古 旭，王德新，王逸之

(西南林業(yè)大學(xué)生物多樣性研究院，云南 昆明 650224)

蕨類植物組培苗煉苗及移栽技術(shù)

古 旭，王德新，王逸之

(西南林業(yè)大學(xué)生物多樣性研究院，云南 昆明 650224)

我國擁有豐富的蕨類植物資源，其在藥用、食用和觀賞方面具有較高的利用和經(jīng)濟(jì)開發(fā)價值。移栽作為影響蕨類植物組培苗出瓶后成活率的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，決定了組培苗能否順利從室內(nèi)培養(yǎng)應(yīng)用到大田生產(chǎn)中。文章在前人工作的基礎(chǔ)上，對蕨類植物組培苗的出瓶時間、煉苗方式以及移栽的基質(zhì)、溫度、光照、濕度、肥料等影響因子進(jìn)行了闡述。

蕨類植物；組培苗；煉苗；移栽環(huán)境

蕨類植物(Pteridophyta)是高等植物三大門類之一，在系統(tǒng)演化上介于苔蘚植物門與種子植物門之間。我國的蕨類植物資源豐富，約有2 600多種，占世界蕨類 12 000 種的近20%[1]。蕨類植物用途廣泛，在藥用、食用和觀賞方面具有較高的利用和經(jīng)濟(jì)開發(fā)價值。生物組培技術(shù)是當(dāng)前蕨類植物繁育研究的熱點，移栽作為影響組培苗出瓶后成活率的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，決定了組培苗能否順利從室內(nèi)培養(yǎng)應(yīng)用到大田生產(chǎn)中。本文在前人工作的基礎(chǔ)上，對蕨類植物組培苗煉苗及移栽的影響因子進(jìn)行總結(jié)和討論。

1 煉苗

由于前期組培苗一直在無菌、恒溫恒濕、光照適宜的人工控制條件下培養(yǎng)，移栽后生長環(huán)境會發(fā)生較大變化，因此組培苗在出瓶前必須通過煉苗增強其對自然環(huán)境的適應(yīng)性。當(dāng)組培苗長至2～6 cm高并有2～3條須根后即可進(jìn)行煉苗，部分植株矮小的物種也可根據(jù)葉片數(shù)量(2片及以上)和葉片大小(2 cm左右)進(jìn)行判斷[2-4]。

常規(guī)煉苗方式為將組培瓶移到自然環(huán)境中，在遮光70%～80%或僅有少量散射光照射的條件下放置5～7 d，然后打開瓶蓋3 d[2,6-8]。也有研究者利用滅過菌的沙瓶對扇葉鐵線蕨進(jìn)行煉苗，其研究表明，與在培養(yǎng)瓶中煉苗相比，沙瓶煉苗后的幼苗移栽成活率更高、生長勢更好，且栽培基質(zhì)受污染的情況更少[9]。

煉苗結(jié)束后，用鑷子輕輕將組培苗從培養(yǎng)基中取出，注意盡量不要傷及其根。研究者對12種觀賞蕨組培苗移栽的研究發(fā)現(xiàn)，有根苗和無根苗的移栽成活率均達(dá)到80%以上，但有根苗移栽后緩苗期要比無根苗縮短10～15 d左右[10]。用清水洗去根部粘附的培養(yǎng)基。為防止幼苗移栽入基質(zhì)后受微生物影響，可用1%亞硫酸鈉、0.01%高錳酸鉀或0.1%多菌靈對幼苗進(jìn)行滅菌消毒，浸泡時間一般在3～10 min[3,6]。

2 移栽環(huán)境

2.1 基質(zhì)

蕨類植物組培苗移植基質(zhì)使用廣泛，如泥炭土、珍珠巖、蛭石、河沙、腐殖土和碎椰殼等。而目前較為常用的基質(zhì)為泥炭土+珍珠巖和泥炭土+珍珠巖+蛭石，前者體積比在1∶1～0.25，后者體積比多為1∶1∶1或2∶1∶1。

泥炭土是水生植物死亡后，在空氣不足和過度濕潤的條件下，通過厭氧微生物緩慢分解逐漸形成的產(chǎn)物。具有質(zhì)地輕、有機(jī)質(zhì)豐富、保水保肥能力強、有害孢子和蟲卵少等特點。土壤pH值偏酸性。

珍珠巖質(zhì)地輕、無菌、不腐，內(nèi)部呈蜂窩狀結(jié)構(gòu)，吸水能力能達(dá)到自身重量的2～3倍。珍珠巖由于透水透氣性良好，可以有效降低土壤粘性和密度。

蛭石是一種天然、無毒的礦物質(zhì)，屬于硅酸鹽，呈弱堿性，具有透氣性好、吸水性強、溫度變化小等特點。此外，因其還有離子交換的能力，對土壤營養(yǎng)起到一定調(diào)節(jié)作用。

有研究利用泥炭土、珍珠巖、蛭石和河沙作為蕨類植物組培苗移栽基質(zhì)，結(jié)果表明，移栽入混合基質(zhì)的幼苗成活率及其后期長勢要明顯優(yōu)于單一基質(zhì)中的幼苗[10,12]。原因是珍珠巖、蛭石和河沙本身不帶養(yǎng)分，作為單一基質(zhì)不能滿足幼苗生長所需營養(yǎng)，而在混合基質(zhì)中，泥炭土提供養(yǎng)分，珍珠巖、蛭石和河沙起到調(diào)節(jié)土壤保水透氣性和土壤pH值的作用。

移栽前可用多菌靈或甲醛水溶液對土壤進(jìn)行滅菌消毒。

2.2 溫度

研究者在對不同環(huán)境因子下巢蕨移栽成活率影響的研究中發(fā)現(xiàn)，遮蔭度、溫度和濕度均能顯著影響組培苗的移栽成活率，但其中溫度影響最大，其次為遮蔭度和濕度[11]。

由于絕大多數(shù)蕨類屬于喜溫植物，過低溫度會抑制幼苗生長，但過高的溫度又容易引起植株萎蔫。因此溫度應(yīng)控制在白天20～25℃，夜晚15℃左右。

2.3 光照

由于絕大部分的蕨類植物是林下草本層和附生植物的重要組成部分，屬耐蔭性植物，其組培苗移栽后要進(jìn)行遮蔭處理，決不可被陽光直射。移栽后7 d內(nèi)在自然光條件下用遮陽網(wǎng)遮光70%～80%。7 d后可逐步提高光照強度和時間，但中午前后仍需遮光，照射光僅為散射光，如果光照調(diào)節(jié)不當(dāng)，易引起幼苗死亡或徒長。根據(jù)不同物種幼苗的生根及葉片生長情況，半個月至一個月后即可去掉遮陽網(wǎng)進(jìn)行正常養(yǎng)護(hù)。

2.4 濕度

絕大多數(shù)蕨類喜陰濕環(huán)境，此外由于其幼苗葉表保護(hù)組織(如角質(zhì)層等)尚未發(fā)育完全，根莖組織不發(fā)達(dá)，植株吸水能力差而易失水[13]，因此移栽時需保持較高的空氣濕度。移栽后覆蓋塑料薄膜或透氣罩，除保濕外，還可起到防風(fēng)保溫的作用。移栽后7 d內(nèi)空氣濕度應(yīng)保持在85%～90%[2,3,6,8,10,14,15]。保濕使用噴霧器最好，不宜直接用澆水壺澆灌，之后空氣濕度可適當(dāng)降低。土壤基質(zhì)的相對含水率一般在35%～60%即可[14]，若濕度長時間過高，土壤介質(zhì)會通氣不足，影響幼苗根部發(fā)育，且容易滋生苔蘚和菌類。夏季，土壤基質(zhì)基本上是一次澆透水后，間隔7～8 d才第二次澆水。

移栽后10 d左右逐步揭開薄膜或打開透氣孔進(jìn)行通風(fēng)，直至幼苗適應(yīng)自然環(huán)境后取下薄膜或透氣罩。夏季高溫時節(jié)，要特別注意增加通風(fēng)強度和通風(fēng)時間，但不能讓風(fēng)直接吹到幼苗上，以防幼苗因蒸騰作用過強而萎蔫。

2.5 施肥

移栽7～10 d后幼苗基本成活，可施加第一次肥料。在澆水添加低濃度MS或者普肥，也可用0.1%的尿素或者磷酸二氫鉀噴灑葉面[6]。對于一些生長于石灰?guī)r地區(qū)的喜鈣蕨類植物，還需適當(dāng)添加一些鈣肥。以后每間隔一周進(jìn)行營養(yǎng)成分補充，肥料濃度逐步增加。

3 討論

相比于種子植物，關(guān)于蕨類植物組培苗煉苗及移栽技術(shù)的研究甚少，僅有少部分物種進(jìn)行過相關(guān)影響因子研究，且不全面、深入。雖然上述煉苗及移栽技術(shù)可應(yīng)用于多數(shù)蕨類植物，但對于一些生長于特殊生境中的物種，其應(yīng)用性尚不明確。有研究者在對一種生長在德克薩斯州西部耐強光照、耐旱的蕨類植物NotholaenaSun-Tuff進(jìn)行研究時發(fā)現(xiàn)，其組培苗移栽在高濕的環(huán)境中時，幼苗易腐爛，幼苗成活率低，反之卻高[16]?？梢娨恍┚哂歇毺厣盍?xí)性的蕨類植物其組培苗煉苗及移栽技術(shù)還有待進(jìn)一步研究。

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Transplanting Techniques on Tissue Culture Seedling of Ferns

GU Xu, WANG Dexin, WANG Yizhi

(Yunnan Academy of Biodiversity, Southwest Forestry University, Kunming 650224, China)

China has abundant resources of ferns, which have high utilization and economic development in the field of medicinal, edible and ornamental. As a key link, the transplanting techniques directly affect the survival rate of seedlings, and decide the success of field cultivation. Based on the research works, this paper summarized the influence factors of the cultivation and transplanting for fern plantlets from matrix, temperature, illumination, humidity and fertilizer etc.

Fern; tissue culture seedling; hardening-seedling; transplanting environment

10.3969/j.issn.1671-3168.2017.01.022

2016-10-26.

云南省環(huán)保專項(215025).

古 旭(1988-)，女，云南昆明人，碩士，助理實驗師.主要從事生物多樣性保護(hù)研究.Email:675129144@qq.com

王逸之(1984-)，男，博士，助理研究員.主要從事竹林培育、生物多樣性保護(hù)研究.Email:scauwyz@163.com

S682.35；F723.133；S723.3

A

1671-3168(2017)01-0098-03