張 逸 黃鳳洪 馬忠華 黃慶德 臧茜茜 陳 鵬 鄧乾春

(中國農業(yè)科學院油料作物研究所;油料脂質化學與營養(yǎng)湖北省重點實驗室1，武漢 430062)(中國農業(yè)科學院油料作物研究所-無限極(中國)有限公司功能油脂聯(lián)合實驗室2，廣州 510665)

微波預處理對沙棘油得率和品質的影響

張 逸1黃鳳洪1馬忠華2黃慶德1臧茜茜1陳 鵬1鄧乾春1

(中國農業(yè)科學院油料作物研究所;油料脂質化學與營養(yǎng)湖北省重點實驗室1，武漢 430062)(中國農業(yè)科學院油料作物研究所-無限極(中國)有限公司功能油脂聯(lián)合實驗室2，廣州 510665)

在2 450 MHz、560 W的微波條件下，分別對沙棘籽、沙棘果肉和沙棘全果進行0～5 min預處理，研究微波不同時間對溶劑法所提沙棘籽油、沙棘果油及沙棘全果油的得率和品質的影響。結果表明，微波預處理能提高沙棘籽油、沙棘果油和沙棘全果油的得率，最高增加比例分別為9.49%、28.35%、18.21%；隨著微波時間的延長，沙棘籽油中維生素E含量呈下降趨勢，而沙棘果油和沙棘全果油則相反；3種油中植物甾醇含量先增加后減少；沙棘籽油總酚呈先增加后減少的趨勢，沙棘果油和沙棘全果油則呈上升趨勢；微波也會導致過氧化值和酸價的升高，而微波預處理對脂肪酸組成的影響不大。由此可見，合適的微波預處理時間能同時提高沙棘籽油、沙棘果油和沙棘全果油得率及改善其營養(yǎng)品質。

微波預處理 沙棘油 溶劑提取法 得率

沙棘(Hippopha?rhamnoidesL.)為胡頹子科酸刺屬的灌木或小喬木[1]，是醫(yī)食兩用的植物，有很高的經濟價值和開發(fā)潛力，沙棘油提取于沙棘果實或種子，分為沙棘籽油、沙棘果油和沙棘全果油，含有多不飽和脂肪酸、維生素E、植物甾醇、類胡蘿卜素、多酚等生物活性成分。沙棘油具有保護心血管、改善胃腸道、促進皮膚組織再生、保護肝損傷等功效[2-5]，因此，沙棘油作為特種功能性油脂，在食品、醫(yī)藥保健品、化妝品等領域有廣泛的應用前景。然而，Yang等[6]報道沙棘籽的含油量一般為10%左右，沙棘果的含油量為1.4%～13.7%。含油量較低以及得率不高就極大限制了沙棘油的深度利用與產業(yè)發(fā)展，因而提高沙棘油的得率或改善沙棘油的品質值得深入研究。對油料進行預處理以提高油脂得率及改善油脂品質是有效手段之一，傳統(tǒng)的預處理方法有脫殼、粉碎、研磨、加熱和酶解等[7]，但傳統(tǒng)預處理耗時長或成本高；新型的微波技術通過物料分子與電磁場間的相互作用傳遞能量，可以對較厚物料進行快速、完整的加熱，從而破壞細胞壁結構，促進油脂和營養(yǎng)成分的溶出[8-9]。沙棘油的提取方法一般為溶劑法、超臨界CO2萃取法等[6]，而將微波預處理技術與常見沙棘油提取方法相結合并系統(tǒng)分析其品質的相關研究鮮見報道。本試驗分別以籽、果、全果為原料，探討微波預處理對溶劑法提取沙棘油得率、理化品質和營養(yǎng)品質的影響，并試圖推測其變化規(guī)律和機制，為深入開發(fā)利用沙棘油提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 原料與試劑

沙棘干果：青海康普生物科技股份有限公司；正己烷、無水乙醇為分析純：國藥集團化學試劑有限公司；氫氧化鉀、氫氧化鈉為分析純：天津市科密歐化學試劑有限公司；正己烷、異丙醇為色譜純：德國Merck公司；福林酚、5α-膽甾烷、生育酚標品、植物甾醇標品：美國Sigma-Aldrich公司。

1.1.2 儀器與設備

DU800型紫外分光光度計:德國Beckman Coulter公司；Agilent 6890氣相色譜儀:美國Agilent Technologies公司；Essentia LC-15C高效液相色譜儀:日本島津公司。

1.2 方法

1.2.1 原料微波預處理

將沙棘全果于40 ℃烘箱烘24 h，4 500 r/min粉碎3 s，過篩分離得到沙棘籽和沙棘果肉，將沙棘籽、沙棘果肉和沙棘全果調水至12%，密封放置在4 ℃冰箱中保持24 h，使水分均勻分布，將120 g待微波樣品分別平鋪于3個直徑為75 mm的平皿中，置于微波爐轉盤上，設置微波頻率2 450 MHz，功率560 W，進行微波處理0～5 min。

1.2.2 沙棘油的制備

粉碎微波0～5 min的沙棘籽、沙棘果肉和沙棘全果，并過40目篩，準確稱取一定量的樣品粉末于具塞平底燒瓶中，然后加入正己烷(料液比1:10)，置于45 ℃恒溫水浴鍋中攪拌提取2 h，經抽濾、旋轉蒸發(fā)及氮吹揮干溶劑，得到沙棘籽油、沙棘果油和沙棘全果油，稱重并按下式計算得率：

得率=(m/M)×100%

式中：m為沙棘籽油、沙棘果油或沙棘全果油的質量/g；M為沙棘籽粉、沙棘果肉粉或沙棘全果粉的干質量/g。

1.2.3 理化指標及沙棘油生物活性成分測定

1.2.3.1 理化指標

酸值：GB/T 5530—2008；過氧化值：GB/T 5538—2008；脂肪酸組成：EN14103。

1.2.3.2 維生素E

采用AOCS Official Method Ce 8-89的方法，精確稱取約2 g的待測油樣于25 mL的容量瓶內，并加入一定量的正己烷，搖動至樣品溶解，用正己烷定容至刻度，然后用HPLC測定維生素E的含量，流動相為正己烷:異丙醇=99.5:0.5(V/V)，進樣量20 μL，流速為1.0 mL/min。

1.2.3.3 植物甾醇

參照Azadmard-Damirchi等[10]的方法，稍作修改。

植物甾醇的提?。悍Q取0.03 g油樣(精確到0.000 1 g)于10 mL塑料離心管中，加入3 mL 2 mol/L的氫氧化鉀-乙醇溶液、150 μL 0.5 mol/L的5α-膽甾烷內標溶液(溶于正己烷中)，于90 ℃、160 r/min水浴搖床皂化20 min后取出冷卻至室溫，再加入2 mL蒸餾水和1.5 mL正己烷，于漩渦儀上漩渦5 min，然后在5 000 r/min下離心10 min，重復提取3次，合并3次上清液進行氣相色譜分析。

氣相色譜分析條件：Agilent 6890型氣相色譜儀，Agilent 7683B自動進樣器，氫火焰離子化檢測器；Agilent DB-5HT色譜柱(毛細管柱：30.0 m×320 μm×0.10 μm)；進樣量2 μL，進樣口溫度260 ℃，載氣20 mL/min(等待2 min)，隔墊掃吹流量3～5 mL/min；柱箱溫度60 ℃保持1 min，程序升溫：40 ℃/min升到310 ℃，保持時間6 min，后運行380 ℃，4 min；載氣為氦氣，流量2.0 mL/min，分流模式，分流比25:1，分流流量50 mL/min；檢測器溫度310 ℃，氫氣流量40 mL/min，空氣流量450 mL/min，恒定柱流量+氦氣尾吹流量30 mL/min。

1.2.3.4 總酚

沙棘油中多酚萃取參照Koski等[11]、Khatta等[12]和張苗[13]的方法，準確稱取1.25 g油樣于10 mL塑料離心管中，加入1.5 mL的正己烷和1.5 mL的80%甲醇水溶液后于室溫下在漩渦混合儀中混合5 min，再在5 000 r/min的條件下離心10 min，將上層油樣轉移至塑料離心管，在相同條件下重復萃取3次，將3次提取液合并混勻。

總酚含量測定采用Folin-Ciocalteau法[14]。取0.5 mL上述多酚提取液加入到10 mL比色管中，依次加入5 mL蒸餾水、0.5 mL福林酚試劑后混合均勻放置3 min，再加入1 mL澄清的飽和碳酸鈉溶液并用蒸餾水定容至10 mL，混勻后于室溫下靜置反應1 h，在765 nm處測定樣品的吸光度，結果用沒食子酸當量表示，即mg GAE/100 g。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析

采用Excel 2010處理數(shù)據(jù)，SPSS 18.0進行顯著性分析。

2 結果與討論

2.1 微波預處理對沙棘油得率的影響

由表1可見，溶劑法提取沙棘油得率受微波影響顯著(P<0.05)。3種沙棘油的得率從高到低依次為籽油、全果油和果油，隨著微波時間的延長，沙棘油的得率都呈上升的趨勢，微波處理5 min后，籽油、果油和全果油的得率與0 min比，分別提高了9.49%、28.35%、18.21%，原因可能是微波對水分子作用，使水分子加快振動頻率，產生摩擦，使溫度升高，促使含油細胞破裂[15]。Uquiche等[16]研究了微波預處理對智利榛子油得率的影響，研究表明相同微波功率下，微波時間越長，得率越高。李媛媛等[17]的研究也表明了微波輻射時間的延長能提高亞麻籽油的得率?？梢?，微波預處理能顯著提高沙棘籽油、沙棘果油和沙棘全果油的得率。

2.2 微波預處理對沙棘油品質的影響

2.2.1 酸價及過氧化值

由表2可見，酸價和過氧化值受微波影響顯著(P<0.05)。籽油和果油的酸價先增加后減少，全果油酸價呈上升趨勢，3種沙棘油的酸價范圍分別為1.93～2.55、8.99～11.44、6.85～10.38 mg KOH/g，從表2中還可以看出，籽油的酸價低于果油和全果油，可能是因為微波使沙棘果肉組織中的更多有機酸溶入到油中；隨著微波時間增加，3種沙棘油的過氧化值均呈先增大后減小的趨勢，如籽油在4 min時過氧化值達到26.17 mmol/kg，5 min時下降為2.62 mmol/kg，原因可能是微波時間延長，油料受到的熱能逐漸增加，油脂先氧化為初級氧化產物即氫過氧化物，過氧化值增加，隨著溫度不斷升高，不穩(wěn)定的氫過氧化物進一步氧化分解為二級產物，導致過氧化值的降低。馬勇等[15]、陳升榮等[18]、楊湄等[19]的結果表明微波預處理也能導致花生油、茶葉籽油和菜籽油的過氧化值下降。故沙棘籽、沙棘果肉和沙棘全果不適于長時間的微波處理，3 min之內較為適宜。

表1 微波預處理時間對沙棘油得率的影響/%

注:表中數(shù)值為平均值±標準偏差。同行字母不同表示差異顯著(P<0.05)，余同。

表2 微波預處理時間對沙棘油酸價及過氧化值的影響

2.2.2 脂肪酸

從表3可知，籽油中主要的脂肪酸為亞油酸、α-亞麻酸和油酸，果油為棕櫚酸、棕櫚油酸和油酸，而全果油則為棕櫚酸、棕櫚油酸、油酸、亞油酸和α-亞麻酸，與已有報道相一致[20-21]，其中籽油中α-亞麻酸質量分數(shù)為29.64%，果油中棕櫚油酸為30.58%，全果油中α-亞麻酸和棕櫚油酸質量分數(shù)分別為18.42%和12.99%，是沙棘油發(fā)揮緩解視疲勞、增強免疫力、抗炎等功能的重要物質[22]。微波預處理不同時間對3種油脂的脂肪酸組成均未產生明顯影響，α-亞麻酸、亞油酸等多不飽和脂肪酸也較為穩(wěn)定。

2.2.3 維生素E

維生素E是一種天然抗氧化劑，能減緩油脂的氧化。表4方差分析結果表明，維生素E含量受微波影響顯著(P<0.05)。籽油中維生素E檢測出了α-生育酚和γ-生育酚，果油和全果油中的維生素E則主要為α-生育酚，3種油的維生素E含量高低順序為果油>全果油>籽油。經微波預處理后，籽油中維生素E含量呈下降趨勢，從0 min的225.51 mg/100 g下降到5 min的212.14 mg/100 g；而果油和全果油則相反，微波預處理5 min，維生素E含量分別從微波前的364.33、290.14 mg/100 g上升到435.98、309.81 mg/100 g。Azadmard-Damirchi等[10]比較了0、2、4 min的微波預處理條件下菜籽油中生育酚的含量，結果表明生育酚含量先增加后減少；Cheng等[23]報道了微波1～2 min，棕櫚油中的維生素E含量增加，微波3～4 min，棕櫚油中的維生素E含量則依次減少。3種油維生素E含量受微波影響存在差異，可能是由于沙棘果不同提取部位受微波影響的機制不同，微波對籽油中維生素E的破壞大于維生素E的溶出，導致籽油中維生素E含量減少；而沙棘果肉中含有更多的維生素C、多酚等抗氧化成分[24]，會與維生素E的氧化產生競爭，從而可以減少微波高溫對維生素E的破壞。結果表明，微波預處理能一定程度影響沙棘籽油、沙棘果油和沙棘全果油中的維生素E含量。

表3 微波預處理時間對沙棘油脂肪酸組成的影響/%

表4 微波預處理時間對沙棘油維生素E的影響/mg/100 g

2.2.4 植物甾醇

植物甾醇是植物油中的天然成分，具有減少血清膽固醇、降低心血管疾病等功能。表5表明，植物甾醇含量受微波影響顯著(P<0.05)。籽油中檢測出5種植物甾醇單體，即菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇和Δ5燕麥甾醇；而果油和全果油中還檢測出了膽甾醇。隨著微波時間的延長，籽油、果油和全果油中的甾醇單體及甾醇總量都有先增加后減少的趨勢，3種油的甾醇總量最大值分別為958.40(籽油2 min)、1 092.50(果油3 min)、1 056.97 mg/100 g(全果油3 min)，比未微波(0 min)的含量分別增加了7.70%、15.83%、5.79%，而到微波5 min時，甾醇總量又依次減少到879.23、1 055.22、946.70 mg/100 g。籽油、果油和全果油中的甾醇單體和甾醇總量隨著微波時間的延長都有先增加后減少的趨勢，這可能是由于微波處理對沙棘籽及沙棘果肉組織細胞有破壞作用，有助于沙棘籽及果肉中甾醇的溶出，但隨著微波輻射時間的延長，溫度的上升，高溫下易氧化的植物甾醇被氧化分解，導致甾醇含量的降低；Azadmard-Damirchi等[10]研究了微波預處理對菜籽油中植物甾醇的影響，結果表明菜籽油中植物甾醇含量隨微波時間增加而增加，與本研究結果不一致，原因可能是微波對不同原料的影響有差異?？梢姡⒉A處理對沙棘籽油、沙棘果油和沙棘全果油的植物甾醇含量有一定程度的影響。

2.2.5 總酚

多酚是一種具有多元酚結構的重要次生代謝產物，具有強抗氧化活性。由表6可知，果油和全果油中的總酚含量明顯高于籽油，隨著微波時間延長，籽油總酚先增加后減少，果油和全果油則一直增加，微波對3種油的總酚含量影響顯著(P<0.05)。在4 min時，籽油總酚含量最高，為46.50 mg GAE/100 g，是0 min時的4.33倍，5 min時減少為25.76 mg GAE/100 g；在5 min時，果油和全果油總酚含量最高，分別為125.84、152.40 mg GAE/100 g，比0 min時分別增加了84.87%和189.40%，增量明顯。微波預處理能顯著增加沙棘油中總酚含量，其原因一方面是微波破壞了沙棘籽和沙棘果的細胞結構，促進了多酚的釋放；另一方面是微波使更多的結合酚轉化成游離酚，進而隨正己烷提取溶入油中；而長時間的微波會使籽油總酚含量降低，原因可能是過高的溫度破壞了油料結構，使易于氧化的多酚發(fā)生了氧化分解，導致籽油中總酚含量下降。Wataniyakul等[25]研究表明微波預處理使脫脂米糠中的總酚含量比未微波時增加了55%；Jiao等[26]探討微波處理對南瓜籽油的影響，結果表明微波能明顯提高南瓜籽油中的總酚含量。由此可見，一定時間的微波預處理能有效提高沙棘籽油、沙棘果油和沙棘全果油中的總酚含量。

表5 微波預處理時間對沙棘油植物甾醇的影響/mg/100 g

表6 微波預處理時間對沙棘油總酚的影響/mg GAE/100 g

3 結論

本試驗將微波預處理與溶劑法提取沙棘油相結合，系統(tǒng)研究了微波預處理時間對沙棘籽油、沙棘果油和沙棘全果油的得率、酸價、過氧化值及主要生物活性成分的影響。研究表明，隨著微波時間的延長，沙棘籽油、沙棘果油和沙棘全果油的得率都呈上升趨勢；維生素E(籽油除外)、植物甾醇和總酚含量都有所增加，其中總酚含量增加尤其明顯，但微波時間過長則會導致這些生物活性成分的減少以及酸價和過氧化值的增加，降低了油的品質；微波對3種油的脂肪酸組成影響不大，其中重要的n-3、n-6和n-7系列不飽和脂肪酸都不會因為微波輻射而遭到破壞。故選擇合適的微波時間對沙棘油得率及品質的提高有重要作用，本研究得出沙棘籽、沙棘果肉和沙棘全果分別微波處理2 min、2或3 min、3 min較為適宜，因為該微波時間下，3種沙棘油的得率、維生素E、植物甾醇、總酚均較高，而酸價、過氧化值變化較小，油脂均有理想的理化品質和營養(yǎng)品質?？梢?，微波預處理對解決沙棘油得率低的問題以及改善沙棘油的品質具有一定的意義。

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Effect of Microwave Pretreatment on Yield and Quality of Sea Buckthorn Oil

Zhang Yi1Huang Fenghong1Ma Zhonghua2Huang Qingde1Zang Xixi1Chen Peng1Deng Qianchun1

(Hubei Key Laboratory of Lipid Chemistry and Nutrition,Oil Crops Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences1,Wuhan 430062)(Joint Laboratory of Functional Oils and Fats,Oil Crops Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences-Infinitus (China)Co. Ltd.2,Guangzhou 510665)

Sea buckthorn seeds,pulp and whole berries were pretreated for 0 to 5 min with microwaves under 560 W at frequency of 2 450 MHz respectively,the effect of microwave pretreatment time on the yield and quality of sea buckthorn seed oil,pulp oil and whole berry oil extracted by solvent method was investigated.Results indicated that microwave pretreatment could increase the yield of sea buckthorn seed oil,pulp oil and whole berry oil,the highest increased proportion were 9.49%,28.35% and 18.21%,respectively.It would decreased the content of vitamin E of seed oil and increased it of pulp oil and whole berry oil with the duration of microwave,and the content of phytosterol in three kinds of oil increased initially and then decreased,the changes of total phenol in seabuckthorn seed oil as same as the phytosterol,but the content of seabuckthorn pulp oil and whole berry oil tended to go up.Besides,microwave could also lead to increase peroxide value and acid value.However,the impact of microwave pretreatment on fatty acids composition was unconspicuous.In conclusion,appropriate microwave pretreatment time would increase the yield of sea buckthorn seed oil,pulp oil and whole berry oil and improve its nutritional quality.

microwave pretreatment,sea buckthorn oil,solvent extraction method,yield

中國農業(yè)科學院油料作物研究所所長基金(161017 2014006)

2015-10-14

張逸，男，1986年出生，碩士，脂質化學與營養(yǎng)

鄧乾春，男，1979年出生，副研究員，脂質化學與營養(yǎng)

TQ646.4

A

1003-0174(2017)05-0068-07