孫建華 王少麗

（1 煙臺(tái)市萊陽中心醫(yī)院感染科，山東 煙臺(tái) 265200；2 煙臺(tái)市萊陽中心醫(yī)院中醫(yī)科，山東 煙臺(tái) 265200）

合生元長期治療肝硬化的腸道微生態(tài)變化

孫建華1王少麗2

（1 煙臺(tái)市萊陽中心醫(yī)院感染科，山東 煙臺(tái) 265200；2 煙臺(tái)市萊陽中心醫(yī)院中醫(yī)科，山東 煙臺(tái) 265200）

目的 觀察肝硬化患者糞便中菌群的情況，為了解肝硬化患者腸道菌群的變化比較肝硬化患者與健康對(duì)照組之間的腸道微生態(tài)的差異進(jìn)行綜合分析比較。給予合生元（乳果糖和雙歧三聯(lián)活菌片）治療后觀察對(duì)比治療組與肝硬化對(duì)照組腸道微生態(tài)的變化。方法 收集2012年3月至2014年12月煙臺(tái)市萊陽中心醫(yī)院感染科所收治的肝硬化患者78例，隨機(jī)分為肝硬化對(duì)照組和合生元組，合生元組在常規(guī)保肝抗病毒的基礎(chǔ)上給予雙歧三聯(lián)活菌片（1.5 g，1天3次）及乳果糖（10 mL，1天3次），療程為96周，肝硬化對(duì)照組，僅給予保肝、抗病毒、白蛋白等常規(guī)治療。并以15例同期健康在校大學(xué)生作為健康對(duì)照組。測(cè)定治療前后腸道菌群菌落計(jì)數(shù)，并用秩相關(guān)檢測(cè)法進(jìn)行分析。結(jié)果 肝硬化組患者與正常對(duì)照組相比存在不同程度的腸道菌群失調(diào)，臨床表現(xiàn)主要為：雙歧桿菌減少（10.10±0.95比8.10±1.23，P＜0.05）。給予合生元治療后，合生元組雙歧桿菌較對(duì)照組明顯增多（9.98±0.85比8.40±1.05），差異有顯著性（P值均＜0.05）。結(jié)論 根據(jù)研究發(fā)現(xiàn)肝硬化患者臨床中存在腸道菌群失調(diào)的現(xiàn)象。益生菌制劑能有效改善臨床肝硬化患者腸道菌群失調(diào)的表現(xiàn)癥狀。

益生菌；合生元；肝硬化；腸道微生態(tài)

肝硬化患者的肝功能受到不同程度的損壞，肝臟的解毒功能退化，易導(dǎo)致腸肝屏障及門脈高壓的形成[1]。經(jīng)腸吸收的物質(zhì)得不到肝臟的解毒進(jìn)入患者體循環(huán)，易導(dǎo)致患者出現(xiàn)各種細(xì)菌感染、膿毒血癥及內(nèi)毒素血癥的出現(xiàn)[2]。當(dāng)患者體內(nèi)出現(xiàn)因各種炎癥刺激機(jī)體免疫體統(tǒng)而引起的免疫反應(yīng)后，能夠?qū)е禄颊呷砥鞴偈軗p甚至出現(xiàn)衰竭的現(xiàn)象的出現(xiàn)。這一現(xiàn)象對(duì)患者腸道微生態(tài)平衡的保持起到惡劣的影響，進(jìn)一步影響肝硬化患者的以后。本次研究針對(duì)肝硬化患者及體內(nèi)腸道微生態(tài)的變化之間的關(guān)系進(jìn)行相關(guān)方面的研究，經(jīng)治療后發(fā)現(xiàn)益生菌能夠有效的改善肝硬化患者體內(nèi)腸道菌群失調(diào)的現(xiàn)象，報(bào)道如下。

表1 肝硬化組與正常對(duì)照組腸道菌群的比較（x-±s）

表2 治療后合生元組與肝硬化對(duì)照組的比較（x-±s）

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象：對(duì)本院自2013年3月至2014年12月收治的肝硬化失代償期患者78例采用隨機(jī)抽樣的方法進(jìn)行分組，分為兩組即合生元組，肝硬化對(duì)照組，每組39例。肝硬化組患者年齡23～84歲，平均年齡（58.73±3.47）歲，合生元組患者年齡24～82歲，平均年齡（59.05± 3.92）歲。健康對(duì)照組為15例同期健康在校大學(xué)生自愿者，年齡20～25歲，平均（23.02±0.47）歲。所有入選人群于半年內(nèi)均未使用抗生素類及益生菌類藥物。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本收集：對(duì)所有入選對(duì)象收集新鮮全便，對(duì)糞便樣本持續(xù)6 min混勻，并將待混勻樣本于4 ℃環(huán)境中進(jìn)行密封保存，所有樣本于8 h內(nèi)處理完畢。

1.2.2 測(cè)定方法。腸道菌群的檢測(cè)：取新鮮的糞便樣品0.5 g加入至4.5 mL生理鹽水中，并按照10倍連續(xù)稀釋法將樣品稀釋至10-9。分別取50 μL 10-9、10-7、10-5、10-3和10-1樣品液依次將樣品接種在選擇性培養(yǎng)基上。將樣品中的氧菌孵育在35 ℃孵育箱內(nèi)，培養(yǎng)時(shí)間為24 h；將樣品中的酵母樣真菌孵育在35 ℃的孵育箱內(nèi)，培養(yǎng)時(shí)間為48～72 h；將樣品中的厭氧菌采用抽氣換氣培養(yǎng)法進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間為48 h。使用VITEK-AMS全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)（美國梅里埃公司提供）進(jìn)行細(xì)菌鑒定。測(cè)定結(jié)果以每克糞便濕重中菌落形成的單位的對(duì)數(shù)值進(jìn)行表示（1 g CFU/g）。細(xì)菌的選擇：選擇需氧菌2種（腸桿菌、腸球菌），厭氧菌3種（擬桿菌、雙歧桿菌、乳桿菌）及酵母樣真菌。

1.2.3 治療方法：肝硬化對(duì)照組及合生元組均給予抗病毒、保肝、利尿、白蛋白等常規(guī)治療，合生元組特殊給予：①雙歧桿菌乳桿菌三聯(lián)活菌片（商品名：金雙歧，內(nèi)蒙古雙奇藥業(yè)提供。規(guī)格500毫克/粒，含活菌各5×107CFU/g）每3次/天，每次3粒；②乳果糖口服溶液（山東萊陽市江波制藥提供。規(guī)格10亳升/瓶，）每3次/天，每次10 mL。共治療48周。于治療前，治療96周后分別檢測(cè)。

1.2.4 診斷標(biāo)準(zhǔn)：參照中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝臟病學(xué)分會(huì)脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組制定的有關(guān)酒精性和非酒精性肝硬化的診斷標(biāo)準(zhǔn)；參照中華醫(yī)學(xué)會(huì)傳染病與寄生蟲病學(xué)分會(huì)、肝病學(xué)修訂的病毒學(xué)肝炎防治方案中的乙肝后肝硬化的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：對(duì)所有患者的數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。定性資料采用卡方進(jìn)行檢驗(yàn)；定量資料均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差的形式進(jìn)行表示，應(yīng)用配對(duì)設(shè)計(jì)資料的t檢驗(yàn)或采用兩個(gè)獨(dú)立樣本資料的t檢驗(yàn)對(duì)患者資料進(jìn)行分析。P＜0.05表示數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

見表1、2。

3 討 論

在人體中肝臟與腸道之間的聯(lián)系緊密，正常人腸腔內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定能夠有效的抑制人體炎癥的出現(xiàn)及對(duì)肝臟的免疫平衡起到積極的免疫調(diào)節(jié)作用[3]。當(dāng)人體內(nèi)的腸道內(nèi)環(huán)境發(fā)生變化，致使患者腸道內(nèi)環(huán)境失衡可導(dǎo)致肝臟的網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞功能遭到一定程度的破壞[4]。進(jìn)一步使患者的免疫系統(tǒng)遭到破壞，最終將對(duì)肝臟從無癥狀表現(xiàn)發(fā)展到肝臟的纖維化及肝硬化的轉(zhuǎn)變。近年來通過國內(nèi)外的相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)腸道菌群與肝硬化及并發(fā)癥的相關(guān)發(fā)病機(jī)制存在一定程度上的相關(guān)性，推其原因可能與腸道血液活化肝臟的功能有關(guān)[5]。肝臟內(nèi)分泌的膽汁等進(jìn)入腸道后對(duì)腸道內(nèi)環(huán)境也起到維護(hù)平衡的作用。在患者處于肝硬化階段時(shí)患者的腸道動(dòng)力障礙是導(dǎo)致患者出現(xiàn)腸道內(nèi)細(xì)菌過度繁殖的條件，對(duì)于目前臨床中使用的抗生素尤其是廣譜抗生素的應(yīng)用導(dǎo)致患者腸道內(nèi)菌群的大量死亡致使菌群相互之間失去平衡[6]。有些學(xué)者認(rèn)為抗生素導(dǎo)致患者腸道功能發(fā)生變化是由于抗生素能夠改變腸道內(nèi)細(xì)菌及其他微生物的構(gòu)成對(duì)腸道內(nèi)細(xì)菌總數(shù)的影響不是很明顯[7]；對(duì)于抗生素導(dǎo)致的患者體內(nèi)菌群發(fā)生異位及患者肝臟功能損害及內(nèi)毒素血癥等一系列的問題的存在是由于抗生素能夠改變腸道細(xì)菌的菌群之間的生長狀況。肝硬化患者的臨床表現(xiàn)多為患者的腸道出現(xiàn)水腫、患者的腸道動(dòng)力不足、消化酶種類及數(shù)量的減少、蠕動(dòng)不規(guī)律及食物殘?jiān)木奂逊e等極易對(duì)腸道內(nèi)細(xì)菌的生長環(huán)境及菌群之間的穩(wěn)態(tài)造成惡劣影響。

本研究應(yīng)對(duì)肝硬化患者糞便中的6種細(xì)菌的數(shù)量及比例進(jìn)行檢測(cè)，并應(yīng)用合生元（乳果糖和雙歧三聯(lián)活菌片）進(jìn)行長期干預(yù)治療，觀察治療前后腸道微生態(tài)的變化，為深入研究肝硬化患者腸道微生態(tài)奠定基礎(chǔ)。

[1] 陳燕飛.肝硬化患者腸道微生態(tài)研究[D].杭州:浙江大學(xué),2013.

[2] 中華預(yù)防醫(yī)學(xué)會(huì)微生態(tài)學(xué)分分.中國消化道微生態(tài)調(diào)節(jié)劑臨床應(yīng)用專家共識(shí)(2016版)[J].中國實(shí)用內(nèi)科雜志,2016,36(10):793-804.

[3] 張揚(yáng).合生元調(diào)整腸道微生態(tài)治療NAFLD及其對(duì)TLR4的影響[D].廣州:廣東藥學(xué)院,2014.

[4] 趙杰,朱維銘,李寧.益生菌、益生元、合生元與炎癥性腸病[J].腸外與腸內(nèi)營養(yǎng),2014,21(4):251-253.

[5] 郭慧玲,邵玉宇,孟和畢力格,等.腸道菌群與疾病關(guān)系的研究進(jìn)展[J].微生物學(xué)通報(bào),2015,42(2):400-410.

[6] 羅山鋮.缺血性腦卒中患者肝損害與腸源性內(nèi)毒素血癥的相關(guān)性[J].中國實(shí)用神經(jīng)疾病雜志,2015,18(19):25-26.

[7] 吳夏飛,連娜琦,陸春風(fēng),等.腸道菌群對(duì)慢性肝臟疾病影響的研究進(jìn)展[J].中國藥理學(xué)通報(bào),2013,29(12):1644-1647.

R657.3+1

B

1671-8194（2017）13-0113-02