郭曉蒙，趙富士，冶曉惠，馬挺軍,2,*

（1.北京農(nóng)學院食品科學與工程學院，北京 102206；2.農(nóng)業(yè)生物制品與種業(yè)中關(guān)村開放實驗室，北京 100190）

響應(yīng)面法優(yōu)化檸檬酸脅迫藜麥富集γ-氨基丁酸的培養(yǎng)條件及體外降血壓活性研究

郭曉蒙1，趙富士1，冶曉惠1，馬挺軍1,2,*

（1.北京農(nóng)學院食品科學與工程學院，北京 102206；2.農(nóng)業(yè)生物制品與種業(yè)中關(guān)村開放實驗室，北京 100190）

為優(yōu)化檸檬酸脅迫藜麥富集γ-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，GABA）的最優(yōu)培養(yǎng)條件，采用超聲波提取，高效液相色譜法檢測，在單因素試驗的基礎(chǔ)上，利用響應(yīng)面法優(yōu)化檸檬酸溶液濃度、培養(yǎng)溫度以及培養(yǎng)時間對發(fā)芽藜麥中GABA含量的影響。結(jié)果表明：發(fā)芽藜麥在檸檬酸脅迫下富集GABA的最佳培養(yǎng)條件為檸檬酸溶液濃度2.00 mmol/L、培養(yǎng)溫度25 ℃、培養(yǎng)時間48 h，在此培養(yǎng)條件下發(fā)芽藜麥中GABA含量為1.538 mg/g，是藜麥種子中GABA含量的3.8 倍。體外降血壓實驗結(jié)果表明：檸檬酸脅迫藜麥發(fā)芽后血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制率為63%，分別是用去離子水發(fā)芽的藜麥和藜麥種子的1.3 倍和1.9 倍，即檸檬酸脅迫藜麥發(fā)芽后可以提高其降血壓活性。研究結(jié)果為藜麥的進一步研究提供了一定的理論依據(jù)。

藜麥；發(fā)芽；檸檬酸脅迫；γ-氨基丁酸；響應(yīng)面優(yōu)化

藜麥（Chenopodium quinoa），又名昆諾阿藜、南美藜等，是一年生的藜科草本植物。原產(chǎn)于南美洲安第斯山區(qū)，是印加土著居民的傳統(tǒng)食物，距今有7 000多年的種植歷史，原產(chǎn)地多為海拔3 000～4 800 m的高原地區(qū)，具有抗寒抗旱等特性[1-2]。藜麥蛋白質(zhì)中賴氨酸含量高達5.1%～6.4%[3]；脂肪含量為50～72 mg/g，其中甘油三酯占50%以上[4]；藜麥還富含Mn、Fe、Mg、Ca等礦物質(zhì)，其含量比大宗作物中礦物質(zhì)含量高[5]；藜麥中含有VB1、VB2、VC等維生素，每100 g藜麥中VB1和VB2的含量均能滿足兒童每日所需量的80%左右[6]。同時，藜麥富含多種生物活性物質(zhì)，如黃酮、酚酸、皂苷等，其中黃酮含量一般在36.2～144.3 mg/100 g，并且Hirose等[7]利用高效液相色譜法分析了4 種藜麥中的黃酮，并對不同的品種間黃酮含量差異性進行了比較。聯(lián)合國糧農(nóng)組織認為，藜麥是唯一的單體植物即可滿足人體基本營養(yǎng)需求的食物，正式推薦藜麥為最適宜人類食用的完美營養(yǎng)食品，并列入全球十大營養(yǎng)品之一[8]。藜麥種子不含膽固醇，低脂、低熱量、低糖，含有多種氨基酸和礦物質(zhì)，其中包括人體必需的8 種氨基酸，比例均衡且易于吸收，是糖尿病患者、素食主義者以及孕嬰理想安全的食品[9-11]。

4-氨基丁酸（γ-aminobutyric acid，GABA）是一種以自由態(tài)廣泛存在于原核生物和真核生物中的四碳非蛋白質(zhì)氨基酸[12-13]。因GABA具有降血壓、改善腦機能和緩解疼痛和焦慮等作用，富含GABA的食品，近年來備受消費者喜愛[14-16]。研究表明，植物中GABA的合成主要受GABA支路和多胺降解的影響，其中谷氨酸脫羧酶（glutamatede carboxylase，GAD）和二胺氧化酶（diamine oxidase，DAO）分別是這兩條途徑中的限速酶[17]。植物在受熱、受冷、鹽脅迫、酸脅迫、低氧脅迫等條件下刺激會強烈激活GAD和DAO酶活性，從而促使GABA富集[18]。已有部分學者對CO2處理[19]、低氧脅迫[20]、金屬離子脅迫[21]等進行研究，但利用酸溶液脅迫發(fā)芽目前很少見到相關(guān)研究。

血管緊張素轉(zhuǎn)換酶（angiotensin converting enzyme，ACE）是一種與金屬鋅螯合的二肽羧基肽酶，在體內(nèi)血壓調(diào)節(jié)過程中起到重要作用[22]，哺乳動物血壓的主要生物調(diào)節(jié)是通過腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（renin angiotensin system，RAS），血管緊張素Ⅱ與其在動脈系統(tǒng)的平滑肌細胞上的受體結(jié)合，引起血管收縮和血壓升高。ACE屬于限制酶，可以抑制血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化為血管緊張素Ⅱ，從而抑制血壓升高[23]，并且同時ACE能催化具有降壓作用的舒緩激肽降解[24]，所以ACE抑制率可以作為降血壓實驗的檢測指標[25]。

本研究為優(yōu)化檸檬酸脅迫藜麥富集GABA的最優(yōu)培養(yǎng)條件，以藜麥種子為原料，在單因素試驗的基礎(chǔ)上，利用響應(yīng)面法優(yōu)化檸檬酸溶液濃度、培養(yǎng)溫度以及培養(yǎng)時間對發(fā)芽藜麥中GABA含量的影響，并對優(yōu)化的藜麥芽抑制ACE活性進行分析，并為藜麥的進一步研究提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

藜麥由河北張家口農(nóng)科院提供，置于-18 ℃冰箱中儲存?zhèn)溆谩?/p>

GABA標準品（純度≥99.0%）、馬尿酰-組氨酰-亮氨酸（N-hippuryl-His-Leu hydrate，HHL）、ACE 美國Sigma公司；乙腈（色譜純） 韓國Duksan公司；所有分離用有機溶劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

生化培養(yǎng)箱 寧波海曙賽福實驗儀器廠；KQ-700E型超聲波清洗器 昆山市超聲儀器有限公司；TDZ5M型臺式低速離心機 長沙易達儀器有限公司；1260型高效液相色譜儀（配有1200可變波長紫外檢測器和ChemStation色譜工作站） 美國Agilent公司；BSA224S型電子分析天平 賽多利斯科學儀器（北京）有限公司；DH-101型電熱恒溫鼓風干燥箱 天津市中環(huán)實驗電爐有限公司。

1.3 方法

1.3.1 藜麥種子發(fā)芽處理

稱取一定質(zhì)量的藜麥種子用去離子水清洗后，用1%的次氯酸鈉溶液浸泡5 min，用去離子水清洗干凈（pH 7），然后去離子水浸泡2 h，均勻放入鋪有2 層濾紙的培養(yǎng)皿中，每個培養(yǎng)皿放置約50 粒藜麥種子，然后放入生化培養(yǎng)箱中暗發(fā)芽，發(fā)芽相對濕度為80%～95%左右，期間每12 h噴檸檬酸溶液（實驗濃度）或去離子水（對照）2.0 mL。培養(yǎng)結(jié)束后，用去離子水清洗發(fā)芽藜麥，在50 ℃條件下干燥，然后粉碎，過80 目篩，待測。

1.3.2 藜麥芽中GABA含量的測定

柱前衍生化處理：根據(jù)張志清等[26]方法改進，準確稱取0.5 g藜麥芽粉，以1∶20（g/mL）的料液比將70%的甲醇溶液和藜麥芽粉混合均勻，置于具塞試管中，在50 ℃、700 W條件下提取20 min，然后將混合液移至50 mL離心管中，4 000 r/min離心15 min，取上清液10 μL于樣品瓶中，添加50 μL的鄰苯二甲醛（o-phthaldialdehyde，OPA）衍生液充分振蕩，靜置5 min，用0.22 μm有機濾膜過濾，待測。

色譜條件：根據(jù)鄭鴻雁等[27]方法優(yōu)化改進，采用OPA柱前衍生紫外檢測高效液相色譜法測定藜麥芽中GABA含量。色譜柱：TC-C18（150 mm×4.6 mm， 5 μm）；流動相：流動相A為0.02 mmol/L乙酸鈉溶液，流動相B為純乙腈；流速：1.0 mL/min；檢測波長：322 nm；柱溫：30 ℃；進樣量：10 μL；梯度洗脫程序如表1所示。

1.3.3 標準曲線的繪制

準確配制0.00、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50 mg/mL的GABA標準溶液，分別用OPA衍生后進行色譜分析，根據(jù)色譜圖中峰面積計算GABA含量，實驗重復3 次，計算平均值，以色譜圖中峰面積為縱坐標，以待測樣品質(zhì)量濃度為橫坐標繪制標準曲線?；貧w方程為y=2.7624x（R2=0.999 1），數(shù)據(jù)顯示曲線擬合性良好。

1.3.4 單因素試驗

1.3.4.1 檸檬酸溶液濃度的選擇

稱取10.0 g藜麥種子，檸檬酸溶液濃度分別為0.00、1.00、2.00、3.00、4.00 mmol/L，控制培養(yǎng)溫度為25 ℃，培養(yǎng)時間為48 h，然后按照1.3.1節(jié)方法測定不同檸檬酸溶液濃度對藜麥發(fā)芽富集GABA的影響。以藜麥芽中GABA的含量為測定指標，以去離子水發(fā)芽的藜麥為對照。試驗重復3 次，計算平均值。

1.3.4.2 培養(yǎng)溫度的選擇

稱取10.0 g藜麥種子，培養(yǎng)溫度為15、20、25、30、 35 ℃，控制檸檬酸溶液濃度為2.00 mmol/L，培養(yǎng)時間為48 h，然后按照1.3.1節(jié)方法測定不同培養(yǎng)溫度對藜麥發(fā)芽富集GABA的影響。以藜麥芽中GABA的含量為測定指標，試驗重復3 次，計算平均值。

1.3.4.3 培養(yǎng)時間的選擇

稱取10.0 g藜麥種子，培養(yǎng)時間為24、48、72、96、 120 h，控制檸檬酸溶液濃度為2.00 mmol/L，培養(yǎng)溫度為25 ℃，然后按照1.3.1節(jié)方法測定不同培養(yǎng)溫度對藜麥發(fā)芽富集GABA的影響。以藜麥芽中GABA的含量為測定指標，試驗重復3 次，計算平均值。

1.3.5 Box-Behnken響應(yīng)面優(yōu)化設(shè)計

根據(jù)Box-Behnken試驗設(shè)計原理進行三因素三水平試驗設(shè)計，利用Design-Expert 8.0.6軟件包進行數(shù)據(jù)擬合優(yōu)化藜麥芽中GABA含量的工藝條件。在單因素試驗的基礎(chǔ)上，選擇檸檬酸溶液濃度（A）、培養(yǎng)溫度（B）、培養(yǎng)時間（C）作為響應(yīng)面優(yōu)化的試驗點，自變量的試驗水平分別以-1、0、1進行編碼，共設(shè)計17 組試驗點，其中12 組為析因點，自變量取值在各因素所構(gòu)成的三維頂點；5組為區(qū)域的中心零點，用來估計試驗誤差。試驗因素和水平見表2。

1.3.6 檸檬酸脅迫藜麥芽的體外抑制ACE活性分析

根據(jù)Cushman等[28]的方法略作修改，準確稱取0.5 g藜麥芽粉，以1∶20（g/mL）的料液比將70%甲醇溶液和藜麥芽粉混合均勻，然后置于具塞試管中在50 ℃、700 W的條件下提取20 min，然后將混合液移至50 mL離心管中，4 000 r/min離心15 min，準確移取100 μL上清液與100 μL 5 mmol/L HHL溶液混合均勻，立即37 ℃水浴，保溫5min，然后加入0.1 U/mL ACE溶液10 μL，于37 ℃恒溫水浴中充分反應(yīng)30 min，加入150 μL，1 mol/L HCl溶液用于終止反應(yīng)，再加入1.5 mL乙酸乙酯充分振蕩混合均勻，在4 000 r/min離心5 min后吸取1 mL酯層于另一支試管中，80 ℃烘干冷卻后重新溶于3 mL超純水中，于228 nm波長處測定吸光度。實驗重復3 次，計算平均值。以未發(fā)芽藜麥和去離子水發(fā)芽藜麥作對照。ACE抑制率按以下公式計算。

式中：A為ACE和ACE抑制劑同時存在時的吸光度；B為不加ACE抑制劑時的吸光度（用去離子水代替ACE抑制劑）；C為ACE與ACE抑制劑均不參加反應(yīng)時的吸光度（用去離子水代替ACE抑制劑，并在反應(yīng)前加HCl終止反應(yīng)）。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗結(jié)果

2.1.1 檸檬酸溶液濃度對藜麥芽中GABA含量的影響

如圖1所示，不同濃度的檸檬酸溶液對藜麥芽中GABA含量的影響有顯著性差異（P＜0.05）。檸檬酸溶液濃度在0.00～2.00 mmol/L范圍內(nèi)，GABA含量呈逐漸上升的趨勢，其中2.00 mmol/L時GABA含量最高，此時GABA含量為0.500 mg/g，是對照組（0.377 mg/g）的1.31 倍。當檸檬酸溶液濃度高于2.00 mmol/L時，GABA含量逐漸下降，原因可能是檸檬酸溶液濃度過高會使藜麥發(fā)芽過程中pH值偏低，藜麥中的GAD和DAO酶活性降低，從而抑制GABA的富集[29]。

2.1.2 培養(yǎng)溫度對藜麥芽中GABA含量的影響

由圖2可知，培養(yǎng)溫度在15～25 ℃范圍內(nèi)，GABA含量呈迅速的上升趨勢，在25～35 ℃范圍內(nèi)GABA含量逐漸下降，其中25 ℃條件下培養(yǎng)的藜麥芽中GABA含量最高，達到0.774 mg/g，與20 ℃（0.503 mg/g）和30 ℃（0.382 mg/g）條件下培養(yǎng)的藜麥芽中的GABA具有顯著性差異（P＜0.05），表明藜麥在25 ℃時發(fā)芽富集GABA效果比較好。

2.1.3 培養(yǎng)時間對藜麥芽中GABA含量的影響

如圖3所示，不同的發(fā)芽培養(yǎng)時間對藜麥中GABA含量具有顯著性差異（P＜0.05）。藜麥種子中GABA含量為0.402 mg/g，發(fā)芽24 h后藜麥中GABA含量迅速上升，達到1.060 mg/g。發(fā)芽48 h后，GABA含量繼續(xù)上升，達到1.127 mg/g，此時藜麥芽中GABA含量是藜麥種子中GABA含量的2.8 倍。發(fā)芽48～120 h，GABA含量呈下降趨勢，其原因可能是隨著培養(yǎng)時間的逐漸延長，在轉(zhuǎn)氨酶的作用下，GABA轉(zhuǎn)換成琥珀酸半醛，從而使得GABA含量下降[30]。綜上分析可知：藜麥在第48小時發(fā)芽富集GABA效果較好。

2.2 響應(yīng)面試驗結(jié)果

2.2.1 Box-Behnken試驗設(shè)計及結(jié)果分析

綜合單因素試驗結(jié)果，采用Design-Expert 8.0.6軟件包，以檸檬酸溶液濃度（A）、培養(yǎng)溫度（B）、培養(yǎng)時間（C）為自變量，以藜麥芽中GABA含量為響應(yīng)值，設(shè)計3因素3水平Box-Behnken試驗，試驗設(shè)計方案及結(jié)果見表3。

2.2.2 回歸模型的建立及顯著性檢驗結(jié)果

利用Design-Expert 8.0.6軟件包對表3數(shù)據(jù)進行多元回歸擬合，建立GABA含量（Y）的二階響應(yīng)回歸模型，進而分析各試驗因素對響應(yīng)值Y的影響。擬合二次多項式方程如下：

對該回歸模型及系數(shù)進行顯著性分析，其結(jié)果見表4。從整體上，該模型P＜0.001，模型差異極顯著。失擬項P=0.378 1＞0.05，沒有顯著性差異，說明該模型對本試驗擬合程度良好。模型一次項A、C均對響應(yīng)值GABA含量影響顯著（P＜0.05）；AB、AC交互作用極顯著（P＜0.01），BC交互作用不顯著；一次項B，二次項A2、B2、C2均對響應(yīng)值GABA含量影響極顯著（P＜0.01）。3 個因素對GABA含量的影響依次為B＞C＞A，即培養(yǎng)溫度＞培養(yǎng)時間＞檸檬酸溶液濃度。結(jié)果表明：3 個因素對藜麥芽中GABA含量的影響不是簡單的線性關(guān)系。剔除不顯著項，將擬合方程修正為：

Y=0.210-0.025A-0.011B+0.037C-2.250× 10-3AB-2.750×10-3AC-0.024A2-0.084B2-0.027C2

2.2.3 響應(yīng)面分析

響應(yīng)面圖形是響應(yīng)值和影響因子A、B、C之間的關(guān)系構(gòu)成的三維空間立體結(jié)構(gòu)圖，根據(jù)線性回歸模型繪制相應(yīng)的響應(yīng)面圖和等高線圖，直觀分析3 個因素對藜麥芽中GABA含量的交互作用，響應(yīng)面坡度越陡峭，表明響應(yīng)值對于試驗條件的改變越敏感，該因素對藜麥芽中GABA含量的測定影響越大；對于等高線則可以直觀反映兩變量的交互作用顯著程度，橢圓形表示兩因素之間作用顯著，而圓形則表示不顯著[31]，結(jié)果見圖4。

由圖4a可知，響應(yīng)面的坡度較陡峭，表示在培養(yǎng)時間為48 h條件下，檸檬酸溶液濃度和培養(yǎng)溫度交互作用顯著，在培養(yǎng)溫度較低時，GABA含量隨著檸檬酸溶液濃度的增加而增大，隨著培養(yǎng)溫度的升高，增加幅度減小甚至下降，說明在不同培養(yǎng)溫度下，檸檬酸溶液濃度對GABA含量的影響也不同；圖4b顯示在培養(yǎng)溫度為25 ℃條件下，培養(yǎng)時間和檸檬酸溶液濃度交互作用顯著，在培養(yǎng)時間較短時，GABA含量隨著檸檬酸溶液濃度的增加而增加，隨著培養(yǎng)時間的延長，增加幅度逐漸減低；圖4c顯示在檸檬酸溶液濃度為2.00 mmol/L的條件下，培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間的交互作用不顯著，說明培養(yǎng)時間對GABA含量產(chǎn)生的影響與培養(yǎng)溫度無關(guān)。

利用Design-Expert 8.0.6軟件，結(jié)合回歸模型和響應(yīng)面圖分析得出藜麥發(fā)芽的最佳培養(yǎng)條件為：檸檬酸溶液濃度2.00 mmol/L、培養(yǎng)溫度24.68 ℃、培養(yǎng)時間48.24 h。在此條件下，預(yù)測藜麥中GABA最高含量為1.542 mg/g。根據(jù)實際情況調(diào)整為：檸檬酸溶液濃度2.00 mmol/L、培養(yǎng)溫度25 ℃、培養(yǎng)時間48 h，在此條件下重復試驗3 次，測得GABA含量的平均值為1.538 mg/g，與模型預(yù)測值基本吻合，說明此模型可靠。最終優(yōu)化的藜麥發(fā)芽培養(yǎng)條件確定為檸檬酸溶液濃度2.00 mmol/L，培養(yǎng)溫度25 ℃，培養(yǎng)時間48 h。

2.3 體外抑制ACE活性測定結(jié)果

如圖5所示，2.00 mmol/L的檸檬酸脅迫發(fā)芽的藜麥（實驗組）和去離子水發(fā)芽的藜麥（對照組1）置于生化培養(yǎng)箱中，在25 ℃條件下培養(yǎng)48 h，然后50 ℃烘干，粉碎，過80 目篩。準確稱取0.5 g的試驗組、對照組1、對照組2（藜麥種子）粉末，按照方法1.3.6節(jié)，對其體外抑制ACE酶活性進行分析。結(jié)果顯示：實驗組、對照組1和對照組2三者的ACE抑制率均有顯著性差異（P＜0.05）。實驗組ACE抑制率（63%）分別是對照組1（49%）和對照組2（33%）的1.3 倍和1.9 倍，以上數(shù)據(jù)表明利用檸檬酸脅迫藜麥發(fā)芽，可以促進藜麥中GABA含量增加，從而提高其降血壓活性。

3 結(jié) 論

在單因素試驗的基礎(chǔ)上，采用Box-Behnken響應(yīng)面法，以GABA含量為響應(yīng)值，對藜麥的發(fā)芽培養(yǎng)條件進行優(yōu)化，最佳培養(yǎng)條件為檸檬酸溶液濃度2.00 mmol/L、培養(yǎng)溫度25 ℃、培養(yǎng)時間48 h，在此條件下GABA含量達到1.538 mg/g，是藜麥種子中GABA含量（0.402 mg/g）的3.8 倍。體外降血壓實驗表明：2.00 mmol/L的檸檬酸脅迫藜麥芽干質(zhì)量的ACE抑制率為63%，分別是去離子水脅迫藜麥芽干質(zhì)量和藜麥種子干質(zhì)量的1.3 倍和1.9 倍，充分說明檸檬酸脅迫發(fā)芽可以提高藜麥的降血壓活性。以上研究為開發(fā)藜麥產(chǎn)品提供一定理論依據(jù)。

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Response Surface Optimization of GABA Accumulation in Germinated Quinoa under Citric Acid Stress and Its ACE Inhibitory Activity in Vitro

GUO Xiaomeng1, ZHAO Fushi1, YE Xiaohui1, MA Tingjun1,2,*
(1. College of Food Science and Engineering, Beijing University of Agriculture, Beijing 102206, China; 2. Agricultural Biological Products and Seed Industry of Zhongguancun Open Laboratory, Beijing 100190, China)

This study aimed to optimize the culture conditions for γ-aminobutyric acid (GABA) production in germinated quinoa under citric acid stress. GABA from germinated quinoa was ultrasonically extracted with ethanol and analyzed by high performance liquid chromatography (HPLC). The optimization of citric acid concentration, culture time and temperature, the factors affecting GABA content in germinated quinoa, were optimized by the combined use of one-factorat-a-time method and response surface methodology. Results indicated that the highest GABA content of 1.538 mg/g in germinated quinoa was obtained after 48 h of culture at 25 ℃ in the presence of 2.00 mmol/L citric acid, which was 3.8 times as high as that observed for the ungerminated sample. The percentage of ACE inhibition by germinated quinoa under citric acid stress was 63%, which was 1.3 and 1.9 times higher than that that by the germinated one without citric acid stress and the ungerminated one, respectively. This finding suggested that germination under citric acid stress could improve the antihypertensive activity of quinoa, which will provide a guideline for further study of quinoa.

quinoa; germination; citric acid stress; γ-aminobutyric acid (GABA); response surface analysis

10.7506/spkx1002-6630-201714034

TS213.2

A

1002-6630（2017）14-0221-06

郭曉蒙, 趙富士, 冶曉惠, 等. 響應(yīng)面法優(yōu)化檸檬酸脅迫藜麥富集γ-氨基丁酸的培養(yǎng)條件及體外降血壓活性研究[J]. 食品科學, 2017, 38(14): 221-226.

10.7506/spkx1002-6630-201714034. http://www.spkx.net.cn

GUO Xiaomeng, ZHAO Fushi, YE Xiaohui, et al. Response surface optimization of GABA accumulation in germinated quinoa under citric acid stress and its ACE inhibitory activity in vitro[J]. Food Science, 2017, 38(14): 221-226. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201714034. http://www.spkx.net.cn

2016-10-17

2017年內(nèi)涵發(fā)展定額項目—研究生教育改革與發(fā)展項目—科研創(chuàng)新項目；2017年大學生科研訓練項目

郭曉蒙（1989—），女，碩士研究生，研究方向為天然產(chǎn)物提取與功能食品。E-mail：15600633600@163.com

*通信作者：馬挺軍（1973—），男，教授，博士，研究方向為天然產(chǎn)物提取與功能食品。E-mail：mtingjun@163.com