李光梅　冼志霞　鄧舒靜

【摘要】 目的 研究高危型人乳頭瘤病毒（HR-HPV）檢測(cè)與液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)（TCT）在宮頸癌前病變中的臨床運(yùn)用效果， 對(duì)比分析其敏感性及特異性。方法 350例宮頸癌病理篩查陽(yáng)性者分別采用TCT與HR-HPV檢測(cè)進(jìn)行篩查， 對(duì)篩查陽(yáng)性患者6個(gè)月1次采用TCT與HR-HPV聯(lián)合檢測(cè)進(jìn)行跟蹤測(cè)定， 持續(xù)3年， 分析研究HPV-脫氧核糖核酸（DNA）載量與疾病進(jìn)程的關(guān)聯(lián)性， 并與病理診斷結(jié)果比較， 討論兩者對(duì)疾病檢測(cè)的敏感性及特異性。結(jié)果 350例篩查陽(yáng)性患者中， 其中HR-HPV篩查陽(yáng)性328例， 陽(yáng)性率93.7%（328/350）， TCT篩查陽(yáng)性234例， 陽(yáng)性率66.9%（234/350）， 比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。328例HR-HPV陽(yáng)性患者中， 與病理檢查結(jié)果宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）Ⅱ級(jí)以上者相符合為126例， 敏感性為89.6%、特異性為38.4%；234例TCT篩查陽(yáng)性患者中， 與病理結(jié)果符合者190例， 敏感性為68.6%、特異性為81.2%， 兩項(xiàng)檢測(cè)特異性、敏感性比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。經(jīng)過(guò)追蹤檢測(cè)發(fā)現(xiàn)， 宮頸病變CINⅠ級(jí)或以上病例病灶復(fù)發(fā)/殘留與病毒載量有一定關(guān)聯(lián)性， 宮頸病變CIN分級(jí)越高， 與病毒載量相關(guān)性越高（P<0.05）。結(jié)論 TCT技術(shù)和HR-HPV檢測(cè)方法各有優(yōu)勢(shì)， HR-HPV聯(lián)合TCT技術(shù)可以有效提高宮頸癌檢出效率， 能夠彌補(bǔ)單一檢測(cè)方法的不足；HR-HPV檢測(cè)可以作為病程監(jiān)控的敏感指標(biāo)；將TCT與HR-HPV聯(lián)合檢查， 值得推薦。

【關(guān)鍵詞】 宮頸癌；高危型人乳頭瘤病毒；液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.02.014

Research of clinical application of thinprep cytologic test combined with high-risk human papilloma virus detection in cervical cancer screening LI Guang-mei， XIAN Zhi-xia， DENG Shu-jing. Guangdong Wuchuan City Maternal and Child Health Hospital， Wuchuan 524500， China

【Abstract】 Objective To research clinical application effect by high-risk human papilloma virus （HR-HPV） detection and thinprep cytologic test （TCT） in precancerous lesions of uterine cervix， and to analyze their sensibility and specificity. Methods A total of 350 patients with positive pathological screening of cervical cancer all received TCT and HR-HPV detection for screening. Combination of TCT and HR-HPV detection as applied once per 6 months for monitoring detection in patients for 3 years. Analysis was made on correlation between HPV-desoxyribonucleic acid （DNA） capacity and disease progress. Comparing with pathological diagnosis outcomes， their sensibility and specificity in disease detection were discussed. Results Among the 350 patients with positive screening outcomes， there were 328 positive cases in positive HR-HPV screening， with positive rate as 93.7% （328/350）， and 234 positive cases in TCT screening， with positive rate as 66.9% （324/350）. Their difference had statistical significance （P<0.05）. Among 328 positive cases in positive HR-HPV screening， there were 126 corresponding cases with pathological detection over Cervical intraepithelial neoplasias （CIN） Ⅱ grade， with sensibility as 89.6% and specificity as 38.4%. Among 234 positive cases in TCT screening， there were 190 corresponding cases with pathological detection， with sensibility as 68.6% and specificity as 81.2%. The difference of sensibility and specificity had statistical significance between the two detection measures （P<0.05）. Monitoring detection showed certain correlation between lesions recurrencel residual and viral capacity in cases with over cervical lesion CIN Ⅰ grade， and higher cervical lesion CIN grade led to close correlation with viral capacity （P<0.05）. Conclusion Both TCT and HR-HPV detection contain their own advantages. Combination of HR-HPV and TCT can effectively improve detection efficiency of cervical cancer and cover shortages of single detection method. HR-HPV detection can be taken as the sensitive index in disease course monitoring. Combined detection by TCT and HR-HPV is worth recommending.

【Key words】 Cervical cancer； High-risk human papilloma virus； Thinprep cytologic test

宮頸癌為僅次于乳腺癌的女性第二位高發(fā)惡性腫瘤， 近年來(lái)， 該病發(fā)展呈現(xiàn)年輕化趨勢(shì)， 分子生物學(xué)的研究結(jié)論顯示：宮頸癌的發(fā)生跟HR-HPV的感染密切相關(guān)[1-4]。研究表明：HPV感染， 尤其HR-HPV感染是導(dǎo)致宮頸癌及其癌前病變的重要因素[1， 2]；TCT是采用TCT系統(tǒng)檢測(cè)宮頸脫落細(xì)胞并進(jìn)行細(xì)胞學(xué)分類診斷， 它是目前公認(rèn)的較為先進(jìn)的一種宮頸癌細(xì)胞學(xué)檢查技術(shù)， 與傳統(tǒng)的宮頸刮片巴氏涂片檢查相比明顯提高了標(biāo)本的滿意度及宮頸異常細(xì)胞檢出率， 成為宮頸癌篩查的主要手段。本課題以本市區(qū)年齡20～60歲有性生活史的社區(qū)女性為研究對(duì)象， 收集本社區(qū)女性宮頸癌病理篩查陽(yáng)性患者， 對(duì)入選對(duì)象同時(shí)行TCT及HR-HPV檢測(cè)， 對(duì)陽(yáng)性患者持續(xù)跟蹤3年， 探討HPV感染與宮頸癌疾病的關(guān)聯(lián)性， 旨在評(píng)價(jià)TCT聯(lián)合人乳頭瘤病毒檢測(cè)對(duì)社區(qū)女性宮頸癌篩查的有效性。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選擇本地區(qū)2011年9月～2013年9月宮頸癌病理篩查陽(yáng)性者350例作為研究對(duì)象， 年齡20～60歲， 平均年齡（33.0±9.5）歲， 入選標(biāo)準(zhǔn)：已婚或有性生活史、表現(xiàn)健康、無(wú)婦科重大疾病或?qū)m頸手術(shù)史， 產(chǎn)次0～2次， 平均產(chǎn)次1.5次， 妊娠史0～3次， 平均妊娠史1.8次；排除標(biāo)準(zhǔn)：排除已經(jīng)診斷為宮頸癌或因各種原因切除子宮或?qū)m頸的患者。本研究征得患者知情同意。

1. 2 方法 受檢者3～5 d內(nèi)無(wú)陰道沖洗史或陰道內(nèi)用藥， 受檢前24 h禁性生活， 由婦科醫(yī)生留取樣本分別置于液基細(xì)胞專用保存瓶/HPV專用病毒保存管中送檢， 所有檢測(cè)項(xiàng)目完成檢測(cè)時(shí)間不得>72 h；采用杭州博日全自動(dòng)適時(shí)熒光定量DNA擴(kuò)增技術(shù)， 對(duì)篩查樣本進(jìn)行HR-HPV檢測(cè)， 試劑采用潮州凱普生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品， 其中HPV基因型包括HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68共13種；運(yùn)用全自動(dòng)液基細(xì)胞檢測(cè)儀， 對(duì)病變細(xì)胞進(jìn)行固定、分離、洗滌、染色、固片、鏡檢等流程， 實(shí)現(xiàn)對(duì)靶細(xì)胞的最高檢出效果， 儀器為珠海某生物公司提供， 試劑耗材為公司配套產(chǎn)品， 操作及結(jié)果判讀見說(shuō)明書。對(duì)TCT篩查陽(yáng)性、HR-HPV篩查陽(yáng)性或TCT與HPV共同檢測(cè)陽(yáng)性者由專人負(fù)責(zé)跟進(jìn)， 提醒患者定期復(fù)查， 6個(gè)月1次， 持續(xù)跟進(jìn)3年。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)；病理分型與病毒載量的關(guān)系采用線性關(guān)系分析。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

350例篩查陽(yáng)性患者中， 其中HR-HPV篩查陽(yáng)性328例，

陽(yáng)性率93.7%（328/350）， TCT篩查陽(yáng)性234例， 陽(yáng)性率66.9% （234/350）， 比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。328例HR-HPV陽(yáng)性患者中， 與病理檢查結(jié)果CIN Ⅱ級(jí)以上者相符合為126例， 敏感性為89.6%、特異性為38.4%；234例TCT篩查陽(yáng)性患者中， 與病理結(jié)果符合者190例， 敏感性為68.6%、特異性為81.2%， 兩項(xiàng)檢測(cè)特異性、敏感性比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。經(jīng)過(guò)追蹤檢測(cè)發(fā)現(xiàn)， 宮頸病變CINⅠ級(jí)

或以上病例， 病灶復(fù)發(fā)/殘留與病毒載量有一定關(guān)聯(lián)性， 宮頸病變CIN分級(jí)越高， 與病毒載量相關(guān)性越高（P<0.05）。見表1。

3 討論

據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）報(bào)道， 全世界每年發(fā)生的宮頸癌患者大約為50萬(wàn)左右， 是僅次于乳腺癌的第二大女性殺手， 而發(fā)生在我國(guó)的宮頸癌患者每年則有約15萬(wàn)人之眾， 接近全球發(fā)病人數(shù)的1/3.， 高居我國(guó)女性婦科惡性腫瘤的第一位[3]， 大量流行病學(xué)及分子生物學(xué)資料研究顯示：HPV感染與宮頸癌及其宮頸癌前病變關(guān)系密切[4-6]， 由于大部分HPV感染者多無(wú)臨床癥狀或臨床癥狀不明顯而往往被患者所忽視， 進(jìn)而導(dǎo)致病毒在患者體內(nèi)潛伏從而引發(fā)宮頸細(xì)胞進(jìn)行性病變， 導(dǎo)致嚴(yán)重問(wèn)題， 所以， 宮頸癌被檢出者往往處于臨床中晚期而致患者失去了最佳治療時(shí)間， 影響治療效果進(jìn)而直接影響患者生存時(shí)間， 因此， 宮頸癌的早期診斷顯得尤為重要[6， 7]；本研究采用TCT對(duì)宮頸脫落細(xì)胞進(jìn)行篩查， 特異性高達(dá)81.2%， 與相關(guān)研究的結(jié)論相近[4， 8]， 值得推廣。

研究發(fā)現(xiàn)：HPV感染后， 往往伴隨宮頸上皮細(xì)胞內(nèi)瘤樣病變的存在[7-10]， 孫笑非等[5]研究認(rèn)為：持續(xù)攜帶HPV強(qiáng)烈提示感染者處于繼發(fā)癌前病變的高危環(huán)境中；許曉紅等[6]研究提示：宮頸癌中HPV感染率（84.6%）超過(guò)80%， 明顯高于宮頸糜爛感染率（52.1%）， 表明HPV感染是導(dǎo)致宮頸癌的主要原因， 且HPV感染與宮頸糜爛、與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展密切關(guān)聯(lián)；陳艷等[11]研究顯示：HPV的持續(xù)陽(yáng)性是CIN發(fā)生發(fā)展的重要原因， 宮頸病變及宮頸癌的病灶殘留與復(fù)發(fā)與HPV病毒載量明顯關(guān)聯(lián)， 與本研究結(jié)論相近， 提示監(jiān)控HPV病毒復(fù)制及載量檢測(cè)， 可以作為宮頸疾病監(jiān)控的有效手段。

本研究顯示， HR-HPV檢測(cè)與TCT篩查與病理檢查結(jié)果對(duì)比發(fā)現(xiàn)， HR-HPV具有較高敏感性但特異性稍差， 一方面說(shuō)明宮頸疾病改變是一種時(shí)間漫長(zhǎng)的漸進(jìn)性過(guò)程， 同時(shí)也為臨床防范宮頸疾病惡變提供了時(shí)間窗口；TCT篩查雖然有較高的特異性， 而敏感性稍差且需要有高年資專業(yè)醫(yī)生操作及診斷， 稍顯不足， 但TCT作為一種非創(chuàng)傷性檢測(cè)手段， 仍不失為一種可靠而方便的檢查方法。

總之， 將TCT與HR-HPV聯(lián)合檢查， 既滿足了臨床早發(fā)現(xiàn)早干預(yù)的需求， 又能借助對(duì)HPV病毒載量的檢測(cè)起到對(duì)疾病轉(zhuǎn)歸情況的實(shí)時(shí)監(jiān)控， 不失為一種特異且高效的檢測(cè)手段， 值得推薦。

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[收稿日期：2017-01-10]