摘 要 松材線蟲病是松樹的一種毀滅性病害，對(duì)我國(guó)松林資源、自然景觀和生態(tài)環(huán)境造成了嚴(yán)重破壞。簡(jiǎn)介松材線蟲病的診斷方法，包括外部癥狀診斷、病原線蟲鑒定診斷、輔助診斷技術(shù)等，提出重慶市巴南區(qū)松材線蟲病的主要防控措施：布設(shè)APF-Ⅰ誘捕器誘捕松墨天牛；飛機(jī)噴藥防治；人工伐除病樹。

關(guān)鍵詞 松材線蟲?。辉\斷；防控措施；重慶市巴南區(qū)

中圖分類號(hào)：S763.7 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2017.28.020

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松材線蟲?。˙ursaphelenchus xylophilus）又稱松樹萎蔫病，是松樹的一種毀滅性流行病[1]。在我國(guó)，松墨天牛（Monochamus alternatus Hope ）是它的主要傳媒昆蟲。松材線蟲病致病力強(qiáng)，寄主死亡速度快；傳播快，常常猝不及防；一旦發(fā)生，治理難度大，已被我國(guó)列入對(duì)內(nèi)、對(duì)外的森林植物檢疫對(duì)象。松材線蟲病自2003年傳入重慶市巴南區(qū)以來(lái)，疫點(diǎn)由最初的麻柳嘴、豐盛2個(gè)鎮(zhèn)，發(fā)展到現(xiàn)在的22個(gè)鎮(zhèn)街4個(gè)國(guó)有林場(chǎng)，對(duì)巴南區(qū)現(xiàn)有松林資源、生態(tài)景觀和林業(yè)經(jīng)濟(jì)造成了極大破壞和嚴(yán)重威脅。

巴南區(qū)10余年的防控經(jīng)驗(yàn)表明，加強(qiáng)對(duì)松材線蟲病的監(jiān)測(cè)，運(yùn)用簡(jiǎn)單易行的診斷方法，及時(shí)發(fā)現(xiàn)疫情，徹底清除病樹，是控制疫情擴(kuò)散的重要手段。筆者結(jié)合巴南區(qū)監(jiān)測(cè)、防控的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，通過(guò)系統(tǒng)學(xué)習(xí)，總結(jié)出對(duì)巴南區(qū)現(xiàn)行的松材線蟲病診斷技術(shù)和防控措施。

巴南區(qū)現(xiàn)有松林以馬尾松為主，診斷馬尾松是否感染松材線蟲病，可根據(jù)感病松樹的外部癥狀和病原線蟲的鑒定來(lái)確定。松材線蟲病的典型癥狀表現(xiàn)為4個(gè)階段：1）初期，感病松樹外部無(wú)明顯癥狀，但剝開(kāi)松樹皮會(huì)發(fā)現(xiàn)松脂分泌減少；2）松針無(wú)光、變黃，松脂分泌停止，并能發(fā)現(xiàn)天?？滩郛a(chǎn)卵痕跡；3）大部分針葉變黃，植株開(kāi)始枯萎；4）整株針葉變?yōu)榧t褐色或褐色，且當(dāng)年倒掛于樹枝上不脫落，整株松樹枯死。

1診斷技術(shù)

1.1外部癥狀診斷

馬尾松感病后，據(jù)外部癥狀表現(xiàn)可分為當(dāng)年枯死型、次年枯死型、枝條枯死型3種。

1.1.1 當(dāng)年枯死型

在巴南區(qū)，大部分馬尾松感病后，于當(dāng)年秋天就表現(xiàn)為全株枯死。

1.1.2 次年枯死型

在巴南區(qū)海拔較高的圣燈山及溫度相對(duì)較低的石灘鎮(zhèn)等地，每年均能發(fā)現(xiàn)部分感病的馬尾松當(dāng)年不枯死，而在次年4—5月枯死。

1.1.3 枝條枯死型

有些馬尾松在不利的發(fā)病條件下，感病后并未表現(xiàn)為全株枯死，而是僅有少量枝條枯死，但是隨著時(shí)間推移，枯死的枝條逐漸增多，直至全株枯死。

筆者通過(guò)查閱《巴南年鑒》（2005—2006年）發(fā)現(xiàn)，2006年，干旱導(dǎo)致了巴南區(qū)大量馬尾松枯死。干旱致死的松樹，其針葉變色是從樹冠新葉開(kāi)始變黃或變紅，再到基部老葉；而感染松材線蟲病致死的松樹，針葉變色則是由基部老葉向樹冠新葉變化；干旱枯死的松樹去皮后有松脂流出，而感病致死的松樹去皮后無(wú)松脂流出。2006年，干旱還引發(fā)了山火，造成大量馬尾松過(guò)火死亡，通過(guò)查閱當(dāng)年松材線蟲病的防控總結(jié)，對(duì)比松材線蟲病感病特征，發(fā)現(xiàn)兩者最大區(qū)別是火燒樹去皮后有松脂流出，而感病松樹無(wú)松脂流出[2]。

1.2病原線蟲鑒定診斷

根據(jù)感病馬尾松的外部癥狀表現(xiàn)只能初步診斷，要確診枯死馬尾松是否為松材線蟲病所致，應(yīng)對(duì)枯死松樹進(jìn)行取樣分離鑒定，檢測(cè)松樹體內(nèi)是否攜帶松材線蟲。

1.2.1 形態(tài)學(xué)鑒定

松材線蟲的形態(tài)學(xué)鑒定，一般采用貝爾曼漏斗法將線蟲與植物組織分離，熱殺后制成臨時(shí)玻片進(jìn)行觀察，用電子顯微鏡在4倍物鏡下找到線蟲，在40倍物鏡下鑒定線蟲的形態(tài)特征。松材線蟲熱殺死后，雌蟲呈“（”形，雄蟲呈“J”形。松材線蟲唇區(qū)高，溢縮明顯，前喙圓；口針細(xì)，基部微膨大；中食道球卵圓形，占體寬的2/3以上；排泄孔開(kāi)口大致和食道與腸交接處平行；雌蟲單卵巢，陰門位于蟲體中后部73%處，有“指甲形”陰門蓋；尾部末端呈指形，少數(shù)松材線蟲尾部有一短小尾尖突（<2 μm）；雄蟲交合刺大，弓形成對(duì)，喙突明顯，交合刺遠(yuǎn)端膨大如盤狀，尾部圓錐形，末端包被一卵形交合傘。松材線蟲幼蟲蟲體前部和成蟲相似，后部因腸內(nèi)積聚大量顆粒狀內(nèi)含物而呈暗色且結(jié)構(gòu)模糊。

應(yīng)用線蟲形態(tài)學(xué)鑒定時(shí)，要注意區(qū)分?jǐn)M松材線蟲。因擬松材線蟲與松材線蟲在形態(tài)上極為相似，兩者主要區(qū)別在于：松材線蟲雌成蟲尾部呈指形，少數(shù)松材線蟲尾部有一短小尾尖突（長(zhǎng)度不超過(guò)2 μm），而擬松材線蟲雌成蟲尾部呈圓錐形，末端有尾尖突 （長(zhǎng)度超過(guò)3.5 μm）；松材線蟲雄成蟲交合傘為卵圓形，擬松材線蟲雄成蟲交合傘為板狀，端部平截[3]。

1.2.2 分子鑒定

線蟲的DNA較為穩(wěn)定，適宜作為鑒定物質(zhì)[4]。自20世紀(jì)80年代末以來(lái)，國(guó)內(nèi)外較多學(xué)者將分子生物學(xué)技術(shù)引入松材線蟲的檢測(cè)研究中[5]。筆者在南京林業(yè)大學(xué)松材線蟲病檢測(cè)鑒定技術(shù)培訓(xùn)期間了解到，南京林業(yè)大學(xué)已成功開(kāi)發(fā)出了一系列松材線蟲分子檢測(cè)方法，包括RAPD、SCAR標(biāo)記、RFLP、實(shí)時(shí)PCR等檢測(cè)方法以及非放射性雜交檢測(cè)方法等[6]，其中SCAR標(biāo)記、實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)方法具有穩(wěn)定性好、檢測(cè)靈敏度高、檢測(cè)過(guò)程無(wú)污染、檢測(cè)時(shí)間短、檢測(cè)準(zhǔn)確性高、結(jié)果判讀容易等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于我國(guó)14個(gè)省、自治區(qū)的松材線蟲檢測(cè)鑒定實(shí)踐中。松材線蟲分子檢測(cè)鑒定雖然克服了一些形態(tài)學(xué)鑒定的缺陷，但此類技術(shù)在林業(yè)基層單位難以開(kāi)展，只適于科研院所、海關(guān)等技術(shù)設(shè)備較先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用。

1.3輔助診斷方法

1.3.1 打孔流膠法診斷

使用錘子和打孔器在松樹樹干胸高處打1個(gè)直徑10～15 mm的圓孔，深度至木質(zhì)部，根據(jù)松樹流膠能力分為5個(gè)等級(jí)。一級(jí)：樹脂從孔口外流，滲出量很多；二級(jí)：樹脂從孔口外流，滲出量較多；三級(jí)：樹脂沉積在孔口下緣；四級(jí)：樹脂滲出在圓孔壁上，呈粒狀；五級(jí)：孔壁上無(wú)樹脂流出。一般將三級(jí)以上流膠作為感病依據(jù)[7]。據(jù)陳鳳毛研究，此方法適用于松材線蟲病發(fā)生地區(qū)或其邊緣的外觀正常且無(wú)針葉變色松樹的初步診斷。另外，由于流膠受樹齡、溫度等因素影響，因此，一般在春、夏、秋季，打孔24 h后即可進(jìn)行觀察，冬季則在48～72 h后進(jìn)行觀察。

1.3.2 誘捕器監(jiān)測(cè)

松墨天牛是松材線蟲的傳播媒介，可通過(guò)誘捕松墨天牛來(lái)防控松材線蟲病。每年4—10月（松墨天牛羽化期）在馬尾松林內(nèi)布設(shè)APF-Ⅰ型松墨天牛誘捕器，要求2個(gè)誘捕器之間距離50 m，每個(gè)誘捕器距地面2 m以上。將誘捕到的松墨天牛的表面沖凈、剪碎后用貝爾曼漏斗法進(jìn)行分離，用顯微鏡鏡檢鑒定線蟲。此法簡(jiǎn)單易行，尤以松墨天牛羽化高峰期的檢測(cè)效率高。

1.3.3 線蟲檢測(cè)管

在樹干上用電鉆鉆1個(gè)與線蟲檢測(cè)管直徑相同的圓孔（直徑約1 cm），深度達(dá)木質(zhì)部，然后將線蟲檢測(cè)管插入孔內(nèi)，1～4 d后拔出檢測(cè)管，通過(guò)檢視管壁凝結(jié)水內(nèi)有無(wú)蠕動(dòng)線蟲，再鑒定是否為松材線蟲[8]。此法可在松材線蟲侵染早期、線蟲密度較小時(shí)，成功檢測(cè)出松樹是否被線蟲侵染，簡(jiǎn)單易行，既避免了大量毀樹取樣，起到保護(hù)生態(tài)環(huán)境的作用，又減輕了基層森防機(jī)構(gòu)檢驗(yàn)檢疫人員的工作量，應(yīng)用前景廣闊。

2防控措施

2.1布設(shè)APF-Ⅰ誘捕器防治松墨天牛

利用性成熟的松墨天牛對(duì)特定化學(xué)氣味具有趨向性，每年4—10月（松墨天牛羽化期），巴南區(qū)在馬尾松林內(nèi)布設(shè)APF-Ⅰ型松墨天牛誘捕器，要求2個(gè)誘捕器之間距離50 m，每個(gè)誘捕器距地面2 m以上，每15 d更換1次誘芯，誘捕松墨天牛。2013年布設(shè)誘捕器300部，誘捕天牛54 623頭，平均每部誘捕182頭；2014年布設(shè)880部，誘捕松墨天牛152 214頭，平均每部誘捕172頭；2015年布設(shè)2 870部，誘捕松墨天牛

417 978頭，平均每部誘捕約145頭；2016年布設(shè)4 800部，誘捕松墨天牛335 120頭，平均每部誘捕約70頭。通過(guò)近4年的數(shù)據(jù)可以看出，利用此誘捕器可以提高松墨天牛的防治效果，大量減少松林內(nèi)松墨天牛成蟲數(shù)量，使其后代的種群數(shù)量逐年減少，從而間接控制松材線蟲病。

2.2飛機(jī)噴藥防治

巴南區(qū)自2015年開(kāi)始，連續(xù)2年采用飛機(jī)噴灑高效、低毒、低殘留的綠色威雷微膠囊劑防治松墨天牛。每年5月下旬、7月上旬開(kāi)展2次飛防，每次均對(duì)1 700 hm2重點(diǎn)松林噴灑3 320 kg藥劑，使松墨天牛蟲口密度大大降低，這也使得APF-Ⅰ誘捕器誘捕到的松墨天牛數(shù)量大量減少。飛機(jī)噴藥防治對(duì)防控全區(qū)松材線蟲病起到了極為重要的作用，有效保證了全區(qū)森林資源的安全。

2.3人工伐除病樹

人工伐除是指用人工砍伐所有枯病死松樹，減少枯病死松樹的數(shù)量，并進(jìn)行除害處理，殺死其中的松材線蟲和松墨天牛，降低蟲口密度，防止松材線蟲病的擴(kuò)散蔓延，減輕松材線蟲病的為害。每年10月底至次年2月底，巴南區(qū)按照《松材線蟲病除治技術(shù)規(guī)程》開(kāi)展山場(chǎng)枯病死樹的集中除治，伐除枯死木、瀕死木、衰弱木等，并將直徑1 cm以上的松木枝椏、松木段進(jìn)行焚燒至完全炭化；伐樁高度嚴(yán)格控制在5 cm以下，因?yàn)榉哆^(guò)高可能誘集松墨天牛產(chǎn)卵。伐樁剝皮后，根據(jù)其大小投放磷化鋁1～2片，再進(jìn)行套袋、覆土處理。

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（助理編輯：易 婧；責(zé)任編輯：丁志祥）