金少舉，王 蓉，李海龍，任麗平，王雁梅，王文寶

(1.漯河醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校藥理學(xué)教研室,2.漯河市腫瘤發(fā)生與防治研究創(chuàng)新型科技團(tuán)隊(duì)，河南 漯河 462002；3.寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科，寧夏 銀川 750004；4.寧夏回族自治區(qū)第三人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科，寧夏 銀川 750021)

槐果堿對(duì)SNI致神經(jīng)病理性疼痛小鼠脊髓組織TLR4/p38 MAPK的影響

金少舉1,2，王 蓉3，李海龍4，任麗平1，王雁梅1，王文寶1

(1.漯河醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校藥理學(xué)教研室,2.漯河市腫瘤發(fā)生與防治研究創(chuàng)新型科技團(tuán)隊(duì)，河南 漯河 462002；3.寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科，寧夏 銀川 750004；4.寧夏回族自治區(qū)第三人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科，寧夏 銀川 750021)

目的觀察槐果堿(sohpocarpine，SC)對(duì)坐骨神經(jīng)分支保留性損傷(spared nerve injury，SNI)致小鼠神經(jīng)病理性疼痛的緩解作用，并探討其部分作用機(jī)制。方法將60只♂ ICR小鼠隨機(jī)分為6組，分別為：假手術(shù)組(control)、神經(jīng)病理性疼痛模型組(model)、普瑞巴林陽性對(duì)照組(SNI+普瑞巴林10 mg·kg-1)、槐果堿高、中、低劑量組(SNI+sophocarpine 40、20、10 mg·kg-1)。采用SNI法建立小鼠神經(jīng)病理性疼痛動(dòng)物模型，于術(shù)前1 d、術(shù)后d 7(給藥前d 1)及給藥后1、3、5、7 d測(cè)定小鼠機(jī)械縮足反射閾值(paw withdrawal mechanical threshold，PWMT)、熱刺激縮足反應(yīng)潛伏期(paw withdrawal thermal latency，PWTL)及冷縮足反射次數(shù)(cold withdrawal times，CWT)；采用RT-PCR和Western blot法檢測(cè)槐果堿對(duì)SNI損傷小鼠脊髓組織TLR4、p38 MAPK、IL-1β、TNF-α mRNA及蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果與假手術(shù)組比較，SNI致神經(jīng)病理性疼痛模型組小鼠術(shù)后PWMT明顯降低、PWTL明顯縮短、CWT明顯增多；小鼠脊髓組織p38 MAPK、TLR4、TNF-α、IL-1β mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯上調(diào)。與模型組小鼠比較，SNI+槐果堿40 mg·kg-1組小鼠給藥后PWMT明顯升高、PWTL延長、CWT減少；小鼠脊髓組織p38 MAPK、TLR4、TNF-α、IL-1β mRNA和蛋白表達(dá)水平明顯下調(diào)。結(jié)論槐果堿對(duì)SNI致神經(jīng)病理性疼痛有較好的緩解作用，其機(jī)制可能與其下調(diào)TLR4、p38 MAPK、IL-1β及TNF-α表達(dá)水平有關(guān)。

槐果堿；神經(jīng)病理性疼痛；TLR4；p38 MAPK；IL-1β；TNF-α

神經(jīng)病理性疼痛(neuropathic pain, NP)是臨床上常見的一種慢性病理性疼痛，以痛覺過敏、痛覺超敏、自發(fā)痛及感覺異常為特點(diǎn)[1-2]。神經(jīng)病理性疼痛發(fā)病復(fù)雜，臨床治療效果欠佳，嚴(yán)重影響患者的工作和生活質(zhì)量。神經(jīng)病理性疼痛發(fā)病機(jī)制目前尚未闡明，但各種原因?qū)е碌难装Y反應(yīng)(如神經(jīng)系統(tǒng)感染、免疫炎癥反應(yīng)及小膠質(zhì)細(xì)胞激活等)誘發(fā)的外周神經(jīng)病理生理改變是其中的重要原因之一。在眾多的炎癥信號(hào)通路中，Toll樣受體(Toll-like receptors 4, TLR4)/ p38蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinases，p38 MAPK)信號(hào)通路是經(jīng)典的炎癥反應(yīng)相關(guān)途徑，其被激活后能促進(jìn)炎性細(xì)胞聚集和活化，調(diào)控相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子的合成和活化，促進(jìn)炎癥因子(如TNF-α、IL-1β等)大量表達(dá)，導(dǎo)致機(jī)體的炎癥損傷[3-4]?；惫麎A(sophocarpine，SC)是從中藥苦豆子中提取的一種具有藥理活性的生物堿。我們前期研究發(fā)現(xiàn)，槐果堿對(duì)坐骨神經(jīng)慢性縮窄性損傷致神經(jīng)病理性疼痛小鼠有較好的鎮(zhèn)痛作用，其機(jī)制與其上調(diào)γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid, GABA)、谷氨酸脫羧酶65(glutamic acid decarboxylase 65, GAD65)表達(dá)和下調(diào)γ-氨基丁酸轉(zhuǎn)運(yùn)體1(γ-aminobutyric acid transporters-1，GAT1)表達(dá)有關(guān)，但槐果堿緩解神經(jīng)病理性疼痛是否與調(diào)控TLR4/p38 MAPK炎癥信號(hào)通路有關(guān)，尚未見報(bào)道[5]。本研究采用保留性神經(jīng)損傷(spared nerve injury, SNI)方法建立小鼠神經(jīng)病理性疼痛動(dòng)物模型，建模成功后用不同劑量的槐果堿進(jìn)行性干預(yù)，觀察其改善小鼠神經(jīng)病理性疼痛的作用及對(duì)TLR4、p38 MAPK、IL-1β和TNF-α表達(dá)水平的影響，探討其鎮(zhèn)痛作用機(jī)制。

1 材料

1.1動(dòng)物60只SPF級(jí)ICR小白鼠，♂，體質(zhì)量(20±2)g，湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，許可證號(hào)：SCXK (湘) 2016-0002。將小鼠分籠飼養(yǎng)于溫度為(20±2)℃、濕度50%～70%的動(dòng)物房，自由飲食水，12 h/12 h光照周期。

1.2藥品與試劑槐果堿(純度≥98%)，由南京澤朗生物科技有限公司提供，臨用時(shí)用含有5%的乙醇生理鹽水溶液配制；普瑞巴林(pregabalin，Pre)，購自德國輝瑞制藥有限公司，批號(hào)：20160215；戊巴比妥鈉，Sigma-Aldrich公司，批號(hào)20121011；RNA prep pure Tissue Kit 總RNA提取試劑盒、Fast King一步法RT-PCR試劑盒、PCR引物合成，由天根生化科技(北京)有限公司提供； RIPA蛋白裂解液、預(yù)染蛋白質(zhì)Marker、BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒、兔抗小鼠TLR4、p38 MAPK、IL-1β及TNF-α抗體、羊抗兔HRP標(biāo)記IgG二抗、PVDF膜、超敏ECL化學(xué)發(fā)光顯色液、SDS-PAGE凝膠配制試劑盒等，均購自武漢博士德生物工程有限公司。

1.3儀器Von Frey 纖維絲機(jī)械痛閾測(cè)定套件，上海玉研科學(xué)儀器有限公司；XR1102智能熱刺痛儀，上海欣軟信息科技有限公司；BW-YLS-21A冷熱板痛覺測(cè)定儀，上海軟科隆科技發(fā)展有限公司；FA1604電子分析天平，上海光學(xué)儀器廠；GL-23M高速冷凍離心機(jī)，湖南湘儀離心機(jī)儀器有限公司；凝膠成像分析系統(tǒng)、電泳儀、電泳槽、PCR儀等，均為美國伯樂公司。

2 方法

2.1SNI法建立小鼠神經(jīng)病理性疼痛模型取♂ ICR小鼠，分別稱重，用1%戊巴比妥鈉10 mL·kg-1腹腔注射進(jìn)行麻醉。待麻醉成功后，將小鼠俯臥位固定于手術(shù)臺(tái)上，將右側(cè)后上肢的毛剃除，并用碘伏消毒，沿坐骨神經(jīng)分叉處切開右后肢外側(cè)面皮膚，按肌束走行分離股二頭肌和臀肌，充分暴露游離坐骨神經(jīng)和其遠(yuǎn)心端3個(gè)分支，分別為內(nèi)側(cè)脛神經(jīng)、中間腓總神經(jīng)及外側(cè)的腓腸神經(jīng)，然后用4-0號(hào)線分別結(jié)扎脛神經(jīng)與腓總神經(jīng)并于遠(yuǎn)心端切斷，術(shù)中避免牽拉腓腸神經(jīng)，保持其完好，結(jié)扎完成后逐層縫合肌層和皮膚。假手術(shù)組手術(shù)操作過程與模型組相似，但只暴露游離神經(jīng)，不進(jìn)行結(jié)扎切斷。

2.2動(dòng)物分組及給藥將60只ICR小鼠隨機(jī)分為6組，每組10只動(dòng)物，分別為：假手術(shù)組(sham)、神經(jīng)病理性疼痛模型組(model)、陽性對(duì)照組(SNI+Pre 10 mg·kg-1)、槐果堿高、中、低劑量組(SNI+ sophocarpine 40、20、10 mg·kg-1)。假手術(shù)組和模型組均腹腔注射生理鹽水10 mL·kg-1，治療組分別腹腔注射給予相應(yīng)劑量藥物10 mL·kg-1。各組小鼠從手術(shù)后d 8開始給藥，連續(xù)7 d。

2.3小鼠機(jī)械縮足反射閾值(pawwithdrawalmechanicalthreshold,PWMT)測(cè)定采用上下法測(cè)定小鼠術(shù)前1 d、術(shù)后d 7(給藥前1 d)及給藥后1、3、5、7 d機(jī)械縮足反射閾值。操作方法：將小鼠置于金屬網(wǎng)墊上(網(wǎng)格大小：5 mm×5 mm)，并用透明有機(jī)玻璃罩將其限制在一定范圍內(nèi)，適應(yīng)15 min后用不同折力(g)的Von frey纖維絲刺激小鼠足底，觀察有無縮足反應(yīng)，記錄其陽性反應(yīng)的折力值即為小鼠機(jī)械縮足反射閾值。

2.4小鼠熱刺激縮足反應(yīng)潛伏期(pawwithdrawalthermallatency,PWTL)的測(cè)定參照Hargreave法，使用XR1102智能熱刺痛儀測(cè)定小鼠術(shù)前1 d、術(shù)后d 7(給藥前1 d)及給藥后1、3、5、7 d熱縮足反應(yīng)潛伏期。操作方法：用透明有機(jī)玻璃罩將小鼠限制于3 mm厚的玻璃板上，調(diào)整玻璃板高度，小鼠適應(yīng)15 min后，用熱刺痛儀輻射焦點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)小鼠足底進(jìn)行照射，從開始照射至小鼠出現(xiàn)縮足現(xiàn)象即為小鼠熱縮足反應(yīng)潛伏期(s)。為避免熱刺激燙傷，照射時(shí)長上限設(shè)定為20 s，每只小鼠測(cè)定3次，間隔10 min，取其平均值。

2.5小鼠冷縮足反射次數(shù)(coldwithdrawaltimes,CWT)的測(cè)定使用BW-YLS-21A冷熱板痛覺測(cè)定儀測(cè)定小鼠術(shù)前1 d、術(shù)后d 7(給藥前1 d)及給藥后1、3、5、7 d冷縮足反射次數(shù)。操作方法：設(shè)置冷熱板痛覺測(cè)定儀工作溫度為(4±1)℃，將小鼠置于其上，并用玻璃罩限制活動(dòng)范圍，適應(yīng)5 min，然后記錄其5 min內(nèi)患側(cè)后肢的抬足、添足或抖足次數(shù)即為冷縮足反射次數(shù)。

2.6RT-PCR法測(cè)定小鼠脊髓組織TLR4、p38MAPK、IL-1β及TNF-αmRNA表達(dá)小鼠末次給藥后24 h頸椎脫臼處死，迅速取出L4-L5節(jié)段脊髓組織，充分勻漿后，按照RNA提取試劑盒及Fast King一步法RT-PCR試劑盒說明書進(jìn)行RT-PCR實(shí)驗(yàn)。所用引物序列如下，TLR4上游引物：5′-CCGCTCTGGCATCATCTTCA-3′，下游引物：5′-AGGTCCAAGTTGCCGTTTCT-3′，產(chǎn)物227 bp；p38 MAPK上游引物：5′-GTCCTGAGCACCTGGTTTCT-3′，下游引物：5′-GAGATGACAGTTCCCATCGGC-3′，產(chǎn)物294 bp； IL-1β上游引物：5′-CCAAACCTTTGACCTGGGCT-3′，下游引物：5′-GGAAGGTCCACGGGAAAGAC-3′，產(chǎn)物149 bp；TNF-α上游引物：5′-AACTGCCGAGAGACCCAAAG-3′，下游引物：5′-AGCCCTGCTTCCAGGATTTC-3′，產(chǎn)物185 bp；β-actin上游引物：5′-GATATTGCTGCCCTGGTCGT-3′，下游引物：5′-CTTGGGCGACCCACAATAGA-3′，產(chǎn)物107 bp。

2.7Westernblot法測(cè)定小鼠脊髓組織TLR4、p38MAPK、IL-1β及TNF-α蛋白表達(dá)小鼠末次給藥后24 h頸椎脫臼處死，迅速取出L4-L5節(jié)段脊髓組織，置于試管中，于冰上用電動(dòng)勻漿器充分勻漿，然后加RIPA蛋白裂解液充分裂解，按照說明書進(jìn)行總蛋白提取。調(diào)整各樣本總蛋白濃度一致，加loading buffer 混勻后，用沸水煮5 min，進(jìn)行SDS-PAGE凝膠電泳，按照操作規(guī)程孵育一抗、二抗，然后在凝膠成像儀下成像拍照，以β-actin為內(nèi)參分析待測(cè)蛋白相對(duì)表達(dá)值。

3 結(jié)果

3.1槐果堿對(duì)SNI小鼠PWMT的影響Fig 1結(jié)果顯示，與假手術(shù)組比較，神經(jīng)病理性疼痛模型組及各給藥組小鼠機(jī)械縮足反射閾值于SNI術(shù)后d 7明顯降低(P<0.01)；與模型組比較，給予槐果堿40、20 mg·kg-1后d 3、5、7，小鼠機(jī)械縮足反射閾值明顯升高(P<0.05，P<0.01)。

Fig 1 Effects of sophocarpine onpaw withdrawal mechanical threshold in mice withneuropathic pain induced by SNI(±s, n=10)

3.2槐果堿對(duì)SNI小鼠PWTL的影響由Fig 2可見，與假手術(shù)組比較，神經(jīng)病理性疼痛模型組及各給藥組小鼠熱刺激縮足反應(yīng)潛伏期于SNI術(shù)后d 7明顯縮短(P<0.01)；與模型組比較，給予槐果堿40、20、10 mg·kg-1后d 3、5、7，小鼠熱刺激縮足反應(yīng)潛伏期明顯延長(P<0.05，P<0.01)。

3.3槐果堿對(duì)SNI小鼠CWT的影響Fig 3結(jié)果顯示，與假手術(shù)組比較，神經(jīng)病理性疼痛模型組及各給藥組小鼠冷縮足反射次數(shù)于SNI術(shù)后d 7 明顯增多(P<0.01)；與模型組比較，給予槐果堿40 mg·kg-1后d 3及給予槐果堿40、20 mg·kg-1后d 5、7，小鼠冷縮足反射次數(shù)明顯減少(P<0.05，P<0.01)。

Fig 2 Effects of sophocarpine on paw withdrawal thermal latencyin mice with neuropathic pain induced by SNI(±s,n=10)

Fig 3 Effects of sophocarpine on cold withdrawal timesin mice with neuropathic pain induced by SNI(±s,n=10)

3.4槐果堿對(duì)SNI小鼠脊髓組織p38MAPK、TLR4、TNF-α及IL-1βmRNA表達(dá)的影響與假手術(shù)組比較，神經(jīng)病理性疼痛模型組小鼠脊髓組織p38 MAPK、TLR4、TNF-α及IL-1β mRNA表達(dá)水平明顯上調(diào)(P<0.01)；與模型組比較，槐果堿40 mg·kg-1組小鼠脊髓組織p38 MAPK、TLR4、TNF-α及IL-1β mRNA表達(dá)水平明顯下調(diào)(P<0.05，P<0.01)。見Fig 4。

Fig 4 Effects of sophocarpine on spinal cord tissueexpression levels of p38 MAPK, TLR4,TNF-α and IL-1βmRNA in mice with neuropathic pain induced by SNI(±s,n=5)

3.5槐果堿對(duì)SNI小鼠脊髓組織TLR4、p38MAPK、IL-1β及TNF-α蛋白表達(dá)的影響Fig 5結(jié)果顯示，與假手術(shù)組比較，神經(jīng)病理性疼痛模型組小鼠脊髓組織p38 MAPK、TLR4、TNF-α及IL-1β蛋白表達(dá)水平明顯上調(diào)(P<0.01)；與模型組比較，槐果堿40 mg·kg-1組小鼠脊髓組織p38 MAPK、TLR4、TNF-α及IL-1β蛋白表達(dá)水平明顯下調(diào)(P<0.05，P<0.01)。

4 討論

神經(jīng)病理性疼痛是由各種原因引起的神經(jīng)系統(tǒng)受損或病理改變，導(dǎo)致中樞或外周神經(jīng)超敏，從而誘發(fā)異常疼痛的臨床病癥。研究認(rèn)為[6-7]，炎癥是導(dǎo)致神經(jīng)病理性疼痛痛覺過敏、痛覺超敏、自發(fā)痛等異常表現(xiàn)的重要機(jī)制之一。因此，減少神經(jīng)系統(tǒng)的炎癥反應(yīng)是緩解神經(jīng)病理性疼痛的主要治療手段。

TLR4是機(jī)體免疫和炎癥識(shí)別系統(tǒng)中一種重要的跨膜蛋白受體，可識(shí)別內(nèi)、外源性炎癥刺激因子并與之結(jié)合，促進(jìn)細(xì)胞因子或炎癥因子(如TNF-α、IL-1β等)釋放，誘發(fā)炎癥反應(yīng)[8]。研究報(bào)道[9]，在神經(jīng)病理性疼痛時(shí)，由于神經(jīng)組織受損，釋放炎性刺激因子，TLR4被活化導(dǎo)致炎癥性疼痛，加之釋放的內(nèi)源性炎癥因子，使得疼痛放大，表現(xiàn)為痛過敏、痛超敏或自發(fā)痛等。p38 MAPK是絲裂原活化蛋白激酶家族中介導(dǎo)炎癥反應(yīng)的重要成員之一，活化后能夠促進(jìn)炎性細(xì)胞的聚積和活化，調(diào)控NF-κB等炎癥因子的合成與釋放，在炎癥的發(fā)展與轉(zhuǎn)歸中發(fā)揮關(guān)鍵作用[10]。研究證實(shí)，TLR4與p38 MAPK是相互關(guān)聯(lián)的上下游信號(hào)通路，TLR4表達(dá)上調(diào)后，可激活p38 MAPK信號(hào)通路，促進(jìn)炎癥介質(zhì)因子網(wǎng)絡(luò)失衡，從而誘發(fā)和加重神經(jīng)受損后的炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致病理性疼痛產(chǎn)生。同樣，抑制TLR4活性，則可下調(diào)p38 MAPK的表達(dá)，使TNF-α、IL-1β等炎癥因子生成釋放減少，減輕炎癥反應(yīng)[11-12]。

Fig 5 Effects of sophocarpine on spinal cord tissueexpression levels of p38 MAPK, TLR4, TNF-α and IL-1βprotein in mice with neuropathic pain induced by SNI(±s,n=5)

綜上所述，TLR4/p38 MAPK作為重要的炎癥信號(hào)通路，參與了神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)生發(fā)展，針對(duì)調(diào)控TLR4/ p38 MAPK信號(hào)通路及相關(guān)炎癥因子(如TNF-α、IL-1β等)等將是臨床上緩解神經(jīng)病理性疼痛的一個(gè)新策略。本研究觀察到槐果堿40、20 mg·kg-1能明顯增加SNI誘導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛小鼠機(jī)械縮足反射閾值，延長熱刺激縮足反應(yīng)潛伏期，減少冷縮足反射次數(shù)，提示槐果堿對(duì)神經(jīng)病理性疼痛有較好的緩解作用，這與我們以往的研究結(jié)果一致[5]；同時(shí)，我們檢測(cè)到槐果堿40 mg·kg-1可明顯下調(diào)SNI誘導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛小鼠脊髓組織TLR4、p38 MAPK、IL-1β、TNF-α mRNA與蛋白表達(dá)水平，提示其緩解疼痛機(jī)制與下調(diào)TLR4、p38 MAPK、IL-1β及TNF-α有關(guān)。

(致謝：本文實(shí)驗(yàn)是在漯河醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)?？蒲兄行耐瓿桑兄x中心全體成員對(duì)本研究的支持和幫助)

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EffectofsophocarpineonTLR4/p38MAPKexpressioninsparednerveinjury-inducedneuropathicpaininmice

JIN Shao-ju1,2, WANG Rong3, LI Hai-long4, REN Li-ping1, WANG Yan-mei1, WANG Wen-bao1
(1.DeptofPharmacology,LuoheMedicalCollege,LuoheHenan462002,China; 2.TumorOccurrenceandPreventionResearchInnovationTeamofLuohe,LuoheHenan462002,China; 3.DeptofNuclearMedicine,GeneralHospitalofNingxiaMedicalUniversity,Yinchuan750004,China; 4.DeptofRespiratoryMedicine,theThirdPeople′sHospitalofNingxia,Yinchuan750021,China)

AimTo observe the ameliorating effects of sophocarpine on mice with neuropathic pain induced by spared nerve injury(SNI), and to explore the analgesic mechanism.MethodsSixty male ICR mice were randomly divided into six groups: sham-operated, neuropathic-pain model(SNI), SNI+Pregabalin(Pre) 10 mg·kg-1, SNI+SC 40 mg·kg-1, 20 mg·kg-1and 10 mg·kg-1group. Neuropathic-pain mouse models were established by SNI of the sciatic nerve. The paw withdrawal mechanical threshold(PWMT), paw withdrawal thermal latency(PWTL), and cold withdrawal times(CWT) were detected to assess the analgesic effects of sophocarpine on mice with neuropathic pain induced by spared nerve injury. The expressions levels of TLR4, p38 MAPK, IL-1β and TNF-α mRNA and protein in spinal cord tissue were detected by reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR) and Western blot methods.ResultsCompared with sham group, the SNI group′s PWMT decreased, PWTL was shorten, CWT increased, and the expression levels of p38 MAPK, TLR4, TNF-α and IL-1β mRNA and protein in spinal cord tissue were up-regulated. Compared with SNI model group, the sophocarpine 40 mg·kg-1 group′s PWMT increased, PWTL was lengthened, CWT decreased, and the expression levels of p38 MAPK, TLR4, TNF-α and IL-1β mRNA and protein in spinal cord tissue were down-regulated.ConclusionSophocarpine has the analgesic effects on neuropathic pain induced by SNI, and its mechanism may be related to the down-regulation of TLR4, p38 MAPK, IL-1β and TNF-α expression levels.

sophocarpine; neuropathic pain; TLR4; p38 MAPK; IL-1β; TNF-α

時(shí)間：2017-8-20 16:47 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1086.R.20170820.1647.032.html

2017-05- 15，

2017-06-16

河南省基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計(jì)劃項(xiàng)目(No 152300410178)

金少舉(1977-)，男，博士，副教授，研究方向：神經(jīng)藥理學(xué)，E-mail: jinshaoju@163.com； 王文寶(1978-)，男，碩士，副教授，研究方向：藥物制劑與藥效學(xué)，通迅作者，E-mail: 1362233124@qq.com

10.3969/j.issn.1001-1978.2017.09.016

A

：1001-1978(2017)09-1266-06

R-332；R322.81；R392.12；R441.1；R651.3；R741.02；R977.3