王進(jìn)宇 董曉芳佟建明

（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，北京 100193）

紫花苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)及盲腸微生物數(shù)量的影響

王進(jìn)宇 董曉芳?佟建明

（中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，北京 100193）

本試驗(yàn)旨在研究飼糧中添加不同水平紫花苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)及盲腸微生物數(shù)量的影響。選取540只30周齡的海蘭褐殼蛋雞，隨機(jī)分為6組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15只雞。對(duì)照組飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加250、500、1 000、2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖。試驗(yàn)期 144 d。結(jié)果表明：1）試驗(yàn)第 1～8周，2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組產(chǎn)蛋率顯著高于對(duì)照組和250 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組（P＜0.05）；試驗(yàn)第17～20周，2 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組平均日采食量顯著高于對(duì)照組和250 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組（P＜0.05），同時(shí)250 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組料蛋比顯著低于對(duì)照組和500 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組（P＜0.05）。2）與對(duì)照組相比，試驗(yàn)第144天，各紫花苜蓿粗多糖組蛋黃顏色均顯著加深（P＜0.05）；試驗(yàn)第90天，4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組哈夫單位顯著降低（P＜0.05）；試驗(yàn)第60天，2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組蛋形指數(shù)顯著降低（P＜0.05），試驗(yàn)第120天，1 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組蛋形指數(shù)亦顯著降低（P＜0.05）；試驗(yàn)第61～90天，250、1 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組軟破殼蛋率顯著降低（P＜0.05）。3）與對(duì)照組相比，試驗(yàn)第80天，500、2 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組盲腸大腸桿菌數(shù)量顯著降低（P＜0.05），盲腸乳酸桿菌數(shù)量顯著增加（P＜0.05），同時(shí)4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組盲腸乳酸桿菌數(shù)量也顯著增加（P＜0.05）；試驗(yàn)第144天，1 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組盲腸沙門氏菌數(shù)量顯著降低（P＜0.05）；試驗(yàn)第40、80、120、144天，500、1 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組盲腸雙歧桿菌數(shù)量均有所升高，但差異不顯著（P＞0.05）。由此可見，飼糧中添加適宜水平的紫花苜蓿粗多糖可以顯著提高產(chǎn)蛋期蛋雞生產(chǎn)性能，改善蛋品質(zhì)，優(yōu)化盲腸菌群結(jié)構(gòu)，且500 mg/kg為適宜添加水平。

苜蓿粗多糖；蛋雞；生產(chǎn)性能；蛋品質(zhì)；盲腸微生物

苜蓿（alfalfa）即紫花苜蓿，是一種優(yōu)質(zhì)的多年生豆科牧草，因其產(chǎn)草量大、營養(yǎng)均衡、易于消化且適口性良好而備受畜牧養(yǎng)殖業(yè)推崇。苜蓿多糖（alfalfa polysaccharides，APS）是從苜蓿莖、葉中提取的一類易溶于水的非淀粉酸性多糖［1］，其單糖組成主要包括木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸［2］，具有多種生物活性。研究表明，動(dòng)物飼糧中添加一定劑量的苜蓿多糖具有促進(jìn)動(dòng)物生長［3］、提高養(yǎng)分利用率、促進(jìn)蛋白質(zhì)合成［4］、增強(qiáng)免疫力［5］、提高抗氧化性能［6］等作用。在動(dòng)物消化道中通常定植有數(shù)量龐大、種類各異的微生物，它們不僅參與營養(yǎng)素的合成、消化、吸收，還具有免疫調(diào)節(jié)和阻止病原微生物入侵等作用。因此，健康穩(wěn)定的腸道菌群對(duì)于促進(jìn)動(dòng)物生長發(fā)育、提高生產(chǎn)性能、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)等方面有十分重要的意義。研究發(fā)現(xiàn)，苜蓿多糖具有促進(jìn)動(dòng)物腸道后段的有益菌增殖、調(diào)節(jié)腸道微生物區(qū)系、促進(jìn)腸道健康的作用［7］。此外，苜蓿多糖同其他來源的植物多糖一樣，具有純天然、無毒副作用的特點(diǎn)，因此在開發(fā)成為可替代抗生素的綠色飼料添加劑方面有著巨大的潛力。目前，國內(nèi)外有關(guān)苜蓿多糖對(duì)產(chǎn)蛋雞的影響鮮有報(bào)道。為此，本試驗(yàn)以海蘭褐殼開產(chǎn)蛋雞為研究對(duì)象，通過在蛋雞飼糧中添加不同水平的紫花苜蓿粗多糖，研究其對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)及盲腸微生物數(shù)量的影響，為苜蓿多糖作為綠色飼料添加劑在蛋雞產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)和試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)選用頭茬現(xiàn)蕾期紫花苜蓿（購自內(nèi)蒙古土默特左旗），切割為60 cm長的草段并風(fēng)干，采用水提、醇沉、脫蛋白法提取紫花苜蓿粗多糖。經(jīng)苯酚-硫酸法測(cè)得其中紫花苜蓿粗多糖含量為22.71%。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及基礎(chǔ)飼糧

試驗(yàn)動(dòng)物選用540只30周齡的海蘭褐殼蛋雞?；A(chǔ)飼糧以玉米、豆粕為主要原料，參考NRC（1994）推薦的蛋雞營養(yǎng)需要量確定營養(yǎng)水平，基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

采用單因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選用30周齡、體重和產(chǎn)蛋率無顯著差異（P＞0.05）、健康的540只海蘭褐殼蛋雞，隨機(jī)分為6組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15只雞。對(duì)照組飼喂不添加紫花苜蓿粗多糖的基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加250、500、1 000、2 000和4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖的試驗(yàn)飼糧。預(yù)試期2周，各組統(tǒng)一飼喂基礎(chǔ)飼糧，統(tǒng)計(jì)各組生產(chǎn)性能，經(jīng)分析無顯著差異（P＞0.05）后開始進(jìn)行正式試驗(yàn)，正試期144 d。飼養(yǎng)試驗(yàn)在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所昌平試驗(yàn)基地進(jìn)行，采用3層層疊式籠養(yǎng)，每籠3只雞，每日喂料3次，自由采食和飲水。采用人工補(bǔ)光加自然光照，每天光照16 h。每天記錄雞舍內(nèi)溫度、濕度，同時(shí)觀察雞只健康狀況，并記錄死淘雞數(shù)及其原因。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet（air-dry basis） %

1.4 測(cè)定指標(biāo)

1.4.1 生產(chǎn)性能

試驗(yàn)期間，每天以重復(fù)為單位記錄產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重；每周末結(jié)料1次。試驗(yàn)結(jié)束后根據(jù)記錄計(jì)算各組雞只的產(chǎn)蛋率、平均蛋重、平均日采食量和料蛋比。

1.4.2 蛋品質(zhì)

試驗(yàn)期間，每天以重復(fù)為單位記錄軟破殼蛋數(shù)，計(jì)算各組的軟破殼蛋率；在試驗(yàn)第30、60、90、120、144天，采集當(dāng)天所有雞蛋，于12 h內(nèi)進(jìn)行蛋品質(zhì)測(cè)定。采用蛋品質(zhì)測(cè)定儀（EMT-2 500，Robotmation公司，日本）測(cè)定哈氏單位、蛋黃顏色；采用卵形系數(shù)測(cè)定器（NFN384，F(xiàn)HK公司，日本）測(cè)定每枚雞蛋的縱徑與橫徑。

蛋形指數(shù)＝（縱徑/橫徑）×100。

1.4.3 盲腸微生物數(shù)量

試驗(yàn)第40、80、120、144天，分別于每個(gè)重復(fù)挑選1只接近平均體重的雞只，處死后剖開腹腔，結(jié)扎右側(cè)盲腸，酒精消毒結(jié)扎口后立即運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室。在無菌操作臺(tái)稱取0.5 g盲腸內(nèi)容物置于已滅菌的10 mL離心管，并加入已滅菌的生理鹽水4.5 mL，振蕩4～5 min，此為10-1倍稀釋；靜置一段時(shí)間后，吸取上清液0.5 mL于4.5 mL已滅菌生理鹽水中進(jìn)行10-2倍稀釋，振蕩4～5 s，并依次進(jìn)行10-3～10-7倍稀釋。選擇3個(gè)合適的稀釋度，每一稀釋度取 50 μL，分別接種于伊紅美藍(lán)瓊脂（EMB）培養(yǎng)基（大腸桿菌）、沙門氏菌-志賀氏菌瓊脂（SS）培養(yǎng)基（沙門氏菌）、乳酸細(xì)菌（MRS）培養(yǎng)基（乳酸桿菌）和雙歧桿菌（TPY）培養(yǎng)基（雙歧桿菌）。大腸桿菌37℃有氧培養(yǎng)24 h，沙門氏菌37℃有氧培養(yǎng)24 h，乳酸桿菌和雙歧桿菌37℃厭氧培養(yǎng)48～72 h。每克盲腸內(nèi)容物所含有的細(xì)菌數(shù)用lg（CFU/g）表示，計(jì)算公式如下：

1.5 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS 9.2軟件ANOVA程序進(jìn)行方差分析，用Duncan氏法進(jìn)行組間多重比較，以P＜0.05為差異顯著。試驗(yàn)結(jié)果以“平均值（means）±標(biāo)準(zhǔn)差（SD）”來表示，其中產(chǎn)蛋率和軟破殼蛋率經(jīng)反正弦轉(zhuǎn)換后進(jìn)行方差分析。

2 結(jié) 果

2.1 紫花苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)第1～8周，2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組顯著提高了產(chǎn)蛋率（P＜0.05）；試驗(yàn)第1～20周，250、500、1 000、2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組產(chǎn)蛋率分別提高了 0.07%、1.21%、2.19%、1.59%和1.12%（P＞0.05）。就各紫花苜蓿粗多糖組而言，2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組在試驗(yàn)第1～8周產(chǎn)蛋率顯著高于250 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組（P＜0.05），其余階段各紫花苜蓿粗多糖組間產(chǎn)蛋率無顯著差異（P＞0.05）。試驗(yàn)第17～20周，500、1 000、2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組平均日采食量較對(duì)照組顯著增加（P＜0.05）；試驗(yàn)第1～20周，各紫花苜蓿粗多糖組蛋雞平均日采食量均高于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05）。2 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組平均日采食量在試驗(yàn)第17～20周顯著高于250 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組（P＜0.05）。料蛋比方面，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)第17～20周，250 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組顯著降低（P＜0.05），同時(shí)250、1 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組顯著低于500 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組（P＜0.05）。飼糧中添加紫花苜蓿粗多糖對(duì)平均蛋重沒有顯著影響（P＞0.05）。

2.2 紫花苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)的影響

由表3可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)第30天，1 000、2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組蛋黃顏色顯著降低（P＜0.05）；試驗(yàn)第 90天，500、1 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組蛋黃顏色顯著降低（P＜0.05）；試驗(yàn)第 144天，250、500、1 000、2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組蛋黃顏色均顯著提高（P＜0.05）。不同階段各紫花苜蓿粗多糖組間比較，250、500 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組蛋黃顏色在試驗(yàn)第 30、144天均顯著高于2 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組（P＜0.05）；試驗(yàn)第90天，2 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組蛋黃顏色顯著高于500、1 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組（P＜0.05）。試驗(yàn)第90天，4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組哈夫單位顯著低于對(duì)照組和500 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組（P＜0.05）。試驗(yàn)第60天，2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組蛋形指數(shù)顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）；試驗(yàn)第120天，1 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組蛋形指數(shù)顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。2 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組蛋形指數(shù)在試驗(yàn)第60天顯著低于 250、500、1 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組（P＜0.05），1 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組蛋形指數(shù)在試驗(yàn)第120天顯著低于250、500、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組（P＜0.05）。軟破殼蛋率方面，試驗(yàn)第61～90天，250、1 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組顯著低于對(duì)照組及其他各組（P＜0.05）；從試驗(yàn)全期（第1～144天）來看，各紫花苜蓿粗多糖組軟破殼蛋率均低于對(duì)照組，但差異并不顯著（P＞0.05）。

表3 紫花苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)的影響Table 3 Effects of alfalfa crude polysaccharides on egg quality of laying hens（n＝6）

續(xù)表3

2.3 紫花苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞盲腸微生物數(shù)量的影響

由表4可知，飼糧中添加紫花苜蓿粗多糖可顯著影響試驗(yàn)第80天產(chǎn)蛋雞盲腸大腸桿菌、沙門氏菌及乳酸桿菌的數(shù)量（P＜0.05）。與對(duì)照組相比，在試驗(yàn)第80天，500、1 000、2 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組盲腸大腸桿菌數(shù)量顯著降低（P＜0.05），且500、2 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組盲腸大腸桿菌數(shù)量顯著低于250 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組（P＜0.05）。在試驗(yàn)第80天，500、1 000、2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組盲腸沙門氏菌數(shù)量均低于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05），1 000、2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組盲腸沙門氏菌數(shù)量顯著低于250 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組（P＜0.05）；試驗(yàn)第144天，1 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組盲腸沙門氏菌數(shù)量顯著低于對(duì)照組和250、2 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組（P＜0.05）。試驗(yàn)第80天，500、2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組盲腸乳酸桿菌的數(shù)量顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；試驗(yàn)第120天，500、1 000、2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組盲腸乳酸桿菌數(shù)量均高于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05），500、2 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組盲腸乳酸桿菌數(shù)量顯著高于 250 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組（P＜0.05）。飼糧中添加紫花苜蓿粗多糖對(duì)盲腸雙歧桿菌的增殖有一定的促進(jìn)作用，但對(duì)盲腸雙歧桿菌數(shù)量的影響不顯著（P＞0.05）。

表4 紫花苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞盲腸微生物數(shù)量的影響Table 4 Effects of alfalfa crude polysaccharides on cecal microflora numbers of laying hens（n＝6）lg（CFU/g）

續(xù)表4

3 討 論

3.1 紫花苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

目前，單一多糖（苜蓿多糖）作為飼料添加劑對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能影響的研究還未見報(bào)道。本試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)第 1～8周，飼糧中添加 2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖顯著提高了蛋雞的產(chǎn)蛋率；試驗(yàn)全期，各紫花苜蓿粗多糖組產(chǎn)蛋率均高于對(duì)照組。高產(chǎn)蛋雞在產(chǎn)蛋高峰期卵巢連續(xù)大量排卵，氧化損傷積聚導(dǎo)致其功能衰退［8］，促使蛋雞產(chǎn)蛋率較低。飼糧中添加紫花苜蓿粗多糖能提高蛋雞產(chǎn)蛋率可能是由于苜蓿多糖能通過抑制蛋雞機(jī)體內(nèi)1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）和羥自由基的生成［9］，增強(qiáng)超氧化物岐化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性［10］，緩解卵巢的氧化損傷，從而促進(jìn)產(chǎn)蛋率的上升。此外，本試驗(yàn)材料紫花苜蓿粗多糖中含有少量黃酮類化合物，具有雌激素樣生物活性，能通過調(diào)節(jié)生殖激素水平，增加卵泡數(shù)量，提高產(chǎn)蛋率［11］。試驗(yàn)第17～20周，500、1 000、2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組較對(duì)照組顯著提高了蛋雞的平均日采食量，且250 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組顯著降低了料蛋比。采食量的增加和料蛋比的降低，可能是由于紫花苜蓿粗多糖提高了雞只對(duì)粗蛋白質(zhì)、粗脂肪等養(yǎng)分的代謝率［12］，同時(shí)本試驗(yàn)結(jié)果還表明，紫花苜蓿粗多糖組能增加腸道益生菌（乳酸桿菌、雙歧桿菌）數(shù)量，抑制大腸桿菌和沙門氏菌的增殖，促進(jìn)了腸道健康，這也有利于養(yǎng)分的消化吸收，使蛋雞的生產(chǎn)性能得到提高。

3.2 紫花苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)的影響

蛋黃顏色的深淺主要取決于家禽從飼糧中攝取的類胡蘿卜素的數(shù)量和種類［13］。其中葉黃素是飼料中最主要的著色物質(zhì)。劉培培等［14］研究發(fā)現(xiàn)，隨著飼糧中地黃多糖提取物添加水平的增加，雞蛋蛋黃顏色顯著增加。王翠菊等［15］研究表明，添加100～250 mg/kg黃芪多糖能在一定程度上增加色素沉積，改善蛋黃顏色。而在本試驗(yàn)中，試驗(yàn)前期（第30～90天），紫花苜蓿粗多糖對(duì)于蛋黃顏色的改善作用不明顯，1 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組蛋黃顏色甚至顯著降低了，這可能是由于試驗(yàn)前期高溫天氣較多，雞只的氧化應(yīng)激比較嚴(yán)重，同時(shí)飼糧中豆油含有的不飽和脂肪酸易于氧化，而葉黃素具有部分抗氧化作用，使得色素結(jié)構(gòu)被破壞失去著色功能，因此紫花苜蓿粗多糖在試驗(yàn)前期對(duì)蛋黃顏色的改善效果不太理想。而在試驗(yàn)后期（第120～144天），紫花苜蓿粗多糖組蛋黃顏色有提高的趨勢(shì)。原因可能是紫花苜蓿粗多糖在產(chǎn)蛋后期提高了葉黃素等類胡蘿卜素的穩(wěn)定性，增加了卵黃中的色素沉積，從而改善了蛋黃顏色。

哈夫單位是衡量雞蛋蛋白品質(zhì)和新鮮程度的重要指標(biāo)，哈夫單位越高，說明蛋白質(zhì)越黏稠，品質(zhì)越好。從本試驗(yàn)結(jié)果可以看出，飼糧中添加4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖時(shí)，會(huì)顯著降低雞蛋哈夫單位。這可能是由于紫花苜蓿粗多糖中的半乳糖醛酸等物質(zhì)是一種非淀粉多糖，具有抗?fàn)I養(yǎng)作用，過高的添加水平阻礙了腸黏膜對(duì)飼料中蛋白質(zhì)的吸收，對(duì)蛋白品質(zhì)造成了不利影響。

有研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加天然抗氧化劑會(huì)降低雞蛋蛋形指數(shù)（長/寬）［16-17］。 Reynard等［18］研究指出，應(yīng)激狀態(tài)下蛋雞排卵時(shí)間推遲，雞蛋在子宮中停留延長，導(dǎo)致雞蛋會(huì)變得狹長，蛋形指數(shù)變大。本試驗(yàn)第60天時(shí)，2 000、4 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組蛋形指數(shù)相較于對(duì)照組顯著降低，原因可能在于紫花苜蓿粗多糖緩解了雞只的應(yīng)激反應(yīng)，其具體機(jī)制還有待進(jìn)一步的研究。

鈣是構(gòu)成蛋殼的主要元素，當(dāng)鈣分泌機(jī)能發(fā)生障礙或供應(yīng)不足時(shí)，蛋殼就會(huì)變薄、變脆，影響蛋殼質(zhì)量［19］。從本試驗(yàn)全期來看，各紫花苜蓿粗多糖組軟破殼蛋率均低于對(duì)照組，其中試驗(yàn)第61～90天，250、1 000 mg/kg紫花苜蓿粗多糖組軟破殼蛋率均顯著降低，表明紫花苜蓿粗多糖具有改善蛋殼質(zhì)量的作用。已有研究表明，植物多糖可通過細(xì)胞外鈣離子內(nèi)流和細(xì)胞內(nèi)鈣離子釋放影響胞漿內(nèi)的鈣離子濃度［20-21］。 Deng等［22］研究報(bào)道，水溶性植物多糖具有增強(qiáng)腸道功能的作用，能夠促進(jìn)腸道對(duì)鈣離子的吸收。由此推測(cè)紫花苜蓿粗多糖可能通過調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外鈣離子濃度，促進(jìn)蛋殼中鈣的沉積，從而提高蛋殼質(zhì)量，減少軟破殼蛋的產(chǎn)生。研究發(fā)現(xiàn)，腸道有益菌可通過產(chǎn)生低級(jí)脂肪酸和乳酸等酸性物質(zhì)，降低胃腸道pH，增加鈣和磷等礦物元素的溶解度，促進(jìn)鈣和磷等礦物質(zhì)的吸收，增強(qiáng)蛋殼質(zhì)量［23-24］。由此可見，本試驗(yàn)中紫花苜蓿粗多糖組軟破殼蛋率的降低也可能是由于腸道中乳酸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量的增加引起的。

3.3 紫花苜蓿粗多糖對(duì)蛋雞盲腸微生物數(shù)量的影響

家禽有成對(duì)的盲腸，盲腸內(nèi)穩(wěn)定適宜的溫度、pH及較長的排空間隙，為微生物的定居繁殖提供了理想的條件。研究表明，雞盲腸中總菌數(shù)約為1011個(gè)/g（濕重），厭氧菌總菌數(shù)為108～109個(gè)/g［25］，其中至少含有140個(gè)屬的640個(gè)種的細(xì)菌［26］。考慮到雞的大腸很短，因此盲腸是雞腸道微生物活動(dòng)的主要器官。正常情況下，動(dòng)物腸道中的微生物群落處于一種動(dòng)態(tài)平衡中，其結(jié)構(gòu)與功能受到胃腸道內(nèi)環(huán)境（如氧化還原電勢(shì)、pH）、外界環(huán)境條件（如溫度、濕度）以及飼料的營養(yǎng)組成和化學(xué)結(jié)構(gòu)等多種因素的影響。

已有的研究結(jié)果顯示，飼糧中苜蓿多糖添加水平為1%和8%時(shí)均能明顯促進(jìn)肉仔雞盲腸內(nèi)有益菌（雙歧桿、乳酸桿菌）的增殖，同時(shí)對(duì)大腸桿菌的數(shù)量有抑制作用［7，27］。此外，大量研究證實(shí)飼糧中添加天然植物多糖對(duì)動(dòng)物腸道菌群有積極的調(diào)節(jié)作用。陳清華等［28］研究發(fā)現(xiàn)，仔豬飼糧中添加牛膝多糖能夠抑制腸道大腸桿菌，同時(shí)促進(jìn)雙歧桿菌和乳酸桿菌的增殖，且效果優(yōu)于抗生素組。董永軍等［29］研究指出，飼糧中添加甘草多糖顯著促進(jìn)了艾維茵肉仔雞盲腸中乳酸桿菌和雙歧桿菌的增殖，抑制了大腸桿菌和沙門氏菌的數(shù)量。沈思捷等［30］研究表明，小刺猴頭菌發(fā)酵浸膏多糖可顯著提高肉仔雞回腸、盲腸乳酸桿菌和雙歧桿菌的數(shù)量，并能降低大腸桿菌、沙門氏菌和腸球菌的數(shù)量，其中0.5%添加組的效果最好。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧中添加紫花苜蓿粗多糖可以顯著提高蛋雞的盲腸乳酸桿菌數(shù)量，一定程度上促進(jìn)了雙歧桿菌的增殖，同時(shí)對(duì)盲腸內(nèi)大腸桿菌、沙門氏菌有明顯的抑制作用，與前人的研究結(jié)果基本一致。目前，關(guān)于苜蓿多糖對(duì)腸道微生物菌群的調(diào)節(jié)機(jī)制還尚不明確，可能的作用途徑主要有以下幾個(gè)方面：有研究認(rèn)為，某些植物多糖具有益生元效應(yīng)，即由于其特殊的化學(xué)結(jié)構(gòu)，使得它們不會(huì)在消化道前段被酶水解吸收，而是進(jìn)入腸道后段作為腸道菌群發(fā)酵底物，選擇性的刺激有益菌的生長與活性，從而提高機(jī)體對(duì)病原微生物的抵抗力，改善宿主健康［31］。也有研究指出，植物多糖有效成分進(jìn)入腸道后可通過“占位”效應(yīng)與大腸桿菌、沙門氏菌等致病菌競(jìng)爭(zhēng)腸黏膜上的附著位點(diǎn)，使其無法黏附定植，數(shù)量減少［32］。此外，雙歧桿菌和乳酸桿菌發(fā)酵增殖的過程中產(chǎn)生的多種有機(jī)酸（乙酸、乳酸等）能降低腸道pH和氧化還原電勢(shì)，從而抑制腸道內(nèi)大腸桿菌、沙門氏菌等致病菌的生長，使其數(shù)量下降。聯(lián)系到飼糧中添加紫花苜蓿粗多糖后提高了蛋雞的產(chǎn)蛋率和平均日采食量，顯著降低了料蛋比和軟破殼蛋率，這與腸道中有益菌的增殖一致，表明產(chǎn)蛋雞良好的生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)同保持腸道中乳酸桿菌、雙歧桿菌等益生菌的增殖與優(yōu)勢(shì)密切相關(guān)。

4 結(jié) 論

飼糧中添加適宜水平的紫花苜蓿粗多糖可以顯著提高產(chǎn)蛋期蛋雞生產(chǎn)性能，改善蛋品質(zhì)，優(yōu)化盲腸菌群結(jié)構(gòu)。綜合考慮，蛋雞飼糧中添加500 mg/kg紫花苜蓿粗多糖為適宜添加水平。

參考文獻(xiàn)：

［1］王彥華，王成章，史瑩華，等.苜蓿多糖的研究進(jìn)展［J］.草業(yè)科學(xué)，2007，24（4）：50-53.

［2］王少璞.苜蓿多糖提取、純化及其對(duì)蛋雞肝細(xì)胞生物活性的影響［D］.碩士學(xué)位論文.北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2014：20-29.

［3］董殿元.飼糧中添加苜蓿多糖對(duì)保育豬生長性能及血清生化指標(biāo)的影響［J］.養(yǎng)豬，2014（3）：20-21.

［4］夏素銀，嚴(yán)學(xué)兵，王成章，等.紫花苜蓿生物活性成分在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用［J］.草業(yè)科學(xué)，2010，27（7）：133-140.

［5］LI J S，TANG Y S，MENG X H，et al.The proliferative effects of alfalfa polysaccharides on the mouse immune cells［J］.Life Science Journal，2013，10（2）：868-873.

［6］LIU H W，DONG X F，TONG J M，et al.Alfalfa polysaccharides improve the growth performance and antioxidant status of heat-stressed rabbits［J］.Livestock Science，2010，131（1）：88-93.

［7］張慧輝.水溶性苜蓿多糖的提取及其對(duì)雞免疫功能和生產(chǎn)性能的影響研究［D］.碩士學(xué)位論文.鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2007：40-41.

［8］姜禮文.排卵誘導(dǎo)氧化應(yīng)激對(duì)蛋雞卵巢機(jī)能的影響［D］.碩士學(xué)位論文.北京：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2013：22-32.

［9］劉華偉，董曉芳，佟建明，等.苜蓿、黃芪、地衣芽孢桿菌胞外多糖體外抗氧化活性研究［J］.食品工業(yè)科學(xué)，2011，32（6）：76-78.

［10］徐春燕.苜蓿多糖和黃芪多糖對(duì)肉仔雞抗氧化性能影響的研究［D］.碩士學(xué)位論文.揚(yáng)州：揚(yáng)州大學(xué)，2010：34-37.

［11］劉瑩.槲皮素對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)的影響［D］.碩士學(xué)位論文.哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2013：6-24.

［12］陳紅莉.苜蓿多糖對(duì)肉仔雞消化代謝、生長及免疫性能影響的研究［D］.碩士學(xué)位論文.石河子：石河子大學(xué)，2006：16-20.

［13］曲湘勇，中島隆.天然著色劑提高蛋黃色澤度的比較研究［J］.中國畜牧雜志，1999，35（2）：29-30.

［14］劉培培，臧素敏，王娟，等.螺旋藻粉、地黃多糖和益母草提取物對(duì)蛋雞蛋品質(zhì)和部分生化指標(biāo)的影響［J］.中國家禽，2016，38（12）：25-30.

［15］王翠菊，王洪芳，陳輝，等.黃芪多糖對(duì)蛋雞抗氧化性能和蛋品質(zhì)的影響［J］.動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào)，2011，23（2）：280-284.

［16］ALI M N，HASSAN M S，ABD EL-GHANY F A.Effect of strain，type of natural antioxidant and sulphate ion on productive，physiological and hatching performance of native laying hens［J］.International Journal of Poultry Science，2007，6（8）：539-554.

［17］RADWAN NADIA L，HASSAN R A，QOTA E M，et al.Effect of natural antioxidant on oxidative stability of eggs and productive and reproductive performance of laying hens［J］.International Journal of Poultry Science，2008，7（2）：134-150.

［18］REYNARD M，SAVORY C J.Stress-induced oviposition delays in laying hens：duration and consequences for eggshell quality［J］.British Poultry Science，1999，40（5）：585-591.

［19］王洪芳.黃芪多糖對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能、抗氧化酶活性、免疫機(jī)能及腸道主要菌群的影響［D］.碩士學(xué)位論文.保定：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2010：24-25.

［20］ZHANG M，CHEN H X，HUANG J，et al.Effect of lycium barbarum polysaccharide on human hepatoma QGY7703 cells：inhibition of proliferation and induction of apoptosis［J］.Life Sciences，2005，76（18）：2115-2124.

［21］王鵬雁，安建多，王池，等.槲芪散及槲寄生提取物對(duì)肝癌細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度的影響［J］.首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2012，33（3）：291-296.

［22］DENG W，DONG X F，TONG J M，et al.Effects of an aqueous alfalfa extract on production performance，egg quality and lipid metabolism of laying hens［J］.Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition，2012，96（1）：85-94.

［23］劉愛軍，尹望，李雪平.乳酸菌類微生態(tài)制劑對(duì)海蘭褐蛋雞蛋品質(zhì)、腸道微生物和養(yǎng)殖環(huán)境的影響［J］.飼料研究，2015（21）：16-18，25.

［24］郭時(shí)金.益生菌的作用機(jī)制及在蛋雞中的應(yīng)用［J］.飼料研究，2011（3）：23-25.

［25］BARNES E M，MEAD G C，BARNUML D A，et al.The intestinal flora of the chicken in the period 2 to 6 weeks of age，with particular reference to theanaerobic bacteria［J］.British Poultry Science，1972，13（3）：311-326.

［26］PREIDIS G A，HILL C，GUERRANT R L，et al.Probiotics，enteric and diarrheal diseases，and global health［J］.Gastroenterology，2011，140（1）：8-14.

［27］王麗榮.水溶性苜蓿多糖（WSAP）對(duì)肉仔雞免疫機(jī)理的研究［D］.碩士學(xué)位論文.呼和浩特：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，2001：20-21.

［28］陳清華，賀建華，劉祝英.牛膝多糖對(duì)仔豬腸道微生物及小腸黏膜形態(tài)的影響［J］.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2007，33（6）：723-726.

［29］董永軍，王麗榮，齊永華，等.甘草多糖對(duì)肉仔雞腸道微生物調(diào)控的研究［J］.糧食與飼料工業(yè)，2012（4）：47-49.

［30］沈思捷，姚旭，尚紅梅，等.小刺猴頭菌發(fā)酵浸膏多糖對(duì)肉仔雞腸道菌群的影響［J］.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，35（1）：83-88，93.

［31］GUO F C，WILLIAMS B A，KWAKKEL R P，et al.Effects of mushroom and herb polysaccharides，as alternatives for an antibiotic，on the cecal microbial ecosystem in broiler chickens［J］.Poultry Science，2004，83（2）：175-182.

［32］魏炳棟，陳群，于維，等.黃芪多糖對(duì)三黃肉雞生長性能及腸道菌群的影響［J］.中國飼料，2013（17）：26-28.

Effects of Alfalfa Crude Polysaccharides on Performance，Egg Quality and Caecal Microflora Numbers of Laying Hens

WANG Jinyu DONG Xiaofang?TONG Jianming
（Institute of Animal Science，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Beijing100193，China）

This experiment was conducted to study the effects of dietary different supplemental levels of alfalfa crude polysaccharides（ACPS）on performance，egg quality and caecal microflora numbers of laying hens.Five hundred and forty 30-week-old Hy-line brown hens were randomly allocated to 6 groups with 6 replicates per group and 15 hens per replicate.Hens in control group were fed a corn-soybean meal basal diet，and those in testing groups were fed the basal diet supplemented with 250，500，1 000，2 000 and 4 000 mg/kg ACPS，respectively.The experiment lasted for 144 days.The results showed as follows：1）during week 1 to 8，the laying rate of 2 000 and 4 000 mg/kg ACPS groups was significantly higher than that of the control and 250 mg/kg ACPS groups（P＜0.05）.During week 17 to 20，the average daily feed intake of 2 000 mg/kg ACPS group was significantly higher than that of the control and 250 mg/kg ACPS groups（P＜0.05），while the feed to egg ratio of 250 mg/kg ACPS group was significantly lower than that of the control and 500 mg/kg ACPS groups（P＜0.05）.2）Compared with the control group，all ACPS groups significantly improved the egg yolk color on day 144（P＜0.05），the 4 000 mg/kg ACPS group significantly decreased the Haugh unit on day 90（P＜0.05），the 2 000 and 4 000 mg/kg ACPS groups significantly decreased the egg shape index on day 60（P＜0.05），the 1 000 mg/kg ACPS group also significantly decreased the egg shape index on day 120（P＜0.05），the 250 and 1 000 mg/kg ACPS groups significantly decreased the soft shelled or cracked eggs rate during day 61 to 90（P＜0.05）.3）Compared with the control group，the 500 and 2 000 ACPS groups significantly decreased the number ofEscherichia coliin cecum on day 80，while the number ofLactobacillusin cecum was significantly increased on day 80（P＜0.05），and the 4 000 mg/kg ACPS group also significantly increased the number ofLactobacillusin cecum on day 80（P＜0.05）；the 1 000 mg/kg ACPS group significantly decreased the number ofSalmonellain cecum on day 144（P＜0.05）；the 500 and 1 000 mg/kg ACPS groups increased the number ofBifidobacteriumin caecum on day 40，80，120 and 144，but differences between them were not significant（P＞0.05）.In conclusion，dietary supplemented suitable level of ACPS can enhance performance of laying hens during laying period，improve egg quality，and optimize caecal microflora structure.The appropriate supplemental level of ACPS is 500 mg/kg.［Chinese Journal of Animal Nutrition，2017，29（2）：502-510］

alfalfa crude polysaccharides；laying hens；performance；egg quality；caecal microflora

S831

A

1006-267X（2017）02-0502-09

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.02.017

（責(zé)任編輯 武海龍）

2016-08-01

“十二五”國家科技支撐計(jì)劃課題（2013BAD10B04）；國家蛋雞產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)（CARS-41-K16）；中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院科技創(chuàng)新工程（ASTIP-IAS08）；公益性行業(yè)科研專項(xiàng)（201403047）

王進(jìn)宇（1990—），男，四川成都人，碩士研究生，從事蛋雞營養(yǎng)與飼料科學(xué)的研究。E-mail：wjyahead＠sina.com

?通信作者：董曉芳，副研究員，碩士生導(dǎo)師，E-mail：xiaofangd1124＠sina.com

?Corresponding author，associate professor，E-mail：xiaofangd1124＠sina.com