王蔚倩，王思玉，沈以丹，徐建偉

（浙江農(nóng)林大學(xué)林業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，浙江 杭州 311300）

復(fù)方青錢柳茶對高脂血癥模型大鼠血脂的影響

王蔚倩，王思玉，沈以丹，徐建偉

（浙江農(nóng)林大學(xué)林業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，浙江 杭州 311300）

目的 研究一種由青錢柳為主配以杜仲葉、銀杏葉、三七花等組合的復(fù)方青錢柳茶對高脂血癥大鼠血脂的影響。方法 用高脂飼料喂養(yǎng)SD雄性大鼠建立大鼠高血脂模型，眼球取血測血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平，建模后將高脂血癥大鼠隨機(jī)分為模型對照組、辛伐他汀組以及復(fù)方青錢柳茶水提取物低、中劑量組，每組8只。模型對照組與空白對照組給予相應(yīng)的0.1 ml/10g的生理鹽水，復(fù)方青錢柳茶低、中劑量組分別灌喂以0.4 g/kg和0.8 g/kg的水提取液，辛伐他汀組灌喂以1 mg/kg的辛伐他汀混懸液，持續(xù)喂養(yǎng)四周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后通過血清TC、TG、LDL-C、HDL-C指標(biāo)觀察復(fù)方青錢柳茶水提取物對血脂的影響。結(jié)果 與高血脂模型組比較，復(fù)方青錢柳茶水提取物可顯著降低血清TC、TG和LDL-C，并相對地升高了HDL-C值。結(jié)論 復(fù)方青錢柳茶水提取物具有調(diào)節(jié)血脂的功效。

復(fù)方青錢柳；高血脂癥；大鼠；動物實(shí)驗(yàn)

隨著人們生活水平的不斷提高，營養(yǎng)狀況的改善，高脂血癥發(fā)病率也隨著超重和肥胖人群不斷增加而增加。高脂血癥（hyperlipidemia，HLP）是因脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)或是代謝異常所導(dǎo)致的血漿中一種或幾種脂質(zhì)過高的疾病，是心腦血管疾病及動脈粥樣硬化等發(fā)病的主要誘因[1]，嚴(yán)重威脅著人類的健康和生命。因而在醫(yī)藥界掀起了降血脂作用藥物及保健品開發(fā)研究的浪潮。

復(fù)方青錢柳茶是以青錢柳為主要成分配以杜仲葉、銀杏葉、桑葉、三七花和山楂組成。青錢柳[Cyclocarya paliurus（Batal.）Iljinskaja]又稱青錢李（江西）、山麻柳（四川）、甜茶樹（貴州）、一串錢（湖北）等，系屬于青錢柳屬胡桃科（Juglandaceae）雙子葉植物綱（Dicotyledoneae）植物，是我國特有的速生樹種。青錢柳為高大的速生喬木，有奇數(shù)羽狀復(fù)葉（長約20 cm），它廣泛分布在海拔在420～2500 m的石灰?guī)r山地、溪谷或山區(qū)地帶，如浙江、臺灣、廣西、四川、廣東、貴州、安徽、湖北、福建、云南、江蘇、四川等省均有分布[2]。據(jù)《中國中藥志要》記載，青錢柳的樹葉、樹根、樹皮均具有生津止渴、清熱解毒、止痛的功效，甚至也可用于頑癬等疾病的治療。在民間長期以來人們一直把它的葉片作為茶葉使用，因?yàn)槠湮兜栏侍鹩猩蛑箍?、清熱解暑、降壓、降糖等保健功效，是連糖尿病患者也可飲用的茶飲，故又被稱為甜茶、神茶等[3]。大量研究證實(shí)，青錢柳葉提取物不僅具有顯著的降血脂、降血壓、降血糖作用，而且還能增強(qiáng)機(jī)體免疫力和防治腫瘤[4-7]。雖然青錢柳葉具有良好的降血脂功能，但是當(dāng)前青錢柳葉的主要產(chǎn)品形式青錢柳茶，存在口味單一，不少患者不易接受等缺點(diǎn)。

本文以高血脂癥大鼠為研究對象，借助中藥的配伍理論選擇杜仲葉、銀杏葉、桑葉、三七花和山楂與青錢柳葉配伍成方，研究其水提取物對模型大鼠各項(xiàng)血脂水平的影響，旨在進(jìn)一步證實(shí)復(fù)方青錢柳的降血脂的作用，為開發(fā)新的青錢柳降血脂的保健茶奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動物

SD雄性大鼠75只，購自浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院動物中心，產(chǎn)品合格證號0016527生產(chǎn)許可證號多少scxk20140001，體重180～220 g，大鼠飼養(yǎng)環(huán)境溫度24～26℃。

1.1.2 復(fù)方青錢柳茶水提取物

取復(fù)方茶原材料220 g（內(nèi)含青錢柳葉、杜仲葉等，由文成縣泉山中藥材種植有限公司提供，）加入1200 ml自來水，冷凝回流1 h，冷卻，收集濾液。濾渣中繼續(xù)加于1000 ml自來水，回流30 min，合并提取液，濃縮至220 ml得1 g/ml提取液。

1.1.3 主要藥物和試劑

辛伐他汀片（國藥準(zhǔn)字H20000009，浙江京新藥業(yè)股份有限公司）。

所有血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白蛋固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）試劑盒（均購于南京建成生物工程研究所有限公司）。

1.1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器

M200多功能酶標(biāo)，高溫臺式冷凍離心機(jī)，電子天平。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 高血脂大鼠模型的建立與分組

將40只大鼠隨機(jī)分為空白對照組8只及高脂飼料組32只。對照組大鼠飼喂普通大鼠鼠料，高脂模型組則飼喂高脂飼料，均自由攝食，自由飲用純凈水。動物造模4周，實(shí)驗(yàn)結(jié)束前1天晚上禁食不禁水，次日麻醉后采血并分離血清，測定總膽固醇（TC）、總甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C），在證實(shí)模型成功情況下進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)。將造模成功的32只大鼠隨機(jī)分成模型對照組、辛伐他汀組、復(fù)方青錢柳茶水提取物低、中劑量組，每組8只。

1.2.2 降脂實(shí)驗(yàn)

第一組空白對照組（喂普通飼料+灌1 g/ml生理鹽水），第二組對照模型組（喂高脂飼料+灌1 g/ml生理鹽水），第三組陽性對照組（喂高脂飼料+1 mg/kg辛伐他汀混懸液），第四組復(fù)方青錢柳茶低劑量組（喂高脂飼料+灌0.4 g/kg復(fù)方青錢柳茶水提取物），第五組復(fù)方青錢柳茶中劑量組（喂高脂飼料+灌0.8 g/kg復(fù)方青錢柳茶水提取物）。連續(xù)灌胃6周，每天1次，每周稱一次體重，以便調(diào)整給藥劑量，灌胃期間各組大鼠均自由攝食和飲水。

1.2.3 生化指標(biāo)測定

第6周灌喂結(jié)束后，實(shí)驗(yàn)大鼠禁食（不禁水）12 h，空腹眼眶靜脈采血500 μL左右，在4℃環(huán)境下3500 rpm離心10 min，分離血清，采用酶標(biāo)儀按試劑盒使用說明分別測定個組實(shí)驗(yàn)動物TC、TG、HDL-C、LDL-C值。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件對實(shí)驗(yàn)結(jié)果作數(shù)據(jù)分析，采用t檢驗(yàn)，組間比較采用獨(dú)立樣本檢驗(yàn)顯著性。

2 結(jié) 果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1～4，從表中可知，復(fù)方青錢柳對高血脂模型大鼠血清中的TG、TC、LDLC的濃度均有顯著地降低作用（P＜0.05），而對血清中的HDLC濃度則有升高的作用（P＜0.05）。

表1 復(fù)方青錢柳對高血脂模型大鼠總膽固醇TC的影響（±s）

表1 復(fù)方青錢柳對高血脂模型大鼠總膽固醇TC的影響（±s）

注：*表示與空白對照P＜0.05，**表示與空白對照P＜0.01；Δ表示與模型組對照P＜0.05，ΔΔ表示與模型組對照P＜0.01

給藥劑量（g/kg）給藥前給藥后6周空白對照NS1.47±0.32 1.516±0.276模型組NS2.48±0.45 **1.870±0.217青錢柳低劑量組22.55±0.34 **1.701±0.367青錢柳高劑量組42.64±0.54 **1.616±0.350Δ陽性對照組辛伐他丁2.44±0.24 **1.454±0.309Δ青錢柳復(fù)方低劑量組12.51±0.44 **1.513±0.202Δ青錢柳復(fù)方高劑量組22.88±0.23 **1.613±0.409Δ

表2 復(fù)方青錢柳對高血脂模型大鼠甘油三酯TG的影響（±s）

表2 復(fù)方青錢柳對高血脂模型大鼠甘油三酯TG的影響（±s）

注：*表示與空白對照P＜0.05，**表示與空白對照P＜0.01；Δ表示與模型組對照P＜0.05，ΔΔ表示與模型組對照P＜0.01

給藥劑量（g/kg）給藥前給6周空白對照NS0.565± 0.253 0.388±0.077模型組NS0.746±0.371*0.771±0.136青錢柳低劑量組20.708±0.295*0.590±0.125Δ青錢柳高劑量組41.011±0.262*0.555±0.070Δ陽性對照組辛伐他丁0.755±0.314*0.533±0.115Δ青錢柳復(fù)方低劑量組11.055±0.294**0.632±0.162Δ青錢柳復(fù)方高劑量組21.027±0.247*0.725±0.069

表3 復(fù)方青錢柳對高血脂模型大鼠低密度脂蛋白（L-DLC）含量的影響（±s）

表3 復(fù)方青錢柳對高血脂模型大鼠低密度脂蛋白（L-DLC）含量的影響（±s）

注：*表示與空白對照P＜0.05，**表示與空白對照P＜0.01；Δ表示與模型組對照P＜0.05，ΔΔ表示與模型組對照P＜0.01

空白對照NS0.625±0.1710.459±0.132模型組NS1.04±0.341*0.742±0.071青錢柳低劑量組21.071±0.278*0.525±0.118Δ青錢柳高劑量組41.024±0.223*0.449 ±0.141Δ陽性對照組辛伐他丁1.051±0.197*0.448±0.118Δ青錢柳復(fù)方低劑量組11.098±0.219*0.474±0.063Δ青錢柳復(fù)方高劑量組21.129±0.215*0.470±0.033Δ

表4 復(fù)方青錢柳對高血脂模型大鼠高密度脂蛋白（HDLC）含量的影響（±s）

表4 復(fù)方青錢柳對高血脂模型大鼠高密度脂蛋白（HDLC）含量的影響（±s）

注：*表示與空白對照P＜0.05，**表示與空白對照P＜0.01；Δ表示與模型組對照P＜0.05，ΔΔ表示與模型組對照P＜0.01

空白對照NS1.15±0.241.07±0.22模型組NS0.76±0.16*0.78±0.15青錢柳低劑量組20.74±0.18*0.88±0.18青錢柳高劑量組40.79±0.19*0.99±0.19Δ陽性對照組辛伐他丁0.73±0.24*0.99±0.24Δ青錢柳復(fù)方低劑量組10.77±0.14*0.97±0.14Δ青錢柳復(fù)方高劑量組20.76±0.23*0.96±0.23Δ

3 討 論

研究表明，冠心病的死亡率已經(jīng)超過所有癌癥的死亡率之和，而冠心病是由動脈粥樣硬化引起的，究其本源，引發(fā)動脈粥樣硬化的最主要原因就是高脂血癥，因此，防治高脂血癥是防治心腦血管疾病的關(guān)鍵[8-11]。TG和TC含量是衡量血脂高低的重要指標(biāo)，而高密度脂蛋白能保護(hù)心血管，減少患冠狀動脈心臟病的發(fā)生。目前，他汀類、貝特類、煙酸類、樹脂類膽酸螯合劑是現(xiàn)代用于治療高脂血癥的四大類化學(xué)降脂藥，但由于化學(xué)降脂藥藥多數(shù)基于單靶點(diǎn)的作用機(jī)制，和長期大量使用具有較大的不良反應(yīng)，而中草藥具有多靶點(diǎn)、多成分協(xié)同作用的特性，效果良好，毒副作用小，近年來逐漸成為降脂藥的研究熱點(diǎn)，并取得一定的進(jìn)展[12]。

本文通過高脂飼料飼喂法建立高脂血癥的大鼠模型，結(jié)果表明用高脂飼料飼喂以建立的雄性SD大鼠高脂血癥模型脂質(zhì)代謝紊亂，血脂水平異常，其血清中TC、TG、LDL-C水平均顯著高于空白對照組的大鼠（P＜0.05）。而通過六周給藥后，青錢柳及復(fù)方青錢柳水提液各劑量組與高脂模型組相比較，均能較好地降低高脂血癥大鼠血清中TC、TG、LDL-C含量，且下降幅度與青錢柳水提液的劑量呈現(xiàn)一定的相關(guān)性。同時研究表明復(fù)方青錢柳組和青錢柳水提液組具有明顯升高血清HDL-C。本文很好的證實(shí)了復(fù)方青錢柳水提液的調(diào)節(jié)血脂代謝作用。

[1] Makni M,Fetoui H,Gargouri N K,et al.Hypolipidemic and hepatoprotective effects of flax and pumpkin seed mixture rich in ω-3 andω-6 fatty acids in hypercholesterolemic rats[J].Food and Chemical Toxicology,2008,46:3714-3720.

[2] 謝明勇,李 磊.青錢柳化學(xué)成分和生物活性研究概況[J].中草藥,2001,32(4):365-366.

[3] 徐 慶,宋蕓娟.青錢柳的研究概況[J].華夏醫(yī)學(xué),2004,17(3):451-453.

[4] 劉 姚,葉振南,傅凌韻,等.青錢柳多糖對3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖分化的影響[J].食品科學(xué),2013,34(23):291-295.

[5] 謝明勇,謝建華.青錢柳研究進(jìn)展[J].食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào),2008, 27(1):113-121.

[6] 胡文兵,趙 靜,陳婷婷,吳 茹,王文君.青錢柳多糖對高脂血癥小鼠降血脂作用和機(jī)制初探[J].現(xiàn)代食品科技,2015,11:1-8.

[7] 李 楠,趙 靜,吳 茹,楊占威,王文君.青錢柳多糖對高脂血癥大鼠脂代謝及對PPARα、FAS、GLUT4基因mRNA表達(dá)的影響[J].現(xiàn)代食品科技,2015,04:29-35.

[8] 黃明圈,上官新晨,徐明生,王文君,沈勇根,蔣 艷,陳 琴,陳婷婷.青錢柳多糖降血脂作用的研究.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2011, 33(1):0157-0161.

[9] 劉 姚,陳婷婷,傅凌韻,葉振南,李 楠,王文君.青錢柳多糖對高脂血癥小鼠脂肪酸合成酶(FAS)表達(dá)影響江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2013,35(2):392-397.

[10] KURIHARA H,ASAMI S,SHIBATA H,et al.Hypolipemic effect of Cyclocarya paliurus (Batal) Iljinskaja in lipid-loaded mice[J].Bio Pharm Bull,2013,26(3):383-385.

[11] 許麗萍,柳 毅.高血脂癥的防治[J].中國醫(yī)藥指南,2013,11(9): 793-794.

[12] 丁 寧,張 梅,張琳麗,張艷慧.脂代謝紊亂的中醫(yī)藥研究進(jìn)展[J].中國老年學(xué)雜志,2015,35(2):549-552.

本文編輯：吳 衛(wèi)

R589.2

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ISSN.2095-8242.2017.21.3973.03

浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新項(xiàng)目——復(fù)方青錢柳茶的篩選與制作（2015R412030）；青錢柳保健茶功效研究及臨床試驗(yàn)項(xiàng)目（編號：201552）