毛金觀，彭忠英，李琴

(1.南京市仙林鼓樓醫(yī)院，南京 210046；2.嘉興市婦幼保健院，嘉興 314000)

男性年齡與精子質(zhì)量和精漿生化的關(guān)系

毛金觀1*，彭忠英2，李琴2

(1.南京市仙林鼓樓醫(yī)院，南京 210046；2.嘉興市婦幼保健院，嘉興 314000)

目的 探討不同年齡段男性精子質(zhì)量與精漿彈性硬蛋白酶和精漿中性α-葡萄糖苷酶的關(guān)系。 方法 回顧性分析在嘉興市婦幼保健院門診檢測精子質(zhì)量和精漿生化(精漿彈性硬蛋白酶、精漿中性α-葡萄糖苷酶)的3 262例患者的臨床資料。根據(jù)年齡分為5組：<25歲組、25～29歲組、30～34歲組、35～39歲組和≥40歲組；并按精子質(zhì)量分為少弱精子癥(301例)、少精子癥(193例)、弱精子癥(1 335例)及正常精子組(1 433例)。統(tǒng)計(jì)分析不同精子質(zhì)量不同年齡段男性的精漿彈性硬蛋白酶、精漿中性α-葡萄糖苷酶資料。 結(jié)果 (1)3 262例精液分析，精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率7.14%，精漿彈性硬蛋白酶水平確診感染率29.25%；(2)各年齡組總體精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率相似(P>0.05)，生殖道感染發(fā)生率隨年齡增加有增高趨勢(P<0.05)；(3)不同精子質(zhì)量各組總體精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率不同(P<0.05)，其中少精子癥和少弱精子癥組均顯著高于弱精子癥組及精子正常組(P<0.05)，但生殖道感染發(fā)生率相似(P>0.05)；(4)隨著年齡增加，不同精子質(zhì)量各組精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率相似(P>0.05)，而精漿彈性硬蛋白酶異常發(fā)生率有增高趨勢(P<0.05)，其中少弱精子癥、少精子癥患者各年齡組間比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)；(5)各精子質(zhì)量組精漿彈性硬蛋白酶測定值均隨著年齡增加呈增高趨勢，且正常精子組的精漿彈性硬蛋白酶測定值在35～39歲組及≥40歲組均顯著高于<25歲組(P<0.05)。 結(jié)論 男科門診患者中生殖道感染具有普遍性；伴隨難以自愈的生殖道感染的少弱精子癥、少精子癥和弱精子癥可能與男性患者年齡增加有關(guān)，亦可能與附性腺病變嚴(yán)重程度、病程進(jìn)展所處不同階段有關(guān)。

年齡； 精子質(zhì)量； 彈性硬蛋白酶； 中性α-葡萄糖苷酶

(JReprodMed2017，26(7)：679-684)

男性不育患者以精子數(shù)量減少、精子活力異常多見。精漿彈性硬蛋白酶檢測是一種敏感、特異性炎癥指標(biāo)[1]。中老年年齡增加會使機(jī)體免疫力下降，可能更容易發(fā)生生殖道感染。生殖道感染可能會影響男性生殖腺，尤其是附睪炎癥，影響附睪分泌精漿中性α-葡萄糖苷酶。精漿中性α-葡萄糖苷酶含量和活力與精子活力及精子濃度都有密切關(guān)系[2-3]。本文通過回顧性分析本院門診檢測的不同年齡段的男性精子質(zhì)量與精漿生化資料，探討男性年齡與精子質(zhì)量與精漿彈性硬蛋白酶和精漿中性α-葡萄糖苷酶的關(guān)系。

資料與方法

一、對象及分組

回顧性分析2014年1月至2015年12月在嘉興市婦幼保健院門診檢測精子質(zhì)量并同時行精漿彈性硬蛋白酶和精漿中性α-葡萄糖苷酶檢測者3 262例。根據(jù)年齡分為5組：<25歲組、25～29歲組、30～34歲組、35～39歲組和≥40歲組；并按精液質(zhì)量分為少弱精子癥、少精子癥、弱精子癥及正常精子組。

二、精液分析及精子質(zhì)量判定

取樣前3 d禁酒并且禁欲3～7 d精液檢查。精液采集后置37℃恒溫箱內(nèi)液化，采用SCA精子質(zhì)量分析儀(西班牙)檢測精子濃度和活力。

精子質(zhì)量診斷標(biāo)準(zhǔn)參照第五版《世界衛(wèi)生組織人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊》[4]。參考值下限：精液體積1.5 ml，精子總數(shù)39×106/一次射精，精子濃度15×106/ml，前向運(yùn)動(PR)32%。

正常精子：精子總數(shù)(或濃度，取決于報(bào)告結(jié)果)、前向運(yùn)動(PR)精子百分率均等于或高于參考值下限；

弱精子癥：前向運(yùn)動(PR)精子百分率低于參考值下限；

少弱精子癥：精子總數(shù)(或濃度，取決于報(bào)告結(jié)果)和前向運(yùn)動(PR)精子百分率低于參考值下限；

少精子癥：精子總數(shù)(或濃度，取決于報(bào)告結(jié)果)低于參考值下限。

三、精漿生化檢測

精液分析的同時采用相應(yīng)的定量檢測試劑盒(深圳華康生物)行精漿彈性硬蛋白酶和精漿中性α-葡萄糖苷酶定量檢測；檢測儀器為深圳雷杜RT-6000酶標(biāo)分析儀，實(shí)驗(yàn)操作按試劑盒說明書。

精漿彈性硬蛋白酶定量測定結(jié)果判斷：正常者<290 ng/ml，隱行感染者290～1000 ng/ml，確診感染者>1 000 ng/ml。

精漿中性α-葡萄糖苷酶定量測定結(jié)果判斷：正常參考值為≥20 mU/一次射精。

四、分析指標(biāo)

精漿生化檢測異常的總體發(fā)生率、在各年齡組的發(fā)生率以及在不同精子質(zhì)量組的發(fā)生率；不同精子質(zhì)量在不同年齡段的精漿生化異常發(fā)生率和精漿生化測定值。

五、統(tǒng)計(jì)方法

結(jié) 果

一、一般情況

3 262例精液分析結(jié)果，精漿中性α-葡萄糖苷酶異常233例，發(fā)生率7.14%；精漿彈性硬蛋白酶>1 000 ng/ml為確診感染者954例，發(fā)生率29.25%。

二、總體各年齡組精漿生化異常發(fā)生率比較

各年齡組精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=4.448，P=0.349)；總體各年齡組精漿彈性硬蛋白酶確診感染異常發(fā)生率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=47.365，P=0.000)(表1)。

三、不同精子質(zhì)量各組精漿生化異常發(fā)生率比較

少精子癥、少弱精子癥、弱精子癥、正常精子者中的精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率不同，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.355E2，P=0.000)，其中少精子癥異常發(fā)生率顯著高于弱精子癥和正常精子者(χ2=2.496E2、1.766E2，均P=0.000)，少弱精子癥異常發(fā)生率顯著高于弱精子癥和正常精子者(χ2=1.514E2、98.220，均P=0.000)；精漿彈性硬蛋白酶異常發(fā)生率相似，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=5.545，P=0.136)(表2)。

表1 不同年齡各組總體精漿生化異常發(fā)生率比較

注：各年齡組總體比較，*P<0.05

表2 不同精子質(zhì)量各組精漿生化異常發(fā)生率比較

注：精子質(zhì)量各組總體比較，*P<0.05；與弱精子癥和正常精子組比較，#P<0.05

四、不同精子質(zhì)量組各年齡段的精漿生化異常發(fā)生率比較

1.少弱精子癥組：各年齡組精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率相似(P>0.05)；隨年齡增加精漿彈性硬蛋白酶異常發(fā)生率增高(P<0.05)，其中≥40歲組顯著高于<25歲組(P<0.05)。

2.少精子癥組：各年齡組精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率相似(P>0.05)，其中<25歲組最低；年齡增加精漿彈性硬蛋白酶異常發(fā)生率增高(P<0.05)，其中35～39歲組和≥40歲組顯著高于<25歲組(均P<0.05)。

3.弱精子癥組：各年齡組精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率相似(P>0.05)，其中以<25歲組最高；精漿彈性硬蛋白酶異常發(fā)生率在25～29歲組顯著低于其他各組(均P<0.01)。

4.正常精子組：各年齡組精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率相似(P>0.05)；隨年齡增加，精漿彈性硬蛋白酶異常發(fā)生率增高(P<0.01)，其中35～39歲組和≥40歲組顯著高于<25歲組(均P<0.05)(表3)。

五、不同精子質(zhì)量各組精漿彈性硬蛋白酶檢測結(jié)果比較

不同精子質(zhì)量各年齡組精漿彈性硬蛋白酶檢測結(jié)果比較顯示，大部分隨年齡增加，檢測結(jié)果有增高趨勢，但只有正常精子組中35～39歲組和≥40歲組顯著高于<25歲組(均P<0.05)(表4)。

表3 不同精子質(zhì)量不同年齡段各組精漿生化異常發(fā)生率比較[%(n)]

注：同一精子質(zhì)量組各年齡組總體比較，※P<0.05；與同一精子質(zhì)量組<25歲組比較，*P<0.05；與同一精子質(zhì)量組其他各年齡組比較，#P<0.01

討 論

本研究結(jié)果顯示，男科門診患者精漿彈性硬蛋白酶>1 000 ng/ml確診感染者的總體發(fā)生率為29.25%，少弱精子癥、少精子癥等不同精子質(zhì)量各組檢測精漿彈性硬蛋白酶異常為確診感染者大約為25%～35%，男性患者生殖道感染具有普遍性。不同精子質(zhì)量各組生殖道感染普遍存在且發(fā)病率都很高，少精子癥確診感染者占34.72%，與文獻(xiàn)報(bào)道的32.9%[5]相似，鄭九嘉等[6]報(bào)道IVF-ET治療的男性不育患者中感染發(fā)生率高達(dá)37.57%(275/732)。不同精子質(zhì)量各組精漿彈性硬蛋白酶檢測異常的總體發(fā)生率相似，但精漿中性α-葡萄糖苷酶異常的總體發(fā)生率在不同精子質(zhì)量組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，生殖道感染對附睪的影響值得深入研究。

我們2011～2012年男科門診篩查精液者的確診感染發(fā)生率為31.87%(363/1139)[7]，前期研究資料弱精子癥患者確診感染發(fā)生率為34.85%(92/264)，精子檢查正常者的確診感染發(fā)生率為31.30%(41/131)[8]。男性生殖道感染普遍存在，大部分隨著年齡增加，精漿彈性硬蛋白酶異常發(fā)生率和精漿彈性硬蛋白酶測定值有增高趨勢。臨床上經(jīng)

表4 不同精子質(zhì)量各年齡組精漿彈性硬蛋白酶檢測結(jié)果比較(x-±s)

注：與同一精子質(zhì)量組內(nèi)<25歲組比較，*P<0.05

常遇見精液量增多超過正常范圍者，可能為感染早期，可能與感染早期各生殖腺腺體分泌量增多有關(guān)。

少弱精子癥和弱精子癥患者中確診感染者的精液量及精子總數(shù)均降低[9]，梗阻性無精子癥、嚴(yán)重少精子癥等精子質(zhì)量越差，精漿果糖異常發(fā)生率越發(fā)增高[10]，弱精子癥和精子檢查正常者中確診感染者的精漿果糖測定值降低[8]。生殖道感染很難自愈也很難徹底治愈，男性患者生殖道感染隨年齡增加，生殖腺病變時間更久，慢性感染持續(xù)存在，部分患者病情越來越嚴(yán)重。一個35歲的男性患者，可能在30歲時感染，精子濃度、精子活力、精子總數(shù)出現(xiàn)下降，35歲來院檢查時，有的精子質(zhì)量可能還在正常范圍，有的可能已經(jīng)為少弱精子癥。男科門診經(jīng)常遇見間隔6個月、一年或更久要求復(fù)查精液的男性不育患者精子質(zhì)量越來越差，生殖道感染可能是重要的致病因素之一。男科門診中我們需要關(guān)注精子檢查正常者，他們隨年齡增加，也有可能存在精漿生化異常，更有可能因?yàn)樯车栏腥疽呀?jīng)引起精子濃度、精子活力、精子總數(shù)下降，但尚未到不正常狀態(tài)，增加精漿生化檢查有可能盡早發(fā)現(xiàn)男性不育病因。

不同年齡各組測定精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率相似，不同精子質(zhì)量各組測定精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率在少精子癥和少弱精子癥中較高，而且屬于同一精子診斷學(xué)分類的各年齡組精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率隨年齡增加有增高趨勢，提示生殖道感染隨患者的年齡增加附睪破壞越來越嚴(yán)重。精漿中性α-葡萄糖苷酶定量檢測結(jié)果異常者，其一次射精精液量及一次射精精子總數(shù)均降低[11]。確診感染者的精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率增加；精子活力小于10%者，精漿中性α-葡萄糖苷酶異常發(fā)生率及精漿中性α-葡萄糖苷酶測定值也是顯著降低[9]。本研究顯示，男性患者年齡增長導(dǎo)致精漿生化異常發(fā)生率增加。由此我們推測，男性患者的慢性生殖道感染隨年齡增長，慢性炎癥長期影響附睪等生殖腺病變嚴(yán)重，可能會導(dǎo)致少弱精子癥等男性不育患者精液量、精子總數(shù)和精子活力明顯降低。

精漿彈性硬蛋白酶含量<290 ng/ml的男性不育患者的精子DNA碎片指數(shù)明顯低于精漿彈性硬蛋白酶含量>1 000 ng/ml的患者[12]。生殖道感染的男性不育患者的精子DNA損傷程度增加[13]。生殖道感染是導(dǎo)致男性不育患者精子DNA損傷的重要因素之一。40歲及以上男性不育患者的精子DNA碎片率的檢出值明顯高于40歲以下者[14]。與<35歲者和35～39歲者相比，≥40歲的男性不育患者的DNA完整精子百分率降低[15]；精子DNA完整性差，影響輔助生殖技術(shù)臨床結(jié)局[16]。因此，我們也建議，評價輔助生殖技術(shù)臨床結(jié)局的影響因素時，應(yīng)該考慮生殖道感染和年齡因素。

綜上所述，男性不育患者尤其是實(shí)施輔助生殖技術(shù)的患者應(yīng)常規(guī)檢查精漿生化，尤其是二胎國策放開后，40歲以上的中年男性更應(yīng)常規(guī)檢測精漿生化。

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[編輯：羅宏志]

Relationship between ages and sperm quality and seminal plasma biochemical indexes

MAOJin-guan1*，PENGZhong-ying2，LIQin2

1.NanjingXianlin-GulouHospital，Nanjing2100462.JiaxingMaternal&ChildHealthHospital，Jiaxing314000

Objective：To investigate the relationship between age and sperm quality and biochemical indexes of seminal plasma.

Methods：The clinical data of 3 262 patients with sperm quality and seminal plasma biochemistry indicators (seminal plasma elastase & α-glycosidase) in Jiaxing Maternal & Child Health Hospital were analyzed retrospectively.The patients were divided into 5 groups according to the age：<25 year group，25-29 year group，30-34 years group，35-39 years group and≥40 years group.In addition，the patients were divided into oligoasthenospermia (n=301)，oligozoospermia (n=193) and asthenospermia (n=1335) and normal sperm group (n=1433) according to sperm quality.The correlation between the age or sperm quality and seminal plasma elastase & α-glycosidase was analyzed.

Results：The abnormal rate of seminal plasma α-glycosidase was 7.14%，and the infection rate confirmed by seminal plasma elastase level was 29.25% in 3 262 patients.The abnormal rate of α-glycosidase was similar among the different age groups (P>0.05).The infection rate was significantly increased with age (P<0.05).The abnormal rate of α-glycosidase was significantly different among the different sperm quality groups (P<0.05).The abnormal rate of α-glycosidase in oligoasthenospermia or oligozoospermia was significantly higher than that of asthenospermia or normal sperm group (P<0.05)，while the infection rate was similar (P>0.05).The abnormal rate of α-glycosidase was similar in different sperm quality group with the increase of age (P>0.05)，while the abnormal rate of seminal plasma elastase was significantly increased with age (P<0.05)，which also was significant different in the patients with oligoasthenospermia or oligozoospermia among the different age group (allP<0.05).The tendency of the seminal plasma elastase levels was increased with age in different sperm quality groups.Compared with<25 years old group，the seminal plasma elastase levels of normal sperm group with 35-39 years old and≥40 years old was significantly increased (P<0.05).

Conclusions：Reproductive tract infection in male clinic patients is universality. Oligoasthenospermia，oligozoospermia，and asthenospermia in patients with difficult to self-healing of reproductive tract infections may be related the patients’ age and the severity and advancement of infertile patients’ accessory sex gland lesions.

Age； Sperm Quality； Elastasey； α-glycosidase

10.3969/j.issn.1004-3845.2017.07.012

2016-12-22；

2017-01-23

嘉興市科技計(jì)劃(2015AY23035)

毛金觀，男，浙江平湖人，學(xué)士，主任醫(yī)師，生殖醫(yī)學(xué)、男科專業(yè).(*通訊作者，課題主持人原嘉興市婦幼保健院毛金觀于2016年9月入職南京市仙林鼓樓醫(yī)院)