張鵬飛 張玉軍 朱振龍 安永輝 陳進(jìn)軍

(承德市中心醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，河北 承德 067000)

血清IL-6和TNF-α水平與結(jié)腸癌病程的相關(guān)性

張鵬飛 張玉軍1朱振龍2安永輝3陳進(jìn)軍4

(承德市中心醫(yī)院重癥醫(yī)學(xué)科，河北 承德 067000)

目的 探討不同病理分期結(jié)腸癌病人血清中的白細(xì)胞介素(IL)-6和腫瘤壞死因子(TNF)-α水平及其與結(jié)腸癌病理分期的相關(guān)性。方法 結(jié)腸癌患者168例，其中男88例，女80 例，結(jié)腸癌Ⅰ期44例，Ⅱ期43例，Ⅲ期40例，Ⅳ期41例。此外選取健康對照40例，所有入組者血清IL-6和TNF-α水平運用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測，統(tǒng)計分析血清中IL-6、TNF-α水平和結(jié)腸癌病程分級的相關(guān)性。結(jié)果 結(jié)腸癌Ⅰ期患者血清中的IL-6、TNF-α水平明顯高于對照組(P<0.01)。IL-6及TNF-α水平與結(jié)腸癌病程具有正相關(guān)。結(jié)論 血清中IL-6、TNF-α水平在結(jié)腸癌患者中的水平較正常人明顯升高，且隨著結(jié)腸癌病程增加，其水平亦明顯升高，因此，血清中IL-6、TNF-α水平可作為篩選和評估結(jié)腸癌預(yù)后的重要指標(biāo)。

結(jié)腸癌；白細(xì)胞介素-6；腫瘤壞死因子-α

結(jié)腸癌患者的5年生存率，僅約50%，較低的生存率主要是由于缺乏有效的預(yù)防措施和早期診斷率低〔1〕。研究發(fā)現(xiàn)在結(jié)腸癌中許多炎癥信號通路如核轉(zhuǎn)錄因子(NF-κB)信號通路被異常激活〔2〕，同時流行病學(xué)研究發(fā)現(xiàn)在應(yīng)用非甾體類抗感染藥(NASIDs)人群中結(jié)腸癌的發(fā)病率比較低〔3〕，表明抑制炎癥可能為預(yù)防結(jié)腸癌的重要途徑。本文旨在探討血清中白細(xì)胞介素(IL)-6和腫瘤壞死因子(TNF)-α水平與結(jié)腸癌病程的相關(guān)性。

1 對象和方法

1.1 一般資料 2012年5月至2015年5月在承德市中心醫(yī)院住院的結(jié)腸癌患者168例，其中男88例，女80例，年齡34～75〔平均(43.22±10.55)〕歲，均經(jīng)過活檢和病理診斷分級，其中腫瘤的分期和分級參照美國癌癥聯(lián)合委員會/國際抗癌聯(lián)盟(AJCC/UICC)頒布的結(jié)直腸癌的腫瘤分期和分級標(biāo)準(zhǔn)。具體病人的分級分期和例數(shù)見表1。所有患者病情穩(wěn)定，無合并腫瘤出血、腸穿孔、腸梗阻、急慢性感染，未使用糖皮質(zhì)激素、抗過敏藥物以及自身免疫性炎癥抑制劑，且近3個月無輸血史和疫苗接種史。本院接收健康志愿者40例為正常對照組，男22例，女18例，年齡35～70〔平均(42.10±19.85)〕歲，近期未有急慢性感染、自身免疫性疾病等炎癥性疾病，并給予結(jié)直腸癌、家族性腺瘤性息肉病、腺瘤性息肉癌、潰瘍性結(jié)腸炎、遺傳性非息肉病性結(jié)腸癌等的篩查試驗，排除患有腸道疾病的志愿者。免費提供腹部、盆腔的全面B超和CT檢查。同時健康志愿者近期未使用糖皮質(zhì)激素、抗過敏藥物以及自身免疫性炎癥抑制劑，且近3個月無輸血史和疫苗接種史。兩組均簽署知情同意書，該研究方案已經(jīng)通過醫(yī)院倫理委員會審批。所有參與者于早晨空腹時抽血約4 ml，分離血清，置-80℃冰箱保存，用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測。

表1 所有參與者的年齡和性別分布(n)

1.2 IL-6、TNF-α檢測方法 所有參與者血清中IL-6、TNF-α的含量檢測均采用ELISA 法，IL-6檢測試劑盒和人TNF-α檢測試劑盒均購自南京建成生物科技有限公司。這兩個細(xì)胞因子的檢測原理均雙抗體夾心法，微孔板中分別包被有IL-6和TNF-α抗體，抗體被制作成固相抗體，血清中的IL-6、TNF-α與微孔中的抗體特異性結(jié)合，再與辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的IL-6抗體或HRP標(biāo)記的TNF-α抗體結(jié)合，最終形成的抗體-抗原-HRP標(biāo)記抗體復(fù)合物，當(dāng)加入底物時該復(fù)合物與底物反應(yīng)即顯色。此時用酶標(biāo)儀在450 nm波長下測定吸光度，因此微孔中顯色的深淺和樣品中的IL-6、TNF-α呈正相關(guān)，因此通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算人血清中IL-6、TNF-α的濃度。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行t檢驗、單因素回歸分析。

2 結(jié) 果

2.1 對照組和結(jié)腸癌Ⅰ期血清中IL-6、TNF-α水平比較 結(jié)腸癌Ⅰ期患者血清中的IL-6、TNF-α水平〔(19.25±5.71)pg/ml、(23.46±8.18)pg/ml〕明顯高于對照組〔(3.21±1.27)pg/ml、(5.21±1.36)pg/ml，均P<0.01〕。

2.2 結(jié)腸癌的病程和血清中IL-6、TNF-α水平的相關(guān)性 與對照組相比，IL-6、TNF-α在結(jié)腸癌患者血清中的水平明顯升高，且結(jié)腸癌的病程越高，血清中IL-6、TNF-α水平越高。對照組、Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期分別賦值為0，1，2，3，4，然后利用多重線性回歸分析模型對病程和炎癥因子IL-6、TNF-α水平進(jìn)行Logistic回歸分析，IL-6、TNF-α水平與結(jié)腸癌病程均具有正相關(guān)關(guān)系(b=1.57，1.81；r=0.481，0.630；P<0.05或P<0.01)。見表2。

表2 所有參與者血清中IL-6、TNF-α水平比較

3 討 論

結(jié)腸癌的發(fā)病率在中國多個地區(qū)呈迅速上升的趨勢，且患者在發(fā)現(xiàn)時多已經(jīng)出現(xiàn)了血行轉(zhuǎn)移和淋巴轉(zhuǎn)移，其中肝臟和胃最常發(fā)生轉(zhuǎn)移的臟器〔4〕。早期發(fā)現(xiàn)、早期治療已成為降低結(jié)腸癌死亡率最根本的方法。

通常情況下，腫瘤由于生長速度較快，常發(fā)生中心性壞死，壞死組織分泌化學(xué)性趨化因子，引起單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞在腫瘤壞死部位異常聚積，炎癥細(xì)胞分泌更多的炎性因子〔5〕，其干擾正常的腸道細(xì)胞的物質(zhì)和能量代謝，并最終導(dǎo)致正常細(xì)胞惡變或凋亡。研究顯示炎癥性腸病中潰瘍性結(jié)腸炎患者患結(jié)腸癌的風(fēng)險比一般人群高2.75倍，克羅恩病患者患結(jié)腸癌的風(fēng)險比一般人群高2.64倍〔6〕。炎癥性腸病最終多進(jìn)展為結(jié)腸癌，這與自身免疫功能的紊亂以及炎癥細(xì)胞的異常激活有關(guān)。

促炎癥因子IL-6和TNF-α由激活的巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞分泌并釋放入血。血清中IL-6和TNF-α水平不僅作為結(jié)腸癌的一個重要危險因素〔7〕，研究還發(fā)現(xiàn)血清中IL-6和TNF-α水平較高的結(jié)腸癌患者預(yù)后多較差〔8〕。Poutahidis等〔9〕在基礎(chǔ)實驗研究中發(fā)現(xiàn)用IL-6抗體和TNF-α抗體競爭性結(jié)合小鼠體內(nèi)的IL-6和TNF-α，可以顯著改善小鼠中潰瘍性結(jié)腸炎的進(jìn)展和裸鼠中的結(jié)腸癌的轉(zhuǎn)移。同時，在人群研究中發(fā)現(xiàn)應(yīng)用免疫調(diào)節(jié)劑可以顯著降低結(jié)腸癌的發(fā)病率〔10〕。這些研究均提示下調(diào)IL-6和TNF-α的炎癥作用可抑制結(jié)腸癌的侵襲、轉(zhuǎn)移。

本研究表明血清中IL-6、TNF-α水平可以作為結(jié)腸癌篩查的一個指標(biāo)，當(dāng)患者血清中IL-6、TNF-α水平的水平達(dá)到較高水平時，應(yīng)引起足夠的重視。其次可以通過檢測血清中IL-6、TNF-α的水平，評估結(jié)腸癌的預(yù)后和侵襲轉(zhuǎn)移風(fēng)險，對患者的治療具有一定的指導(dǎo)意義。

此外，本研究推測IL-6、TNF-α可能通過干擾結(jié)腸癌患者的糖脂代謝，加速腸癌患者惡病質(zhì)的進(jìn)程，降低患者的生存質(zhì)量，因此給予腸癌患者炎癥抑制藥物可降低IL-6、TNF-α的水平，可以改善癌癥患者的生存質(zhì)量和預(yù)后，對延緩結(jié)腸癌患者惡病質(zhì)的發(fā)生具有重要的臨床意義。

1 Espejo-Herrera N，Gracia-Lavedan E，Boldo E，etal.Colorectal cancer risk and nitrate exposure through drinking water and diet〔J〕.Int J Cancer，2016；139(2)：334-46.

2 Nachiappan S，Askari A，Mamidanna R，etal.The impact of adjuvant chemotherapy timing on overall survival following colorectal cancer resection〔J〕.Eur J Surg Oncol，2015；41(12)：1636-44.

3 唐人民，李俊明，鄒秀蘭.IKKε/TBK1信號通路調(diào)控與致癌作用的研究進(jìn)展〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2015；35(23)：6918-21.

4 付國靜，楊正德.非甾體類藥與老年人小腸黏膜損傷〔J〕.中華老年醫(yī)學(xué)雜志，2015；34(6)：689-91.

5 張 慶，龍躍平，杜寒松，等.塞來昔布增強(qiáng)氟尿嘧啶對人結(jié)腸癌細(xì)胞SW480增殖與侵襲的抑制作用〔J〕.華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)，2013；42(5):525-9.

6 Gao XY，Wang XL.An adoptive T cell immunotherapy targeting cancer stem cells in a colon cancer model〔J〕.J BUON，2015；20(6)：1456-63.

7 Xavier RJ，Podolsky DK.Unravelling the pathogenesis of inflammatory bowel disease〔J〕.Nature，2007；448(7152)：427-34.

8 袁帶秀，舒麗霞，黃 蓉.杜仲黃酮對H22小鼠的抑瘤作用及其機(jī)制〔J〕.中國老年學(xué)雜志，2016；36(2)：291-3.

9 Poutahidis T，Haigis KM，Rao VP，etal.Rapid reversal of interleukin-6-dependent epithelial invasion in a mouse model of microbially induced colon carcinoma〔J〕.Carcinogenesis，2007；28(12)：2614-23.

9 Scheller J，Garbers C，Rose-John S.Interleukin-6：from basic biology to selective blockade of pro-inflammatory activities〔J〕.Semin Immunol，2014；26(1)：2-12.

10 Djaldetti M，Bessler H.Modulators affecting the immune dialogue between human immune and colon cancer cells〔J〕.World J Gastrointest Oncol，2014；6(5)：129-38.

〔2016-12-11修回〕

(編輯 袁左鳴)

河北省自然科學(xué)基金資助項目(No.301354)

張鵬飛(1985-)，男，主治醫(yī)師，主要從事重癥醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究。

R735.4

A

1005-9202(2017)11-2716-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.11.050

1 河北醫(yī)科大學(xué)病理學(xué)教研室 2 河北醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科 3 河北醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院腫瘤科 4 河北醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院肝膽外科