魏秋霞，楊 建，郭 莉，侯 巍，劉 梅

(1.四川省雅安市農(nóng)業(yè)局動物疫病預(yù)防控制中心，四川 雅安 625000；2.四川省動物疫病預(yù)防控制中心，四川 成都 610047；3.四川省蘆山縣農(nóng)業(yè)局動物疫病預(yù)防控制中心，四川 蘆山 625600)

狂犬病活疫苗免疫后抗體檢測結(jié)果及其分析

魏秋霞1，楊 建1，郭 莉2，侯 巍2，劉 梅3

(1.四川省雅安市農(nóng)業(yè)局動物疫病預(yù)防控制中心，四川 雅安 625000；2.四川省動物疫病預(yù)防控制中心，四川 成都 610047；3.四川省蘆山縣農(nóng)業(yè)局動物疫病預(yù)防控制中心，四川 蘆山 625600)

為了解狂犬病活疫苗免疫效果，對雅安市8縣(區(qū))的農(nóng)村犬(狂犬病活疫苗免疫后)進行隨機抽樣，用ELISA方法檢測免疫抗體，對免疫抗體合格率及對免疫抗體合格率可能有影響的因素進行統(tǒng)計分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，調(diào)查的犬抗體總合格率為77.68%，不同縣(區(qū))的犬血清免疫抗體合格率差異較大，最高的達到100%，最低的僅為40%；使用不同疫苗廠家疫苗、不同的免疫時間對狂犬病免疫抗體合格率均存在顯著性影響。

狂犬?。幻庖呖贵w；合格率；影響

狂犬病(Rabies)又稱恐水癥，是由狂犬病毒引起的一種人獸共患接觸性傳染病。我國是狂犬病疫情較嚴重的國家之一，人間病例數(shù)量一直位于各類傳染病報告死亡數(shù)的前3位。感染犬仍是我國人狂犬病的主要傳染來源，對犬只進行疫苗免疫是預(yù)防、控制狂犬病發(fā)生最有效的途徑，而免疫后抗體水平的高低是評估實際免疫效果的重要指標。

我國狂犬病主要流行于農(nóng)村，農(nóng)村犬大多不進行拴養(yǎng)，犬之間以及犬與人的接觸機會較多，存在較大的犬間狂犬病傳播和人狂犬病發(fā)生風險。我市農(nóng)村飼養(yǎng)犬占全市犬總數(shù)的80%以上，為了解農(nóng)村犬狂犬病疫苗免疫效果，本試驗對全市8縣(區(qū))農(nóng)村犬隨機抽樣進行調(diào)查，以期為全市有效防控狂犬病提供一定的科學依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 試驗疫苗 狂犬病活疫苗(Flury株)，分別來自國產(chǎn)疫苗廠家A、疫苗廠家B和疫苗廠家C。

1.1.2 血清樣品 2016年7月4～12日，對我市8個縣(區(qū))內(nèi)農(nóng)村犬進行簡單隨機抽樣，共計血清樣品327份。按常規(guī)方法，采集犬血液進行血清分離(無嚴重溶血)，然后置于-20℃保存待用，使用前血清經(jīng)56℃熱滅活30min。

1.1.3 檢測試劑 犬狂犬病毒抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)，購自深圳市康百得生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 犬只免疫時間和免疫劑量等情況 抽樣犬只均為農(nóng)村犬，所調(diào)查犬都進行了狂犬病疫苗免疫，且均為單聯(lián)活疫苗，免疫時間均在2016年3～6月期間，免疫劑量嚴格按各廠家疫苗說明書使用，均免疫1次。

1.2.2 檢測方法 嚴格按照廠家酶聯(lián)免疫法試劑盒說明、檢驗方法操作，設(shè)置陽性、陰性及空白對照。

1.2.3 結(jié)果判定 只有陰性對照孔平均OD值≤0.15，臨界對照平均OD值≥0.30，試驗結(jié)果才有效。樣本OD值≥臨界對照OD值時，判為狂犬病毒抗體陽性，且抗體水平高于0.5IU/mL；樣本OD值<臨界對照OD值時，判為狂犬病毒抗體陰性,且抗體水平低于0.5IU/mL。

1.2.4 統(tǒng)計分析 所有數(shù)據(jù)用Microsoft Excel、SPSS19.0進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果

2016年3～6月，全市各縣(區(qū))對轄區(qū)內(nèi)犬只進行了摸底調(diào)查統(tǒng)計，并開展集中免疫。農(nóng)村犬均采用單聯(lián)活疫苗，農(nóng)村犬免疫覆蓋率達到了96.79%，本次調(diào)查采集的均為疫苗免疫后的犬血清樣品。試驗檢測結(jié)果顯示：陰性對照平均值<0.15(減去了空白對照)，臨界對照平均值>0.70(減去了空白對照)，試驗結(jié)果有效。

2.1 不同縣(區(qū))的犬狂犬病抗體檢測情況

對327份犬血清樣品進行狂犬病抗體的檢測，結(jié)果有254份血清抗體水平合格，總合格率為77.68%。不同縣(區(qū))的犬血清抗體水平差異較大，最高的達到100%，最低的僅為40%。對不同區(qū)域犬的狂犬病抗體合格率進行分析，發(fā)現(xiàn)不同區(qū)域的犬抗體合格率存在差異，其中縣E、縣G與其它6個縣(區(qū))的合格率差異極其顯著(P<0.01)。具體如表1所示。

表1 各縣(區(qū))狂犬病免疫抗體合格率比較

2.2 不同生產(chǎn)廠家的疫苗對免疫抗體合格率的影響

本次調(diào)查的犬免疫的均為狂犬病活疫苗，免疫程序均為1次/年，免疫保護期為1年。共采集了327只犬的血清樣品。其中177只犬使用了國產(chǎn)疫苗A，62只犬使用了國產(chǎn)疫苗B，88只犬使用了國產(chǎn)疫苗C，抗體合格數(shù)、合格率如表2所示。經(jīng)統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，3個廠家的疫苗免疫后抗體合格率均在70%以上，疫苗A、疫苗B免疫所產(chǎn)生的抗體合格率差異不大，但二者免疫抗體合格率與疫苗C差異極其顯著(P<0.01)。

表2 不同疫苗廠家對狂犬病免疫抗體合格率影響

2.3 不同免疫時間對免疫抗體合格率影響

如表3所示，此次檢測樣品按這4個免疫時間段統(tǒng)計，每個時間段免疫的抗體合格率均大于70%，免疫時間與抗體合格率之間存在相關(guān)性，差異顯著，尤其是6月以后免疫的抗體合格率(6月后免疫時間已達到狂犬病疫苗免疫后要求的監(jiān)測時間間隔)與其它3組的合格率差異極其顯著(P<0.01)。

表3 免疫時間對免疫抗體合格率影響

3 討論

世界衛(wèi)生組織(WHO)認為，預(yù)防人類狂犬病最具成本效益的戰(zhàn)略是為犬類接種疫苗并消除犬類狂犬病。目前國際上公認犬有效免疫率達到70%以上，即可有效控制狂犬病的傳播。因此，要控制狂犬病在人間傳播，對本地區(qū)的犬類進行狂犬病疫苗的免疫及免疫效果評價尤為重要。本次監(jiān)測調(diào)查結(jié)果顯示，全市犬只免疫抗體總合格率為77.68%，達到了70%的標準，但不同區(qū)域之間存在較大差異，有兩個縣(區(qū))合格率分別僅為40%、55%。現(xiàn)在農(nóng)村犬大多不進行拴養(yǎng)，犬之間以及犬與人的接觸機會較多，存在較大的犬間狂犬病傳播和人狂犬病發(fā)生風險。檢測結(jié)果經(jīng)單因素統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，使用不同疫苗廠家疫苗、免疫時間不同對狂犬病免疫抗體合格率均存在顯著性影響，這可能與采樣方式、采樣數(shù)量及疫苗效果等因素有關(guān)。

綜上所述，本次免疫抗體檢測對全市8個縣(區(qū))農(nóng)村犬進行隨機采樣，發(fā)現(xiàn)不同區(qū)域之間狂犬病抗體合格率存在較大差異，免疫效果存在區(qū)域不均衡性；使用不同廠家同類型疫苗以及免疫時間兩因素與犬的狂犬病抗體合格率存在統(tǒng)計學相關(guān)性。本次監(jiān)測大部分縣(區(qū))免疫抗體合格率達到了世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦的70%的有效免疫保護率標準，結(jié)合近幾年本市未出現(xiàn)狂犬病人間病例情況，總體認為雅安市對狂犬病的防控效果較好，但也存在個別縣免疫抗體合格率較低的情況，說明部分區(qū)域仍存在發(fā)生狂犬病的風險。今后，應(yīng)針對不同縣(區(qū))的實際情況，進一步查找原因，重點進行補免、監(jiān)測等防控。

[1]中國農(nóng)業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所.動物傳染病學[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2008：215-219.

[2]衛(wèi)生部，公安部，農(nóng)業(yè)部，等.中國狂犬病防治現(xiàn)狀[S].2009.

[3]張菲，張守峰，唐青，等.我國狂犬病現(xiàn)狀與防控意見[J].中國人獸共患病學報，2010，26(4)：381-388.

[4]黃保續(xù).獸醫(yī)流行病學[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2010：67-71.

[5]馬奎.我國狂犬病流行現(xiàn)狀及防控策略[J].公共衛(wèi)生與預(yù)防醫(yī)學，2012，23(6)：53-54.

[6]陳軍，鄭文成，張朝陽，等.湖南部分地區(qū)免疫犬狂犬病免疫效果研究[J].中國動物檢疫，2009，26(12)：56-58.

[7]田克恭，李明.動物疫病診斷技術(shù)-理論與應(yīng)用[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2013：160-167.

2017-2-22

魏秋霞,碩士研究生,主要從事動物疫病預(yù)防控制工作。E-mail：weiqx905@163.com。