王相子 徐小艷 徐正軍 開 妍 周 偉 陳昌海

（江蘇省動物疫病預(yù)防控制中心，江蘇南京 210036）

重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗（Re-6株+Re-7株）免疫抗體監(jiān)測分析

王相子 徐小艷 徐正軍 開 妍 周 偉 陳昌海

（江蘇省動物疫病預(yù)防控制中心，江蘇南京 210036）

為評估我省使用重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗（Re-6株+Re-7株）后的雞群免疫效果，更好的開展禽流感防控工作，筆者對2014-2015年全省春、秋防及日常監(jiān)測所采集的規(guī)模養(yǎng)雞場及散養(yǎng)戶樣品進(jìn)行了免疫抗體檢測與分析。檢測結(jié)果表明，江蘇省H5亞型高致病性禽流感Re-6株平均免疫抗體合格率為96.84%；Re-7株平均免疫抗體合格率為95.95%。大部分地區(qū)的免疫抗體效價(jià)呈現(xiàn)較高的一致性。種雞場的H5亞型禽流感免疫效果整體最好。2015年H5亞型高致病性禽流感Re-6株和Re-7株的免疫效果均高于2014年。

高致病性禽流感；血凝抑制試驗(yàn)；免疫抗體合格率

禽流感（avian influenza，AI）在世界各地發(fā)生，具有重要公共衛(wèi)生意義。高致病性禽流感被世界動物衛(wèi)生組織列為必須報(bào)告的動物傳染病，我國將其列為一類動物疫病，其暴發(fā)和流行可對家禽業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前，強(qiáng)制免疫是我國作為防控高致病性禽流感的主要措施之一。

2014年9月開始，我省根據(jù)農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)局要求，將當(dāng)時(shí)對雞群使用的重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗（Re-6株+Re-4株）替換為重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗（Re-6株+Re-7株）。為評估我省使用該疫苗后的雞群免疫效果，更好的開展禽流感防控工作，筆者對2014-2015年全省春、秋防及日常監(jiān)測所采集的規(guī)模養(yǎng)雞場及散養(yǎng)戶樣品進(jìn)行了免疫抗體檢測與分析。

1 材料與方法

1.1 材料

樣品來源：2014年11月～2015年11月江蘇省動物疫病預(yù)防控制中心在開展重大動物疫病春防、秋防、日常監(jiān)測等工作中，隨機(jī)抽檢的雞血清樣品2372份，所檢雞群均免疫了重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗（Re-6株+Re-7株），免疫密度達(dá)100%。樣品來自全省13個(gè)市38個(gè)縣82個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的451個(gè)場（戶）。

檢測試劑：禽流感病毒H5亞型（Re-6株）血凝抑制試驗(yàn)抗原、陽性血清、陰性血清；禽流感病毒H5亞型（Re-7株）血凝抑制試驗(yàn)抗原、陽性血清、陰性血清，均由哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司提供，自配1%雞紅細(xì)胞。

1.2 方法

參照《高致病性禽流感診斷技術(shù)》GB/T 18936-2003中規(guī)定的血凝（HA）和血凝抑制（HI）試驗(yàn)技術(shù)，通過血凝試驗(yàn)結(jié)果配制4HAU的病毒抗原，采用血凝抑制試驗(yàn)檢測血清中H5亞型高致病性禽流感免疫抗體。

1.3 結(jié)果判定

以完全抑制4個(gè)HAU抗原的血清最高稀釋倍數(shù)作為HI滴度，即血清效價(jià)。根據(jù)農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)，雞免疫21d后，抗體效價(jià)≥24判為免疫合格；抽檢雞群免疫抗體合格率≥70%判為合格。

2 檢測結(jié)果

共檢測雞血清樣品4742份，合格4571份，合格率96.39%。其中H5亞型Re-6株共檢測樣品2370份，合格2295份，合格率96.84%，H5亞型Re-7株共檢測樣品2372份，合格2276份，合格率95.95%。

2.1 各地區(qū)的疫苗免疫抗體合格率

在對全省13個(gè)市的免疫抗體檢測合格率進(jìn)行比較后發(fā)現(xiàn)，全省13個(gè)市的高致病性禽流感免疫抗體合格率均高于農(nóng)業(yè)部規(guī)定的70%和我省規(guī)定的80%的標(biāo)準(zhǔn)。H5亞型高致病性禽流感（Re-6株）全省平均免疫抗體合格率為96.84%；H5亞型高致病性禽流感（Re-7株）全省平均免疫抗體合格率為95.95%。詳見表1。

表1 各市免疫抗體檢測結(jié)果

2.2 不同類別雞群的免疫抗體合格率

共檢測各類養(yǎng)殖場戶共451個(gè)，其中種雞場11個(gè)，Re-6株共檢測樣品154份，合格153份，合格率99.35%；Re-7株共檢測樣品156份，合格153份，合格率98.08%；規(guī)模場46個(gè)，Re-6株共檢測樣品684份，合格673份，合格率98.39%；Re-7株共檢測樣品681份，合格661份，合格率97.06%；散養(yǎng)戶394個(gè)，Re-6株共檢測樣品1532份，合格1469份，合格率95.89%；Re-7株共檢測樣品1535份，合格1462份，合格率95.24%。詳見表2。

表2 不同類別雞群的免疫抗體檢測結(jié)果

表3 不同年份免疫抗體檢測結(jié)果

2.3 不同年份的免疫抗體合格率

2014年，全省H5亞型高致病性禽流感Re-6株共檢測樣品717份，合格690份，合格率為96.23%，Re-7株共檢測樣品723份，合格692份，合格率95.71%；2015年，全省Re-6株共檢測樣品1653份，合格1605份，合格率97.10%，Re-7株共檢測樣品1649份，合格1584份，合格率96.06%。詳見表3。

3 討論

從檢測結(jié)果來看，2014～2015年江蘇省存欄雞群的H5亞型高致病性禽流感Re-6株和Re-7株的免疫抗體合格率均達(dá)到農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)及我省省級標(biāo)準(zhǔn)，且免疫抗體整體水平較高，抗體水平持續(xù)平穩(wěn)，說明重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗（Re-6株+Re-7株）在我省應(yīng)用效果良好。

進(jìn)一步對比這兩年我省13個(gè)市存欄雞群重組禽流感病毒滅活疫苗免疫效果發(fā)現(xiàn)，13個(gè)市的免疫抗體檢測結(jié)果之間也存在著差別。2014～2015年，13個(gè)市的H5亞型Re-6株疫苗平均免疫抗體合格率為96.84%，其中最高的市為100%，最低為87.11%；H5亞型Re-7株疫苗平均免疫抗體合格率為95.95%，其中最高的市為100%，最低為86.60%。從圖一看，首先，Re-6株與Re-7株疫苗免疫抗體合格率相比較發(fā)現(xiàn)，大部分地區(qū)呈現(xiàn)出了較高的一致性，個(gè)別地區(qū)出現(xiàn)兩者差異較大（免疫抗體合格率分別為97.46% 和90.68%）的情況；其次，大部分地區(qū)的免疫抗體合格率均分布在全省平均免疫抗體合格率附近，但有個(gè)別地區(qū)出現(xiàn)與平均免疫抗體合格率差距較大的情況。說明我省大部分地區(qū)的高致病性禽流感疫苗免疫工作正在有效地、合理地開展。

圖1 13個(gè)市重組禽流感疫苗免疫效果分布

2014～2015年，共監(jiān)測來自451個(gè)養(yǎng)雞場（戶）的4742份樣品，其中監(jiān)測種雞場11個(gè)，Re-6株平均免疫抗體合格率為99.35%，Re-7株平均免疫抗體合格率為98.08%，且每個(gè)種雞場的免疫抗體合格率均高于80%；監(jiān)測商品代養(yǎng)雞場46個(gè)，Re-6株平均免疫抗體合格率為98.39%，Re-7株平均免疫抗體合格率為97.06%，有44個(gè)場的免疫抗體合格率高于80%，占商品代養(yǎng)雞場總數(shù)的95.65%；監(jiān)測散養(yǎng)戶394個(gè)，Re-6株平均免疫抗體合格率為95.89%，Re-7株平均免疫抗體合格率為95.24%，有367戶的免疫抗體合格率高于80%，占散養(yǎng)戶總數(shù)的93.15%。從圖二看，首先，各類別雞群Re-6株和Re-7株免疫抗體合格率較一致；其次，三種不同類別雞群中，種雞場的H5亞型禽流感疫苗整體免疫效果較商品代養(yǎng)雞場、散養(yǎng)戶好。分析原因，種雞場和商品代養(yǎng)雞場多按程序免疫；而散養(yǎng)戶的多通過春、秋季開展的疫苗集中免疫行動進(jìn)行免疫，免疫條件相對較差，因而導(dǎo)致有些地方出現(xiàn)免疫效果相對偏低的情況，因而建議有條件的地方盡量采取程序免疫的方式。

圖2 不同類別雞群免疫抗體合格率對比情況

2014年，H5亞型Re-6株免疫抗體合格率為96.23%，Re-7株免疫抗體合格率為95.71%；2015年，H5亞型Re-6株免疫抗體合格率為97.10%，Re-7株免疫抗體合格率為96.06%。比較發(fā)現(xiàn)，通過重組疫苗的持續(xù)使用，Re-6株和Re-7株免疫抗體合格率均有所提高，Re-6株提高了0.87%，Re-7株提高了0.35%。說明通過持續(xù)開展該疫苗的免疫，全省疫苗免疫抗體水平處于持續(xù)向好的狀態(tài)。

[1] 甘孟侯.禽流感（第二版）[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002：181.

[2] 徐小艷.重組禽流感病毒H5亞型二價(jià)滅活疫苗免疫抗體監(jiān)測與分析[J].畜牧與獸醫(yī)，2011，43（6）：50-52.