周燕平+覃沅華+曲曉東

[摘 要] 目的：觀察牙齦炎和牙周炎患者齦溝液內(nèi)一氧化氮（NO）水平變化。方法：隨機(jī)抽取牙齦炎組、牙周炎組及正常組。使用硝酸還原酶法測定3組受試者齦溝液內(nèi)NO水平，并檢測牙齦炎組、牙周炎組患者治療前后牙周臨床指標(biāo)、齦溝液內(nèi)NO水平變化。結(jié)果：正常組齦溝液NO水平低于牙齦炎組，牙齦炎組齦溝液NO水平低于牙周炎組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。兩組患者治療后齦溝液內(nèi)NO水平有所下降仍高于正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。牙齦炎組、牙周炎組患者牙周臨床指標(biāo)均較治療前降低，牙齦炎組治療后牙周探診深度、附著喪失低于牙周炎組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：健康人群齦溝液內(nèi)亦可檢出NO，但水平較低，NO水平的上升伴隨著牙周疾病的發(fā)生、發(fā)展，且與牙周疾病炎癥程度具有一定關(guān)聯(lián)。

[關(guān)鍵詞] 牙齦炎；牙周炎；齦溝液；一氧化氮

中圖分類號：R781.05 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：2095-5200（2017）03-090-03

DOI：10.11876/mimt201703037

[Abstract] Objective： This study was conducted to observe the changes of nitric oxide （NO） level in gingival crevicular fluid of patients with gingivitis and periodontitis. Methods： Gingivitis group， periodontitis group and normal group were randomly selected. The levels of NO in gingival crevicular fluid of all patients in the three groups were measured by nitric acid reductase method. The changes of NO level in gingival crevicular fluid were observed before and after treatment in gingivitis group and periodontitis group. Results： The NO levels of the normal group in the gingival crevicular fluid was lower than that in the gingivitis group， and the NO levels of gingivitis group in gingival crevicular fluid was lower than that in the periodontitis group， the difference was statistically significant （P<0.05）. The NO levels in gingival crevicular fluid of gingivitis group and periodontitis group were decreased after treatment， but were still higher than that in the normal group， the difference was statistically significant （P<0.05）. The periodontal clinical indexes of gingivitis group and periodontitis group were lower than those before treatment， and periodontal probing depth and detachment loss in periodontitis group were both significantly lower than those in periodontitis group （P<0.05）. Conclusions： NO can be detected in the gingival crevicular fluid of healthy people， but the levels of NO is related to the occurrence and development of periodontal disease， and it is related to the degree of inflammation of periodontal disease.

[Key words] gingivitis； periodontitis； gingival crevicular fluid； nitric oxide

牙周病是一種菌斑感染導(dǎo)致的牙齒支持組織慢性炎癥性病變，包括牙齦炎、牙周炎等，以牙周支持組織破壞為主要表現(xiàn)[1]。作為一種化學(xué)性質(zhì)極其活潑的自由基，一氧化氮（NO）不僅參與了循環(huán)、消化、神經(jīng)、免疫等多個生理過程，也在牙周組織病理改變過程中扮演了重要角色[2]。齦溝液為牙齦結(jié)締組織滲入到齦溝內(nèi)的體液，檢測牙齦炎和牙周炎患者齦溝液內(nèi)NO水平變化，了解其引發(fā)牙周病的機(jī)制，對于疾病的診斷、評估與治療均具有價值[3]。為此，本研究進(jìn)行了對照分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)抽取2012年3月—2015年3月41例牙齦炎和57例慢性牙周炎患者，入組前6個月內(nèi)無牙周病治療史、抗生素使用史；選取同期35名健康體檢者，均經(jīng)全面檢查排除口腔粘膜與全身代謝性疾病[4]，納入正常組。本臨床研究已征得我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，受試者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 檢測方法

1.2.1 齦溝液內(nèi)NO檢測 取受試者雙側(cè)上下前后牙各1顆，其中前牙取中切牙（若缺失則取側(cè)切牙），后牙取第一恒磨牙（若缺失則取第二恒磨牙），清除牙垢、牙石，漱口，干燥牙面，覆蓋棉卷隔濕，采用袋底法提取齦溝液[5]，取樣部位包括頰、腭舌側(cè)近中、遠(yuǎn)中牙周袋內(nèi)，各取樣部位留置30 s，確保吸潮紙未受血液或唾液污染，立即將其置于EP管內(nèi)，3 min后重復(fù)上次操作，相同部位吸潮紙置于同一EP管內(nèi)，-70℃液氮保存，待測。檢測時將標(biāo)本取出，4℃解凍，以300 μL蒸餾水浸沒，3000 r/min離心5 min，留取上清液，以硝酸酶還原法實(shí)施NO檢測[6]。

1.2.2 相關(guān)牙周檢查及指標(biāo)記錄 記錄3組受試者牙齦指數(shù)、出血指數(shù)、牙周探診深度，按照文獻(xiàn)[7] 進(jìn)行評分。若探診深度超過3 mm且袋底位于牙周袋根部則判斷發(fā)生附著喪失，若牙齦無退縮，附著喪失=牙周探診深度-釉牙骨質(zhì)界到齦緣距離，若牙齦存在退縮，則附著喪失=牙周探診深度+釉牙骨質(zhì)界到齦緣距離。檢測區(qū)域包括舌側(cè)邊緣齦、頰側(cè)近中齦乳頭、頰側(cè)邊緣齦及頰側(cè)遠(yuǎn)中齦乳頭，各區(qū)域檢查結(jié)果平均值為最終結(jié)果。

1.3 治療方案

牙齦炎、牙周炎患者均接受相關(guān)治療，包括菌斑控制、齦上潔治、齦下刮治、咬合調(diào)整、牙周袋處理等[8]，并于治療后再次檢測齦溝液內(nèi)NO、相關(guān)牙周指標(biāo)，觀察患者上述指標(biāo)變化情況。

2 結(jié)果

2.1 NO檢測結(jié)果

正常組、牙齦炎組、牙周炎組受試者齦溝液內(nèi)NO水平分別為（0.63±0.14）μmol/L、（5.19±1.33）μmol/L、

（7.26±2.08）μmol/L，正常組齦溝液NO水平低于牙齦炎組，牙齦炎組齦溝液NO水平低于牙周炎組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。牙齦炎組治療后齦溝液內(nèi)NO水平為（2.87±0.45）μmol/L，低于牙周炎組患者治療后的（4.68±1.24）μmol/L，但兩組患者治療后齦溝液內(nèi)NO水平仍高于正常組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

2.2 牙周臨床指標(biāo)

正常組牙齦指數(shù)、出血指數(shù)、牙周探診深度、附著喪失均低于牙齦炎組，牙齦炎組上述牙周臨床指標(biāo)均低于牙周炎組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

牙齦炎組、牙周炎組患者牙周臨床指標(biāo)均較治療前降低，牙齦炎組治療后牙周探診深度、附著喪失低于牙周炎組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

3 討論

NO是左型精氨酸在一氧化氮合酶作用下生成的小分子氣體自由基，具有極其活潑的化學(xué)性質(zhì)，可參與機(jī)體循環(huán)、消化、免疫等多種系統(tǒng)病理生理過程[9]。自國外學(xué)者首次于唾液中檢出NO存在以來，NO在牙周組織疾病中作用時有報道 [10]。

本研究健康人群齦溝液亦可檢出NO，但水平較低，說明NO主要來源于齦溝液，并可參與牙周微循環(huán)調(diào)節(jié)、維持牙周正常菌群平衡、抗微生物感染等作用環(huán)節(jié)[11-12]。而牙齦炎和牙周炎患者齦溝液內(nèi)NO水平明顯上升，考慮與患者牙周組織均存在明顯炎癥有關(guān)，此時大量聚集的炎癥細(xì)胞可增強(qiáng)誘導(dǎo)型NO（iNO）表達(dá)，進(jìn)而引發(fā)NO水平上升[13]。既往研究也表明，隨著炎癥程度的加劇，牙周組織疾病患者齦溝液內(nèi)NO水平呈上升趨勢[14]。

在牙周指標(biāo)的觀察中，可以發(fā)現(xiàn)，NO與牙周指標(biāo)的變化趨勢相同，即隨著齦溝液內(nèi)NO水平的上升，患者牙齦指數(shù)、出血指數(shù)、牙周探診深度、附著喪失逐漸增加，說明過量的NO主要扮演細(xì)胞毒效應(yīng)分子和炎性產(chǎn)物，從而造成內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)障礙、血管內(nèi)皮破壞、微循環(huán)異常，引發(fā)疾病的進(jìn)一步發(fā)展[15]，其機(jī)制是炎癥誘導(dǎo)的NO大量生成可導(dǎo)致自然殺傷細(xì)胞活化，發(fā)揮病原微生物和腫瘤細(xì)胞殺傷作用，但過量NO可造成擴(kuò)血管因子與縮血管因子間平衡被打破，進(jìn)而造成多重級聯(lián)信號活化、引發(fā)炎癥瀑布級聯(lián)反應(yīng)，擴(kuò)大信號范圍，加劇炎癥進(jìn)展[16]；齦溝液內(nèi)NO主要來自于巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、中性粒白細(xì)胞等，而大量生成的NO可誘導(dǎo)上述細(xì)胞自身凋亡加劇，從而造成機(jī)體調(diào)控炎癥反應(yīng)能力下降、抗微生物防御能力不足，故牙齦炎和牙周炎均不存在自愈性，且隨著時間的推移，患者癥狀逐漸加重[17]。

經(jīng)規(guī)范化治療，牙齦炎、牙周炎患者牙周臨床指標(biāo)均得到明顯改善，牙周組織炎癥狀態(tài)的改善也伴隨著齦溝液內(nèi)NO水平的下降，而有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，在牙周疾病靜止期、痊愈期，齦溝液內(nèi)NO變化顯著[18]，因此，通過檢測牙齦炎和牙周炎患者齦溝液內(nèi)NO水平變化，不僅能夠判斷治療效果、預(yù)測疾病進(jìn)展，還可評估牙周疾病活動期，為治療方案的調(diào)整提供重要參考。

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