S180腫瘤模型進(jìn)行試驗(yàn)。作者認(rèn)為，使用免疫健全動(dòng)物建立腫瘤模型對(duì)于抗腫瘤藥物或制劑的篩選及評(píng)價(jià)至關(guān)重要。

3.2 SA修飾DMP脂質(zhì)體抗腫瘤效應(yīng)的分析

在腫瘤微環(huán)境中，腫瘤細(xì)胞除了被脈管系統(tǒng)纏繞外，還被成纖維細(xì)胞、免疫細(xì)胞、髓源抑制性細(xì)胞、腫瘤相關(guān)中性粒細(xì)胞以及TAMs等基質(zhì)細(xì)胞所包圍[12]。大量試驗(yàn)和臨床數(shù)據(jù)顯示，TAMs是微環(huán)境炎性反應(yīng)最主要的締造者[13-15]，它們甚至可作為腫瘤不良預(yù)后的獨(dú)立指標(biāo)[15]。作者認(rèn)為，針對(duì)TAMs的炎性細(xì)胞本質(zhì)，抗炎藥物（如GC）在腫瘤治療方面的應(yīng)用值得期待。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，GC類藥物潑尼松龍可以抑制腫瘤部位巨噬細(xì)胞（即TAMs）一系列促瘤活性，如分泌生長(zhǎng)因子和促細(xì)胞分裂素以及血管生成促進(jìn)作用等[8]，甚至能夠直接對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生凋亡誘導(dǎo)及增殖抑制的作用[9]。本研究中，作者使用SA修飾的DMP脂質(zhì)體包載GC類藥物DMP，并對(duì)比考察了其抗腫瘤效應(yīng)。試驗(yàn)結(jié)果（圖1和表2）表明，非靶向的NT-DMP-E和NT-DMP-L組20 d體積抑瘤率僅分別為(25.9±34.0)%和(42.3±10.8)%，而SA-DMP-L(m)的體積抑瘤率高達(dá)(83.4±4.0)%。SA-DMP-L(m)的優(yōu)秀抑瘤率效果，一方面歸功于SA修飾脂質(zhì)體對(duì)TAMs的靶向作用，另一方面是GC類藥物DMP對(duì)TAMs以及腫瘤細(xì)胞的雙向抑制作用也有較大貢獻(xiàn)。作者從本試驗(yàn)結(jié)果得到啟示，結(jié)合靶向藥物遞送系統(tǒng)，GC類抗炎藥物可以發(fā)揮很可觀的腫瘤治療效應(yīng)。

3.3 機(jī)體免疫系統(tǒng)在腫瘤治療中的作用

TAMs不僅能發(fā)揮多種促腫瘤作用，它們還具有強(qiáng)烈的免疫抑制活性，這種免疫“屏障”作用使得腫瘤能夠逃逸正常的機(jī)體免疫監(jiān)視[5, 16]。試驗(yàn)結(jié)果表明，不同劑量SA-DMP-L組間抗腫瘤作用的差異揭示了正常的機(jī)體免疫功能在腫瘤治療中發(fā)揮著重要作用[16]。由圖2可見(jiàn)，SA-DMP-L(l)組小鼠腫瘤在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中一直緩慢、持續(xù)地增長(zhǎng)，該組20 d的體積抑瘤率為(56.3±6.8)%。SA-DMP-L(h)組則先經(jīng)歷了一個(gè)從第9至13天的平臺(tái)期，其平均腫瘤體積維持在450 mm3左右（同期對(duì)照組從700 mm3增長(zhǎng)至2 100 mm3，SA-DMP-L(l)組也從550 mm3增長(zhǎng)至850 mm3）。該平臺(tái)期后，SA-DMP-L(h)組腫瘤自第13天起開(kāi)始快速增長(zhǎng)，20 d時(shí)平均腫瘤體積達(dá)到與SA-DMP-L(l)組相當(dāng)，兩組間無(wú)顯著性差異（> 0.05）。SA-DMP-L(m)組小鼠的腫瘤體積也在第9天達(dá)到與SA-DMP-L(h)組相當(dāng)?shù)钠脚_(tái)，直至末次給藥的3 d后（第18天）方有所增長(zhǎng)。令人鼓舞的是，該組體積抑瘤率高達(dá)(83.4 ± 4.0)%。作者分析，DMP的介入使得腫瘤及其微環(huán)境與機(jī)體免疫系統(tǒng)的相互作用發(fā)生了改變，而不同劑量組DMP對(duì)三者的影響各異。低劑量的SA-DMP-L（2.5 mg·kg-1）能對(duì)微環(huán)境中TAMs起到一定抑制作用，但不能達(dá)到為機(jī)體免疫系統(tǒng)徹底打開(kāi)這個(gè)“屏障”的程度。因此，該組腫瘤保持緩慢增長(zhǎng)的趨勢(shì)。高劑量的SA-DMP-L（10.0 mg·kg-1）則足以打破腫瘤微環(huán)境的“屏障”，但其對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)的抑制作用也更為強(qiáng)烈，致使后者在面對(duì)失去了“屏障”的腫瘤細(xì)胞時(shí)仍然“無(wú)能為力”。雖然SA-DMP-L(h)組平均腫瘤體積自第7天起就低于SA-DMP-L(l)組，但在試驗(yàn)?zāi)┢趨s快速增長(zhǎng)至與低劑量組相當(dāng)，甚至有超過(guò)后者的趨勢(shì)。高、低2個(gè)劑量組的腫瘤體積變化過(guò)程說(shuō)明，GC類藥物DMP對(duì)腫瘤微環(huán)境炎性反應(yīng)抑制程度不夠或?qū)C(jī)體免疫系統(tǒng)的抑制程度過(guò)高都將影響抗腫瘤療效。更值得注意的是，中劑量的SA-DMP-L（5.0 mg·kg-1）則恰如其分地抑制了TAMs的促腫瘤活性，同時(shí)對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)的抑制作用較為緩和。機(jī)體免疫系統(tǒng)能對(duì)失去微環(huán)境“屏障”的腫瘤細(xì)胞發(fā)揮正常的免疫殺傷和清除作用。因此，該組小鼠的腫瘤在較長(zhǎng)一段時(shí)間中均處于生長(zhǎng)抑制狀態(tài)，20 d的體積抑瘤率也是高達(dá)80%以上，達(dá)到與一些細(xì)胞毒性抗腫瘤藥物的臨床前體內(nèi)試驗(yàn)水平相當(dāng)。另外，體質(zhì)量的抑制也能從側(cè)面顯示SA-DMP-L對(duì)小鼠機(jī)體的毒性及不良反應(yīng)，DMP的體質(zhì)量增長(zhǎng)抑制作用與劑量成正相關(guān)（圖5）。非靶向DMP制劑組較差的腫瘤治療效應(yīng)表明，非靶向DMP制劑組更多地表現(xiàn)出了GC對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物機(jī)體免疫系統(tǒng)的抑制作用。以上結(jié)果啟示研究者，GC在治療腫瘤方面扮演著“雙刃劍”角色。它們既能抑制腫瘤微環(huán)境中的免疫細(xì)胞，發(fā)揮可觀的治療作用；又能干預(yù)機(jī)體免疫系統(tǒng)的正常功能，反而不利于腫瘤的治療。

3.4 體內(nèi)抗腫瘤作用的綜合評(píng)價(jià)

目前，在進(jìn)行體內(nèi)抑瘤活性試驗(yàn)時(shí)，通常采用體積抑瘤率評(píng)價(jià)藥物（或制劑）的抗腫瘤活性。該指標(biāo)能一定程度地反映試驗(yàn)終點(diǎn)的情況，但由于腫瘤生長(zhǎng)本身便不是勻速的過(guò)程，加之藥物（或制劑）的介入將影響腫瘤的發(fā)展，簡(jiǎn)單地以某一個(gè)時(shí)間點(diǎn)評(píng)價(jià)抗腫瘤藥物（或制劑）的優(yōu)劣必然存在缺陷，腫瘤全過(guò)程的變化更需要受到關(guān)注?；谝陨峡紤]，本課題組提出“腫瘤生長(zhǎng)曲線下面積抑瘤率（即AUTGC抑瘤率）”的評(píng)價(jià)指標(biāo)[17]。它將整條腫瘤生長(zhǎng)曲線量化，表征的是整個(gè)試驗(yàn)區(qū)間而非單一時(shí)間點(diǎn)的情況。在本研究中，試驗(yàn)終點(diǎn)（第20天）SA-DMP-L(l)組和SA-DMP-L(h)組的平均腫瘤體積相當(dāng)。但從整條曲線來(lái)看，第15天后SA-DMP-L(h)組平均腫瘤體積方開(kāi)始較快速地增長(zhǎng)，而在第11~15天，SA-DMP-L(h)組都顯著優(yōu)于SA-DMP-L(l)組（< 0.05）。因此，需要采用AUTGC抑瘤率才能客觀反映出SA-DMP-L(h)組的優(yōu)勢(shì)。當(dāng)然，AUTGC抑瘤率也有其缺陷。由于試驗(yàn)動(dòng)物生存時(shí)間的差異性，在計(jì)算時(shí)AUTGC只有均值能較好地反映問(wèn)題，而標(biāo)準(zhǔn)偏差的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義不大。綜上，體內(nèi)抗腫瘤效應(yīng)的優(yōu)劣需要更多的指標(biāo)來(lái)全方面地評(píng)價(jià)。

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(本篇責(zé)任編輯：趙桂芝)

Study ofanti-tumor effects for S180-bearing mice of sialic acid-modified dexamethasone palmitate liposomes

HUANG Zhen-jun, LI Xuan, SONG Yan-zhi, LI Jing, SUN Jing, DENG Yi-hui*

(,,110016,)

Objective This article aimed at targeting glucocorticoids(GC) to the tumor microenvironment to achieve good anticancer efficacy by the means of anti-inflammatory. Method Dexamethasone palmitate(DMP) was loaded into the liposomes modified with sialic acid(SA). And mice S180 sarcoma model were established to investigate theantitumor effects of SA-modified liposomal DMP at varied doses, as well as the control groups including the non-targeted groups of commercial emulsions and liposomes. Result Both the non-targeted emulsions group and liposome groups have certain advantage over the control group in tumor inhibition. And the targeted SA-modified liposomal groups possessed a better anti-tumor efficacy than the non-targeted emulsions and liposomes groups. Within the sialic acid-modified liposomal DMP groups, the group administrated at the dose of 5.0 mg·kg-1DMP achieved the best antitumor efficacy with a tumor volume inhibition rate of (83.4 ± 4.0)%, area under the tumor curve inhibition rate of 79.9%, and survival rate of 83.3% in S180-bearing mice during 20-days’ test. Conclusion With the aid of the anti-inflammation effects of GC, excellent anticancer efficacies can be achieved. And the tumor microenvironment and host immune systems are vital factors of the cancer treatments, in which more attraction should be drawn before the launch of a new cancer therapeutic strategy, including the design of drug delivery systems.

pharmaceutics; targeting liposome; host immune system; glucocorticoids; anti-inflammation; tumor microenvironment

（2016）03–0089–10

10.14146/j.cnki.cjp.2016.03.003

R94

A

2015-04-24

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81373334）

黃振君(1990-), 男(漢族), 江西贛州人, 碩士研究生, E-mail huangzjdds@163.com; *鄧意輝(1964-),男(漢族), 湖南花垣人, 教授, 主要從事藥物靶向新劑型的研究, Tel. 024-23986316, E-mail dds-666@163.com。