張陳明，陶 勝

（安徽百友司法鑒定中心，安徽 合肥230031）

親子鑒定中STR基因座可疑多步突變2例

張陳明，陶 勝

（安徽百友司法鑒定中心，安徽 合肥230031）

法醫(yī)遺傳學；親子關(guān)系；短串聯(lián)重復序列；DNA突變分析；多步突變

1 案 例

兩位母親（胡某與楊某）均因為自己女兒（劉某與李某）辦理出生醫(yī)學證明所需，委托我中心進行親子關(guān)系鑒定。本中心采集四位被鑒定人指尖血備檢。用Chelex-100法提取基因組DNA，分別采用AGCU EX22、AGCU 21+1試劑盒（無錫中德美聯(lián)生物技術(shù)有限公司）對常染色體上39個STR基因座進行復合擴增，并用PowerPlex?16 HS試劑盒（美國Promega公司）對常染色體上15個STR基因座進行復合擴增，對上述檢驗結(jié)果進行復核驗證。同時，采用AGCU X12試劑盒（無錫中德美聯(lián)生物技術(shù)有限公司）對X染色體上12個STR基因座進行復合擴增。以上擴增均在9700型PCR儀（美國AB公司）上完成，擴增體系和擴增條件均依照試劑盒使用說明書，PCR產(chǎn)物在3130xl基因分析儀（美國Thermo Fisher Scientific公司）上進行毛細管電泳，用GeneMapper?ID v3.2軟件進行STR分型。

先用AGCU EX22試劑盒對常染色體21個STR基因座進行檢驗，發(fā)現(xiàn)兩對母女（胡某-劉某、楊某-李某）均在FGA基因座存在多步突變的可能。在第一對母女的FGA基因座，母親胡某的表型為“22”，女兒劉某的表型為“27”；在第二對母女的FGA基因座，母親楊某的表型為“21”，女兒李某的表型為“24”。采用PowerPlex?16 HS試劑盒進行復核驗證，發(fā)現(xiàn)FGA基因座的分型與上述結(jié)果一致，且這兩種STR試劑盒檢出的FGA基因座的等位基因峰（胡某女兒的“27”、楊某的“21”以及楊某女兒的“24”）在信號強度、峰高與峰面積等方面均比其他基因座的雜合子高。

采用AGCU 21+1試劑盒進一步檢測18個多態(tài)性STR基因座，第一對母女又出現(xiàn)一個STR基因座不符合遺傳規(guī)律：在D4S2408基因座，母親胡某的表型為“9”，女兒劉某的表型為“10”；在第二對母女中，母親楊某均能提供女兒李某必需的等位基因。對12個X-STR基因座進行分型檢驗，發(fā)現(xiàn)兩對母女在每個X-STR基因座均有一個相同的等位基因。按照SF/Z JD0105001—2016《親權(quán)鑒定技術(shù)規(guī)范》，在考慮第一對母女FGA和D4S2408基因座存在突變可能、第二對母女FGA基因座存在突變可能的前提下，累積親權(quán)指數(shù)分別為1.020 1×104、1.525 1×105。

2 討 論

在親子鑒定實踐中，STR基因座發(fā)生突變的現(xiàn)象是普遍存在的，且其發(fā)生突變的主要機制是復制滑動突變，只涉及一個基序的加或減稱為一步突變，約占STR基因座的90%，少數(shù)突變基因會涉及幾個基序，稱多步突變[1]。多步突變是通過逐步突變形成的，突變的步數(shù)越多，其發(fā)生的機會越小，最多突變步數(shù)為四步[2]。通常STR基因座核心序列重復次數(shù)越多，基因突變率越高，F(xiàn)GA基因座等位基因范圍在12.2～51.2，目前觀察到的等位基因數(shù)目多達80個，共有69種變異，在常見突變的基因座中，F(xiàn)GA基因座的突變率最高（0.29%）[3，4]。

在本文的兩個案例中，F(xiàn)GA基因座的可疑突變分別達到了五步及三步，這在日常鑒定實踐中極為罕見，甚至第一對母女還同時有另一個STR基因座（D4S2408）存在一步突變的可能。查閱文獻發(fā)現(xiàn)，親子鑒定中同時存在2個及以上STR基因座突變的現(xiàn)象已有報道[5-7]。

關(guān)于親子鑒定實踐中遇到這種突變的應對策略，筆者認為，若只有1個或2個STR基因座不符合孟德爾遺傳規(guī)律，為了避免因STR基因座發(fā)生突變而錯判，應增加突變率低、穩(wěn)定性好的STR基因座進行復核驗證，以便能更有效地排除近親關(guān)系。在二聯(lián)體親子鑒定中，遇到突變時若能使雙親的另一方也參與檢驗，更有利于結(jié)果的準確判斷。有文獻[8]報道，F(xiàn)GA基因座存在等位基因丟失導致假突變現(xiàn)象，因此，若發(fā)生突變的基因座檢測為純合子，最好換用其他廠家生產(chǎn)、引物序列不同的試劑盒或重新設(shè)計引物進行驗證，以防出現(xiàn)等位基因漏檢，即雜合子擴增丟失現(xiàn)象。如出現(xiàn)類似突變，也可以考慮應用高通量二代測序儀分型檢測判斷，有條件的還可進一步增加紅細胞血型、SNP等遺傳標記系統(tǒng)、性染色體STR分型、mtDNA測序、插入缺失（InDel）位點檢驗等技術(shù)，以確保鑒定意見的準確性與嚴謹性。

[1]侯一平.法醫(yī)物證司法鑒定實務(wù)[M].北京：法律出版社，2012：136-137.

[2]李海霞，馬曉燕，張晉湘，等.24個常用STR基因座的突變觀察與分析[J].中山大學學報（醫(yī)學科學版），2010，31（1）：13-16.

[3]李成濤，郭宏，趙珍敏，等.親權(quán)鑒定中常用STR基因座的基因組學和遺傳學分析[J].法醫(yī)學雜志，2008，24（3）：214-220.

[4]鄧志輝，吳國光，程良紅，等.13個STR基因座在親子鑒定案例中的基因突變觀察[J].中國法醫(yī)學雜志，2013，18（3）：150-153.

[5]常云峰，蔡繼峰，楊立，等.2個STR基因座變異親子鑒定1例[J].法醫(yī)學雜志，2011，27（3）：192.

[6]任賀，郭劍章，陳星，等.3個STR基因座變異親子鑒定1例[J].法醫(yī)學雜志，2010，26（6）：479-480.

[7]李海霞，孫宏鈺，張何，等.3個STR基因座同時突變的親子鑒定案1例[J].法醫(yī)學雜志，2009，25（4）：319-320.

[8]蔡金洪，湯美云，黃健.親子鑒定中常用10個STR基因座突變的觀察和分析[J].湖南中醫(yī)藥大學學報，2013，33（4）：8-9.

DF795.2

B

10.3969/j.issn.1004-5619.2017.04.035

1004-5619（2017）04-0451-02

2016-04-05）

（本文編輯：李 莉）

張陳明（1985—），男，碩士研究生，助理研究員，主要從事法醫(yī)物證學鑒定；E-mail：448531970@qq.com