劉亞洋，李 鶴，朱源生

· 心血管病臨床觀察/研究·

芪參益氣滴丸對冠心病慢性心力衰竭病人心功能、免疫功能及micro RNA155水平的影響

劉亞洋1，李 鶴2，朱源生1

目的 研究芪參益氣滴丸對冠心病慢性心力衰竭病人心功能和免疫功能、微小RNA(micro RNA)155等的影響。方法 將冠心病慢性心力衰竭病人60例，隨機分為對照組(30例)及芪參益氣滴丸治療組(30例)。兩組均給予常規(guī)治療，治療組加用芪參益氣滴丸，療程為90 d。觀察治療前后左室收縮末期容積(LVESV)及舒張末容積(LVEDV)、左心室射血分數(shù)(LVEF)，腦鈉肽水平、6 min步行距離、免疫細胞亞群、micro RNA155等指標。結(jié)果 兩組治療后左室射血分數(shù)、左心室舒張末期容積、左室收縮末期容積均較治療前有明顯改善(P<0.05)；治療組較對照組改善明顯(P<0.05)。兩組治療后N末端B型鈉尿肽原(NT-proBNP)、6 min步行距離均較治療前有明顯改善(P<0.05)；治療組較對照組改善明顯(P<0.05)。治療組治療后micro RNA155表達量較治療前明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。與治療前比較，對照組治療后，CD4、CD8、CD4/CD8無明顯改變(P>0.05)，治療組治療后，CD4、CD4/CD8有明顯上升，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，CD8無明顯變化(P>0.05)。血清micro RNA155表達水平與lg(NT-proBNP)呈正相關(r=0.695，P<0.01)；與LVEF呈負相關(r=-0.539，P<0.01)；與CD4呈負相關(r=-0.581，P<0.05)。結(jié)論 冠心病心力衰竭病人血清micro RNA155水平升高，免疫細胞亞群比例發(fā)生改變，常規(guī)藥物治療基礎上加用芪參益氣滴丸治療能進一步改善心臟功能，糾正免疫失衡。

冠心??；心力衰竭；芪參益氣滴丸；微小RNA155

心力衰竭是多種心臟疾病的最終發(fā)展狀態(tài)，目前冠心病已成為心力衰竭常見的病因。冠心病因心肌長期血液供應不足或冠脈血管閉塞后未早期建立有效血運重建，導致心臟功能下降、心肌代謝異常，可激活一系列炎癥反應乃至心臟重構(gòu)，免疫系統(tǒng)相關網(wǎng)絡也參與其中。

芪參益氣滴丸是提取黃芪、丹參、三七、降香等有效成分制成，該藥對冠心病病人的癥狀、生活質(zhì)量均有改善。本研究探討常規(guī)西藥治療和中西醫(yī)結(jié)合對心臟功能改善情況的差異，并研究對免疫系統(tǒng)的影響情況。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2016年3月—2016年10月在濰安市第二人民醫(yī)院門診就診的冠心病所致慢性心力衰竭病人60例，診斷標準符合Framingham 標準：左室射血分數(shù)(LVEF)<45%和/或左心室舒張末期內(nèi)徑>55 mm(男)或>50 mm(女)。排除伴有肺源性心臟病、風濕性心臟病、嚴重內(nèi)分泌疾病、嚴重肝腎功能異常、嚴重感染性疾病、妊娠、血液透析、惡性疾病。隨機分為兩組，對照組(30例)及和參益氣滴丸治療組(30例)。對照組給予利尿劑、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑、β受體阻滯劑、洋地黃等常規(guī)基礎治療。治療組：在常規(guī)治療基礎上加用芪參益氣滴丸，每次0.5 g，每日3次。連續(xù)治療3個月。收集所有研究對象的臨床資料，包括性別、年齡、吸煙史、體重指數(shù)等，同時收集N末端B型鈉尿肽原(NT-proBNP)等指標及超聲心動圖檢查。

1.2 方法

1.2.1 生化指標 所有病人清晨抽取空腹全血樣品5 mL，于室溫下4 000 r/min離心3 min，留取上層血清液，保存于-80 ℃冰箱備用。按miRNA提取試劑盒說明書提供的方法抽提總RNA，熒光定量PCR檢測血漿微小RNA(micro RNA)155的表達。micro RNA155的相對表達水平采用2-△△CT方法計算。T細胞CD4、CD8亞群檢測采用抗體致敏的紅細胞花環(huán)法檢出。

1.2.2 心功能指標 采用多普勒超聲心動圖檢查測定治療前后左室射血分數(shù)(LVEF)、左心室舒張末期容積(LVEDV)、左室收縮末期容積(LVESV)等，所有數(shù)值均測定3個心動周期取其均值。

2 結(jié) 果

2.1 兩組臨床資料比較 治療前，治療組與對照組在年齡、性別、高血壓病、糖尿病史、體重指數(shù)、吸煙史、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、三酰甘油(TG)差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。詳見表1。

表1 兩組臨床資料比較

2.2 兩組病人心功能和生化指標比較 兩組治療后LVEF、LVESV、LVEDV均較治療前有明顯改善(P<0.05)；治療組LVEF、LVESV較對照組改善明顯(P<0.05)。兩組治療后NT-proBNP、6 min步行距離均較治療前有明顯改善(P<0.05)；治療組較對照組改善明顯(P<0.05)。詳見表2。

表2 兩組病人心功能和生化指標比較(±s)

2.3 兩組病人micro RNA155及免疫功能比較 治療組治療后，micro RNA155表達水平較治療前明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。與治療前比較，對照組治療后，CD4、CD8、CD4/CD8無明顯改變(P>0.05)，治療組治療后，CD4、CD4/CD8有明顯上升，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，CD8無明顯變化(P>0.05)；兩組治療后比較，治療組CD4、CD4/CD8較對照組改善明顯(P<0.05)。詳見表3。

組別時間()治療組治療前±±±±治療后 ±)) ±))± ±))對照組治療前±±±±治療后±±±± 與同組治療前比較，)<；與對照組治療后比較，)<。

2.4 micro RNA155與LVEF、NT-proBNP、CD4、CD8相關性分析 結(jié)果顯示，micro RNA155表達水平與 lg(NT-proBNP)呈正相關(r=0.695，P<0.01)；與LVEF呈負相關(r=-0.539，P<0.01)；與CD4負相關(r=-0.581，P<0.05)。

3 討 論

micro RNA是一類高度保守的內(nèi)源性非編碼單鏈的小RNA分子，在血漿中保持穩(wěn)定水平，通過多個水平調(diào)節(jié)靶基因的表達，參與炎癥反應、氧化應激等病理進程[1]。其在心血管疾病的發(fā)生發(fā)展病理進程中發(fā)揮重要作用[2]，在心力衰竭病理生理中起重要作用，參與如纖維化等疾病發(fā)展進程。micro RNA155是micro RNAs家族中的一員，研究證實micro RNA155是心臟炎癥及和心肌肥大的重要介質(zhì)[3]；研究顯示敲除micro RNA155后左室功能改善，能縮小心肌梗死后面積，減少膠原降解，抑制成纖維細胞增殖及分化為心肌成纖維細胞，改善心臟重構(gòu)，micro RNA155過表達則產(chǎn)生相反的效應[4]。本研究顯示在心力衰竭人群中micro RNA155水平升高，治療后其水平下降，提示其可能作為心力衰竭的標志物應用于臨床，與BNP水平的正相關性及與LVEF的負相關性也佐證這種可能。

慢性心力衰竭與炎癥反應、神經(jīng)體液因子、免疫系統(tǒng)改變、心肌能量耗竭等密切相關，而這些因素之間又相互聯(lián)系、相互影響，形成關聯(lián)的網(wǎng)絡和病理系統(tǒng)。T淋巴細胞是人體細胞免疫的主要細胞，分為CD4+細胞和CD8+細胞亞群。CD4+細胞是輔助性T細胞，CD8+細胞為殺傷性細胞，介導細胞免疫。淋巴細胞亞群比例失衡與慢性心力衰竭相關[5]，慢性心力衰竭病人淋巴細胞減少，CD4+細胞亞群減少，在老年心力衰竭人群中可出現(xiàn)CD8+細胞增加[6]。micro RNA155在巨噬細胞、樹突狀細胞、B細胞及T細胞等免疫細胞中表達，在細胞活化中起重要作用。micro RNA155可直接作用于多個靶點，如轉(zhuǎn)錄因子、細胞因子、蛋白受體及酶類等，進一步影響免疫細胞功能，在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮正向或負向調(diào)節(jié)作用[7-9]。

芪參益氣滴丸由黃芪、丹參、三七、降香等藥物組成，具有活血止痛、益氣通脈之功，用于治療氣虛血瘀型胸痹心痛。在心力衰竭防治中有其獨特的療效[10]。有研究提示，芪參益氣滴丸可通過影響炎癥反應途徑抑制心室肥厚和纖維化[11-12]。Lin等[13]研究發(fā)現(xiàn)，芪參益氣滴丸可通過調(diào)節(jié)能量代謝途徑改善缺血再灌注損傷所致心肌結(jié)構(gòu)及功能異常。Chen等[14]研究提示，大鼠心肌缺血再灌注損傷時芪參益氣滴丸可通過抗氧化應激及線粒體保護發(fā)揮心臟保護作用，改善心室功能和能量代謝。

本研究結(jié)果表明，經(jīng)芪參益氣滴丸治療后LVEF、LVESV較治療前有明顯改善，說明芪參益氣滴丸可增強左室收縮功能，6 min步行距離提示芪參益氣滴丸能明顯改善病人的心臟功能。本研究結(jié)果提示，冠心病心力衰竭病人應用芪參益氣滴丸治療組較對照組CD4、CD4/CD8明顯升高，提示該藥物可影響免疫細胞亞群的動態(tài)平衡，從而改善心力衰竭病人的免疫功能。micro RNA155影響免疫系統(tǒng)功能，micro RNA155與CD4水平負相關，提示micro RNA155可能與淋巴細胞亞群比例失衡相關。芪參益氣滴丸治療心力衰竭后micro RNA155表達量明顯下調(diào)，CD4升高。本研究提示芪參益氣滴丸治療心力衰竭可能是通過多個層面影響免疫系統(tǒng)。

綜上所述，冠心病心力衰竭病人micro RNA155升高，免疫細胞亞群比例發(fā)生改變，常規(guī)藥物治療基礎上加用芪參益氣滴丸治療能進一步改善心臟功能，糾正心力衰竭病人的免疫系統(tǒng)失衡狀態(tài)。

[1] Costantino S，Paneni F，Lüscher T，et al.MicroRNA profiling unveils hyperglycaemic memory in the diabetic heart[J].Eur Heart J，2016，37(6)：572-576.

[2] Marques F，Vizi D，Khammy O，et al.The transcardiac gradient of cardio-microRNAs in the failing heart[J].Eur J Heart Fail，2016，18(8)：1000-1008.

[3] Seok H，Chen J，Kataoka M，et al.Loss of microRNA-155 protects the heart from pathological cardiac hypertrophy[J].Circ Res，2014，114(10)：1585-1595.

[4] He W，Huang H，Xie Q，et al.miR-155 knockout in fibroblasts improves cardiac remodeling by targeting tumor protein p53-inducible nuclear protein 1[J].J Cardiovasc Pharmacol Ther，2016，21(4)：423-435.

[5] Laroumanie F，Douin-Echinard V，Pozzo J，et al.CD4+T cells promote the transition from hypertrophy to heart failure during chronic pressure overload[J].Circulation，2014，129(21)：2111-2124.

[6] Moro-García MA，Echeverría A，Galán-Artímez MC，et al.Immunosenescence and inflammation characterize chronic heart failure patients with more advanced disease[J].Int J Cardiol，2014，174(3)：590-599.

[7] Lind EF，Elford AR，Ohashi PS.Micro-RNA 155 is required for optimal CD8+T cell responses to acute viral and intracellular bacterial challenges[J].J Immunol，2013，190(3)：1210-1216.

[8] Dudda J C，Salaun B，Ji Y，et al.MicroRNA-155 is required for effector CD8+T cell responses to virus infection and cancer[J].Immunity，2013，38(4)：742-753.

[9] Vigorito E，Kohlhaas S，Lu D，et al.miR-155：an ancient regulator of the immune system[J] Immunol Rev，2013，253(1)：146-157.

[10] 王拴虎，毛靜遠，侯雅竹，等.西藥常規(guī)加用芪參益氣滴丸治療慢性心力衰竭隨機對照試驗的系統(tǒng)評價[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2013，33(11)：1468-1475.

[11] Li YC，Liu YY，BH Hu，et al.Attenuating effect of post-treatment with QiShen YiQi Pills on myocardial fibrosis in rat cardiac hypertrophy[J].Clinical Hemorheology & Microcirculation，2012，51(3)：177-191.

[12] Ma S，Ma J，Ding C，et al.GW25-e4167 QiShen YiQi Pills ameliorates ventricular fibrosis and dysfunction via regulation the expression of matrix metalloproteinase-9 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in the isoproterenol-induced myocardial fibrosis rats[J].J Am Coll Cardiol，2014，64(16)：C81.

[13] Lin SQ，Wei XH，Huang P，et al.Qi Shen YiQi Pills? prevent cardiac ischemia-reperfusion injury via energy modulation[J].Int J Cardiol，2013，168(2)：967-974.

[14] Chen JR，Wei J，Wang LY，et al.Cardioprotection against ischemia/reperfusion injury by QiShen YiQi Pill? via ameliorate of multiple mitochondrial dysfunctions[J].Drug Design，Development and Therapy，2015，9：3051-3066.

(本文編輯薛妮)

1.江蘇省淮安市第二人民醫(yī)院(江蘇淮安 223002)，E-mail：yayangliu@qq.com；2.江蘇省淮安市中醫(yī)院

信息：劉亞洋，李鶴，朱源生.芪參益氣滴丸對冠心病慢性心力衰竭病人心功能、免疫功能及micro RNA155水平的影響[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2017，15(11)：1342-1344.

R542.2 R289.5

B

10.3969/j.issn.1672-1349.2017.11.015

1672-1349(2017)11-1342-03

2017-03-06)