酶對(duì)固體墨污布洗凈率的研究
探討了降低固體墨中動(dòng)物膠的作用及提高洗凈率的方法。用Trypsin、Papain和Uguis分解明膠,酶的用量越多,明膠的分解越快。在固體墨溶液中添加酶,發(fā)現(xiàn)Trypsin和Papain使固體墨液的透過率上升。在洗凈實(shí)驗(yàn)中,用方差檢驗(yàn)分析了洗凈率與酶及纖維的關(guān)系。用酶洗凈固體墨污垢,主要是酶對(duì)固體墨中的膠發(fā)生了作用。
酶;固體墨污布;洗凈率
固體墨中動(dòng)物膠的作用是保護(hù)膠體,本研究用明膠代替動(dòng)物膠,考察了蛋白質(zhì)分解酶對(duì)墨液的沉降作用,同時(shí)在洗凈實(shí)驗(yàn)中調(diào)查了蛋白質(zhì)分解酶對(duì)固體墨污垢的去除效果。實(shí)驗(yàn)所用的酶是在身體用洗滌劑中配合的、植物提取的木瓜蛋白酶(Papain),動(dòng)物提取的胰蛋白酶(Trypsin)和墨污垢洗凈中使用的夜鶯粉(U g u i s)。由于對(duì)u g u i s的用法不清楚,因而,本研究用試劑酶作比較,以確認(rèn)它的作用。
1.1 實(shí)驗(yàn)材料
固體墨使用日本きくや制造的油煙墨。實(shí)驗(yàn)布:聚酯布(日本中尾濾布提供,PET)、棉60(關(guān)西衣生活研究提供,cotton)、聚酯65%/棉 35%混紡布(關(guān)西衣生活研究提供,PC)。對(duì)上述白布實(shí)施前處理后,裁成10cm×10cm的布基備用。酶:Papain(日本和光純藥提供)、Trypsin(來自于活豬1:250,由NaKalai tesque提供)。uguis(美容文化社提供),是把uguis加工成粉末,在快速起泡的肥皂中1次混入0.5g uguis,為防止吸濕,在肥皂中混入了自然賦形物。
在明膠分解實(shí)驗(yàn)中,使用試劑級(jí)的明膠和試劑級(jí)的氨基酸L(-)-苯基丙氨酸(特級(jí))。pH調(diào)整采用了NaOH溶液和鹽酸溶液。上述材料均來自日本和光純藥株式會(huì)社。
1.2 墨液透過率的測(cè)定
在10mL同樣濃度的固體墨溶液(約7.79g固體墨/200mL蒸餾水)中,分別添加3種酶,測(cè)定固體墨溶液的透過率(日本島津制作所 UV-2550,530nm),加入的酶量為100、250 mg/kg,溫度30℃、40℃。
1.3 酶對(duì)明膠的分解性
1.3.1 導(dǎo)電率測(cè)定法
(1)明膠檢量線
測(cè)定明膠濃度分別為0.1%、0.5%、1.0%、 1.5%、2.0%溶液的導(dǎo)電率(HORIBA ES-51,電極常數(shù)1052×100m-1,測(cè)定范圍0.1~10 S/ m-1),用分光光度計(jì)(日本島津制作所 UV-2550)測(cè)定UV下的吸光度。明膠溶液的濃度X與導(dǎo)電率Y1成比例關(guān)系。
為了考察用導(dǎo)電率測(cè)定明膠溶液濃度的妥當(dāng)性,本研究還測(cè)定了同樣濃度明膠溶液的吸光度(λmax=258nm),明膠在258nm處對(duì)苯基丙氨酸有吸收。測(cè)定結(jié)果顯示:明膠濃度X與吸光度Y2成比例關(guān)系。
上述實(shí)驗(yàn)測(cè)定的導(dǎo)電率Y3與吸光度測(cè)定值X間具有很高的相關(guān)性。
因此,通過測(cè)定導(dǎo)電率把握明膠溶液的濃度是可行的。
(2)氨基酸液檢量線
明膠經(jīng)酶分解后會(huì)生成氨基酸,為了考察用導(dǎo)電率的變化追蹤氨基酸濃度的妥當(dāng)性,本研究使用試劑氨基酸做了定量討論。實(shí)驗(yàn)測(cè)定了5、 50、100、250、500、1000、2000、5000 mg/kg、1.0%、1.5%、2.0% L(-)-苯基丙氨酸水溶液的導(dǎo)電率。L(-)-苯基丙氨酸的濃度X與導(dǎo)電率Y4成比例關(guān)系。
本研究還測(cè)定了L(-)-苯基丙氨酸在λmax=258nm處的吸光度,確認(rèn)L(-)-苯基丙氨酸濃度(5、50、100、250、500、1000、2000 mg/kg)與吸光度Y5存在比例關(guān)系。
上述實(shí)驗(yàn)測(cè)定的導(dǎo)電率Y6與吸光度測(cè)定值X存在高相關(guān)性。
因此,通過測(cè)定導(dǎo)電率把握L(-)-苯基丙氨酸濃度是可行的。
1.3.2 空白實(shí)驗(yàn)
測(cè)定2.0%明膠溶液與Papain、Trypsin、Uguis各250ppm(40℃,pH5.8)反應(yīng)60min的導(dǎo)電率,單獨(dú)調(diào)查酶對(duì)明膠溶液導(dǎo)電率的影響。
1.3.3 分解率的定義
把式(1)測(cè)定的導(dǎo)電率換算成明膠濃度,將明膠初始濃度減少的量作為分解量,并以百分率表示明膠的分解率。
1.3.4 明膠的分解
把3種酶分別添加至200mL 2.0%的明膠水溶液中,測(cè)定溶液導(dǎo)電率的變化。為了討論洗滌條件,酶的加入量為100、200、250mg/kg,溫度30℃、40℃、50℃,用NaOH或鹽酸調(diào)整溶液的pH為4.4、5.9、8.0、10.5,然后測(cè)定溶液的導(dǎo)電率,按照1.3.3的方法求出明膠的分解率。
1.4 墨污染布的制作及洗滌方法
用固體墨的原液(約7.79g固體墨/蒸餾水200mL)做成全面污染布,作為濃墨污染布。污布洗凈前的反射率(平均值±SD,n=20),PET(21.24±0.06)%,棉(17.63±0.14)%,PC (18.96±0.33)%。使用同樣的固體墨做成薄墨(固體墨0.534g/蒸餾水200mL)污染布,污染布洗凈前的反射率(平均值±SD,n=20),PET (29.63±2.48)%,棉(31.72±2.34)%,PC (39.42±1.66)%。
洗凈方法:用立式去污機(jī)在100r/min下分別洗凈污布15min、30min。第一次經(jīng)酶洗凈后,用水漂洗,在烘干機(jī)(60℃)干燥1h,然后進(jìn)行第二次酶洗凈。洗凈條件采用各種酶分解效果高的條件。第二次酶洗凈后,用40℃ 0.5%的SDS溶液洗凈15min、30min,以除去污垢和實(shí)驗(yàn)布上的酶。洗凈性評(píng)價(jià)是通過測(cè)定實(shí)驗(yàn)布的表面反射率(日本電色SQ 2000),算出K/S值,最后求出洗凈率(%)。Rs根據(jù)第一次洗凈、第二次洗凈及第一次洗凈前污布的表面反射率值來計(jì)算。
對(duì)薄墨污染布第二次酶洗凈30min的洗凈布,本研究調(diào)查了污布中的蛋白質(zhì)殘留量。實(shí)驗(yàn)是把污布浸在100mL 0.1mol/L NaOH溶液中,在80℃攪拌2h,抽出明膠。根據(jù)Bradford法,用同仁化學(xué)的蛋白快速定量?jī)x(Lot FQ823)測(cè)定抽出液中的蛋白質(zhì)含量。
2.1 酶對(duì)墨液透過率的影響
本研究調(diào)查了酶對(duì)固體墨液的洗凈作用。實(shí)驗(yàn)是把濃度為100、250mg/kg的Papain、Trypsin、Uguis分別添加至固體墨溶液中,圖1是在30℃和40℃反應(yīng)的結(jié)果。添加Uguis的實(shí)驗(yàn)從開始至結(jié)束,固體墨溶液的透過率始終為0,故略去該圖。實(shí)驗(yàn)所用的固體墨溶液在21h后的透過率為0,說明無墨粒沉降。
圖1 酶對(duì)固體墨液透過率的影響
在添加Papain、Trypsin的體系中,均觀察到了墨粒子沉降的現(xiàn)象,固體墨溶液的透過率上升。添加250mg/kg的Papain,在30℃、40℃反應(yīng)1h后,固體墨溶液的透過率上升。這可能是動(dòng)物膠發(fā)生分解,墨粒子開始沉降之故。添加100mg/kg的Papain在3h后,墨粒子才開始發(fā)生沉降。在添加250mg/kg的Papain反應(yīng)8h后(30℃),固體墨溶液的透過率達(dá)到最高的59.2%。在觀察到墨粒子沉降的同時(shí),還觀察到墨粒子凝集的狀態(tài),這是兩種不同的現(xiàn)象。例如,添加100mg/kg的Papain(40℃)8h后,固體墨溶液的透過率為46.1%,大的墨粒子凝集呈塊沉降,而更加細(xì)小的粒子呈分散狀態(tài),因而透過率高。
Trypsin比Papain更快引起墨液粒子沉降,在所有條件下,均顯示出比較高的透過率。添加250mg/ kg的Trypsin(40℃)最先發(fā)生沉降現(xiàn)象,8h后固體墨溶液的透過率達(dá)到72.5%。添加100mg/kg的Trypsin(40℃)在1h后也發(fā)生墨粒子沉降,8h后固體墨溶液的透過率達(dá)到66.8%。說明溫度是Trypsin的優(yōu)先反應(yīng)條件。Trypsin對(duì)動(dòng)物膠的作用比Papain更快,分解量更多。
2.2 酶對(duì)明膠的分解
2.2.1 酶量與分解率
在固體墨溶液的沉降實(shí)驗(yàn)中,雖沒有得到Uguis的數(shù)據(jù),但由明膠分解確認(rèn)了它對(duì)固體墨的作用。圖2是空白實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。在單純的2.0%明膠溶液及單純的250mg/kg的Papain、Trypsin、Uguis溶液中,溶液的導(dǎo)電率均沒有發(fā)生變化。
圖2 三種酶和2.0%明膠在40℃蒸餾水中的導(dǎo)電率
在2%的明膠溶液中分別添加100、200、 250mg/kg的Papain、Trypsin、Uguis,通過導(dǎo)電率測(cè)定明膠溶液分解生成的氨基酸量。研究發(fā)現(xiàn):隨著時(shí)間增加,明膠溶液的導(dǎo)電率上升。圖3是根據(jù)導(dǎo)電率求出的明膠分解率。不論是哪種酶,隨著時(shí)間增加均會(huì)導(dǎo)致明膠發(fā)生分解,并在反應(yīng)30min后達(dá)到一定值。Papain及Trypsin 在200mg/kg、250mg/kg的添加量的分解率均高。在所有濃度范圍內(nèi),Trypsin的明膠分解作用均高于Papain。Uguis比上述兩種酶的明膠分解率低,在100mg/kg,明膠幾乎沒有分解。
圖3 2.0%明膠分解率與酶濃度的關(guān)系(40℃,pH5.9,n=3)
圖4 2.0%明膠分解率與溫度的關(guān)系(250mg/kg,pH5.9,n=3)
圖5 2.0%明膠分解率與溶液pH值的關(guān)系(250mg/kg,pH5.9,n=3)
2.2.2 溫度與分解
圖4是250mg/kg的Papain、Trypsin、Uguis在 30℃、40℃、50℃對(duì)2.0%明膠的分解率。Papain及Trypsin在50℃、40℃的分解率都高,而在30℃的分解率較低。Uguis在所有的溫度范圍內(nèi)分解率均比其他酶低。
2.2.3 pH與分解率
圖5是250mg/kg的Papain、Trypsin、Uguis在pH4.4、pH5.9、pH 8.0、pH 10.5對(duì)2.0%明膠的分解率。Papain及Trypsin在pH5.9的分解率最高。Papain在pH4.4、pH8.0的分解率低,在pH10.5幾乎沒有發(fā)生分解。Trypsin在pH4.4和pH10.5的分解率低。Uguis在所有條件下的分解率都低。
Papain和Trypsin均是加水分解酶對(duì)肽結(jié)合發(fā)生作用。Papain有廣泛的基質(zhì)特異性。在中性pH作用性廣,是完全的一次構(gòu)造的單純蛋白質(zhì)。Trypsin的基質(zhì)特異性嚴(yán)密,只對(duì)含有羧基的肽結(jié)合有特異的作用。Uguis由于不是試劑,對(duì)它的詳細(xì)情況不了解,它對(duì)明膠的分解效果較小。在250mg/kg濃度、40℃下作用60min后,比較3種酶的最大分解率,Trypsin為41.6%,Papain為39.9%,Uguis為13.6%,Trypsin的分解率最高,Uguis的分解率僅為Trypsin的3成左右。在固體墨溶液沉降實(shí)驗(yàn)中,未觀察到Uguis使墨溶液透過率發(fā)生改變,但在明膠分解實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),Uguis使溶液的導(dǎo)電率上升,說明Uguis使明膠慢慢地發(fā)生了分解。
2.3 酶對(duì)墨污布的洗凈性
洗凈需要從基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)找出適合的酶應(yīng)用條件。根據(jù)圖1的結(jié)果,為使動(dòng)物膠分解,在洗凈前把
污布在500mL濃度為250mg/kg的酶溶液中浸泡2h(40℃),根據(jù)圖3~圖5的洗凈結(jié)果,在1L蒸餾水(40℃)中添加250mg/kg的酶,調(diào)整溶液pH為5.9,進(jìn)行洗凈。圖6是濃墨污染布(Dark ink)及薄墨污染布(Light ink)分別用酶洗凈1次的結(jié)果,圖7是經(jīng)酶第2次洗凈的結(jié)果,圖8是為了提高洗凈效果,用SDS再次洗凈后的結(jié)果。圖中的空白樣是用水洗凈的結(jié)果。
2.3.1 用酶洗凈第1次的洗凈結(jié)果(圖6)
對(duì)濃墨污染布,用酶洗凈1次、2次的洗凈力都很低。在第1次用酶洗凈時(shí),酶的種類及纖維種類對(duì)洗凈率并無差別(ANOVA,p<0.05)。洗凈時(shí)間的差別:對(duì)于棉,洗15min和洗30min有明顯差別,30min的洗凈率更高(ANOVA,p<0.05)。
薄墨污染布比濃墨污染布的洗凈率數(shù)值高。酶對(duì)洗凈率差的影響,Trypsin對(duì)棉的洗凈率高(ANOVA,p<0.05)。對(duì)不同纖維種類,在使用Uguis時(shí),洗凈時(shí)間及纖維種類的洗凈率有差別(ANOVA,p<0.05),30min的洗凈率以PC最高。
第1次用酶洗凈,不論是濃墨污染布還是薄墨污染布,均與水洗的洗凈率沒有差別。通過酶的作用分解動(dòng)物膠對(duì)提高洗凈率幫助不大。同水洗一樣,它的作用只是使墨污垢從布表面脫離。
2.3.2 用酶洗凈第2次的洗凈效果(圖7)
濃墨污染布的洗凈率稍有提高,大多數(shù)的洗凈率<10%。酶只對(duì)PET和PC的洗凈率有影響, Uguis對(duì)PET及PC的洗凈率高(ANOVA,p<0.05)。沒有發(fā)現(xiàn)纖維種類引起的洗凈率差別(ANOVA,p<0.05)。洗凈時(shí)間的影響,對(duì)于PET,30min的洗凈率最高(ANOVA,p<0.05)。
薄墨污染布的洗凈率高于酶第1次的洗凈率。酶種類引起的洗凈率差,在棉及PC均可觀察到(ANOVA,p<0.05),Uguis對(duì)棉的洗凈率高。對(duì)于PC,Uguis比空白樣和Papain的洗凈率更高,Trypsin比Papain的洗凈率高(Bonferroni-Dunn法,p<0.05)。纖維種類的差別,所有酶都能觀察到差異(ANOVA,p<0.05)。Papain對(duì)PET的洗凈率比棉和PC更高(Bonferroni-Dunn法,p<0.05),洗凈時(shí)間引起的洗凈率差沒有觀察到(ANOVA,p<0.05)。
圖6 第1次經(jīng)酶洗凈的洗凈率(250mg/kg,40℃,n=10)
在用酶洗滌時(shí),對(duì)于所有纖維,Papain的洗凈率比空白樣低,這可能是發(fā)生了墨的再污染,或植物由來的酶對(duì)動(dòng)物膠的分解力低。
2.3.3 SDS洗凈效果(圖8)
用酶洗凈后,為了除去污布上的污垢及酶,本研究用SDS溶液對(duì)污布進(jìn)行了洗凈。濃墨污染布的洗凈率只是稍有上升。不同的酶對(duì)PC的洗凈率有差別,其中Uguis的洗凈率更高(ANOVA,p<0.05)。Uguis和Trypsin對(duì)不同纖維的洗凈率有差別,對(duì)PC的洗凈率更高(ANOVA,p<0.05)。洗凈時(shí)間的影響:酶對(duì)PC洗凈 30min的洗凈率更高
在薄墨污染布的洗凈中,不同酶對(duì)PC的洗凈率有差別(ANOVA,p<0.05),Uguis比Papain的洗凈率更高(Bonferroni-Dunn法,p<0.05)。所有酶的洗凈率均因纖維種類有差別(ANOVA,p<0.05),Papain對(duì)PET的洗凈率高于對(duì)棉和PC的洗凈率(Bonferroni-Dunn法,p<0.05)。Uguis對(duì)PC的洗凈率高于棉(Bonferroni-Dunn法,p<0.05)。Trypsin對(duì)PET和PC的洗凈率高于棉(Bonferroni-Dunn法,p<0.05)。洗凈時(shí)間的影響:Uguis洗凈30min的洗凈率更高(ANOVA,p<0.05)。
圖7 第2次經(jīng)酶洗凈的洗凈率(250mg/kg,40℃,n=10)
圖8 酶洗凈后再經(jīng)0.5%SDS洗凈的洗凈率(40℃,n=10)
洗凈次數(shù)與洗凈率的關(guān)系,是對(duì)酶洗凈第1次、酶洗凈第2次在30min的洗凈結(jié)果進(jìn)行比較的。在用Trypsin、Uguis洗凈濃墨污染的場(chǎng)合,發(fā)現(xiàn)了洗凈次數(shù)及纖維種類引起的洗凈率差,第2次洗凈的洗凈率更高(ANOVA,p<0.05)。對(duì)棉及PC,在第2次洗凈后的洗凈率明顯提高(ANOVA,p<0.05)。對(duì)薄墨污染布,則是PET及PC洗凈第2次后的洗凈率顯著提高(ANOVA,p<0.05)。
2.3.4 洗凈后污布的動(dòng)物膠殘留量
Papain比空白樣的洗凈率更低,這可能與動(dòng)物膠的未分解有關(guān),或者是還有其他原因。因此,本研究用Bradford法調(diào)查了洗凈后污染布的動(dòng)物膠殘留量。圖9是洗凈前PET污布、棉污布、PC污布的蛋白質(zhì)含量與洗凈后薄墨污染布(用酶第2次洗凈30min)的對(duì)比結(jié)果。
圖9 用Bradford法測(cè)定洗凈前后樣品上的動(dòng)物膠殘留率(n=2)
不論是哪種污布,與洗凈前相比,洗凈后的蛋白質(zhì)含量均減少,說明蛋白質(zhì)殘留量與洗凈率間有一定的相關(guān)性。例如,用Papain洗凈時(shí),洗凈率低的棉及PC的污布上殘留的蛋白質(zhì)是較多的,比水洗時(shí)的蛋白質(zhì)殘留量還多。而對(duì)于洗凈率高的Trypsin,洗凈后污布上的蛋白質(zhì)含量較少。同時(shí)考慮污布的洗凈率與蛋白質(zhì)殘留量的話,由于Papain對(duì)動(dòng)物膠的分解量少,因而洗凈性低,Trypsin對(duì)動(dòng)物膠的分解量多,因而洗凈性也高。
2.3.5 酶洗凈的課題
本研究整理墨污染布的洗凈結(jié)果,提出以下兩個(gè)課題;
首先,從3種酶對(duì)3種墨污染布的洗凈效果,得到以下結(jié)論:①棉是3種纖維中墨污垢最難洗去的。為了獲得高于空白樣的洗凈率,先用Papain洗凈后,再用Trypsin和Uguis洗凈Papain無法洗凈的污垢。對(duì)不同纖維的洗凈率,Trypsin和Uguis對(duì)PET、Uguis對(duì)棉、Uguis和Trypsin對(duì)PC均比空白樣的洗凈率高。
課題1 從對(duì)明膠的分解和固體墨液透過率的測(cè)定中,雖然發(fā)現(xiàn)Uguis的洗凈效果并不理想,但為何它的洗凈率高呢?眾所周知,鳥類的糞便中是存在蛋白酶的,在明膠中很難檢出蛋白質(zhì)的活性,但用酪素可檢出蛋白酶的活性。在本實(shí)驗(yàn)中,Uguis對(duì)明膠的分解率及固體墨溶液的透過率均低,表現(xiàn)出與Uguis對(duì)明膠作用相似的傾向。Uguis的洗凈率高的理由,是酶作用對(duì)干燥狀態(tài)的動(dòng)物膠與溶液不同,市售品中所含添加劑的影響也不甚明了。
另一方面,在固體墨溶液的沉降實(shí)驗(yàn)中,盡管確認(rèn)了Papain對(duì)動(dòng)物膠的分解效果,也確認(rèn)了酪素的分解效果,但Papain的洗凈率很低。酶對(duì)溶液(液體)與布(固體)的作用不同至今還有不解之處。由于沒有足夠的詳細(xì)數(shù)據(jù),要闡明這些問題,還需今后做進(jìn)一步的研究。
課題2 提高洗凈率。比較筱原陽子與本文圖8濃墨洗凈的結(jié)果后發(fā)現(xiàn),棉和PC的洗凈率只是稍有提高,但對(duì)于PET,組合洗凈方法比用酶洗凈的洗凈率更高。
WG.Cutler等人曾經(jīng)研究了酶對(duì)含蛋白質(zhì)污垢的日本墨汁的洗凈性,他們用堿性蛋白酶對(duì)EMPA116(用血液、墨汁、墨水混合染制的棉污布)進(jìn)行洗凈實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)只用洗滌劑洗凈(40℃),所得的污布反射率約17%,而添加酶后,污布反射率約為38%。雖然添加酶提高了洗滌劑的洗凈效果,但即使是配合酶的洗滌劑,除去墨污垢也很困難。在本實(shí)驗(yàn)條件下,用酶單獨(dú)洗凈濃墨棉污布,用Trypsin對(duì)棉污布進(jìn)行第2次酶洗凈(30min,40℃)后,污布反射率為25%。本研究?jī)H使用動(dòng)植物由來的酶,從先前微生物由來的酶的高洗凈效果研究出發(fā),探討了不同種類酶的洗凈效果,進(jìn)一步研究了酶對(duì)墨污染布的作用。
本研究討論了利用酶分解動(dòng)物膠、除去墨污垢的方法,得到的主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
3.1 在固體墨溶液中添加酶,測(cè)定溶液透過率。
Trypsin在添加時(shí)出現(xiàn)墨粒子的沉降和透過率上升的現(xiàn)象,Papain則在添加1h后開始變化。Uguis的透過率自始至終為0。
3.2 用明膠代替動(dòng)物膠測(cè)定,用Papain、Trypsin、Uguis分解明膠,確認(rèn)它們的作用。結(jié)果顯示,Papain、Trypsin、Uguis均是酶含量越多其分解率越高,而且在40℃,pH5.9時(shí)分解率高。
3.3 從上述3.1、3.2的結(jié)果設(shè)定洗凈條件,獲得比空白樣洗凈率高的纖維是:Uguis和Trypsin對(duì)PET,Uguis對(duì)棉,Uguis和Trypsin對(duì)PC。
3.4 從洗凈后污布的蛋白質(zhì)殘留量調(diào)查結(jié)果來看,洗凈率高的污布,蛋白質(zhì)殘留量少,酶對(duì)墨污垢的洗凈作用是除去動(dòng)物膠所致。
(岳霄譯自2015.4《纖維消費(fèi)雜志》,作者是日本岡山大學(xué)的筱原陽子)
The Detergency of Enzymes on Cloth Soiled with Solid India Ink
Yoko SHINOHARA
A method for the removal of India ink dirt from fabrics involving the reduction of the protective colloid of the glia present in the ink was investigated. The gelatin was decomposed by the enzymes trypsin, papain and uguis. The more enzymes applied, the faster the decomposition of the gelatin. When the mixture of enzymes was added to an India ink solution, the transmittance was increased by trypsin and papain. A washing test was then conducted to use variance test to analyze the relationship between the cleaning rate and these enzymes and fbers. It was revealed that the soil was removed by the effect of enzymes toward the glue in the solid India ink solution.
enzyme; cloth soiledwith solidIndia ink;cleaning rate