對于從事食品生產(chǎn)相關產(chǎn)業(yè)的人來說,食品安全是重中之重,是維護消費者信任的首要因素。食品生產(chǎn)商為了確保產(chǎn)品的安全與品質,都會進行食源性致病菌的檢測。廣州迪奧生物科技有限公司針對目前的致病微生物檢測現(xiàn)狀開發(fā)了全方位的IMSA技術平臺,本次課程的主題主要由申洪杰老師對迪奧公司的IMSA技術平臺做一個簡單的講解。
現(xiàn)行檢測方法概述
微生物學及生化鑒定方法(即國標方法)是傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法,這種方法的檢測結果非常準確,但是具有時間長、效率低的缺點,并且這種方法需要專業(yè)人員進行結果分析。
分子生物學方法是目前主流的檢測方法之一。第一代PCR檢測技術具有反應熱循環(huán)、操作繁雜、靈敏度高、準確度低、反應時間長、結果判斷麻煩、需要專業(yè)背景、單指標檢測等諸多缺點,已經(jīng)無法滿足日益壯大的市場需求。第二代熒光PCR檢測技術分為普通熒光PCR和熒光探針PCR,普通熒光PCR反應熱循環(huán),操作很繁雜,但是靈敏度很高;熒光探針PCR的檢測時間長、結果分析麻煩、需要專業(yè)背景。另外分子生物學方法只適用于大型高端儀器,局限于高端市場,普及推廣困難,無法滿足基層檢測機構的需求。第三代恒溫擴增檢測技術可實時監(jiān)測實驗過程,操作簡單,檢測時間短,使用成本低,但也具有擴增結果無法測序和多使用目視判斷的缺點。
IMSA技術平臺
廣州迪奧生物科技有限公司針對目前的致病微生物檢測現(xiàn)狀開發(fā)了全方位的IMSA技術平臺。該平臺結合了IMSA技術和熒光檢測技術,在通過優(yōu)化之后實現(xiàn)高效率和高準確率。IMSA平臺的核心技術是Bst聚合酶,它的來源是濕熱脂肪芽孢桿菌bacillus、stearothermophilus DNA聚合酶的部分片段,分子量67KD。Bst聚合酶具有5`→3`DNA聚合酶活性,但不具有5`→3`外切核酸酶活性;鏈置換活性強;在寬溫度范圍內(nèi)具有活性,最佳活性溫度為63℃,80℃ 20min酶便失活等特點。
MISA技術平臺與其他檢測方法的對比見表1、表2、表3。IMSA技術平臺的特點有五點:第一、恒溫擴增,無需熱循環(huán),持續(xù)擴增;第二、Bst DNA聚合酶,高效擴增;第三、引物設計,成剪刀狀莖環(huán)結構,自主擴增;第四、擴增模板濃度需求低,提高低拷貝模板的擴增概率;第五、熒光信號檢測,擴增產(chǎn)物檢測準確率高,干擾小。
IMSA技術的應用范圍非常廣,能夠檢測包括國家規(guī)定必檢致病菌在內(nèi)的眾多微生物和玉米和大豆等農(nóng)作物的轉基因成分,還能夠對豬、牛、羊、雞、鴨、鵝等動物源性食品做成分檢測,也能檢測出水產(chǎn)中細菌和病毒引起的病害。
IMSA檢測平臺是既適用于食品生產(chǎn)加工企業(yè)日常質控,也適用于基層監(jiān)管部門開展批量風險監(jiān)測的優(yōu)秀技術平臺。具有更簡單、更經(jīng)濟、更純粹的優(yōu)勢。