＊成霈 王妍 郭松年

(西安市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗院 西安 710065)

超高效液相色譜法測定濕巾中的苯扎氯銨含量

＊成霈 王妍 郭松年

(西安市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗院 西安 710065)

采用超高效液相色譜法測定濕巾中的苯扎氯銨含量。稱取一定量濕巾樣品加甲醇-水（體積比1:1）超聲、振蕩提取后，離心過濾，上機(jī)測定，外標(biāo)法定量。結(jié)果表明：該方法在1～50mg/L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)十二烷基二甲基芐基氯化銨和十四烷基二甲基芐基氯化銨線性良好，相關(guān)系數(shù)分別為0.9998和0.9997，檢測限分別為0.50mg/L和0.60mg/L，RSD分別為0.97%和1.45%，加標(biāo)回收率分別為88.20～91.96%和89.70～92.10%。該方法前處理簡便快捷，準(zhǔn)確度、精密度、穩(wěn)定性好，檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

濕巾；苯扎氯銨；超高效液相色譜

引言

苯扎氯銨是一種陽離子表面活性劑，屬于非氧化性殺菌劑，具有廣譜、高效的殺菌滅藻能力，對革蘭氏陽性菌和陰性菌，某些滴蟲、原蟲和真菌有效，常作為防腐劑和殺菌劑應(yīng)用于衛(wèi)生濕巾中。苯扎氯銨是由正烷烴基取代二甲基芐基氯化銨組成的同系物混合物，其中以十二烷基二甲基芐基氯化銨（DDBAC）和十四烷基二甲基芐基氯化銨（TDBAC）最為常見。苯扎氯銨對人體的皮膚和眼睛都具有強(qiáng)烈的刺激作用，國內(nèi)已報道過量使用苯扎氯銨會引起變態(tài)反應(yīng)性結(jié)膜炎、視力減退、接觸性皮炎，灼傷中毒，嚴(yán)重者甚至可能導(dǎo)致死亡。根據(jù)衛(wèi)生部編寫的《消毒產(chǎn)品標(biāo)簽說明書管理規(guī)范》含有苯扎氯銨的衛(wèi)生濕巾用品最小銷售標(biāo)簽應(yīng)當(dāng)標(biāo)注所用含量、使用方法、使用范圍和注意事項。目前我國尚未制定相關(guān)檢測方法標(biāo)準(zhǔn)，導(dǎo)致相關(guān)部門監(jiān)管困難。本文采用超高效液相色譜法測定濕巾中的苯扎氯銨含量，并應(yīng)用于餐飲及市售領(lǐng)域采集樣品中苯扎氯銨含量的測定，結(jié)果滿意。

1.實驗部分

(1)儀器與試劑

DDBAC、TDBAC標(biāo)準(zhǔn)品，w=100．0%，美國Dr．Ehrenstorfer公司；甲醇，色譜純，美國Honeywell公司；三乙胺、庚烷磺酸鈉，分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司。UPLC液相色譜儀，配有二極管陣列檢測器，美國Waters公司。準(zhǔn)確稱取0．10g DDBAC、TDBAC標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇-水（v：v=1∶1）溶解并定容至10mL得到10mg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液，再用甲醇-水（v：v=1∶1）逐級稀釋為1、2、4、8、10、20、50 mg/L質(zhì)量濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)系列。

(2)樣品處理

準(zhǔn)確稱取濕巾樣品1．00g于離心管中，加入20．0mL甲醇-水（v：v=1∶1）超聲10min，振蕩提取20min后以3000 r/ min離心5min，取上清液用針式過濾器凈化，上機(jī)進(jìn)行測定。

(3)色譜條件

ACQUITY UPLC T3液相色譜柱，2．1mm×100mm，1．8μm；柱溫30℃，進(jìn)樣量2μL，流動相為甲醇-0．2mol/L庚烷磺酸鈉+ 1%三乙胺（冰醋酸調(diào)PH=6）（v：v=88∶12），流速0．2mL/ min，檢測波長210nm。

2.結(jié)果與討論

(1)苯扎氯銨混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

在1．3色譜條件下，苯扎氯銨混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖見圖1。由圖1可以看出DDBAC、TDBAC基線平穩(wěn)，分離良好，能夠保證定量結(jié)果準(zhǔn)確。

圖1 苯扎氯銨混合標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖Fig.1 The chromatograms of benzalkonium chloride standard

(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線、檢測限和線性范圍

在1．3色譜條件下對苯扎氯銨混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測定，以質(zhì)量濃度（ρ）為橫坐標(biāo)，峰面積（A）為縱坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)校正曲線。結(jié)果表明，在質(zhì)量濃度為1～50mg/L范圍內(nèi)苯扎氯銨混合標(biāo)準(zhǔn)溶液線性良好，DDBAC的回歸方程為A=1．11×104ρ+6．67×103，r=0．9998，TDBAC的回歸方程為A=5．25×103ρ+2．84×102，r=0．9997。將甲醇-水（v：v=1∶1）空白對照與4mg/L苯扎氯銨混合標(biāo)準(zhǔn)溶液按1．3色譜條件重復(fù)測定20次，按GB/T16631-2008《高效液相色譜法通則》中“獲得最小檢測限的方法”計算DDBAC和TDBAC的檢測限分別為0．5mg/L和0．6mg/L。

(3)精密度

將4mg/L苯扎氯銨混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液按1．3色譜條件重復(fù)測定9次，計算得DDBAC的RSD=0．97%，TDBAC的RSD=1．45%。

(4)回收率

取4組濕巾樣品分別準(zhǔn)確稱取3份1．00 g于離心管中，其中2份分別加入10、50mg/L的苯扎氯銨混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液3mL后混勻，1份作為空白，再按1．2樣品處理后依照1．3色譜條件上機(jī)測定，以外標(biāo)法定量，計算濕巾樣品的加標(biāo)回收率結(jié)果見表1。結(jié)果表明，4組濕巾樣品中DDBAC不同濃度水平添加的加標(biāo)回收率為88．20～91．96%，TDBAC不同濃度水平添加的加標(biāo)回收率為89．70～92．10%，能夠滿足濕巾樣品的檢測要求。

表1 濕巾樣品加標(biāo)回收試驗結(jié)果Table1 The results of Sample recovery

(5)樣品提取方法的選擇

將3組含有苯扎氯銨的濕巾樣品分別采用體積比為2∶8、1∶1、8∶2的甲醇-水、乙腈-水溶液以及100%甲醇、100%乙腈、水作為提取溶劑處理，結(jié)果發(fā)現(xiàn)水溶液提取樣品的檢測結(jié)果最低，甲醇-水（v：v=1∶1）溶液提取樣品的檢測結(jié)果最高，而且色譜峰形良好，因此最終確定甲醇-水（v：v=1∶1）溶液作為提取溶劑。根據(jù)市售濕巾樣品中苯扎氯銨含量的檢測結(jié)果和標(biāo)示使用量，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍，選擇20倍的樣品稀釋倍數(shù)。

將3組濕巾樣品分別稱取3份，用20 mL甲醇-水（v：v= 1∶1）溶液提取3次，將3次提取液分別上機(jī)測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)第1次提取液檢測結(jié)果最高，第2、3次提取液的檢測結(jié)果近乎為零，故確定樣品經(jīng)甲醇-水（v：v=1∶1）溶液提取一次后，凈化上機(jī)測定。

(6)樣品檢測結(jié)果

對餐飲及市售領(lǐng)域采集的不同廠家的36種濕巾樣品按上述方法進(jìn)行檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)所抽樣品中有12種濕巾產(chǎn)品添加了苯扎氯銨作為殺菌劑，而且含量頗高，除其中2種濕巾外包裝上標(biāo)示含有苯扎氯銨外，其余10種均未按照衛(wèi)生部《消毒產(chǎn)品標(biāo)簽說明書管理規(guī)范》在其最小銷售標(biāo)簽上標(biāo)注含有苯扎氯銨，因此可能對消費者產(chǎn)生誤導(dǎo)。

3.結(jié)論

本文采用超高效液相色譜法測定濕巾中苯扎氯銨的含量，前處理快捷方便，穩(wěn)定性、準(zhǔn)確度、精密度良好，檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。應(yīng)用該方法對市售濕巾進(jìn)行抽樣檢測，結(jié)果表明部分所抽檢濕巾未按《消毒產(chǎn)品標(biāo)簽說明書管理規(guī)范》在最小銷售標(biāo)簽標(biāo)注含有苯扎氯銨及其含量，有可能誤導(dǎo)消費者。

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Measurement of Benzalkonium Chloride Content in Moist Wipes by Super-efficient Liquid Chromatography Method

Cheng Pei, Wang Yan, Guo Songnian

（Xi’an Product Quality Monitoring and Inspection Institute, Xi’an, 710065）

Adopt super-efficient liquid chromatography method to measure the benzalkonium chloride content in moist wipes. Weigh and take certain quantity of moist wipes samples and then add methyl alcohol-water(volume ratio 1∶1) ultrasound，after shaking and extracting, take the centrifugal filtration, measurement by practical operation and external standard method measurement. The result has showed that this method, in the mass concentration range of 1-50mg/L, the linearity of dodecyl dimethyl benzyl ammonium chloride and tetradecyl benzyl dimethyl ammonium chloride is good and the related coefficient respectively are 0.9998 and 0.9997, besides, the detection limit respectively of 0.50 mg/L and 0.60 mg/L, RSD respectively of 0.97% and 1.45%, adding standard recovery respectively of 88.20～91.96% and 89.70～92.10%. This processing method is simple and fast with good accuracy, degree of precision and stability and the detection result is accurate and reliable.

moist wipes；benzalkonium chloride；super-efficient liquid chromatography

TQ

A

((責(zé)任編：盧鳳英)

國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局科技計劃項目“濕巾中常用保濕劑和殺菌劑的檢驗方法研究（2015QK202）”。

成霈（1982～），男，西安市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗院，研究方向：質(zhì)譜分析、色譜分析。