趙 琦

(柳州市婦幼保健院 婦科，廣西 柳州545001)

子宮內膜癌組織中ER、PR、p53、Ki-67的表達及其與臨床病理特征的相關性分析

趙 琦

(柳州市婦幼保健院 婦科，廣西 柳州545001)

子宮內膜癌(endometrial carcinoma)是女性最常見的生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之一，其發(fā)病率逐年增高，且有年輕化趨勢。子宮內膜癌的發(fā)病機制尚未完全清楚，但臨床大量研究已經證實性激素水平異?？赡苁菍е伦訉m內膜癌發(fā)病的主要原因之一，同時抑癌基因的抑制、原癌基因的激活等也參與了子宮內膜癌的發(fā)生發(fā)展過程[1-4]。本研究主要對子宮內膜癌組織中雌激素受體(estrogen receptor,ER)、孕激素受體(progestin reseptor,PR)、53抑癌基因(p53)、抗原Ki-67(Ki-67)的表達及其與臨床病理特征的相關性進行分析，旨在探討其在子宮內膜癌的發(fā)及發(fā)展中的作用，以期為子宮內膜癌的臨床診治提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集我院2009年1月-2015年12月期間收治的100例子宮內膜癌患者組織標本，納入標準：(1)均病理確診為子宮內膜癌；(2)子宮內膜癌組織標本均為患者未行放療、化療和激素治療狀態(tài)下取得；(3)未合并其他惡性腫瘤；(4)臨床資料完整。入選患者年齡36-87歲，平均(54.74±8.50)歲，初潮年齡11-18(14.33±1.31)歲，孕次0-8(3.20±0.42)次，產次0-6次，平均(2.02±0.24)次，其中絕經患者76例，未絕經者24例；合并高血壓14例，糖尿病8例，冠心病7例；病理類型：子宮內膜樣腺癌86例，其他14例；依據2009年FIGO頒布的病理分期標準：Ⅰ期70例，Ⅱ期12例，Ⅲ期-Ⅳ期18例；組織分化程度：G1 25例，G2 57例，G3 18例；有淋巴結轉移者12例，無淋巴結轉移88例。選取同期患子宮肌瘤、子宮脫垂、子宮腺肌癥等疾病的50例患者行手術切除子宮取得的正常子宮內膜組織為對照，入選患者組織標本均病理確診，1年內無激素治療史，未合并其他惡性腫痛，年齡38-84歲，平均(55.18±9.26)歲，初潮年齡12-18歲，平均(14.51±1.33)歲，孕次0-7次，平均(3.22±0.40)次，產次0-6次，平均(1.98±0.21)次，其中絕經患者32例，未絕經者18例；合并高血壓6例，糖尿病3例，冠心病3例。子宮內膜癌患者與對照患者在年齡、初潮年齡、孕次、產次、絕經狀態(tài)、合并癥等方面比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

1.2 方法

采用免疫組化SP法觀察標本組織中ER、PR、p53、Ki-67的表達情況。具體步驟如下：將福爾馬林固定的組織標本以石蠟包埋后連續(xù)切片，厚度4 μm，行脫蠟處理，在3%的過氧化氫室溫下孵育10 min，蒸餾水沖洗，EDTA抗原修復液進行組織抗原修復，內源性氧化物酶封閉，磷酸鹽緩沖液(PBS)進行沖洗，滴加一抗，在4℃下進行過夜處理后再次PBS緩沖液沖洗后滴加二抗，在37℃溫度下孵育30 min，PBS緩沖液沖洗，DAB顯色，自來水沖洗后進行復染后進行脫水、透明及樹脂封片，按照檢測試劑盒操作說明進行。檢測中以PBS代替一抗(作為陰性對照)，以已知的陽性切片為陽性對照。檢測所用ER、PR、p53、Ki-67試劑盒均為美國Zymed公司生產。

1.3 結果判定

ER、PR、p53、Ki-67陽性時均表現(xiàn)為細胞核內棕黃色。計算陽性細胞所占百分比：陽性細胞所占百分比≤10%時評定1分，>10%-50%之間評定2分，>50%-75%評定為3分，>75%評定為4分；評定細胞著色強度：無色評定0分、淺黃色評定1分、棕黃色評定2分、棕褐色評定3分；將陽性細胞所占百分比得分與染色強度得分相乘，最后得分在3分及以下為(-)，>3-6分為(+)，>6-8分為(++)，>8-12分為(+++)，>3分者均為陽性。

1.4 統(tǒng)計學方法

所得數(shù)據采用SPSS 19.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料采用卡方檢驗，相關性分析采用Spearman相關性分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 ER、PR、p53、Ki-67在子宮內膜癌與正常子宮內膜組織中的表達狀況

ER、PR在正常子宮內膜組織中的陽性表達率分別為96.00%、94.00%，高于子宮內膜癌組織中陽性表達率的66.00%、62.00%，p53、Ki-67在正常子宮內膜組織中的陽性表達率分別為2.00%、16.00%，低于子宮內膜癌組織中陽性表達率的48.00%、72.00%，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 ER、PR、p53、Ki-67在子宮內膜癌與正常子宮內膜組織中的陽性表達比較(n,%)

2.2 不同臨床病理特征子宮內膜癌患者子宮內膜癌組織中ER、PR、p53、Ki-67的表達狀況

ER陽性表達與患者絕經狀況、淋巴結轉移狀況無關(P>0.05)，與病理類型、病理分期和組織分化程度有關(P<0.05)；PR陽性表達與患者絕經狀況、病理分期及淋巴結轉移狀況無關(P>0.05)，與病理類型、組織分化程度有關(P<0.05)；p53陽性表達與患者絕經狀況、病理類型、病理分期和淋巴結轉移狀況無關(P>0.05)，與組織分化程度有關(P<0.05)；Ki-67陽性表達與患者絕經狀況、病理類型和組織分化程度無關(P>0.05)，與病理分期及淋巴結轉移狀況有關(P<0.05)，見表2。

表2 不同臨床病理特征子宮內膜癌患者子宮內膜癌組織中ER、PR、p53、Ki-67陽性表達比較(n,%)

3 討論

子宮內膜癌是女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，起源與子宮內膜上皮，可根據臨床特點分為I型雌激素依賴型與II型非雌激素依賴型，其發(fā)生及發(fā)展尚未完全研究清楚，但研究普遍顯示性激素水平異常及抑癌基因的抑制、原癌基因的激活等與子宮內膜癌發(fā)生及發(fā)展有關。[1-4]。

最早在1983年Bokhman就提出了I型雌激素依賴型子宮內膜癌與長期雌激素刺激有關，后隨著臨床研究的深入，臨床大量研究顯示ER與PR在子宮內膜癌組織中存在一定程度的表達缺失[5-8]，如表達率相對較高時患者往往在采用性激素治療時療效較好，同時有研究也顯示ER與PR表達與患者預后關系密切[9,10]，這可能與對性激素治療敏感等有關。本研究對ER和PR在子宮內膜癌組織中的表達進行了研究，結果顯示正常子宮內膜組織中陽性表達率分別達到了96.00%、94.00%，在子宮內膜癌組織中陽性表達率僅為66.00%、62.00%，同時分析其與臨床病理特征間的相關性，ER陽性表達與患者絕經狀況、淋巴結轉移狀況無關，與病理類型、病理分期、組織分化程度有關，PR陽性表達與患者絕經狀況、病理分期及淋巴結轉移狀況無關，與病理類型、組織分化程度有關，子宮內膜樣腺癌組織中ER及PR表達明顯低于其他類型癌，而且隨著組織分化程度的降低陽性表達率明顯降低，表面ER與PR與患者生物學特征關系極為密切。

p53為抑癌基因，具有抑制細胞增長、調節(jié)轉錄及誘導凋亡的作用，p53的點突變被認為是導致其失去抑癌作用的主要原因[11,12]，發(fā)生突變后的p53還可促使正常細胞惡化，本研究中子宮內膜癌增長中p53陽性表達率有所升高，同時與組織分化程度關系密切，表明其與子宮內膜癌的惡性程度有關，惡性程度高的低分化子宮內膜癌往往預后較差，因此此指標還可間接反映及評估預后。Ki-67是與細胞有絲分裂有關的一種增殖細胞抗原，半衰期相對較短不足1 h，能反映出細胞增殖狀態(tài)，因此Ki-67陽性表達率越高往往代表細胞增殖越活躍[13-15]，本研究中子宮內膜癌增殖中Ki-67表達率也明顯高于子正常子宮內膜組織，同時與患者病理分期及淋巴結轉移狀況有關，而淋巴結轉移往往與癌細胞的侵襲能力、預后關系密切，因此Ki-67的表達升高提示了患者更容易出現(xiàn)淋巴結轉移及遠處轉移，往往預后可能更差，值得注意。

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