雍 燕 ， 方炳虎 ， 劉國昌 ， 謝郁超 ， 喬妍紅 ， 溫敏捷

(1.廣東溫氏大華農(nóng)生物科技有限公司 ， 廣東云浮527400 ； 2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院 ， 廣東廣州510642)

幾種中藥復(fù)方制劑對鴨傳染性漿膜炎的防治效果觀察

雍 燕1， 方炳虎2， 劉國昌1， 謝郁超2， 喬妍紅1， 溫敏捷1

(1.廣東溫氏大華農(nóng)生物科技有限公司 ， 廣東云浮527400 ； 2.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院 ， 廣東廣州510642)

鴨傳染性漿膜炎是由鴨疫里默菌(Riemerellaanatipestifer，RA)引起的一種主要侵害雛鴨、鵝等多種禽類的急性或慢性、敗血性、接觸性傳染病。該病多發(fā)于1～8 周齡的雛鴨，廣泛分布于世界各養(yǎng)鴨國家，臨床癥狀主要表現(xiàn)為頭頸歪斜、癱瘓、角弓反張、綠色下痢，剖檢主要以纖維素性心包炎、肝周炎、氣囊炎、腦膜炎等為特征，與大腸桿菌病的典型區(qū)別在于肝周包膜易剝離，且大腸桿菌病患鴨在剖檢時非常臭。該病死亡率較高，可達10%～90%，耐過鴨生長性能、飼料報酬低下，已成為我國乃至世界養(yǎng)鴨業(yè)危害最嚴(yán)重的疾病之一。

鴨疫里默菌血清型眾多，目前為止，世界上報道的公認(rèn)的血清型共有21 個，即血清1～21型。據(jù)報道我國至少存在1、2、5、6、10、11、13和14等多個血清型，其中以1、2、10型為主型[1-2]。鴨疫里默菌不同血清型之間無交叉保護，而且同一地區(qū)不同養(yǎng)殖場的主要血清型差異較大[3]，這給疫苗的研制和使用帶來極大的困難，因此疫苗也很難在鴨傳染性漿膜炎的預(yù)防中發(fā)揮理想作用。長期以來，臨床上主要靠化學(xué)藥物預(yù)防和治療鴨傳染性漿膜炎，但長期不正確的使用化學(xué)藥物導(dǎo)致鴨疫里默菌對越來越多的藥物表現(xiàn)出不同程度的耐藥。面對如此嚴(yán)峻的形勢，采用中藥來預(yù)防鴨傳染性漿膜炎將是鴨病防治的新方向。本試驗中，選用3個不同的中藥復(fù)方制劑，通過人工感染鴨疫里默菌，考察其對鴨傳染性漿膜炎的防治效果，以期為臨床上對該病的防治提供正確的指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 健康2 日齡雛番鴨共410 只，購自廣東溫氏食品集團股份有限公司。

1.2 試驗藥品 鴨為先，主要成分為蒼術(shù)、甘草、白術(shù)、金銀花、楊樹花等，由廣東溫氏大華農(nóng)生物科技有限公司生產(chǎn)；清瘟解毒口服液，主要成分為地黃、梔子、黃芩、板藍(lán)根等，由廣東溫氏大華農(nóng)生物科技有限公司生產(chǎn)；金葉清瘟散，主要成分為金銀花、大青葉、蒲公英、板藍(lán)根等，由本研究室按照獸藥國家標(biāo)準(zhǔn)制備；大華農(nóng)氟爾欣，通用名為20% 氟苯尼考可溶性粉，由廣東溫氏大華農(nóng)生物科技有限公司生產(chǎn)。

1.3 試驗細(xì)菌 為前期從臨床發(fā)病鴨腦中分離并鑒定為鴨疫里默菌的菌株，細(xì)菌分離鑒定見參考文獻[4]。

1.4 鴨疫里默菌半數(shù)致死量(LD50)的測定 取前期從臨床上分離并鑒定為鴨疫里默菌的細(xì)菌凍存液，先用TSA培養(yǎng)基(含5%胎牛血清)涂板復(fù)蘇培養(yǎng)后，挑取典型的菌落接種于TSB(含5%胎牛血清)肉湯中，37 ℃搖床培養(yǎng)16～18 h后，離心取菌體，再用生理鹽水制成5麥?zhǔn)蠞岫鹊木鷳乙海? ℃保存?zhèn)溆?，臨用前用生理鹽水分別稀釋成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5的菌懸液。健康15 日齡雛番鴨共50 只，平均分成5 組，每組分別注射不同稀釋倍數(shù)的菌懸液0.2 mL，觀察5 d并記錄各組的死亡情況，計算鴨疫里默菌的LD50。

1.5 防治試驗方法 健康2 日齡雛番鴨共360 只，購回后于實驗條件下飼養(yǎng)1 周，隨機分為6 組，每組60 只。空白對照組不進行任何藥物防治；陽性對照組人工感染細(xì)菌，不用藥物進行防治；各試驗組在人工感染細(xì)菌前一周按不同的給藥方案給予不同的藥物，見表1。

人工感染細(xì)菌方法：各試驗組與陽性對照組所有鴨腿部肌肉注射0.2 mL半數(shù)致死量的菌懸液，空白對照組注射0.2 mL生理鹽水。

感染細(xì)菌后，觀察并記錄各組試驗動物的發(fā)病情況。

發(fā)病判定：試驗鴨出現(xiàn)食欲減退、精神沉郁、口鼻有分泌物、綠色下痢、頭頸歪斜、角弓反張等鴨傳染性漿膜炎典型癥狀。

表1 幾種藥物防治鴨傳染性漿膜炎的試驗處理方法

2 結(jié)果

2.1 鴨疫里默菌的半數(shù)致死量(LD50) 根據(jù)Reed和Muench法計算鴨疫里默菌的半數(shù)致死量LD50為10-2.2。故在進行防治試驗中，細(xì)菌制成5 麥?zhǔn)系木鷳乙?，稀釋?0-2的菌懸液后，再進行注射。

2.2 不同藥物對鴨傳染性漿膜炎的防治效果 陽性對照組鴨發(fā)病很急，在人工感染細(xì)菌后24 h，大部分發(fā)病，表現(xiàn)典型的鴨傳染性漿膜炎癥狀，并出現(xiàn)死亡。各給藥組的鴨發(fā)病較緩，3個中藥復(fù)方制劑組的鴨在人工感染細(xì)菌后36 h左右出現(xiàn)少量發(fā)病，48 h左右為發(fā)病高峰期，3 d后基本無新病例增加。大華農(nóng)氟爾欣組的發(fā)病高峰期在人工感染細(xì)菌后36 h左右，之后陸續(xù)有新增病例，5 d后無新增病例?？瞻讓φ战M無發(fā)病。各組的發(fā)病和死亡情況見表2。

表2 各組試驗動物的發(fā)病與死亡情況

陽性對照組幾乎全部發(fā)病，可見人工感染的臨床分離菌具有很強的致病性，感染率高達96.67%，致死率可達75.00%。試驗中選用的不同藥物均有較明顯的防治效果，各試驗組的發(fā)病率與死亡率均明顯低于陽性對照組。由表2 可見，3種中藥復(fù)方制劑對鴨傳染性漿膜炎的防治效果均優(yōu)于目前臨床廣泛使用的氟苯尼考，其中鴨為先與清瘟解毒口服液的效果相當(dāng)，可大大降低鴨傳染性漿膜炎的發(fā)病率與死亡率。

3 討論

目前臨床上廣泛使用氟苯尼考、阿莫西林等化學(xué)藥物防治鴨傳染性漿膜炎，但化學(xué)藥物都是通過不同的殺菌或抑菌機制來控制疾病，即化學(xué)藥物重在疾病發(fā)生后的治療，而非發(fā)病前的預(yù)防。由于采用化學(xué)藥物預(yù)防疾病很難掌握正確的時機，有些養(yǎng)鴨戶為了提高經(jīng)濟效益，通過長期添加化學(xué)藥物來預(yù)防鴨傳染性漿膜炎。長時間通過飼料或飲水添加化學(xué)藥物預(yù)防疾病，將會帶來一系列嚴(yán)重的后果，如藥物殘留于動物性食品中，耐藥性的產(chǎn)生等。中藥防治鴨傳染性漿膜炎的獨特優(yōu)勢日益凸顯，越來越多的研究表明，中藥對于鴨傳染性漿膜炎的防治有顯著效果[5-7]，也有研究提出，中西結(jié)合將是今后臨床防治鴨傳染性漿膜炎的重要方向[8]。

中醫(yī)認(rèn)為鴨疫里默菌由衛(wèi)表侵入皮膚，如外衛(wèi)不固下陷進入腠理進入營血，再進入臟腑及其他器官并在其中繁殖，機體正邪相搏，正固邪虛則為隱性，邪實正弱，正不抗邪，于是某臟腑失職造成病癥[9]。另有試驗表明，多種中藥浸出液對鴨疫里默菌有較強的抑制作用，如黃連、大黃、黃柏、板藍(lán)根、石榴皮、薄公英等[10]。

本試驗中選用的3種中藥復(fù)方制劑為清熱解毒、扶正祛邪的方劑。在細(xì)菌感染前通過混飼給藥，可以提高機體對外來病原的抵抗力。在細(xì)菌侵入機體后，這些中藥中的抗菌成分也發(fā)揮其效用而殺滅細(xì)菌或抑制其快速繁殖。試驗結(jié)果表明，使用中藥復(fù)方制劑的3組試驗動物發(fā)病較晚，癥狀較輕，發(fā)病率和死亡率明顯低于陽性對照組，其防治效果也優(yōu)于氟苯尼考。同時由于發(fā)病晚，病情輕，臨床上可及時采取正確的治療措施，從而提高治愈率，減少經(jīng)濟損失。建議在鴨傳染性漿膜炎高發(fā)期，選用清瘟解毒口服液250 mL兌水150 kg，連用7 d，或者鴨為先100 g拌料40 kg，連用7 d進行預(yù)防，可有效減少鴨傳染性漿膜炎的發(fā)生。

[1] 張大丙，郭玉璞.我國鴨疫里氏桿菌血清型的鑒定[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報，1999，30(6)：536-542.

[2] 程安春，汪銘書，陳孝躍，等.我國鴨疫里氏桿菌血清型調(diào)查及新血清型的發(fā)現(xiàn)和病原特性[J].中國獸醫(yī)學(xué)報，2003，23(4)：320-323.

[3] Chang-You Yu, Yi-Wen Liu, Shih-Jen Chou,etal. Genomic diversity and molecular differentiation of Riemerella anatipestifer associated with eight outbreaks in five farms[J]. Avian Pathology, 2008, 37(3):273-279.

[4] 雍燕，方炳虎，劉國昌，等.3株鴨疫里氏桿菌的分離鑒定[J].畜牧與獸醫(yī)，2016，48(3)：126-129.

[5] 臧瑩安，容庭，丁發(fā)源.治療鴨傳染性漿膜炎的中藥篩選[J].中國家禽，2009，31(14)：43-44.

[6] 王秀君，唐兆新，吳思源，等.中獸醫(yī)辨證防治鴨傳染性漿膜炎[J].水禽世界，2008(3)：40-42.

[7] 容庭，王剛，李書宏，等.防治鴨傳染性漿膜炎中藥組方的篩選及應(yīng)用[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009(12)：142-146.

[8] 魏建夫.中西藥結(jié)合防治鴨傳染性漿膜炎的效果試驗[J].浙江畜牧獸醫(yī)，2012(4)：36-37.

[9] 吳芳，王建超.鴨傳染性漿膜炎的中西醫(yī)防治[J].當(dāng)代畜禽養(yǎng)殖業(yè)，2016(4)：44-45.

[10] 盧玉葵，張濟培，陳建紅，等.40種中草藥對三株鴨疫里默氏桿菌的體外抑菌試驗[J].養(yǎng)禽與禽病防治，2006(6)：18-19.

2016-09-20

雍燕(1988-)，女，碩士，主要從事動物用化學(xué)藥物和中藥新制劑的研發(fā)工作，E-mail:xiaoyner@126.com

S858.32

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0529-6005(2017)07-0052-02