高 琴 劉 磊* 劉公言 孫海濤 李福昌**

(1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，泰安271018；2.山東省農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所，濟(jì)南250100)

飼糧鈷添加水平對(duì)斷奶至3月齡獺兔消化代謝的影響

高 琴1劉 磊1*劉公言1孫海濤2李福昌1**

(1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，泰安271018；2.山東省農(nóng)科院畜牧獸醫(yī)研究所，濟(jì)南250100)

本試驗(yàn)旨在研究飼糧鈷添加水平對(duì)斷奶至3月齡獺兔飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率、氮代謝、胰腺消化酶活性、血清生化指標(biāo)和鈷代謝的影響。選擇體重相近的斷奶獺兔200只，隨機(jī)分為5組，每組40個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只試驗(yàn)兔。5組試驗(yàn)兔分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加0(對(duì)照)、0.1、0.4、1.6、6.4 mg/kg鈷(以硫酸鈷的形式)的試驗(yàn)飼糧，經(jīng)7 d預(yù)飼后進(jìn)行為期53 d的飼養(yǎng)試驗(yàn)。結(jié)果顯示：飼糧鈷添加水平對(duì)飼糧中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率均沒(méi)有顯著影響(P>0.05)，但飼糧干物質(zhì)(DM)、粗蛋白質(zhì)(CP)和鈷的表觀消化率隨飼糧鈷添加水平的升高均有先升高后降低的趨勢(shì)，DM和CP的表觀消化率在鈷添加水平為1.6 mg/kg時(shí)最高，鈷的表觀消化率在鈷添加水平為0.4 mg/kg時(shí)最高。飼糧鈷添加水平對(duì)糞氮(FN)、可消化氮(DN)、氮表觀消化率(NAD)、氮生物學(xué)效價(jià)(NBV)均無(wú)顯著影響(P>0.05)，對(duì)食入氮(IN)、尿氮(UN)、氮沉積(RN)、氮利用率(NUR)有顯著影響(P<0.05)。隨著飼糧鈷添加水平的升高，IN、RN和NUR均先降低后升高再降低，并均在鈷添加水平為1.6 mg/kg時(shí)最高，而UN則逐漸降低。飼糧鈷添加水平對(duì)胰腺胰蛋白酶活性有顯著影響(P<0.05)，且在鈷添加水平為1.6 mg/kg時(shí)最高。飼糧鈷添加水平對(duì)血清尿素含量有顯著影響(P<0.05)，隨著飼糧鈷添加水平的升高，血清尿素含量先降低后升高，在鈷添加水平為1.6 mg/kg時(shí)最低。飼糧鈷添加水平對(duì)血清總蛋白和白蛋白含量無(wú)顯著影響(P>0.05)。飼糧鈷添加水平對(duì)糞、尿、肌肉、脾臟和腎臟中鈷含量有顯著影響(P<0.05)，且隨著飼糧鈷添加水平的升高，糞、尿、肌肉、脾臟和腎臟中鈷含量均持續(xù)增加。綜合本試驗(yàn)測(cè)定指標(biāo)，斷奶至3月齡獺兔飼糧鈷適宜添加水平為0.4～1.6 mg/kg(飼糧中鈷含量實(shí)測(cè)值為0.60～1.83 mg/kg)。

鈷；獺兔；營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率；氮代謝；鈷代謝

1935年Underwood和Marston分別發(fā)現(xiàn)羊的消瘦病是由缺鈷引起的，從而確定了鈷是動(dòng)物必需的微量元素，這也是確認(rèn)的第6種動(dòng)物必需的微量元素[1]。鈷是維生素B12(鈷胺素)的重要活性組分，主要通過(guò)維生素B12參與機(jī)體造血和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化、代謝等，進(jìn)而影響體內(nèi)蛋白質(zhì)、脂肪和糖的代謝。鈷在機(jī)體代謝過(guò)程中，能激活磷酸酶、精氨酸酶和過(guò)氧化氫酶，且能抑制細(xì)胞色素氧化酶和琥珀酸脫氫酶的活性，改善基礎(chǔ)代謝中糖和氮的吸收，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)[2]。在家兔上，本課題組前期試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加不同水平(0.1～6.4 mg/kg)的鈷對(duì)生長(zhǎng)獺兔的日增重和飼料轉(zhuǎn)化效率均沒(méi)有顯著影響[3]。NRC(2005)在對(duì)禽類的研究中發(fā)現(xiàn)含硫氨基酸(尤其是半胱氨酸)易與鈷形成復(fù)合物，降低鈷的吸收率。Kincaid等[4]研究表明，奶牛干奶期(尤其是產(chǎn)前55～20 d)血清中維生素B12的含量下降，飼糧中補(bǔ)充鈷可以增加瘤胃中維生素B12的合成量，還可以增加初乳和常乳中維生素B12的含量。Schwarz等[5]對(duì)處于生長(zhǎng)期的奶牛和成熟奶牛的研究證實(shí)機(jī)體所需鈷的量大于NRC的推薦值。這些結(jié)果說(shuō)明不同物種間對(duì)鈷的需要量差異較大。

鈷也可促進(jìn)纖維分解菌活動(dòng)，從而促進(jìn)纖維消化[6]。動(dòng)物一旦缺鈷，就會(huì)出現(xiàn)異嗜、拒食、生長(zhǎng)不良、消瘦和貧血等癥狀，以及血液中維生素B12含量下降、甲基丙二酸和同型半胱胺含量升高、紅細(xì)胞減少、血紅蛋白含量下降等[7-9]。近年來(lái)，鈷因其具有重要的生物學(xué)功能而被營(yíng)養(yǎng)學(xué)家所重視。飼糧中鈷可提高動(dòng)物對(duì)飼料尤其是劣質(zhì)飼料的消化率，Krasnodebska[10]報(bào)道，給飼喂半合成飼糧的閹公羊每天補(bǔ)充1 mg鈷，可使粗纖維消化率提高13.4%。Singh等[11]給犢牛飼喂低質(zhì)牧草并補(bǔ)充尿素，再另外補(bǔ)充鈷后發(fā)現(xiàn)非蛋白氮和其他養(yǎng)分的利用率明顯提高。穆秀梅等[12]研究表明，飼料中添加鈷和維生素B12有利于斷奶羔羊的生長(zhǎng)發(fā)育，增加羔羊的日增重。Hertz等[13]研究指出，飼料中添加鈷使鯉魚(yú)的成活率、受精卵的孵化率、蛋白質(zhì)的合成率等均有提高或改善。但是目前鈷的研究多集中在反芻動(dòng)物和水產(chǎn)動(dòng)物方面，在家兔上鈷的添加是否也能影響到飼糧中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化代謝，目前尚未知。因此，本試驗(yàn)在飼糧中添加不同水平的鈷，通過(guò)測(cè)定飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率、氮代謝和鈷代謝等指標(biāo)，進(jìn)一步確定飼糧中鈷的添加水平，為確定生長(zhǎng)獺兔鈷需要量提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間、地點(diǎn)

飼養(yǎng)試驗(yàn)于2015年10月1日至2015年12月1日在山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院試驗(yàn)基地動(dòng)物試驗(yàn)舍進(jìn)行，兔舍為封閉式平房，水泥地板，采用單籠飼養(yǎng)；樣品測(cè)定在山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院畜牧平臺(tái)實(shí)驗(yàn)室完成。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物分組與飼養(yǎng)管理

選取平均體重為(855.6±22.0) g的35日齡左右的斷奶獺兔200只(公母各占1/2)，按性別和體重隨機(jī)分為5組，每組40個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只試驗(yàn)兔，各組間體重差異不顯著(P>0.05)。5組試驗(yàn)兔分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加0(對(duì)照)、0.1、0.4、1.6、6.4 mg/kg鈷的試驗(yàn)飼糧，制成顆粒后鈷含量實(shí)測(cè)值分別為0.27、0.35、0.60、1.83、6.62 mg/kg?；A(chǔ)飼糧參考De Blas等[14]的生長(zhǎng)兔飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。鈷以硫酸鈷[購(gòu)自廣西南寧益維飼料科技有限公司，鈷含量為(1.00±0.05)%，生產(chǎn)批號(hào)為20150308-5]的形式進(jìn)行添加，預(yù)試期7 d，正試期53 d。試驗(yàn)兔單籠飼養(yǎng)，試驗(yàn)期間早、晚各飼喂1次。試驗(yàn)前對(duì)兔舍、兔籠、料盒和飲水設(shè)備進(jìn)行徹底清洗和消毒，試驗(yàn)期間自然采光和通風(fēng)，自由采食和飲水，3～5 d帶兔消毒兔舍1次。

1.3 樣品采集與制備

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束前6 d，每組隨機(jī)抽取8只試驗(yàn)兔，轉(zhuǎn)移到經(jīng)消毒處理的代謝籠內(nèi)，單籠飼養(yǎng)，并飼喂相應(yīng)的試驗(yàn)飼糧，自由采食和飲水。預(yù)試期3 d，預(yù)試期后連續(xù)3 d收集每只試驗(yàn)兔全天的糞樣和尿樣，4 ℃密封保存，同時(shí)記錄每只試驗(yàn)兔每天的采食量、排糞量和排尿量。鮮糞稱重后，取其中一部分稱重后加10%的硫酸固氮，每天取樣比例相同，然后在烘箱中于65 ℃下烘72 h，稱重即得糞樣的風(fēng)干重，最后將3 d的風(fēng)干糞樣混合粉碎，混勻后-20 ℃冷凍保存待測(cè)。尿樣測(cè)量后，取一定比例盛入備好的250 mL塑料瓶中，加入5 mL濃硫酸固氮，每天取樣比例相同，混勻后置于-20 ℃冷凍保存待測(cè)。

在試驗(yàn)開(kāi)始后的第54天清晨空腹稱重，每組隨機(jī)抽取8只試驗(yàn)兔空腹稱重后立即心臟采血10 mL，分離血清，置于-20 ℃冷凍保存待測(cè)；屠宰后取組織樣品，液氮保存后待測(cè)。

1.4 測(cè)定指標(biāo)和方法

1.4.1 飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率

能量通過(guò)美國(guó)Parr-6200高壓氧彈儀進(jìn)行測(cè)定；干物質(zhì)(DM)含量依據(jù)GB/T 6435—2006所述方法測(cè)定；粗纖維(CF)含量采用酸堿洗滌法測(cè)定；粗蛋白質(zhì)(CP)含量采用凱氏定氮法測(cè)定；粗脂肪(EE)含量采用索氏抽提法測(cè)定；粗灰分(Ash)含量采用高溫灼燒法測(cè)定；中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)、酸性洗滌木質(zhì)素(ADL)含量采用范氏纖維洗滌法測(cè)定；鈣(Ca)含量采用高錳酸鉀滴定法測(cè)定，磷(P)含量采用鉬黃比色法測(cè)定，鈷含量采用GB/T 13884—2003所述方法測(cè)定。上述指標(biāo)具體測(cè)定方法參見(jiàn)張麗英[15]主編的《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》。飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率根據(jù)以下公式計(jì)算：

飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率(%)=100×(食入的

營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)量-糞中相應(yīng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)量)/

食入的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)量。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供Premix provided the following per kg of the diet：VA 12 000 IU，VD3900 IU，VE 50 mg，VK31.5 mg，VB11.5 mg，VB25 mg，VB340 mg，VB550 mg，VB60.5 mg，VB112.5 mg，VB120.02 mg，膽堿 choline 600 mg，生物素 biotin 0.2 mg，K 7 mg，Mg 3 mg，F(xiàn)e 60 mg，Zn 60 mg，Cu 40 mg，Mn 9 mg，I 1 mg，Se 0.2 mg，石粉 limestone 15 000 mg，食鹽 NaCl 5 000 mg，賴氨酸 Lys 1 000 mg，蛋氨酸 Met 2 000 mg，10%桿菌肽鋅10% bacitracin zine 300 mg。

2)消化能為計(jì)算值，其他營(yíng)養(yǎng)水平均為實(shí)測(cè)值。DE was a calculated value, while the others were measured values.

1.4.2 氮代謝指標(biāo)

飼糧、糞和尿中氮含量利用凱氏定氮法進(jìn)行測(cè)定，具體方法參見(jiàn)張麗英[15]主編的《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測(cè)技術(shù)》。氮代謝指標(biāo)根據(jù)以下公式計(jì)算：

可消化氮(digestible nitrogen，DN，g/d)=

食入氮(nitrogen intake，IN)-糞氮

(fecal nitrogen，F(xiàn)N)；

沉積氮(retention nitrogen，RN，g/d)=

IN-FN-尿氮(urinary nitrogen，UN)；

氮表觀消化率(nitrogen apparent digestibility，

NAD，%)=100×DN/IN；

氮利用率(nitrogen utilization rate，NUR，%)=

100×RN/IN；

氮生物學(xué)效價(jià)(nitrogen biological value，

NBV，%)=100×RN/DN。

1.4.3 胰腺消化酶活性

胰腺胰蛋白酶和糜蛋白酶活性分別采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的胰蛋白酶測(cè)試盒和糜蛋白酶測(cè)試盒測(cè)定。具體原理為：胰蛋白酶能催化水解底物精氨酸乙酯的酯鏈，使其在253 nm處的吸光度值升高，根據(jù)吸光度值的變化可以計(jì)算出酶的活性；而糜蛋白酶可以水解酪蛋白產(chǎn)生含酚的氨基酸，酚試劑可被含酚的氨基酸還原成藍(lán)色物質(zhì)，通過(guò)比色可測(cè)定酶的活性。

1.4.4 血清生化指標(biāo)

血清總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)和尿素(UR)含量均采用日本和光純藥工業(yè)株式會(huì)社提供的試劑盒，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)在日立7020型全自動(dòng)分析儀上進(jìn)行測(cè)定。

1.4.5 飼糧、糞、尿及組織中鈷含量

飼糧、糞、肌肉、脾臟、腎臟樣品在105 ℃下烘干后，取適量，在馬福爐中炭化至無(wú)炭粒，然后用HNO3-HClO4(3∶1)消化，煮沸數(shù)分鐘后冷卻，定容過(guò)濾，采用原子吸收分光光度法對(duì)樣品中鈷含量進(jìn)行測(cè)定。血清和尿用HNO3-HClO4(4∶1)消化后，采用原子吸收分光光度法測(cè)定其中鈷含量。

1.5 數(shù)據(jù)處理與分析

用SAS 9.1.3統(tǒng)計(jì)軟件中的GLM程序進(jìn)行數(shù)據(jù)的方差分析，并采用Duncan氏法進(jìn)行數(shù)據(jù)的多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧鈷添加水平對(duì)斷奶至3月齡獺兔飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

由表2可以看出，飼糧鈷添加水平對(duì)飼糧DM、CP和鈷的表觀消化率均無(wú)顯著影響(P>0.05)，但上述指標(biāo)隨飼糧鈷添加水平的升高均有先升高后降低的趨勢(shì)，在1.6 mg/kg鈷添加組中DM和CP的表觀消化率最高，在0.4 mg/kg鈷添加組中鈷的表觀消化率最高。飼糧鈷添加水平對(duì)飼糧能量、EE、Ash、CF、NDF、ADF、ADL、Ca和P的表觀消化率均無(wú)顯著影響(P>0.05)。

2.2 飼糧鈷添加水平對(duì)斷奶至3月齡獺兔氮代謝的影響

由表3可以看出，飼糧鈷添加水平對(duì)IN有顯著影響(P<0.05)，與對(duì)照組相比，0.1 mg/kg鈷添加組IN顯著降低(P<0.05)。飼糧鈷添加水平對(duì)UN、RN、NUR有顯著影響(P<0.05)，隨著飼糧鈷添加水平的升高，RN和NUR先降低后升高再降低，二者均在鈷添加水平為1.6 mg/kg時(shí)最高，而UN則逐漸降低。飼糧鈷添加水平對(duì)FN、DN、NAD、NBV均無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表2 飼糧鈷添加水平對(duì)斷奶至3月齡獺兔飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)無(wú)字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.01)。下表同。

In the same row, values with no or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as below.

表3 飼糧鈷添加水平對(duì)斷奶至3月齡獺兔氮代謝的影響

續(xù)表3項(xiàng)目Items飼糧鈷添加水平DietaryCosupplementallevel/(mg/kg)00．10．41．66．4R?MSEP值P?value可消化氮DN/(g/d)3．723．623．854．004．040．320．0647沉積氮RN/(g/d)2．64ab2．54b2．57b2．99a2．96a0．350．0279氮表觀消化率NAD/%67．8068．1070．9973．9573．375．450．0882氮利用率NUR/%48．29ab47．67b47．38b54．70a54．40a6．160．0345氮生物學(xué)效價(jià)NBV/%71．0869．8666．6974．1774．096．140．1041

2.3 飼糧鈷添加水平對(duì)斷奶至3月齡獺兔胰腺消化酶活性的影響

由表4可以看出，飼糧鈷添加水平對(duì)胰腺胰蛋白酶活性有顯著影響(P<0.05)，對(duì)糜蛋白酶活性無(wú)顯著影響(P>0.05)。隨著飼糧鈷添加水平的升高，胰蛋白酶活性先增加后降低，且在鈷添加水平為1.6 mg/kg時(shí)最高。

表4 飼糧鈷添加水平對(duì)斷奶至3月齡獺兔胰腺消化酶活性的影響

2.4 飼糧鈷添加水平對(duì)斷奶至3月齡獺兔血清生化指標(biāo)的影響

由表5可以看出，飼糧鈷添加水平對(duì)血清UR含量有顯著影響(P<0.05)，隨著飼糧鈷添加水平的升高，血清UR含量先降低后升高，且在鈷添加水平為1.6 mg/kg時(shí)最低。飼糧鈷添加水平對(duì)血清TP和ALB含量無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表5 飼糧鈷添加水平對(duì)斷奶至3月齡獺兔血清生化指標(biāo)的影響

2.5 飼糧鈷添加水平對(duì)斷奶至3月齡獺兔鈷代謝的影響

由表6可以看出，飼糧鈷添加水平對(duì)糞、尿、肌肉、脾臟和腎臟中鈷含量均有顯著影響(P<0.05)，且隨著飼糧鈷添加水平的升高，鈷含量均持續(xù)增加。飼糧鈷添加水平對(duì)血清鈷含量無(wú)顯著影響(P>0.05)。

3 討 論

3.1 飼糧鈷添加水平對(duì)斷奶至3月齡獺兔飼糧營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響

獺兔合成維生素B12需要鈷的參與，而維生素B12作為甲基丙二酰輔酶A變位酶和5-甲基四氫葉酸甲基轉(zhuǎn)移酶的輔酶，參與糖的異生過(guò)程和蛋氨酸合成。在羊上，Becker等[16]發(fā)現(xiàn)缺鈷綿羊?qū)F的表觀消化率顯著高于不缺鈷的綿羊；Pal等[17]發(fā)現(xiàn)飼喂0.25 mg/kg BW的硫酸鈷顯著提高綿羊總碳水化合物、無(wú)氮浸出物和CF的消化率。Kadim等[18]比較了飼喂低水平鈷飼糧和皮下注射2 000 μg鈷山羊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率，結(jié)果發(fā)現(xiàn)低水平鈷飼糧使DM、CP、EE的表觀消化率和消化能均降低。Lopez-Guisa等[19]指出，在低質(zhì)飼糧中給青年牛提供高于NRC推薦量的鈷(0.24 mg/kg)可促進(jìn)低質(zhì)飼糧的消化。Tomlinson等[20]報(bào)道，鈷的營(yíng)養(yǎng)功能除了通過(guò)瘤胃微生物合成維生素B12外，還可提高纖維分解菌的活性，從而促進(jìn)纖維的消化。然而，Saxena等[21]在犢牛飼糧中添加0.25、0.30、0.40 mg/kg鈷后表明，DM、CP、EE和CF的表觀消化率均不受鈷添加水平的顯著影響；Hussein等[22]在體外試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)加高劑量(5～30 mg/kg)的鈷對(duì)DM和CF的表觀消化率沒(méi)有顯著影響；Ki?idayovaás等[23]的體外試驗(yàn)也得出，在含鈷0.2 mg/kg的基礎(chǔ)飼糧中補(bǔ)加鈷(2、4、8 mg/kg)并不能促進(jìn)DM、NDF和ADF的降解。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧鈷添加水平對(duì)獺兔飼糧中各營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率均無(wú)顯著影響，但DM、CP和鈷的表觀消化率隨著飼糧鈷添加水平的升高有先升高后降低的趨勢(shì)。有關(guān)鈷對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率影響的研究較多，但結(jié)果不盡一致，這說(shuō)明鈷對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響存在物種差異性。

表6 飼糧鈷添加水平對(duì)斷奶至3月齡獺兔鈷代謝的影響

3.2 飼糧鈷添加水平對(duì)斷奶至3月齡獺兔氮代謝的影響

鈷作為維生素B12的重要組成部分，與氮的同化、血紅素和肌肉蛋白質(zhì)的合成密切相關(guān)[24]。飼糧缺鈷，則維生素B12的合成緩慢，影響飼糧中含氮物質(zhì)的利用[25]。鈷能促進(jìn)喂以非豆科干草的牛對(duì)尿素的利用和對(duì)纖維素的消化，并能提高牛的生長(zhǎng)速度。Mburu等[26]給東非小山羊飼喂缺鈷飼糧，與飼喂足夠量鈷(硫酸鈷形式)飼糧相比，UN較高，表明瘤胃中飼糧氮的發(fā)酵減少，氮的損失增加，可導(dǎo)致生長(zhǎng)率降低和身體狀況不良。Roginski等[27]報(bào)道，飼糧中添加鈷使鯉魚(yú)的生長(zhǎng)速度、成活率、受精卵的孵化率、蛋白質(zhì)的合成等均有提高或改善。Anadu等[28]報(bào)道，在羅非魚(yú)的飼料中添加氯化鈷，會(huì)使蛋白質(zhì)合成加快。在本試驗(yàn)中，飼糧鈷添加水平對(duì)獺兔FN、DN、NAD、NBV均無(wú)顯著影響，對(duì)IN、UN、RN、NUR有顯著影響，隨著飼糧鈷添加水平的升高，IN、RN和NUR均先降低后升高再降低，UN則逐漸降低，且IN、RN和NUR均在鈷添加水平為1.6 mg/kg時(shí)達(dá)到最大值，說(shuō)明在獺兔飼糧中添加適宜水平的鈷能夠提高蛋白質(zhì)的消化率和利用率，其消化率的提高可能是由于胰腺中蛋白質(zhì)消化相關(guān)酶活性增大所致，而血清中UR含量的降低也間接證明機(jī)體蛋白質(zhì)利用率的提高。血清中TP和ALB含量并未隨飼糧鈷添加水平的變化而發(fā)生顯著變化，這與李慶云等[29]在北京鴨飼糧中添加1.0和2.0 mg/kg鈷顯著提高血漿TP及ALB含量的結(jié)果不一致，這可能是由于所研究物種不同所致。

3.3 飼糧鈷添加水平對(duì)斷奶至3月齡獺兔鈷代謝的影響

利用組織鈷含量作為評(píng)價(jià)鈷營(yíng)養(yǎng)狀況的指標(biāo)，其優(yōu)點(diǎn)在于樣品污染降低，使測(cè)定更為準(zhǔn)確。飼糧鈷吸收的主要部位是小腸后段，與鐵部分共享腸黏膜轉(zhuǎn)運(yùn)通道。動(dòng)物體內(nèi)的鈷含量較低，為0.03～0.06 mg/kg，其中43%分布于肌肉組織，14%分布于骨組織，其余的43%則分布于其他各種軟組織內(nèi)。鈷在肝臟、腎臟中的含量較高、其次是腎上腺、脾臟、胰腺和骨骼組織，其余組織和器官中的含量則較少[30]。血液中鈷含量很低而且變化幅度大，全血鈷含量為38 μg/dL，而血漿鈷含量為0.5～0.7 mg/dL，表明大量的鈷存在于紅細(xì)胞中。血漿中的鈷大部分與α-球蛋白和β-球蛋白形成不穩(wěn)定化合物，少部分以離子形式存在，血液中鈷含量可反映飼糧鈷營(yíng)養(yǎng)的狀況[31]。在本研究中，血清鈷含量未隨飼糧鈷添加水平的變化而發(fā)生顯著變化。已有研究表明動(dòng)物血清中的元素含量相對(duì)穩(wěn)定，一般不受元素添加量的影響，而肝臟是元素主要的代謝器官，受飼糧中元素含量的影響較大，一般與飼糧元素添加量呈正相關(guān)[32-34]。在本研究中，獺兔肌肉、肝臟和腎臟中鈷含量均隨著飼糧鈷添加水平的升高而持續(xù)增加。鈷主要以陽(yáng)離子形式隨尿排出，少量與膽汁一起排泄，未被利用的鈷大部分隨糞排出，隨著飼糧鈷添加水平的增加，尤其是6.4 mg/kg鈷添加組，其糞和尿中鈷含量顯著高于其他各組，這可能是由于飼糧中鈷添加過(guò)量所致。

4 結(jié) 論

綜合本試驗(yàn)測(cè)定指標(biāo)，斷奶至3月齡獺兔飼糧鈷適宜添加水平為0.4～1.6 mg/kg(飼糧中鈷含量實(shí)測(cè)值為0.60～1.83 mg/kg)。

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*Contributed equally

**Corresponding author, professor, E-mail: chlf@sdau.edu.cn

(責(zé)任編輯 菅景穎)

Effects of Dietary Cobalt Supplemental Level on Digestion and Metabolism of Weaned to 3-Month-Old Rex Rabbits

GAO Qin1LIU Lei1*LIU Gongyan1SUN Haitao2LI Fuchang1**

(1.CollegeofAnimalScienceandTechnology,ShandongAgriculturalUniversity,Tai’an271018,China; 2.AnimalHusbandryandVeterinaryInstitute,ShandongAcademyofAgriculturalSciences,Jinan250100,China)

This experiment was conducted to study the effects of dietary cobalt supplemental level on dietary nutrient apparent digestibility, nitrogen metabolism, digestive enzyme activities in pancreas, serum biochemical indices and cobalt metabolism of weaned to 3-month-old Rex rabbits. Two hundred weaned Rex rabbits with the similar body weight were randomly assigned into 5 groups with 40 replicates in each group and each replicate contained 1 rabbit. Rabbits in 5 groups were fed experimental diets which supplemented with 0, 0.1, 0.4, 1.6 and 6.4 mg/kg cobalt ((in the form of cobalt sulfate)) on the basis of a basal diet, respectively. The trial lasted for 7 days for adaptation and 53 days for feeding test. The results showed that dietary cobalt supplemental level had no significant influence on dietary nutrient apparent digestibility (P>0.05), but with the increase of dietary cobalt supplemental level, the apparent digestibility of dietary dry matter (DM), crude protein (CP) and cobalt tended to be increased firstly and then decreased, and the highest DM and CP apparent digestibility appeared in 1.6 mg/kg cobalt supplementation group and the highest cobalt apparent digestibility appeared in 0.4 mg/kg cobalt supplementation group. Dietary cobalt supplemental level had no significant influences on fecal nitrogen (FN), digestible nitrogen (DN), nitrogen apparent digestibility (NAD) and nitrogen biological value (NBV) (P>0.05), but had significant influences on nitrogen intake (NI), urinary nitrogen (UN), retention nitrogen (RN) and nitrogen utilization rate (NUR) (P<0.05). With the increase of dietary cobalt supplemental level, NI, RN and NUR tended to be decreased firstly and then increased, UN gradually tended to be decreased, and the highest NI, RN and NUR all appeared in 1.6 mg/kg cobalt supplementation group. Dietary cobalt supplemental level had significant influence on trypsin activity in pancreas (P<0.05), and the highest value appeared in 0.4 mg/kg cobalt supplementation group. Dietary cobalt supplemental level had significant influence on serum urea (UR) content (P<0.05), with the increase of dietary cobalt supplemental level, the serum UR content tended to be decreased firstly and then increased, and the lowest value appeared in 1.6 mg/kg cobalt supplementation group. Dietary cobalt supplemental level had no significant influences on serum total protein (TP) and albumin (ALB) contents (P>0.05). Dietary cobalt supplemental level had significant influences on the content of cobalt in fecal, urine, muscle, spleen and kidney (P<0.05), with the increase of dietary cobalt supplemental level, the content of cobalt in fecal, urine, muscle, spleen and kidney continued to be increased. Considering all indices of this experiment, appropriate dietary cobalt supplemental level is 0.4 to 1.6 mg/kg (the actual measured content of cobalt in the diet is 0.60 to 1.83 mg/kg) for weaned to 3-month-old Rex rabbits.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(3)：1082-1091]

cobalt; Rex rabbits; nutrient apparent digestibility; nitrogen metabolism; cobalt metabolism

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.03.043

2016-09-06

中國(guó)博士后科學(xué)基金(2015M58061)；山東農(nóng)業(yè)大學(xué)博士后科學(xué)基金(2015—2017)；山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)(SDAIT-21-12)；現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(CARS-44-B-1)；山東省農(nóng)業(yè)重大應(yīng)用技術(shù)創(chuàng)新課題(肉、獺兔高效高產(chǎn)技術(shù)研究、集成與推廣)；山東農(nóng)業(yè)大學(xué)青年科技創(chuàng)新基金項(xiàng)目(2015—2016)

高 琴(1990—)，女，山東棗莊人，碩士研究生，從事家兔營(yíng)養(yǎng)與代謝研究。E-mail: 634747303@qq.com

S816

A

1006-267X(2017)03-1082-09

*同等貢獻(xiàn)作者

**通信作者:李福昌，教授，博士生導(dǎo)師，E-mail: chlf@sdau.edu.cn