張敏，吳建英，吳集才

(景德鎮(zhèn)市疾病預(yù)防控制中心，江西景德鎮(zhèn)333000)

景德鎮(zhèn)市490例HIV-1抗體陽性者免疫印跡帶型分析

張敏，吳建英，吳集才

(景德鎮(zhèn)市疾病預(yù)防控制中心，江西景德鎮(zhèn)333000)

目的對景德鎮(zhèn)市490例HIV-1抗體陽性者的免疫印跡帶型進行分析。方法采用蛋白免疫印跡試驗對標(biāo)本進行確證檢測，分析不同性別、不同年齡組的帶型差異。結(jié)果gp160、gp120、p66、p55、p51、gp41、p39、p31、p24、p17全部陽性的共142例，條帶gp160、gp120出現(xiàn)率最高為100%，p24為99.2%，gp41為95.7%，p55出現(xiàn)率最低為43.9%；條帶gp41和p17在男女性別中的出現(xiàn)率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05)，條帶p31在不同年齡組間的出現(xiàn)率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05)。結(jié)論gp160、gp120、gp41、p24是判定HIV-1抗體陽性的重要條帶，本市發(fā)現(xiàn)的HIV感染者多數(shù)在AIDS期前。

艾滋病病毒；感染者；免疫印跡帶型

人類免疫缺陷病毒（HIV）抗體檢測是診斷人感染HIV的主要依據(jù)，免疫印跡試驗（Western Blot）則是用于HIV抗體確證檢測的主要方法。艾滋病病毒顆粒的結(jié)構(gòu)蛋白基因包括：包膜蛋白（env）gp160、gp120、gp41，核心蛋白（gag）p55、p24、p17、p39，逆轉(zhuǎn)錄酶蛋白（pol）p66、p51、p31。當(dāng)人感染HIV后，機體則會對上述HIV蛋白產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，其反應(yīng)結(jié)果會在印跡試驗條帶中出現(xiàn)不同的帶型組合。為了解我市HIV感染者WB帶型分布情況，筆者對490例HIV-1抗體陽性者的帶型進行分析，報告如下。

1 材料與方法

1.1 樣本來源景德鎮(zhèn)市疾病預(yù)防控制中心HIV確證實驗室檢測的490例HIV-1抗體陽性樣本，樣本主要來源于轄區(qū)各艾滋病篩查實驗室上送的HIV抗體待確證的血清標(biāo)本。

1.2 檢測試劑新加坡MP生物醫(yī)學(xué)亞太私人有限公司生產(chǎn)的人類免疫缺陷病毒HIV1+2免疫印跡試劑。

1.3 檢測方法按照試劑盒說明書的要求，采用Western Blot免疫印跡技術(shù)檢測。

1.4 判定標(biāo)準(zhǔn)檢測條帶同時符合以下2條標(biāo)準(zhǔn)即可判HIV-1抗體陽性：⑴至少有2條env帶（gp160/gp120和gp41）出現(xiàn)，或至少1條env帶和p24帶同時出現(xiàn)；⑵符合試劑盒提供的陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS 20.0進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，計數(shù)資料采用χ2檢驗分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 帶型分布HIV-1抗體陽性樣本條帶中，gp160和gp120出現(xiàn)的次數(shù)最多，為100%，其次p24為99.2%，gp41為95.7%，p66為93.3%，p51為91.0%，p31為84.7%，p17為72.9%，p39為48.8%，p55為43.9%。HIV-1抗體陽性樣本中10條帶型gp160、gp120、p66、p55、p51、gp41、p39、p31、p24、

p17全部出現(xiàn)的共142例，占29.0%；出現(xiàn)gp160、gp120、p66、p51、gp41、p39、p31、p24、p17帶型共65例，占13.3%；出現(xiàn)gp160、gp120、p66、p55、p51、gp41、p31、p24、p17帶型共39例，占8.0%。

2.2 不同性別HIV感染者WB帶型分布490例HIV-1抗體陽性樣本中，男性413例，占84.3%，女性77例，占15.7%。條帶gp41和p17在男女性別中的出現(xiàn)率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05)。見表1。

2.3 不同年齡組HIV感染者WB帶型分布490例HIV-1抗體陽性樣本中，＜20歲年齡組9例，20～39歲年齡組153例，40～59歲年齡組170例，＞60歲年齡組158例。條帶p31在4個年齡組間的出現(xiàn)率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05)。見表2。

3 討論

艾滋?。ˋIDS）是由人類免疫缺陷病毒（HIV)侵入機體，導(dǎo)致人體免疫力低下，容易產(chǎn)生各種疾病的一種死亡率極高的傳染病[1]。HIV抗體檢測是診斷機體是否感染HIV的重要手段，免疫印跡實驗則是現(xiàn)階段確證HIV感染的重要檢測方法。艾滋病病毒的結(jié)構(gòu)基因主要有3個編碼區(qū)：env、pol、gag，每個編碼區(qū)又含有多個蛋白，機體一旦被感染，就會因為這些病毒蛋白的濃度、抗原性的強弱不同，對其產(chǎn)生的免疫應(yīng)答則不同，結(jié)果導(dǎo)致WB條帶中出現(xiàn)不同的帶型組合，單個條帶的陽性百分率也不相同[2-5]。

表1 不同性別HIV-1抗體陽性者WB帶型分布

表2 不同年齡組HIV-1抗體陽性者WB帶型分布

本實驗室檢測的490例HIV-1抗體陽性條帶中，HIV包膜蛋白抗體gp160和gp120出現(xiàn)率均為100%，gp41為95.7%，表明包膜蛋白抗體是確證HIV感染的必要條件，與相關(guān)報道一致[6-8]。據(jù)文獻報道[9]，HIV感染者進入AIDS期后，由于機體內(nèi)病毒大量復(fù)制導(dǎo)致消耗過多p24抗體，這些變化則反映在WB條帶上p24帶的缺失，本次數(shù)據(jù)p24條帶的出現(xiàn)率為99.2%，表明絕大部分感染者都是被發(fā)現(xiàn)在AIDS期前，這可能與目前不斷擴大艾滋病監(jiān)測與艾滋病網(wǎng)絡(luò)實驗室建設(shè)策略相關(guān)[10]。除gp160、gp120條帶出現(xiàn)率100%外，其它條帶均有不同程度的缺失，p55出現(xiàn)率僅43.9%，有一半多感染者p55帶缺失，gp160與p55同是前體蛋白，但兩者出現(xiàn)率存在明顯的差別，估計與他們在宿主細(xì)胞中的穩(wěn)定性差異相關(guān)，gp160的糖基化能夠抵抗消化酶的作用，增加了在胞漿中的穩(wěn)定性，p55沒有糖基化[11，12]。gp41和p17在不同性別帶型中出現(xiàn)率有統(tǒng)計學(xué)差異，有報道認(rèn)為可能與不同性別感染者的傳播途徑有關(guān)系；40～59歲年齡組p31的出現(xiàn)率明顯高于小于20～39歲年齡組，可能與不同年齡的免疫狀態(tài)和傳播途徑有關(guān)[13]。

本組數(shù)據(jù)顯示，490例HIV-1抗體陽性條帶中出現(xiàn)不同條帶的缺失，缺失率最大的為p55帶，其次為p39帶，HIV抗體陽性者的p55帶的缺失可能與疾病進展的速度相關(guān)，提示HIV抗體在疾病不同病程階段可能發(fā)生變化[14，15]。因此，免疫印跡實驗作為國內(nèi)HIV抗體確證的金標(biāo)法，其結(jié)果不僅局限于判定HIV抗體陽性與否，也有助于從人感染HIV后的免疫反應(yīng)抗體在不同個體出現(xiàn)的不同血清學(xué)特征中發(fā)現(xiàn)與HIV疾病相關(guān)的信息，更好的為臨床診斷和艾滋病防控工作提供依據(jù)。

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R512.91，R446.62

A

1674-1129(2017)04-0484-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2017.04.009

2016-12-21；

2017-06-02)

張敏，女，1980年生，本科，主管技師，主要從事艾滋病檢測工作。

吳建英，女，1965年生，本科，副主任技師，主要從事艾滋病檢測工作。E-mail：jdzwjy@126.com