劉偉，農(nóng)翠茴，馬麗輝，

（1.三亞市婦幼保健院婦產(chǎn)科，海南 三亞 572000；2.汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院，廣東 汕頭 515000；3.三亞市婦幼保健院檢驗(yàn)科，海南 三亞 572000；4.三亞市人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，海南 三亞 572000）

封閉抗體和抗心磷脂抗體與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的相關(guān)性研究

劉偉1，2，農(nóng)翠茴3，馬麗輝2，4，

（1.三亞市婦幼保健院婦產(chǎn)科，海南 三亞 572000；2.汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院，廣東 汕頭 515000；3.三亞市婦幼保健院檢驗(yàn)科，海南 三亞 572000；4.三亞市人民醫(yī)院風(fēng)濕免疫科，海南 三亞 572000）

目的 探討封閉抗體和抗心磷脂抗體與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的相關(guān)性，尋找復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的病因。方法選取2014年6月至2016年6月三亞市婦幼保健院收治的120例有復(fù)發(fā)性流產(chǎn)史婦女為觀察組，120例健康經(jīng)產(chǎn)婦為對(duì)照組。采用ELISA法檢測兩組受檢者的封閉抗體和抗心磷脂抗體，采用χ2檢驗(yàn)比較兩組受檢者中抗體的表達(dá)率；采用診斷試驗(yàn)評(píng)價(jià)的靈敏度、特異度和受試者工作曲線(ROC)方法，定量反映兩種抗體表達(dá)對(duì)育齡期婦女復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的預(yù)測情況。結(jié)果觀察組婦女的血清封閉抗體陰性率為85.8%，明顯高于對(duì)照組的30.0%，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；觀察組婦女的血清抗心磷脂抗體陽性率為19.2%，高于對(duì)照組的4.2%，差異亦有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；觀察組的血清封閉抗體陰性+抗心磷脂抗體陽性為11例，占9.17%，高于對(duì)照組的0.83%，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；經(jīng)診斷試驗(yàn)評(píng)價(jià)，血清封閉抗體陰性、抗心磷脂抗體陽性或兩者聯(lián)合對(duì)育齡期婦女復(fù)發(fā)性流產(chǎn)預(yù)測的靈敏度(85.8%、19.2%、9.2%)、特異度(70.0%、95.8%、99.2%)和ROC曲線下面積(0.779、0.575、0.542)有明顯差異。結(jié)論育齡期婦女的血清封閉抗體缺失或抗心磷脂抗體增高與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)密切相關(guān)，尤其是前者。在臨床中應(yīng)重視免疫抗體的檢測及治療，減輕育齡期婦女因反復(fù)流產(chǎn)帶來的心理、身體傷害及社會(huì)醫(yī)療負(fù)擔(dān)。

封閉抗體；抗心磷脂抗體；復(fù)發(fā)性流產(chǎn)

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)(recurrent spontaneous abortion，RSA)是指與同一性伴侶連續(xù)發(fā)生3次或3次以上的自然流產(chǎn)，即孕28周前自行終止妊娠，胎兒體質(zhì)量＜1 kg。近年來育齡期婦女合并RSA的發(fā)生率呈現(xiàn)逐年增高的趨勢，研究發(fā)現(xiàn)免疫紊亂是導(dǎo)致RSA的重要原因，約占全部RSA的50%以上[1]。免疫紊亂表現(xiàn)為育齡期婦女的血清自身免疫抗體抗心磷脂抗體(ACA)陽性率或自身免疫抑制抗體封閉抗體(BA)陰性率增高。本研究通過檢測RSA婦女與健康經(jīng)產(chǎn)婦的血清封閉抗體和抗心磷脂抗體，探討兩種抗體與RSA的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年6月至2016年6月三亞市婦幼保健院收治的120例RSA育齡期婦女為觀察組，年齡19～43歲，平均29.4歲，均進(jìn)行常規(guī)病因檢查，排除因夫妻雙方染色體異常或母兒血型不合因素發(fā)生的自然流產(chǎn)。選取同期來我院體檢的120例健康經(jīng)產(chǎn)婦作為對(duì)照組，平均年齡29.9歲(范圍21～42歲)，均無不孕不育史以及反復(fù)流產(chǎn)病史且已經(jīng)生育一個(gè)正常子女。觀察組的文化程度大學(xué)46例，高中52例，初中22例；對(duì)照組大學(xué)42例，高中49例，初中29例。兩組研究對(duì)象的年齡、學(xué)歷等一般資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 研究方法

1.2.1 標(biāo)本采集 采集住院患者與體檢經(jīng)產(chǎn)婦清晨靜脈血3 mL，離心析出血清。樣本收集后從凝血中分離血清，按照NCCLS文件H18-A2建議進(jìn)行樣本保存。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑 測定儀器用BioTek ELX800酶標(biāo)儀，輔助儀器用精宏三用恒溫水槽DK型、TECAN Freedom EVOlyzer全自動(dòng)酶免分析一體機(jī)。封閉抗體檢測試劑盒-ELISA法試劑由美國萊姆德公司生產(chǎn)，購自北京索奧生物技術(shù)有限公司；抗心磷脂抗體檢測試劑盒為INOVADiagnostics公司產(chǎn)品。

1.2.3 封閉抗體及抗心磷脂抗體檢測 檢測過程嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作和結(jié)果的判讀。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0版統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。為進(jìn)一步探討兩種抗體表達(dá)與育齡期婦女合并RSA的相關(guān)性，采用診斷試驗(yàn)的靈敏度、特異度和受試者工作曲線(ROC)法計(jì)算各個(gè)抗體表達(dá)及聯(lián)合表達(dá)預(yù)測RSA的曲線下面積(Az)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組血清抗體的檢測情況 觀察組患者的封閉抗體陰性率為85.8%，明顯高于對(duì)照組的30.0%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=76.741，P＜0.001)。觀察組的抗心磷脂抗體陽性率為19.2%，亦顯著高于對(duì)照組的4.2%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=13.100，P＜0.001)。觀察組的血清封閉抗體陰性+抗心磷脂抗體陽性為11例，占9.17%，高于對(duì)照組的0.83%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=8.772，P=0.003)，見表1。

表1 兩組血清封閉抗體和抗心磷脂抗體陽性率的比較(例)

2.2 兩種血清抗體對(duì)RSA預(yù)測的靈敏度、特異度和ROC曲線下面積比較 封閉抗體陰性預(yù)測RSA的靈敏度、特異度和ROC曲線下面積Az分別為85.8%、70.0%和0.779(P＜0.001)；抗心磷脂抗體陽性預(yù)測RSA的靈敏度、特異度和ROC曲線下面積Az分別為19.2%、95.8%和0.575(P=0.045)；封閉抗體陰性+抗心磷脂抗體陽性預(yù)測RSA的靈敏度、特異度和ROC曲線下面積Az分別為9.2%、99.2%和0.542(P=0.265)，表明封閉抗體陰性育齡期婦女預(yù)測RSA的靈敏度較高，而抗心磷脂抗體陽性和兩者聯(lián)合預(yù)測RSA的特異度更高，見圖1。

圖1 兩種血清抗體及組合對(duì)RSA預(yù)測的ROC曲線

3 討 論

研究表明，育齡期婦女合并RSA的原因除染色體、解剖、內(nèi)分泌、感染等不良因素外，機(jī)體的免疫紊亂是主要原因之一[2]?？剐牧字贵w是以血小板和內(nèi)皮細(xì)胞膜上帶負(fù)電荷的心磷脂作為靶抗原的一種自身抗體。研究發(fā)現(xiàn)，血清抗心磷脂抗體陽性育齡期婦女妊娠容易合并胎盤血管內(nèi)皮損傷、血栓形成以及胎盤梗阻的病理改變[3-5]。封閉抗體是人類白細(xì)胞抗原(HLA)、滋養(yǎng)層及淋巴細(xì)胞交叉反應(yīng)抗原(TLX)等刺激母體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的一類IgG型抗體[6-7]，它可以與來自父系的抗原相結(jié)合，阻止母體Th細(xì)胞識(shí)別胎兒抗原，誘發(fā)對(duì)胚胎的攻擊[8-11]。

本文結(jié)果顯示，觀察組的血清封閉抗體陰性率高達(dá)85.8%，而健康經(jīng)產(chǎn)婦的血清封閉抗體陰性率僅為30.0%，說明RSA患者中血清封閉抗體顯著缺失；同時(shí)，觀察組的血清抗心磷脂抗體陽性率為19.2%，亦較對(duì)照組的4.2%有明顯升高。這一結(jié)果與盧巧云等[12]報(bào)道RSA婦女血清的封閉抗體陰性率89.0%與抗心磷脂抗體陽性率19.0%基本接近，與該作者報(bào)道的RSA婦女血清封閉抗體陰性率和抗心磷脂抗體陽性率均高于正常分娩者的結(jié)論亦完全一致。李相新等[13]于2015年報(bào)道了在RSA患者、繼發(fā)性不孕患者和正常生育產(chǎn)婦3種不同育齡婦女人群中血清封閉抗體和抗心磷脂抗體的檢測結(jié)果，顯示RSA組的血清封閉抗體陰性率為88.00%，均高于其他兩組，且RSA組的血清總抗心磷脂抗體陽性率為17.33%，介于繼發(fā)性不孕組和正常生育產(chǎn)婦組之間；該研究認(rèn)為育齡期婦女的血清封閉抗體和抗心磷脂抗體與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)密切相關(guān)。通過現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道，我們可以明確進(jìn)行上述兩種自身抗體的檢測并及時(shí)采用合適的治療方法是防治復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的有效措施。

本研究為進(jìn)一步了解兩種自身抗體檢測的預(yù)測價(jià)值，采用診斷試驗(yàn)評(píng)價(jià)中的靈敏度、特異度和受試者工作曲線(ROC)法來計(jì)算兩種抗體表達(dá)及聯(lián)合表達(dá)對(duì)復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的預(yù)測能力。經(jīng)過計(jì)算，封閉抗體陰性預(yù)測RSA的靈敏度較高但特異度低；而抗心磷脂抗體陽性以及兩者聯(lián)合預(yù)測RSA的特異度更高，達(dá)95%以上；ROC曲線下面積則提示育齡期婦女的血清封閉抗體陰性的綜合檢測能力略高。針對(duì)該結(jié)果參考文獻(xiàn)報(bào)道，鮑時(shí)華等[14]提出應(yīng)針對(duì)抗心磷脂抗體進(jìn)行多次檢測，必要時(shí)應(yīng)進(jìn)行5次以上的測定，否則容易出現(xiàn)漏診；而本研究未對(duì)抗心磷脂抗體進(jìn)行多次檢測，這可能也是抗心磷脂抗體陽性以及兩種抗體聯(lián)合預(yù)測RSA的靈敏度偏低的原因。

綜上所述，育齡期婦女的血清封閉抗體缺失和抗心磷脂抗體陽性與RSA關(guān)系密切，尤其是前者，需引起臨床上的廣泛重視，并積極進(jìn)行檢測，做到提前預(yù)防和治療，提高育齡期婦女的妊娠率。

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Relationship between blocking antibodies and anti-cardiolipin antibodies in recurrent spontaneous abortion.

LIU Wei1,2,NONG Cui-hui3,MA Li-hui2,4.1.Department of Gynaecology and Obstetrics,Maternal and Child Health Care Hospital of Sanya,Sanya 572000,Hainan,CHINA;2.Shantou University Medical College,Shantou 515000,Guangdong, CHINA;3.Department of Clinical Laboratory,Maternal and Child Health Care Hospital of Sanya,Sanya 572000,Hainan, CHINA;4.Department of Rheumatology,Sanya Municipal People’s Hospital,Sanya 572000,Hainan,CHINA

ObjectiveTo investigate the relationship between blocking antibodies and anti-cardiolipin antibody in recurrent spontaneous abortion,and find the causes of recurrent spontaneous abortion.MethodsFrom June 2014 to June 2016,120 women with recurrent spontaneous abortion history were selected as the study group,and 120 healthy non-pregnant parous women were recruited as the control group,who were given blocking antibody detection and anti-cardiolipin antibody detection by ELISA method.The negative rate of blocking antibodies and positive rate of anti-cardiolipin antibody were compared by the chi-square test,and sensitivity,specificity and receiver operator characteristic curve(ROC)were used to calculate and compare the prediction ability of the two antibodies for recurrent spontaneous abortion.ResultsBlocking antibody negative rate of the study group were significantly higher than that in the control group(85.8%vs 30.0%,P＜0.001).Anti-cardiolipin antibody positive rate of the study group were significantly higher than that in the control group(19.2%vs 4.2%,P＜0.001).The rate of blocking antibody negative and anticardiolipin antibody positive in the study group was 9.17%(11 cases),which was significantly higher than 0.83%in the control group(P=0.003).According to diagnostic test evaluating,the sensitivity(85.8%vs 19.2%vs 9.2%),specificity(70.0%vs 95.8%vs 99.2%)and area under the curve(0.779 vs 0.575 vs 0.542)showed significant difference among blocking anti-bodies negative,anti-cardiolipin antibody positive,and the combination of the two.ConclusionBlocking antibody negative and anticardiolipin antibody positive in women are closely related to the recurrent spontaneous abortion,especially the former.We should strengthen the detection and treatment in clinic,so as to reduce the psychological and physical damage,and social medical burden of women of childbearing age due to repeated abortion.

Blocking antibodies;Anticardiolipin antibodies;Recurrent spontaneous abortion

R714.21

A

1003-6350（2017）04-0597-03

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.04.026

2016-09-20)

馬麗輝。E-mail：marymlh@sina.com