彭莉，李丹

（1.沈陽(yáng)市中心血站質(zhì)量控制科，沈陽(yáng) 110044；2.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院消化內(nèi)科，沈陽(yáng) 110001）

血清IL?17和MMP?7檢測(cè)在肝細(xì)胞癌診斷中的作用

彭莉1，李丹2

（1.沈陽(yáng)市中心血站質(zhì)量控制科，沈陽(yáng) 110044；2.中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院消化內(nèi)科，沈陽(yáng) 110001）

目的 探討血清白細(xì)胞介素17（IL?17）和基質(zhì)金屬蛋白酶7（MMP?7）檢測(cè)在肝細(xì)胞癌診斷中的價(jià)值。方法 選取中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院消化內(nèi)科就診的肝細(xì)胞癌患者52例（HCC組），肝硬化患者32例（LC組）；中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院體檢中心體檢的正常人群36例（對(duì)照組）。采用ELISA方法檢測(cè)血清IL?17和MMP?7水平，評(píng)估2者的診斷效能并分析其相關(guān)性。結(jié)果 與對(duì)照組及LC組比較，HCC組血清IL?17和MMP?7水平顯著增高（均P＜0.001）；與對(duì)照組比較，LC組IL?17和MMP?7水平顯著增高（均P＜0.05）。血清IL?17和MMP?7的ROC曲線下面積分別為0.901（95%CI：0.847～0.954）和0.845（95%CI：0.772～0.918）。診斷HCC血清IL?17的靈敏度和特異度分別為90.4%、77.9%，血清MMP?7的靈敏度和特異度分別為86.5%、76.5%，2者聯(lián)合診斷的靈敏度和特異度為98.7%、94.8%。HCC組血清IL?17和MMP?7水平正相關(guān)（r=0.513，P＜0.01）。結(jié)論IL?17和MMP?7參與肝細(xì)胞癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，血清IL?17和MMP?7可作為肝細(xì)胞癌診斷的有效標(biāo)志物。

白細(xì)胞介素17；基質(zhì)金屬蛋白酶7；肝細(xì)胞癌；診斷

肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，嚴(yán)重危害人類健康，降低患者生活質(zhì)量，死亡率在我國(guó)居惡性腫瘤第二位，在世界范圍內(nèi)居第三位［1］。近年來(lái)，HCC的基礎(chǔ)研究、早期診斷和治療取得了很大進(jìn)展，但患者的總體生存率仍不足5%［2］。目前，HCC的診斷主要依靠影像學(xué)檢查、病理學(xué)檢查和血清標(biāo)志物甲胎蛋白（α?feto?protein，AFP）的篩查。AFP是目前常用的HCC篩查的血清標(biāo)志物，靈敏度和特異度相對(duì)較低。流行病學(xué)調(diào)查［3］顯示，30%HCC患者血清AFP在正常范圍內(nèi)，HCC診斷的假陽(yáng)性率可達(dá)40%。因此，尋找有效的早期診斷標(biāo)志物是提高HCC患者生存率的重要手段。有研究［4］報(bào)道由輔助性T17細(xì)胞分泌的白細(xì)胞介素17（interleukin?17，IL?17）通過(guò)促進(jìn)腫瘤血管生成而促進(jìn)多種腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。基質(zhì)金屬蛋白酶7（matrix metalloproteinase?7，MMP?7）通過(guò)降解細(xì)胞外基質(zhì)參與腫瘤新生血管形成、浸潤(rùn)和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等過(guò)程［5］。本研究通過(guò)檢查外周血中的IL?17和MMP?7水平，探討IL?17和MMP?7 2者的相關(guān)性及其在HCC中的診斷價(jià)值，為HCC的早期診斷、臨床治療和預(yù)后提供新的思路和方法。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選擇2010年3月至2015年6月中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院消化內(nèi)科就診的52例HCC患者（HCC組），其中男41例，女11例，年齡36～74歲。所有HCC患者均經(jīng)臨床和病理確診，未接受化療、放療及生物學(xué)治療。32例肝硬化（liver cirrhosis，LC）患者（LC組），其中男26例，女6例，年齡33～71歲。選擇中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院體檢中心體檢的36例健康人作為對(duì)照組，男29例，女7例，年齡31～68歲，均無(wú)心、肝、腎和肺等臟器疾病。所有研究對(duì)象均排除其他腫瘤病史，均簽署知情同意書。3組年齡和性別差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 血清IL?17和MMP?9檢測(cè)

抽取患者空腹靜脈血5 mL，3 000 r/min離心10 min，收集血清，-80℃儲(chǔ)存?zhèn)溆?。血清IL?17和MMP?7測(cè)定采用ELISA方法（R&D公司），操作方法嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，數(shù)據(jù)采用x±s表示，各組指標(biāo)比較采用Mann?WhitneyU檢驗(yàn)。相關(guān)分析采用Pearson相關(guān)性檢驗(yàn)。繪制受試者工作特征（receiver operator characteristic，ROC）曲線評(píng)估各指標(biāo)的診斷效能（靈敏度和特異度）。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組血清IL?17和MMP?7水平比較

與對(duì)照組及LC組比較，HCC組血清IL?17和MMP?7水平顯著增高（均P＜0.001）；與對(duì)照組比較，LC組IL?17和MMP?7水平顯著增高（P分別為＜0.001、0.016）。見(jiàn)表1。

表1 3組血清IL?17和MMP?7水平比較Tab.1 Comparison of serum IL?17 and MMP?7 levels among three groups

2.2 血清IL?17和MMP?7的診斷效能分析

血清IL?17和MMP?7的ROC曲線下面積分別為0.901（95%CI：0.847～0.954）和0.845（95%CI：0.772～0.918），見(jiàn)圖1。血清IL?17的最優(yōu)截?cái)嘀禐?3.75 pg/mL時(shí)，診斷HCC的靈敏度和特異度為90.4%和77.9%。血清MMP?7的最優(yōu)截?cái)嘀禐?.40 ng/mL時(shí)，診斷HCC的靈敏度和特異度為86.5%和76.5%。2者聯(lián)合診斷的靈敏度和特異度為98.7%和94.8%。

圖1 血清IL?17和MMP?7的ROC曲線Fig.1 ROC curves of serum IL?17 and MMP?7

2.3 HCC患者血清IL?17和MMP?7的相關(guān)性分析

HCC患者血清IL?17和MMP?7正相關(guān)（r= 0.513，P＜0.01）。

3 討論

目前研究［6］已經(jīng)證實(shí)，在多種實(shí)體腫瘤中，炎癥是重要的誘發(fā)因素，隨著腫瘤的發(fā)展，炎癥影響腫瘤的宿主免疫反應(yīng)。HCC的發(fā)生和發(fā)展過(guò)程中存在一定的免疫功能障礙，主要表現(xiàn)為免疫逃逸和細(xì)胞因子的分泌紊亂，且隨病情進(jìn)展而逐漸加重。IL?17由Th17分泌的具有促炎作用的細(xì)胞因子，通過(guò)與其特異性受體結(jié)合，發(fā)揮促炎癥、免疫應(yīng)答和造血等功能。有研究［7?10］發(fā)現(xiàn)在多種惡性腫瘤組織（胃癌、乳腺癌、結(jié)直腸癌和肺癌）中IL?17表達(dá)顯著增高，且與腫瘤血管生成呈顯著正相關(guān)。血管生成是腫瘤惡性生物學(xué)特征之一，目前最重要的促血管生成的因子——血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothe?lial growth factor，VEGF）在多種腫瘤新生血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷徙的作用已經(jīng)得到證實(shí)。LIU等［11］研究發(fā)現(xiàn)IL?17通過(guò)促進(jìn)VEGF分泌間接影響腫瘤發(fā)展過(guò)程。ZHANG等［12］用流式細(xì)胞技術(shù)證實(shí)肝癌患者腫瘤組織中Th17細(xì)胞的陽(yáng)性率明顯高于正常組織且伴有高IL?17的表達(dá)。本研究結(jié)果表明HCC組血清IL?17水平顯著高于LC組和對(duì)照組，推測(cè)患者外周血IL?17水平升高是由于腫瘤組織產(chǎn)生的IL?17釋放入血所致，故認(rèn)為IL?17可作為診斷HCC有價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物。

ZHANG等［13］報(bào)道IL?17通過(guò)調(diào)節(jié)MMP?7的活性而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化過(guò)程。MMP?7屬于基質(zhì)溶解素，對(duì)基底膜及相關(guān)屏障有廣譜的降解功能。研究［14］發(fā)現(xiàn)MMP?7的高表達(dá)發(fā)生于上皮來(lái)源的腫瘤，其高表達(dá)與腫瘤細(xì)胞的發(fā)生、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)等密切相關(guān)。NAKAMURA等［15］報(bào)道MMP?7通過(guò)與胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白相互作用，抗細(xì)胞凋亡，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖和生長(zhǎng)。ITO等［16］證實(shí)抑制MMP?7活性可減弱腫瘤血管生成活性。本結(jié)果顯示HCC組血清MMP?7顯著高于LC組和對(duì)照組，與以往研究結(jié)果一致。

利用ROC曲線評(píng)估血清IL?17和MMP?7的診斷效能，ROC曲線下的面積值越接近1，表示指標(biāo)的診斷效能越好。本研究結(jié)果顯示，HCC患者血清IL?17和MMP?7的ROC曲線下面積分別為0.901和0.845，表示血清IL?17的診斷效能高于血清MMP?7。2者聯(lián)合診斷的靈敏度和特異度可達(dá)到98.7%和94.8%，且顯著相關(guān)。因此，IL?17和MMP?7可作為HCC診斷的血清標(biāo)志物。

綜上所述，血清IL?17和MMP?7在HCC患者呈現(xiàn)高水平，提示2者可能在HCC的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，聯(lián)合檢測(cè)IL?17和MMP?7可能對(duì)患者的早期診斷和指導(dǎo)治療具有重要意義。今后還有待于進(jìn)一步擴(kuò)大樣本，深入探討IL?17和MMP?7在HCC中的作用機(jī)制。

［1］何海華，楊志奇，孫振綱，等.IL?10、IL?17及IL?18在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)特點(diǎn)及其臨床意義［J］.標(biāo)記免疫分析與臨床，2016，23（2）：152-153.DOI：10.11748/bjmy.issn.1006?1703.2016.02.010.

［2］MONTELLA L，PALMIERI G，ADDEO R，et al.Hepatocellular car?cinoma：will novel targeted drugs really impact the next future?［J］. World J Gastroenterol，2016，22（27）：6114-6126.DOI：10.3748/ wjg.v22.i27.6114.

［3］AHN DG，KIM HJ，KANG H，etal.Feasibilityof α?fetoproteinas a di?agnostic tool for hepatocellular carcinoma in Korea［J］.Korean J In?tern Med，2016，31（1）：46-53.DOI：10.3904/kjim.2016.31.1.46.

［4］KUANG DM，PENG C，ZHAO Q，et al.Tumor?activated monocytes promote expansion of IL?17?producing CD8+T cells in hepatocellu?lar carcinoma patients［J］.J Immunol，2010，185（3）：1544-1549. DOI：10.4049/jimmunol.0904094.

［5］王夢(mèng)潔，孫蘇平，錢科卿，等.結(jié)直腸癌患者血清IL?17和TGF?β濃度及其相關(guān)性的初步研究［J］.中國(guó)腫瘤臨床，2013，40（13）：767-769，778.DOI：10.3969/j.issn.1000?8179.2013.13.005.

［6］王拱辰，施廣霞.肝細(xì)胞癌免疫逃逸機(jī)制的研究進(jìn)展［J］.胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2012，21（10）：975-980.DOI：10.3969/j. issn.1006?5709.2012.10.028.

［7］WU X，YANG T，LIU X，et al.IL?17 promotes tumor angiogenesis through Stat3 pathway mediated upregulation of VEGF in gastric cancer［J］.Tumour Biol，2016，37（4）：5493-5501.DOI：10.1007/ s13277?015?4372?4.

［8］COFFELT SB，KERSTEN K，DOORNEBAL CW，et al.IL?17?pro?ducing γδ T cells and neutrophils conspire to promote breast cancer metastasis［J］.Nature，2015，522（7556）：345-348.DOI：10.1038/ nature14282.

［9］LI YX，ZHANG L，SIMAYI D，et al.Human papillomavirus infec?tion correlates with inflammatory Stat3 signaling activity and IL?17 level in patients with colorectal cancer［J］.PLoS One，2015，10（2）：e0118391.DOI：10.1371/journal.pone.0118391.

［10］LI Q，HAN Y，F(xiàn)EI G，et al.IL?17 promoted metastasis of non?small?cell lung cancer cells［J］.Immunol Lett，2012，148（2）：144-150. DOI：10.1016/j.imlet.2012.10.011.

［11］LIU J，DUAN Y，CHENG X，et al.IL?17 is associated with poor prognosis and promotes angiogenesis via stimulating VEGF produc?tion of cancer cells in colorectal carcinoma［J］.Biochem Biophys Res Commun，2011，407（2）：348-354.DOI：10.1016/j.bbrc.2011. 03.021.

［12］ZHANG JP，YAN J，XU J，et al.Increased intratumoral IL?17?pro?ducing cells correlate with poor survival in hepatocellular carcino?ma patients［J］.J Hepatol，2009，50（5）：980-989.DOI：10.1016/ j.jhep.2008.12.033.

［13］ZHANG Q，LIU S，PARAJULI KR，et al.Interleukin?17 promotes prostate cancer via MMP7?induced epithelial?to?mesenchymal tran?sition［J］.Oncogene，2016.［Epub ahead of print］DOI：10.1038/ onc.2016.240.

［14］OKAYAMA H，KUMAMOTO K，SAITOU K，et al.CD44v6，MMP?7 and nuclear Cdx2 are significant biomarkers for prediction of lymph node metastasis in primary gastric cancer［J］.Oncol Rep，2009，22（4）：745-755.DOI：10.3892/or_00000496.

［15］NAKAMURA M，MIYAMOTO S，MAEDA H，et al.Matrix metallo?proteinase?7 degrades all insulin?like growth factor binding pro?teins and facilitates insulin?like growth factor bioavailability［J］. Biochem Biophys Res Commun，2005，333（3）：1011-1016.DOI：10.1016/j.bbrc.2005.06.010.

［16］ITO TK，ISHII G，CHIBA H，et al.The VEGF angiogenic switch of fibroblasts is regulated by MMP?7 from cancer cells［J］.Onco?gene，2007，26（51）：7194-7203.DOI：10.1038/sj.onc.1210535.

（編輯 武玉欣）

Clinical Value of Serum IL?17 and MMP?7 in Diagnosis of Hepatocellular Carcinoma

PENG Li1，LI Dan2
（1.Department of Quality Control，Shenyang Blood Center，Shenyang 110044，China；2.Department of Gastroenterology，The First Hospital，China Medical Universi?ty，Shenyang 110001，China）

Objective To evaluate the significance of serum interleukin?17（IL?17）and matrix metalloproteinase?7（MMP?7）in the diagnosis of hepatocellular carcinoma（HCC）.Methods A total of 52 patients with HCC（HCC group），32 patients with liver cirrhosis（LC group）and 36 healthy controls（control group）were enrolled for the study，and all samples were collected from The First Hospital of China Medical University. Serum levels of IL?17 and MMP?7 were determined using ELISA method.The diagnostic performance and their correlation was evaluated.Re?sults Serum levels of IL?17 and MMP?7 in HCC group were significantly higher than those in LC group（allP＜0.001）and control group（all P＜0.001）.Both of them in LC group were higher than control group（allP＜0.05）.The area under ROC of serum IL?17 and MMP?7 were 0.901（95%CI：0.847?0.954）and 0.845（95%CI：0.772?0.918）.The sensitivity of serum IL?17 and MMP?7 in the diagnosis of HCC was 90.4%and 86.5%，respectively，and the specificity of the same markers was 77.9%and 76.5%，respectively.Combined detection of the two markers improved sensitivity to 98.7%and specificity to 94.8%.Serum IL?17 was positively correlated to MMP?7（r=0.513，P＜0.01）.Conclusion IL?17 and MMP?7 are involved in the progress of HCC，and serum IL?17 and MMP?7 may be useful markers in the diagnosis of HCC.

interleukin?17；matrix metalloproteinase?7；hepatocellular carcinoma；diagnosis

R735.7

A

0258-4646（2017）03-0248-03

10.12007/j.issn.0258?4646.2017.03.014

彭莉（1976-），女，副主任醫(yī)師，碩士. E-mail：m15204017926@163.com

2016-09-21

網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間：