靳情　嚴威　朱國勇

摘要：目的 探討痰標本的質(zhì)量對培養(yǎng)結(jié)果的臨床應用價值。方法 收集我院2015年3月～9月的1858例痰標本，進行涂片、革蘭染色、鏡檢，根據(jù)涂片染色結(jié)果，并對上述痰標本進行細菌培養(yǎng)鑒定，分析鏡檢結(jié)果與細菌檢出率的關(guān)系。結(jié)果 1858例痰標本中，涂片合格標本1150例，占61.89%；不合格標本708例，占38.11%。共檢出847株細菌。在1150涂片合格的標本中，細菌檢出率為73.65%，合格痰標本涂片結(jié)果與培養(yǎng)結(jié)果的符合率為67.13%。在708例涂片不合格的標本中，檢出212株細菌，細菌檢出率為29.94%。結(jié)論 痰培養(yǎng)標本的質(zhì)量非常重要，而涂片革蘭染色鏡檢能在早期為呼吸道感染的診斷和治療提供重要信息，可以篩除不合格的痰標本，提高痰培養(yǎng)的細菌檢出率，有效指導臨床用藥。

關(guān)鍵詞：質(zhì)量分析；痰涂片；革蘭染色；細菌培養(yǎng)；病原菌

院內(nèi)感染的發(fā)生是臨床較難攻克的難題，最為常見的感染以下呼吸道感染所占比例為主。痰培養(yǎng)對下呼吸道感染性疾病的病原診斷、指導臨床用藥有著非常重要的參考價值。培養(yǎng)前痰標本的質(zhì)量是關(guān)鍵。如何培養(yǎng)出真正的致病菌，取決于樣本采集。因此，對痰標本的質(zhì)量做評價至關(guān)重要。涂片革蘭染色鏡檢，不僅可以為診斷提供快速有價值的信息，對微生物鑒定過程還能起到引導作用。

1 資料與方法

1.1一般資料 標本采集2015年3月～9月，1858例痰標本來自襄陽市中醫(yī)醫(yī)院就診。在醫(yī)護人員指導下，清晨漱口，清洗咽喉、深咳痰液于一次性無菌痰杯中；對于重癥患者，可經(jīng)氣管插管或氣管切開處，用一次性吸痰管抽取呼吸道標本，立即送檢。

1.2涂片制備與染色鏡檢 用無菌棉簽挑取膿性、粘稠的痰，直接涂片，自然干燥后經(jīng)甲醇固定或火焰快速固定3次，革蘭染色鏡檢。

1.3鏡檢結(jié)果記錄 白細胞>25個/LP，上皮細胞<10個/LP的標本為合格標本；白細胞<10個/LP，上皮細胞>25個/LP的標本為不合格標本，聯(lián)系臨床重留。

1.4標本的培養(yǎng)、分離及鑒定 經(jīng)鏡檢合格的痰標本用液化劑（sputasol，code SR089A，OXOZD產(chǎn)品）使痰液化，分別接種于血平板、巧克力平板，在5%～10%CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，35℃～37℃孵育18～24 h；真菌接種沙氏培養(yǎng)基。對分離的可疑菌落進行染色鏡檢，通過生化反應和藥敏試驗，鑒定細菌[1]。

1.5統(tǒng)計學分析 用統(tǒng)計軟件分析，采用χ2檢驗，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1痰標本的細菌檢出率 1858例痰標本中1150例標本檢出有細菌（除口腔正常菌群），陽性檢出率為61.89%，合格標本的檢出率為73.65%（847/1150），不合格標本的檢出率為29.94%（212/708），兩者比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。

2.2合格痰標本涂片與培養(yǎng)結(jié)果顯示 鏡檢與培養(yǎng)結(jié)果均為陽性者有592份，鏡檢陽性而培養(yǎng)結(jié)果為陰性者有123份，鏡檢與培養(yǎng)結(jié)果均為陰性者有180份，合格痰標本涂片結(jié)果與培養(yǎng)結(jié)果差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01），其符合率為67.13%（772/1150），真陽性率為69.9%（592/847）。

3 討論

痰培養(yǎng)結(jié)果是判斷呼吸道感染的重要依據(jù)之一，而其培養(yǎng)結(jié)果主要依靠痰標本的質(zhì)量。由于痰液中細菌種類復雜多樣，常出現(xiàn)多種細菌混合感染，以及樣本留取質(zhì)量等多種分析前因素的影響，導致臨床微生物室痰液培養(yǎng)陽性率不高。然而臨床醫(yī)生使用抗生素須依靠其培養(yǎng)結(jié)果，所以其準確性非常重要。正確留取標本對檢驗結(jié)果至關(guān)重要[1-2]根據(jù)ABC分類法對痰標本是否合格進行分類，各地均有報道且各不相同，本文對1858例痰標本進行研究，1150份樣本合格，合格樣本檢出率73.65%，與2013年陳險峰報道492例痰標本，合格368 例，占74.80%[3-6]，基本相符。合格痰標本涂片結(jié)果與培養(yǎng)結(jié)果符合率為67.13%（772/1150），國外文獻報道[7]，二者符合率達80.20%；本文比上述報道結(jié)果偏低，說明分析前的質(zhì)量控制做的不是很好，樣本合格率有待提高。然而合格標本檢出率高，并不等于在實際工作中將不合格標本一概拒收。有文章報道不合格的標本，存在潛在的致病菌[8]。因此，在實際工作中，需要大量積累經(jīng)驗，判斷這類標本的陽性是由何種原因引起，唾液污染還是真正致病菌？另文獻報道也證實提高痰標本送檢質(zhì)量確實有助于提高培養(yǎng)陽性率[8]。

綜上所述，判斷痰標本質(zhì)量最直接的方法就是涂片革蘭染色，其結(jié)果比培養(yǎng)快，并且能在早期為患者的治療和診斷提供重要信息。痰涂片革蘭染色可以篩選出合格的痰標本，提高痰培養(yǎng)的細菌檢出率[7]若對痰標本不進行鏡檢剔除，所有痰標本均進行培養(yǎng)，會使細菌檢出率下降，有可能導致病原學診斷的錯誤。檢驗人員在鑒定細菌時應結(jié)合涂片與培養(yǎng)結(jié)果，判斷兩者是否一致，這種做法有助于提高痰標本細菌檢出的準確性，且具有重要鑒定價值。

參考文獻：

[1]葉應嫵，王毓三，申子瑜，等.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版，南京：東南大學出版社，2006：736-753.

[2]郭基平，袁暉蓉，陳幼紅，等.標本涂片革蘭染色在臨床微生物檢驗中的作用[J].中國醫(yī)藥導報，2006，32（3）.

[3]韓志偉，廖雪梅. 痰標本涂片檢查與培養(yǎng)結(jié)果分析[J]. 中國微生態(tài)學雜志，2003，15（5）：279-280.

[4]楊嬌英，鐘毓瓊，蔡志軍. 85 份合格咳痰標本涂片檢查與培養(yǎng)結(jié)果分析[J]. 檢驗醫(yī)學與臨床，2009，6（7）：556-557.

[5]肖卓. 痰涂片革蘭氏染色臨床價值探討[J]. 黑龍江醫(yī)學，2004，47（ 9）：682.

[6]陳險峰，周庭銀.痰涂片革蘭氏染色鏡檢的臨床意義[J].檢驗醫(yī)學，2013，28（6）：499.

[7]Pagano L，Girmenia C，Melel L，et a1.Infections caused by filamentous fungi inpatients with hematologic malignancies.Areport of391cases byGMEMA Infection ProgramD[J].Haemtologica，2001，86.

[8]楊朵，辛續(xù)麗，馬東媛，等.痰培養(yǎng)標本合格性評估標準的比較[J].檢驗醫(yī)學，2012，27（9）：773-775.

編輯/金昊天