魏新亮　王衛(wèi)衛(wèi)　魏思忱　孔郁　田樹英　姜紅玉

[摘要] 目的 分析丙型肝炎性肝硬化患者血清內(nèi)臟脂肪素的表達意義。 方法 收集河北省滄州市中心醫(yī)院2014年7月～2015年11月117例丙型肝炎性肝硬化患者（肝硬化組，A級41例、B級42例、C級34例）和20例健康對照人員（對照組）為研究對象，測量兩組被試人員的血清內(nèi)臟脂肪素、胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）、白介素-6（IL-6）水平。 結(jié)果 肝硬化組及A、B、C三級患者內(nèi)臟脂肪素水平低于對照組，HOMA-IR和IL-6水平高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）。A、B、C三級患者的內(nèi)臟脂肪素水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05），HOMA-IR和IL-6水平比較，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）。將內(nèi)臟脂肪素作為應變量，其他生化指標作為自變量，胰島素r=-0.237、HOMA-IR r=-0.229、IL-6 r=-0.076，內(nèi)臟脂肪素與胰島素、HOMA-IR、IL-6無明顯相關性（P > 0.05）。 結(jié)論 丙型肝炎性肝硬化患者的內(nèi)臟脂肪素表達水平較低，內(nèi)臟脂肪素可作為診斷丙型肝炎性肝硬化的指標，但是不能作為判斷肝功能嚴重程度的指標。

[關鍵詞] 丙型肝炎；肝硬化；內(nèi)臟脂肪素；Child-Pugh分級；胰島素抵抗

[中圖分類號] R657.3+1 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2016）12（a）-0062-04

Significance of serum levels of visfatin in patients with hepatitis C cirrhosis

WEI Xinliang WANG Weiwei WEI Sichen KONG Yu TIAN Shuying JIANG Hongyu

The Second Digestive Department of Internal Medicine， Central Hospital of Cangzhou City， Hebei Province， Cangzhou 061000， China

[Abstract] Objective To analyze the significance of serum levels of visfatin in patients with hepatitis C cirrhosis. Methods 117 cases of hepatitis C cirrhosis patients （Liver cirrhosis group， A level 41 cases，B level 42 cases and C level 34 cases） and 20 healthy controls （control group） were collected in Central Hospital of Cangzhou City from July 2014 to November 2015. The serum levels of HOMA-IR， IL-6 and visfatin in two groups were measured. Results The levels of visfatin in A， B， C three level and liver cirrhosis group were lower than those in the control group， HOMA-IR and IL-6 levels were higher than those in the control group， the difference was statistically significant （P < 0.05）. A， B， C three group comparison， the difference of the visfatin level of the patients was not statistically significant （P > 0.05）， HOMA-IR and IL-6 levels were significantly different （P < 0.05）. The visfatin was used as the dependent variable， other biochemical parameters as independent variables， insulin r=-0.237， HOMA-IR r=-0.229， IL-6 r=-0.076， visfatin and insulin， IL-6， HOMA-IR had no significant correlation （P > 0.05）. Conclusion The expression of visfatin in patients with hepatitis C cirrhosis is lower， and visfatin can be used as an index to diagnose hepatitis C cirrhosis， but it can not be used as an index to judge the severity of liver function.

[Key words] Hepatitis C； Liver cirrhosis； Visfatin； Child-Pugh classification； Insulin resistance

內(nèi)臟脂肪素是內(nèi)臟脂肪合成的脂肪細胞因子，首次發(fā)現(xiàn)于2005年[1]。內(nèi)臟脂肪素具有類胰島素樣作用，參與了多種病理、生理過程。丙型肝炎性肝硬化是丙型肝炎終末期臨床表現(xiàn)，該病亦屬于代謝性疾病，內(nèi)臟脂肪素與肝病的發(fā)生、發(fā)展關系密切。本研究對117例丙型肝炎性肝硬化患者的血清內(nèi)臟脂肪素水平進行測定，分析血清內(nèi)臟脂肪素表達水平與丙型肝炎性肝硬化的關系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集河北省滄州市中心醫(yī)院2014年7月～2015年11月收治的住院丙型肝炎性肝硬化患者117例（肝硬化組），患者均為HCV-Ab陽性，臨床表現(xiàn)有腹水、脾功能亢進等門脈高壓癥狀，有典型CT影像學表現(xiàn)；其中男性64例，女53例；平均年齡（54.12±10.32）歲；Child-Pugh分級：A級41例，B級42例，C級34例。納入標準：腎功能正常，無心、肺功能不全和代謝疾病。排除標準：合并糖尿病、心臟病、腫瘤、肥胖、嚴重感染、甲狀腺功能亢進等影響激素代謝疾病。健康對照人員20例（對照組），均為我院健康體檢者，其中男性13例，女性7例；平均年齡（53.52±12.19）歲。

1.2 方法

兩組人員均空腹8 h后，抽取清晨靜脈血6 mL，離心半徑8 cm，3000 r/min離心6 min，處理后置于-70℃環(huán)境下保存，采用ELISA法測量內(nèi)臟脂肪素。再抽取靜脈血，應用全自動生化儀測量肝功能、空腹血糖（FBG）、血脂，應用希森美康CA-1500全自動凝血分析儀檢測凝血酶原時間（prothrombin time，PT），采用化學發(fā)光法測定血清胰島素（FINs）水平，采用發(fā)光免疫法測定白介素-6（IL-6）水平。

體重指數(shù)（BMI）=體重/身高2。應用胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）評價胰島素抵抗水平，計算方法：HOMA-IR=FBG×FINs/22.5。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計量資料以均數(shù)±標準差表示，組間比較采用t檢驗，方差分析采用F檢驗，內(nèi)臟脂肪素與其他各指標的相關性采用Spearman等級相關分析法。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 肝硬化組與對照組一般情況的比較

肝硬化組患者白蛋白（Alb）、三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、內(nèi)臟脂肪素水平均低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）；肝硬化組患者丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、總膽紅素（TBiL）、PT、FINs、HOMA-IR、IL-6均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）；兩組患者的年齡、BMI、血清高密度脂蛋白（HDLD）及空腹血糖（FBG）比較，差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05）。

2.2 兩組內(nèi)臟脂肪素、HOMA-IR、IL-6水平比較

肝硬化組A、B、C三級內(nèi)臟脂肪素水平低于對照組（F=3.57，P=0.01），HOMA-IR和IL-6水平高于對照組（F=19.87，P=0.00；F=29.62，P=0.00），差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）（表2）。A、B、C三組內(nèi)臟脂肪素水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（F=0.35，P=0.72），HOMA-IR和IL-6水平差異顯著，隨Child-Pugh分級加重，水平逐漸升高，差異有統(tǒng)計學意義（F=12.35，P=0.00；F=4.12，P=0.02）（P < 0.05）。

2.3 內(nèi)臟脂肪素與胰島素、HOMA-IR、IL-6相關性分析

將內(nèi)臟脂肪素作為應變量，其他檢測指標作為自變量，進行相關性分析，胰島素r=-0.237、HOMA-IR r=-0.229、IL-6 r=-0.076，內(nèi)臟脂肪素與胰島素、HOMA-IR、IL-6無明顯相關性（P > 0.05）。

3 討論

內(nèi)臟脂肪素是脂肪組織分泌的脂肪因子[1]，不同組織的內(nèi)臟脂肪素表達水平不同。內(nèi)臟脂肪組織的內(nèi)臟脂肪素表達水平高于皮下脂肪組織，人體內(nèi)臟脂肪素血漿水平主要與內(nèi)臟脂肪面積相關[2]，肝臟內(nèi)臟脂肪素表達水平較高[3]。既往研究報道內(nèi)臟脂肪素對胰島素受體的親和力較高，認為內(nèi)臟脂肪素具有類胰島素作用。但是人體血漿內(nèi)臟脂肪素濃度遠遠低于胰島素，且血漿內(nèi)臟脂肪素水平與空腹或進食無關，因而內(nèi)臟脂肪素增強胰島素敏感性的作用仍有待深入研究。當前研究發(fā)現(xiàn)[4-6]，部分群體的內(nèi)臟脂肪素水平較高，如肥胖人群、2型糖尿病和胰島素抵抗患者，動物實驗也證實了此結(jié)論[7-8]。

內(nèi)臟脂肪素可能加重胰島素抵抗，胰島素抵抗可致血脂代謝紊亂，促進TG在前脂肪細胞的積聚，加重肝臟脂肪沉積，并進一步誘發(fā)對肝臟的“多重打擊”，引起細胞外基質(zhì)生成過多，形成脂肪性肝纖維化甚至肝硬化。IL-6主要由單核細胞和巨噬細胞產(chǎn)生，與肝臟局部炎癥反應有關，參與肝細胞的炎性損傷過程，IL-6具有刺激細胞生長、促進細胞分化和加速肝細胞急性期蛋白合成的作用。在肝纖維化過程中，IL-6水平的升高與肝臟對細胞因子的清除能力下降有關。一項研究顯示，人血漿內(nèi)臟脂肪素水平與HOMA-IR不相關，而與IL-6、CRP呈正相關，反映機體炎癥狀態(tài)[9]。目前認為，內(nèi)臟脂肪素可能通過肝細胞內(nèi)胰島素受體的酪氨酸磷酸化，誘導IL-6的分泌[10]。同時，IL-6也能調(diào)節(jié)內(nèi)臟脂肪素mRNA在脂肪細胞中的表達[11]，兩者相互作用，促進了前脂肪細胞的分化成熟，同時加重了胰島素抵抗。

研究表明，內(nèi)臟脂肪素基因在正常肝臟呈低表達，慢性丙型病毒性肝炎患者中血清內(nèi)臟脂肪素水平升高[12-13]，且與BMI無關[14]，在慢性肝損害患者中表達上調(diào)，且與纖維化程度呈正相關，在重度肝纖維化中增加，伴隨代謝綜合征時下降[15]。內(nèi)臟脂肪素水平與門靜脈炎癥相關，并可以預測門靜脈炎癥。

研究發(fā)現(xiàn)，在丙型肝炎性肝硬化患者中，血清內(nèi)臟脂肪素水平并未升高，而低于健康人群，考慮其主要原因為丙型肝炎性肝硬化時肝細胞內(nèi)臟脂肪素mRNA表達下降，肝細胞生成內(nèi)臟脂肪素減少所致，同時，丙型肝炎性肝硬化時，內(nèi)臟脂肪減少亦是內(nèi)臟脂肪素減少的原因之一[4]，但其水平降低，其原因考慮可能由以下因素綜合作用所致：①丙型肝炎性肝硬化時多數(shù)存在胰島素抵抗[16]，且隨Child-Pugh分級加重高而加重，而胰島素抵抗時內(nèi)臟脂肪素水平上升，從而部分抵消胰島素抵抗[17]；②本研究中的肝硬化患者為丙型肝炎性肝硬化，而研究表明慢性丙型肝炎患者內(nèi)臟脂肪素水平升高，且隨肝纖維化程度加重而升高；③肝硬化時往往存在低氧血癥，且隨Child-Pugh分級加重而加重，而缺氧、低氧狀態(tài)下機體內(nèi)氧穩(wěn)態(tài)的主要調(diào)節(jié)因子低氧誘導因子-1高表達，其可直接上調(diào)內(nèi)臟脂肪素的表達；④細胞因子IL-6等對內(nèi)臟脂肪素水平的調(diào)節(jié)作用，目前研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)臟脂肪素與IL-6呈正相關，丙型肝炎性肝硬化時，隨Child-Pugh分級加重，IL-6水平越高，考慮存在IL-6水平升高而上調(diào)內(nèi)臟脂肪素水平可能；⑤內(nèi)臟脂肪素在各種炎癥時均升高，而肝硬化本身為一種炎癥性疾病[18-19]，且炎癥隨Child-Pugh分級加重而加重，從而上調(diào)內(nèi)臟脂肪素水平；⑥肝硬化患者普遍存在營養(yǎng)不良問題，且隨病情加重而加重，內(nèi)臟脂肪素可促進體內(nèi)乙酰胺合成，而乙酰胺可以改善患者的營養(yǎng)狀況，營養(yǎng)不良狀態(tài)下患者的內(nèi)臟脂肪素表達水平也更高[20]。多種因素的綜合作用，使得丙型肝炎性肝硬化時內(nèi)臟脂肪素水平下降，但在不同Child-Pugh分級時無明顯差異。

綜上所述，內(nèi)臟脂肪素在丙型病毒性肝硬化時下降，但不能做為肝臟功能嚴重程度的指標，且與HOMA-IR無關，其在丙型肝炎肝硬化患者血清中降低可能為多因素作用的結(jié)果，如研究其具體作用機制可能需研究丙型肝炎性肝硬化時多臟器所含內(nèi)臟脂肪素水平的變化及各種脂肪因子的水平，來綜合分析其表達意義。

[參考文獻]

[1] Fukuhara A，Matsuda M，Nishizawa M，et al. Visfatin：a protein secreted by visceral fat that mimics the effects of insulin [J]. Science，2005，307（5708）：426-430.

[2] Berndt J，Klting N，Kraliseh S，et al. Plasma visfatin con-centrations and fat depot-specific mRNA expression in humans [J]. Diabetes，2005，54（10）：2911-2916.

[3] Chen L，Liu W，Lai S，et al. Insulin resistance，serum visfatin，and adiponectin levels are associated with metabolic disorders in chronic hepatitis C virus-infected patients [J]. Eur J Gastroenterol Hepatol，2013，25（8）：935-941.

[4] 蔡懷陽，李運澤，李莉，等.血漿內(nèi)臟脂肪素與非酒精性脂肪性肝病患者內(nèi)臟脂肪厚度的關系[J].世界華人消化雜志，2014，22（11）：1564-1568.

[5] 楊國強.肥胖和2型糖尿病患者血清內(nèi)脂素水平的檢測及臨床意義[J].中國醫(yī)藥指南，2016，14（9）：11-12.

[6] 呂長淮.內(nèi)脂素與非酒精性脂肪肝病相關性研究[J].包頭醫(yī)學院學報，2015，31（10）：8-9.

[7] Haider DG，Schindler K，Schaller G，et al. Increased plasma visfatin concentrations in morbidly obese subjects are reduced after gastric banding [J]. J Clin Endocrinol Metab，2006，91（4）：1578-1581.

[8] Qu S，Mo L，Niu Y，et al. Expression of visfatin in the diabetic rat retina [J]. Clin Exp Ophthalmol，2016，44（4）：251-259.

[9] Oki K，Yamane K，Kamei N，et al. Circulating visfatin level is correlated with inflammation，but not with insulin resi-stance [J]. Clin Endocrinol （Oxf），2007，67（5）：796-800.

[10] Moschen AR，Kaser A，Enrich B，et al. Visfatin，an adip-ocytokine with proinflammatory and immunomodulating properties [J]. J Immunol，2007，178（3）：1748-1758.

[11] Kralisch S，Klein J，Lossner U，et al. Hormonal regulation of the novel adipo-cytokine visfatin in 3T3-L1 adipocytes [J]. J Endoerinol，2005，185（3）：R1-R8.

[12] 蘇少慧，劉穎嬌，郭兆霞，等.慢性丙型肝炎患者頸動脈內(nèi)膜和血清內(nèi)臟脂肪素的變化[J].實用肝臟病雜志，2015，18（6）：674-675.

[13] Chen L，Liu W，Lai S，et al. Insulin resistance，serum visfatin，and adiponectin levels are associated with metabolic disorders in chronic hepatitis C virus-infected patients [J]. Eur J Gastroenterol Hepatol，2013，25（8）：935-941.

[14] Kukla M，Zwirska-Korczala K，Gabriel A，et al. Visfatin serum in chronic hepatitis C patients [J]. J Viral Hepat，2010，17（4）：254-260.

[15] Huang JF，Huang CF，Yu ML，et al. Serum visfatin is correlated with disease severity and metabolic syndrome in chronic hepatitis C infection [J]. J Gastroenterol Hepatol，2011， 26（3）：530-535.

[16] Wójcik K，Jablonowska E，Omulecka A，et al. Insulin res-istance，adipokine profile and hepatic expression of SOCS-3 gene in chronic hepatitis C [J]. World J Gastroenterol，2014，20（30）：10449-10456.

[17] Mondal G，Saroha A，Bose PP，et al. Altered glycosylation，expression of serum haptoglobin and alpha-1-antitrypsin in chronic hepatitis C，hepatitis C induced liver cirrhosis and hepatocellular carcinoma patients [J]. Glycoconj J， 2016，33（2）：209-218.

[18] Luk T，Malam Z，Marshall JC. Pre-B cell colony-enhancing factor （PBEF）/visfatin： visfatin novel mediator of innate immunity [J]. J Leukoc Biol，2008，83（4）：804-816.

[19] 王孟仙，何治軍，黃光明.雷貝拉唑預防肝硬化門脈高壓性胃病及肝源性潰瘍致上消化道出血的療效分析[J].中國醫(yī)藥導報，2016，13（18）：146-148.

[20] 陳文宇，唐婷玉，楊琪，等.慢性阻塞性肺疾病患者血漿內(nèi)臟脂肪因子水平變化及其與營養(yǎng)狀況的關系[J].醫(yī)學研究雜志，2013，42（4）：60-63.

（收稿日期：2016-09-05 本文編輯：王紅雙）