楊曉秋+劉國慶+寇源鋒

重慶泰濠制藥有限公司

【摘 要】用氣相色譜對泊馬度胺原料藥中N，N-二甲基甲酰胺、乙酸、四氫呋喃、甲醇、乙醇、1，4-二氧六環(huán)殘留溶劑分析方法進(jìn)行開發(fā)，采用氣相色譜儀氫火焰離子化檢測器、色譜柱：DB-WAX（30-m×0.32-mm），膜厚0.5μm 按內(nèi)標(biāo)法檢測N，N-二甲基甲酰胺等殘留溶劑的含量。結(jié)果：6個溶劑的分離度都大于2.0，線性范圍為6個殘留溶劑的定量限至ICH限度值120% ，r最小為0.99912，回收率為95.9～102.9%，檢出限最大40.1ppm，精密度RSD最大4.6%。結(jié)論：該方法準(zhǔn)確、靈敏、快速、精密度高，適用于泊馬度胺6個殘留溶劑的檢測，同時符合ICH要求。

【關(guān)鍵詞】泊馬度胺；氣相色譜；N，N-二甲基甲酰胺；乙酸

泊馬度胺由美國賽爾基因（Celgens）公司研發(fā)一種新型免疫調(diào)節(jié)劑，2013年2月通過FDA批準(zhǔn)上市，用于治療復(fù)發(fā)性及難治性多發(fā)性股市瘤。

在合成工藝中用到溶劑N，N-二甲基甲酰胺、乙酸、四氫呋喃、甲醇、乙醇、1，4-二氧六環(huán)，因此需要按照ICH指南，控制產(chǎn)品中使用的殘留溶劑限度。鑒于該產(chǎn)品理化性質(zhì)原因，在水和醇類等很多溶劑的溶解性差，在N，N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜有一定的溶解性，我們采用二甲亞砜做溶劑，同時N，N-二甲基甲酰胺高沸點溶劑，乙酸的靈敏度低，如果采用頂空進(jìn)樣，檢出限不能滿足要求，因此我們采用自動進(jìn)樣器液體進(jìn)樣方式進(jìn)樣，提高了靈敏度，同時加入內(nèi)標(biāo)正丙醇，保證了方法的準(zhǔn)確度和精密度。

1.儀器與試劑

表1 儀器

儀器名稱 型號 供應(yīng)商

電子天平 CP225D 賽多利斯

氣相色譜儀 Agilent 6890N 安捷倫

Agilent 7890A 安捷倫

色譜柱 DB-WAX（ 30-m×0.32-mm），膜厚0.5μm 安捷倫

表2 試劑

名稱 規(guī)格

四氫呋喃 AR

甲醇 AR

乙醇 AR

1，4-二氧六環(huán) AR

N，N-二甲基甲酰胺 HPLC

乙酸 AR

正丙醇 AR

二甲亞砜 HPLC

2.試驗過程與結(jié)果

2.1色譜條件

色譜柱： DB-WAX（ 30-m×0.32-mm），膜厚0.5μm

柱溫：

保持9min 30℃/min 保持3min 30℃/min 保持5min

40℃——→40℃——→70℃——→70℃——→150℃——→

60℃/min 保持6min

150℃——→220℃——→220℃

氣化室溫度：220℃ FID檢測器溫度：260℃

載氣：N2 ；載氣流速：1.0ml/min；進(jìn)樣量：1μl；分流比：20：1

2.2 溶液的配制

2.2.1 空白：二甲亞砜。

2.2.2 內(nèi)標(biāo)貯備溶液的配制：取正丙醇約0.5g，置100mL量瓶中，加二甲亞砜溶解并稀釋至刻度，搖勻。

2.2.3 對照貯備溶液的配制：取四氫呋喃約0.072g，甲醇約0.3g，乙醇約0.5g，1，4-二氧六環(huán)約0.038g，N，N-二甲基甲酰胺約0.088g，乙酸約0.5g，精密稱定，置同一100mL量瓶中，加二甲亞砜溶解并稀釋至刻度，搖勻。

對照溶液的配制：吸取0.5ml對照貯備溶液于5ml容量瓶中，加入0.5ml內(nèi)標(biāo)貯備溶液，用二甲亞砜稀釋至刻度搖勻；（四氫呋喃約為72μg/ml，甲醇約為300μg/ml，乙醇約為500μg/ml，1，4-二氧六環(huán)約為38μg/ml，N，N-二甲基甲酰胺約為88μg/ml，乙酸約為500μg/ml）供試品溶液的配制：取供試品約0.5g，精密稱定，置5ml容量瓶中，加入0.5ml內(nèi)標(biāo)貯備溶液，用二甲亞砜稀釋至刻度搖勻。

2.3系統(tǒng)適用性與專屬性試驗

將空白、對照溶液按測定方法，分別注入色譜儀，記錄色譜圖，空白對待測溶劑峰無干擾，從表3可見，通過系統(tǒng)適用性試驗，各溶劑峰分離度最小為6.14，表明該方法專屬性強，對照溶液分離度圖譜見圖1。

表3 對照溶液分離度

峰序號 溶劑名稱 保留時間（min） 相鄰溶劑間分離度

1 四氫呋喃 5.382 ——

2 甲醇 6.341 10.25

3 乙醇 7.622 11.80

4 正丙醇 11.059 32.72

5 1，4-二氧六環(huán) 11.668 6.14

6 N，N-二甲基甲酰胺 16.944 54.11

7 乙酸 18.875 25.57

2.4樣品檢測與重復(fù)性

重復(fù)稱取7份樣品，檢測殘留溶劑，測得乙醇為1051ppm，N，N-二甲基甲酰胺為182ppm，其他溶劑均未檢出，均符合ICH限度要求，測得RSD最大為4.60%，可見該方法精密度好 ，對樣品中的殘留溶劑有較好的檢測指示能力。

2.5 線性與范圍

根據(jù)有機揮發(fā)性殘留溶劑規(guī)定的定量限至限度值120%配制溶液，測得的線性相關(guān)系數(shù)r最小為0.99912，可見該檢測方法在規(guī)定的濃度范圍內(nèi)有較好的線性。

2.6檢出限

根據(jù)S/N=3±1時為檢測限，在供試品中四氫呋喃的檢測限為10.8ppm，甲醇的檢測限為19.3 ppm，乙醇的檢測限為20.0 ppm，1，4-二氧六環(huán)的檢測限為19.6 ppm，N，N-二甲基甲酰胺的檢測限為31.1 ppm，乙酸的檢測限為40.1ppm。

2.7 準(zhǔn)確度

通過在已知準(zhǔn)確濃度的樣品中加入各溶劑規(guī)定限值的80%、100%、120%濃度的溶劑，測得的回收率為95.9～102.9%，可見該方法準(zhǔn)確度好。

3. 討論

ICH 3C明確規(guī)定藥品用到的殘留溶劑必須質(zhì)量控制，該產(chǎn)品用到ICH II類和III類溶劑，本方法都對用到的殘留溶劑進(jìn)行了檢測，而且符合ICH限度要求，采用二甲亞砜為稀釋液解決了該產(chǎn)品溶解性不好的問題，從2.6項下可見，殘留溶劑檢出限最大為40.1ppm，方法靈敏度高，回收率均在90-110%之間，說明本方法準(zhǔn)確，在待測溶劑定量限至限度的120%范圍內(nèi)線性相關(guān)系數(shù)為最小0.99912，表明呈良好的線性，因此本方法適用于泊馬度胺原料藥的殘留溶劑檢測。

參考文獻(xiàn)：

[1]《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（2010年修訂）.

[2]《中國藥典》2015版9101藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原則.

[3]USP（1225）（Validation of Compendial Methods）.

[4]ICH出版的ICHQ2A、ICHQ2B.