鶴壁市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測檢驗中心 李勇 張艷麗 劉宏偉 宋保軍

如何驗證農(nóng)殘速測儀的準(zhǔn)確性

鶴壁市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測檢驗中心 李勇 張艷麗 劉宏偉 宋保軍

河南省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測中心

河南省綠色食品發(fā)展中心 主辦

河南省無公害農(nóng)產(chǎn)品認(rèn)證委辦公室

鶴壁市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)測檢驗中心通過摸索和研究，開展了速測儀的比對驗證?，F(xiàn)將驗證方法介紹如下，供同行參考。

一、驗證過程

（一）基本準(zhǔn)備

1.儀器與試劑

驗證儀器：河南農(nóng)大迅捷公司生產(chǎn)的農(nóng)藥殘留檢測儀、吉大·小天鵝農(nóng)藥殘留快速檢測儀、北京強(qiáng)盛分析儀器制造中心快速檢測儀。

驗證試劑：石家莊某農(nóng)殘試劑，廣州某農(nóng)殘試劑。

2.實(shí)驗方法

按照GB/T5009.199-2003《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》酶抑制率法(分光光度法)方法檢測。

3.樣品的預(yù)處理

（1）樣品處理：選取有代表性的蔬菜樣品，剪成1 cm左右長度的碎片，取樣品1 g，放入燒杯或提取瓶中，準(zhǔn)確加入5 mL提取液，振蕩1～2 min，倒出提取液，靜置3～5 min，待用。

（2）空白溶液測試：先于試管中加入2.5 mL緩沖液，再準(zhǔn)確加入0.1 mL酶液和0.1 mL顯色劑，搖勻，在水浴溫度37℃的條件下放置15 min以上。再加入0.1 mL底物搖勻，將溶液倒入比色皿中，此時檢測溶液開始顯色反應(yīng)，應(yīng)立即放入儀器比色池中，記錄反應(yīng)3 min的吸光度變化值。

（3）樣品溶液測試：先于試管中加入2.5 mL樣品提取液，其他操作與空白溶液測試相同，記錄反應(yīng)3 min的吸光度變化值。

（二）采用不同分組進(jìn)行多角度驗證

1.不同操作人員使用同一樣品在同一臺儀器上進(jìn)行驗證，以驗證不同操作習(xí)慣對速測準(zhǔn)確性的影響。人員操作習(xí)慣影響的驗證，是指定多名檢驗人員，用統(tǒng)一的樣品和速測試劑，對同一臺速測儀器進(jìn)行操作。根據(jù)每個操作人員的通道誤差率判定操作人員對速測準(zhǔn)確性的影響。本驗證指定了4名操作人員，用同一樣品和同一品牌試劑進(jìn)行，選取3臺速測儀進(jìn)行平行驗證。以1號速測儀為例，驗證結(jié)果見表1。

結(jié)果表明：在統(tǒng)一樣品、統(tǒng)一速測試劑、同一臺速測儀器的條件下，由于操作人員的習(xí)慣不同，得到的4個數(shù)據(jù)，按照Q檢驗法，25.7屬于可疑值，說明結(jié)果存在一定的差異。這種差異多數(shù)由于操作不規(guī)范造成的，比如吸取2.5 mL浸提劑時，不用移液槍，直接倒入小瓶，小瓶里的浸提劑數(shù)量不精確，直接影響檢測結(jié)果；又如不會正確使用移液槍，吸取時過量。也可能是器具工具造成的，比如移液槍老化，造成吸液時有漏液，或吸量不準(zhǔn)確。

表1 1號速測儀不同操作人員的通道誤差

2.同一操作人員用同一樣品對多臺同型號儀器進(jìn)行驗證，以驗證同型號儀器之間的差異。同型號儀器之間的驗證就是一名檢測人員用統(tǒng)一的樣品和速測試劑在多臺同型號的速測儀上進(jìn)行檢測。本驗證要求參與本平行驗證的所有儀器為性能可靠的儀器，并要求不同儀器由同一名操作員進(jìn)行。 以抑制率平均值之間的絕對差判定各儀器之間的差異。本驗證指定了1名檢測員，選取了某品牌型號的4臺速測儀，用同一樣品和同一品牌試劑進(jìn)行，驗證結(jié)果見表2。

結(jié)果表明：4臺某品牌型號速測儀的抑制率平均值最高為27.6，最低為25.9，絕對差值為3.5，表明同型號速測儀的準(zhǔn)確性并非完全一致。但各臺的抑制率平均值的差別均不超過10%，表明各臺儀器均為合格產(chǎn)品，能夠承擔(dān)速測任務(wù)。

3.同一人員使用同一樣品對不同型號儀器進(jìn)行驗證，以驗證不同型號儀器之間的差異

不同型號速測儀的驗證是平行驗證，3種品牌型號的的速測儀，各選取1臺，由同一人員使用同一樣品、同一試劑進(jìn)行檢測，通過比較抑制率平均值判定各型號儀器的準(zhǔn)確性是否一致。本驗證選取了河南農(nóng)大迅捷速測儀、吉大速測儀、北京強(qiáng)盛速測儀中各選取1臺，指定4名檢測員，用同一樣品和同一品牌試劑進(jìn)行，驗證結(jié)果見表3。

表2 4臺某型號儀器之間的抑制率平均值

結(jié)果表明：在同一操作人員、同一樣品、同一試劑的條件下，3種品牌型號的速測儀抑制率平均值接近一致，說明3種品牌型號速測儀的準(zhǔn)確性是一致的。

二、本次驗證的指導(dǎo)意義

（一）速測雖然不在計量認(rèn)證和機(jī)構(gòu)考核范圍內(nèi)，但由于其作為最常用的監(jiān)管手段，必須定期對速測儀的準(zhǔn)確性進(jìn)行驗證。這方面是大部分實(shí)驗室的薄弱環(huán)節(jié)，必須進(jìn)行加強(qiáng)與完善。

（二）本次驗證表明，速測儀的準(zhǔn)確性受人員操作習(xí)慣、水浴溫度、廠家試劑等多種因素影響，必須加強(qiáng)操作規(guī)范培訓(xùn)，并對速測試劑進(jìn)行準(zhǔn)確性驗證。

（三）不同型號、品牌的速測儀，很有可能存在差異。若一個單位在使用不同型號、品牌的速測儀時，必須對其進(jìn)行驗證，以掌握不同型號不同品牌速測儀的稟性。

（四）對試驗過程所用的移液槍等器具，要定期進(jìn)行校驗，操作人員也要正確使用移液槍等器具，減少操作誤差。

表3 不同型號儀器之間的抑制率平均值