白學(xué)莉，單文靜

（遼寧省大連市第五人民醫(yī)院，遼寧大連 116021）

白蘞的化學(xué)成分研究

白學(xué)莉，單文靜

（遼寧省大連市第五人民醫(yī)院，遼寧大連 116021）

目的研究中藥白蘞的化學(xué)成分。方法采用大孔吸附樹(shù)脂、硅膠柱色譜、聚酰胺色譜、葡聚糖凝膠（sephadex LH－20）柱色譜、十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODS）色譜等手段進(jìn)行分離純化，根據(jù)化合物的理化性質(zhì)和波譜學(xué)等方法鑒定中藥白蘞所含化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)。結(jié)果從白蘞植物的70%乙醇提取物中分離得到9個(gè)化合物，分別鑒定為尿苷(uridine，1)，腺苷(adenosine，2)，阿魏酸(ferulic acid，3)，原兒茶酸(protocatechuate，4)，沒(méi)食子酸(gallic acid，5)，大黃素－8－O－ －D－吡喃葡萄糖苷（emodin－8－O－ －D－glucopyranoside，6)，咖啡酸(caffeic acid，7)， －谷甾醇( －sitosterol，8)，7 －羥基－ －谷甾醇(7 －h(huán)ydroxy－ －sitosterol，9)。結(jié)論化合物4和化合物9是從蛇葡萄屬(Ampelopsis Michx.)植物中首次分離得到，化合物1～3和化合物7為首次從白蘞Ampelopsis japonica(Thunb.)Makino植物中分離得到。

白蘞；化學(xué)成分；成分分離；結(jié)構(gòu)鑒定

白蘞又名兔核、白根、昆侖、貓兒卵、鵝抱蛋、見(jiàn)腫消、穿山老鼠、白水罐、山地瓜、鐵老鼠、母雞帶仔、老鼠瓜薯、山栗子、人卦牛、白漿罐、野紅薯、地老鼠、野著薯、母雞抱蛋、五爪藤等，首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，引為下品。白蘞廣泛分布于我國(guó)東北、華北、華東、華中及西南地區(qū)[1－2]。2015年版《中國(guó)藥典（一部）》收載的白蘞為葡萄科白蘞Ampelopsis japonica(Thunb.)Makino的塊根，具有清熱解毒、消腫散結(jié)、生肌止痛之功效，用于癰疽發(fā)背、療瘡、瘰癘、水火燙傷。白蘞入藥歷史悠久，早在《名醫(yī)別錄》中就有記載，是歷代醫(yī)家治療疔癰的重要藥物?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，白蘞具有明確的抗腫瘤、抗菌、抗病毒等活性[3－7]，同時(shí)可外用治療瘡瘍[8]?，F(xiàn)代化學(xué)研究表明，白蘞主要含有酚酸、蒽醌、黃酮、皂苷類(lèi)物質(zhì)，同時(shí)還含有揮發(fā)油類(lèi)成分[9－11]。其中，酚酸類(lèi)成分沒(méi)食子酸和蒽醌類(lèi)成分大黃素被認(rèn)為是其主要的活性成分，用于白蘞的質(zhì)量評(píng)價(jià)[12－14]。為了進(jìn)一步分析白蘞的化學(xué)成分，為其開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)，本研究中對(duì)白蘞的70%乙醇提取物的化學(xué)成分進(jìn)行了分析，共分離純化出9個(gè)化合物，通過(guò)理化性質(zhì)和波譜學(xué)手段鑒定了全部化合物的結(jié)構(gòu)?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與材料

1.1 儀器

BRUKER－ARX－300型和BRUKER－ARX－500型核磁共振波譜儀（TMS作內(nèi)標(biāo)，布魯克科技有限公司)；Waters Prep150型高效液相色譜儀（檢測(cè)器2489 UV／Visible Detector，沃特世科技有限公司)；制備色譜柱YMCODS－A柱（250 mm×10 mm，5 μm，YMC科技有限公司)；分析色譜柱YMCODS－A型(150 mm×4.6 mm，5 μm，YMC科技有限公司)；RE－3000B型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）；柱色譜硅膠(100－200目，200～300目)，薄層色譜硅膠H(300～400目)及薄層色譜硅膠（GF25），均購(gòu)于青島海洋化工有限公司；ODS柱色譜填料(60～80 μm，Welch科技有限公司)；Sephadex LH－20(北京綠百草科技發(fā)展有限公司)；AB－8大孔吸附樹(shù)脂(河北華眾化工有限公司)。

1.2 材料

白蘞藥材購(gòu)于遼寧省藥材公司，經(jīng)大連210醫(yī)院藥學(xué)部徐保利副主任藥師鑒定為蛇葡萄屬(Ampelopsis Michx.)葡萄科白蘞Ampelopsisjaponica(Thunb.)Makino的塊根。

2 方法與結(jié)果

2.1 方法

取中藥材白蘞10.0 kg，粉碎，以8倍量（80 L）70%乙醇浸泡0.5 h時(shí)后加熱回流提取3次，每次2 h，合并提取液并減壓濃縮得浸膏約2.1 kg，浸膏加水50 L溶解稀釋?zhuān)芤悍謩e依次采用氯仿、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取，并對(duì)各萃取部分進(jìn)行減壓濃縮至浸膏，對(duì)正丁醇萃取部分浸膏采用大孔吸附樹(shù)脂及硅膠柱色譜技術(shù)，二氯甲烷∶甲醇（500∶1～1∶1），經(jīng)過(guò)薄層色譜法合并分離物，進(jìn)一步經(jīng)過(guò)ODS柱色譜，制備液相色譜，以甲醇－水為洗脫系統(tǒng)進(jìn)行單體成分純化，分離各化合物，采用核磁共振光譜技術(shù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。

2.2 分析結(jié)果

采用2.1項(xiàng)下方法分離，得化合物1（14 mg），2（22 mg），3（26 mg），4（12 mg），5（5 mg），6（20 mg），7（10 mg），8（9 mg）和9（12 mg），結(jié)構(gòu)鑒定分別為尿苷(uridine，1)，腺苷(adenosine，2)，阿魏酸(ferulic Acid，3)，原兒茶酸(protocatechuate，4)，沒(méi)食子酸(gallic acid，5)，大黃素－8－O－β－D－吡喃葡萄糖苷（emodin－8－O－β－D－glucopyranoside，6)，咖啡酸(caffeic acid，7)，β－谷甾醇(β－sitosterol，8)，7 β－羥基－β－谷甾醇(7 βhydroxy－β－sitosterol，9)?；衔锝Y(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。

圖1 化合物1～9結(jié)構(gòu)

2.3 各化合物鑒定

2.3.1 化合物1

淡黃色油狀(甲醇)。1H－NMR(300 MHz，DMSO－d6) δ：11.13(1H，s，N－H)，5.63(1H，d，J＝8.0 Hz，H－5)，7.87(1H，d，J＝8.0 Hz，H－6)，5.76(1H，d，J＝5.5 Hz，H－1′)；13C－NMR(75 MHz，DMSO－d6)δ：151.6(C－2)，163.2(C－4)，102.6(C－5)，141.6 (C－6)，88.5(C－1′)，74.3(C－2′)，70.7(C－3′)，85.6(C－4′)，61.7(C－5′)。與文獻(xiàn)[15]報(bào)道結(jié)果一致，故鑒定該化合物為尿苷(uridine)。

2.3.2 化合物2

無(wú)色油狀(甲醇)。13C－NMR(300 MHz，DMSO－d6) δ：152.8(C－2)，149.5(C－4)，119.8(C－5)，156.6 (C－6)，140.4(C－8)，88.4(C－1′)，73.9(C－2′)， 71.1(C－3′)，86.4(C－4′)，62.1(C－5′)。與文獻(xiàn)[16]報(bào)道的數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為腺苷。

2.3.3 化合物3

白色針狀結(jié)晶(MeOH)。1H－NMR(CD3OD－d4，500 MHz)δH：7.76(1H，d，J＝16.1 Hz，H－7)，6.47 (1H，d，J＝16.1 Hz，H－8)，7.01(1H，d，J＝8.1 Hz，H－5)，7.21(1H，dd，J＝8.1，2.0 Hz，H－6)，7.32(1H，d，J＝2.0 Hz，H－2)，4.08(3H，s)。與文獻(xiàn)[17]報(bào)道的數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為阿魏酸。

2.3.4 化合物4

白色結(jié)晶(MeOH)。三氯化鐵－鐵氰化鉀反應(yīng)呈陽(yáng)性，提示有酚羥基；溴甲酚綠反應(yīng)呈陽(yáng)性，提示有羧基存在；SnCl2反應(yīng)呈陽(yáng)性，提示有鄰酚羥基存在。與原兒茶醛對(duì)照品共薄層，Rf值一致，故鑒定該化合物為原兒茶酸。

2.3.5化合物5

白色結(jié)晶(MeOH)。三氯化鐵－鐵氰化鉀反應(yīng)呈陽(yáng)性，提示含有酚羥基；溴甲酚綠反應(yīng)呈陽(yáng)性，提示有羧基存在。與沒(méi)食子酸對(duì)照品共薄層，二者Rf值一致，故鑒定該化合物為沒(méi)食子酸。

2.3.6 化合物6

黃色針晶(甲醇)，Borntr?ger′s反應(yīng)、三氯化鐵反應(yīng)、Molish反應(yīng)均呈陽(yáng)性。均與已知對(duì)照品共薄層，其Rf值一致，故鑒定該化合物為大黃素－8－O－β－D－吡喃葡萄糖苷。

2.3.7 化合物7

白色針狀結(jié)晶(MeOH)。1H－NMR(DMSO－d6，500 MHz)δH：7.43(1H，d，J＝16.1 Hz，H－7)，6.16(1H，d，J＝16.1 Hz，H－8)，6.03(1H，dd，J＝9.0，2.8 Hz，H－2)，6.74(1H，d，J＝9.0 Hz，H－5)，6.98(1H，dd，J＝9.0，3.0 Hz，H－6)，9.06(1H，s，H－9)；13C－NMR (DMSO－d6，500 MHz)δC：168.2(C－9)，116.1(C－8)，144.5(C－7)，121.2(C－6)，115.4(C－5)，148.3(C－4)，145.9(C－3)，114.5(C－2)，126(C－1)。與文獻(xiàn)[17]報(bào)道結(jié)果一致，故鑒定該化合物為咖啡酸。

2.3.8 化合物8

白色針狀結(jié)晶(MeOH)，mp 137～138℃，Liebermann－Burchard反應(yīng)陽(yáng)性。與β－谷甾醇對(duì)照品共薄層，Rf值相同，斑點(diǎn)顏色一致。與β－谷甾醇對(duì)照品混合，熔點(diǎn)不下降，故鑒定該化合物為β－谷甾醇。

2.3.9 化合物9

白色粉末(MeOH)，mp 213～214℃。1H－NMR (CDCl3－d，500 MHz)δH：3.55(1H，m，H－3)，5.30 (1H，s，H－6)，3.85(1H，m，H－7)，0.70(3H，s，CH3－18)，1.05(3H，s，CH3－19)，0.93(3H，d，J＝6.5Hz，CH3－21)，0.83(3H，d，J＝7.0Hz，CH3－26)，0.81(3H，d，J＝7.0Hz，CH3－27)，0.85(3H，t，J＝7.5 Hz，CH3－29)；13C－NMR (125 MHz，CDCl3－d)δC：C1～C29(36.9，31.6，71.4，41.7，143.5，125.4，73.3，40.9，48.3，36.4，21.1，39.5，42.9，55.4，26.4，28.5，56.0，11.8，19.1，36.1，18.8，34.0，26.1，45.8，29.1，19.8，19.0，23.1，12.0)。與文獻(xiàn)[18]報(bào)道的數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定該化合物為7β－羥基－β1－谷甾醇。

3 討論

白蘞為傳統(tǒng)中藥，具有抗腫瘤、抗菌及抗病毒等活性。本試驗(yàn)中采用傳統(tǒng)中藥化學(xué)研究手段從中藥白蘞Ampelopsis japonica(Thunb.)Makino中分離得到9個(gè)化合物單體成分，并應(yīng)用光譜學(xué)技術(shù)對(duì)所有化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定，其中化合物4和化合物9是從蛇葡萄屬(AmpelopsisMichx.)植物中首次分離得到，化合物1～3和化合物7為首次從白蘞植物中分離得到。從白蘞及蛇葡萄屬植物中首次分離的單體成分主要為酚酸類(lèi)及生物堿類(lèi)成分，酚酸類(lèi)成分是主要活性成分，具有抗菌、降糖、抗腫瘤等活性。首次分離的活性成分如阿魏酸、咖啡酸等可為白蘞藥材的質(zhì)量控制和質(zhì)量評(píng)價(jià)提供新的指標(biāo)，同時(shí)可為中藥白蘞的開(kāi)發(fā)提供理論基礎(chǔ)。

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Study on the Constituents of Ampelopsis Japonica(Thunb.)Makino

Bai Xueli,Shan Wenjing

(Dalian Fifth People′s Hospital,Dalian,Liaoning,China116021)

Objective To study the chemical constituents of the Ampelopsis japonica(Thunb.)Makino.MethodsSeparation and purification were carried out by macroporous adsorption resin,silica gel column chromatography,polyamide chromatography,Sephadex LH－20 column chromatography,octadecyl silanebondedsilicagel(ODS)chromatography.Thephysico－chemical properties andspectroscopic methods were used to identify the structure ofAmpelopsis japonica(Thunb.)Makino.Results9 compounds were obtained from the 70%ethanol－water extracts of theAmpelopsis japonica(Thunb.)Makino.The structures were determined as Uridine(1),Adenosine(2), FerulicAcid(3),protocatechuate(4),gallicacid(5),emodin－8－O－β－D－glucopyranoside(6),Caffeicacid(7),β－sitosterol(8)and 7β－h(huán)ydroxy－β－sitosterol(9)by comparison of their spectral data with the reported data,respectively.Conclusion s Compounds 4 and 9 were isolated from genus Ampelopsis for the first time,compound 1－3 and 7 were isolated from Ampelopsis japonica(Thunb.)Makino for the first time.

Ampelopsis Radix(Thunb.)Makino;chemical constituents;structural identification;constituent isolation

R284.1；R282.71

A

1006－4931(2017)01－0016－03

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.01.005

2016－09－18；

2016－10－25)

白學(xué)莉（1972－），女，主管藥師，研究方向?yàn)橹兴庂|(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，（電話）0411－84211244（電子信箱）baixueli0411＠163.com。