安國榮,張啟云,張國龍,陳秀娜（青海省地質(zhì)礦產(chǎn)測試應(yīng)用中心，青海西寧810008）

快速溶劑萃取儀（ASE）萃取-氣相色譜測定黑枸杞中有機(jī)氯

安國榮,張啟云,張國龍,陳秀娜
（青海省地質(zhì)礦產(chǎn)測試應(yīng)用中心，青海西寧810008）

本文研究了加速溶劑萃取儀（ASE）萃?。恍D(zhuǎn)蒸發(fā)、氮吹濃縮和氟羅里硅土柱凈化前處理，氣相色譜-電子捕獲檢測器測定8中有機(jī)氯的分析方法。氣相色譜-電子捕獲的分析條件采用峰面積外標(biāo)法完全可以分離8種有機(jī)氯。結(jié)果表明，該方法的樣品加標(biāo)回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為：76.0%～114%、2.1%～7.9%。方法檢測限為0.13～0.22μg·kg-1。該分析方法快速、有效、準(zhǔn)確，適合黑枸杞樣品中有機(jī)氯的測定。

黑枸杞；快速溶劑萃??；氣相色譜；有機(jī)氯

近年黑枸杞很火，商家宣稱降壓、降脂、降糖、抗疲勞、抗衰老、還能抗癌，價(jià)格也一度飚升每公斤上千元，被稱為“軟黃金”，它從一文不值到身價(jià)百倍，從野生無人問津到種植百倍呵護(hù)，越來越多的人感覺黑枸杞就是搖錢樹。人工種植就會有更多農(nóng)藥殘留的問題，有機(jī)氯農(nóng)藥作為持久性有機(jī)污染物因具有持久性、生物累積性、長距離傳輸性和生物毒性[1]等特點(diǎn)，并且對人類健康和環(huán)境具有嚴(yán)重危害而越來越受到人們的重視。

黑枸杞植物因其含有微量或痕量的有機(jī)氯，對人類健康構(gòu)成了潛在的威脅，因其含量低對分析測試存在一定的難度。目前，常用的提取樣品中有機(jī)氯的方法主要有索氏提取、微波輔助萃取、超聲波提取、浸泡震蕩法等[2-4]，但這些方法一般耗時長、消耗溶劑量大、萃取效果不理想、不易實(shí)現(xiàn)自動化等問題。快速溶劑萃取儀（ASE）適用于土壤及植物樣品中有機(jī)氯的萃取，具有萃取時間短、溶劑消耗少、易實(shí)現(xiàn)自動化等特點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用[5-9]。本文采用快速溶劑萃取儀（ASE）萃取黑枸杞中殘留有機(jī)氯農(nóng)藥，提取液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、氮吹濃縮，氟羅里硅土柱凈化后，用帶有電子捕獲檢測器的氣相色譜儀分離和測定，結(jié)果令人滿意。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

快速溶劑萃取儀ASE350（美國賽默飛）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器RE-52AA（上海亞榮生化儀器廠）；恒溫水浴氮吹儀JOYN-DCY-12S（上海喬躍電子有限公司）；氣相色譜儀Trace GCUltra（美國菲尼根），帶電子捕獲檢測器（ECD）。

標(biāo)準(zhǔn)溶液：壇墨質(zhì)檢-國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心GBW（E）082505（8種有機(jī)氯農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液）批號：2015-09，濃度：100μg·mL-1；替代物標(biāo)準(zhǔn)：中國標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心（2,4,5,6-四氯-間二甲苯）編號21781，濃度：200μg·mL-1；無水Na2SO4：600℃灼燒4h，冷卻后放置在干燥器中備用；正己烷（農(nóng)殘級）、丙酮（農(nóng)殘級）乙醚（色譜純）、硅藻土、氟羅里硅土柱。

樣品：2016年青海海西某地區(qū)的黑枸杞。樣品洗凈晾干后粉碎，過60目篩子后，密封冷藏備用。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 快速溶劑萃取儀提取稱取5.0g黑枸杞樣品、5.0g硅藻土于研缽中混合均勻，加入1.0μg·mL-12,4,5,6-四氯-間二甲苯替代物標(biāo)準(zhǔn)40μL，再轉(zhuǎn)移至底部放有一層纖維濾紙和5.0g氟羅里硅土的22mL不銹鋼萃取池中萃取。萃取條件：正己烷、丙酮混合萃取溶劑（1∶1，V∶V），萃取溫度100℃，壓強(qiáng)1500×6895Pa，加熱5min，靜態(tài)時間5min，淋洗體積為60%池體積，氮?dú)獯祾邥r間為90s，靜態(tài)萃取次數(shù)3次，收集全部提取液。提取液經(jīng)轉(zhuǎn)蒸氮吹至1mL左右，待凈化。

1.2.2 提取溶液的凈化氟羅里硅土柱凈化。氟羅里硅土柱預(yù)先用5mL乙醚-正己烷（15+85）混合溶液淋洗、5mL正己烷順序活化后，將提取液加入柱液面上層，用10mL乙醚-正己烷（15+85）混合溶液淋洗，N2濃縮，定容至5.0mL，1mL氣相色譜測定。

1.2.3 基體加標(biāo)在空白或試樣中加入適當(dāng)濃度有機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)和1μg·mL-1的2,4,5,6-四氯-間二甲苯替代物標(biāo)準(zhǔn)溶液40μL，其后操作同試樣處理。

1.2.4 氣相色譜的分析條件DB-5石英毛細(xì)管色譜柱（30m×0.25mm，1μm），柱箱溫度：初始溫度150℃保持1min，以8℃·min-1升溫至280℃，保持10min。進(jìn)樣口溫度230℃，不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量1μL，柱流量1.3mL·min-1。電子捕獲檢測器（ECD）溫度300℃，尾吹氣流量30mL·min-1。

2 結(jié)果與討論

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

本實(shí)驗(yàn)采用外標(biāo)法定量，校準(zhǔn)系列標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：100μg·mL-1有機(jī)氯農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液混標(biāo)用正己烷逐級稀釋到1μg·mL-1標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別配制成0、10、20、40、60、100ng·mL-1等不同濃度水平的混合標(biāo)準(zhǔn)系列。每個標(biāo)準(zhǔn)系列點(diǎn)均加入40μL的1.0μg·mL-12,4,5,6-四氯-間二甲苯替代物標(biāo)準(zhǔn)按前述氣相色譜條件測定，8種有機(jī)氯農(nóng)藥在氣相色譜的分離效果圖見圖1。

圖1 8種有機(jī)氯化合物及替代物標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖Fig.1 Eight kinds of organochlorine compounds and the chromatogram of the substitute standard solution

通過濃度與對應(yīng)峰面積建立校準(zhǔn)曲線線性方程，見表1。

表1 8種目標(biāo)化合物的保留時間、線性方程與相關(guān)系數(shù)Tab.1 Eight kinds of target compounds of retention time, linear equation and correlation coefficient

2.2 方法檢測限、回收率及精密度

方法檢測限（method detection limits,MDL）的測定采用空白基質(zhì)加標(biāo)法，在空白樣品中加入一定量的8種有機(jī)氯標(biāo)樣，重復(fù)分析7個空白加標(biāo)樣品，計(jì)算各組分質(zhì)量分?jǐn)?shù)標(biāo)準(zhǔn)偏差s,MDL=3s。得到方法檢測限見表2。

方法回收率和方法精密度按照1.2實(shí)驗(yàn)方法，進(jìn)行黑枸杞樣品加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)和樣品平行測定，分別測定加標(biāo)和未加標(biāo)樣品中的有機(jī)氯農(nóng)藥的量，得到有機(jī)氯的回收率和樣品的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。結(jié)果見表2。方法平均回收率為76.0%～124%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.1%～7.9%方法回收率和精密度滿足樣品分析要求。

表2 8種目標(biāo)化合物的方法檢測限、回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=7）Tab.2 Eight kinds of target compoundsmethod detection limit, recoveries and relative standard deviation

2.3 空白實(shí)驗(yàn)與方法實(shí)驗(yàn)整個過程的監(jiān)控

用硅藻土和氟羅里硅土作為樣品空白，與樣品進(jìn)行相同的前處理后測定，結(jié)果有機(jī)氯農(nóng)藥均未檢出，說明實(shí)驗(yàn)過程未引入干擾成分。方法實(shí)驗(yàn)整個過程的監(jiān)控，每個樣品及空白都加入1.0μg·mL-12,4,5,6-四氯-間二甲苯替代物標(biāo)準(zhǔn)40μL，經(jīng)過測定算出每個樣品的回收率都在70%以上，說明此方法整個過程當(dāng)中每個樣品的回收率都能達(dá)到要求。

2.4 實(shí)際樣品的測定

用該方法測定青海某地區(qū)黑枸杞樣品，分離效果較好?？梢娡ㄟ^此方法能夠滿足黑枸杞中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的測定。樣品氣相色譜圖見圖2。

圖2 實(shí)際樣品的氣相色譜圖Fig.2 Gas chromatogram of actual samples

3 結(jié)語

本研究采用加速溶劑萃取儀（ASE）萃取、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、氮吹濃縮和氟羅里硅土柱凈化前處理，氣相色譜-電子捕獲檢測器測定8種有機(jī)氯，該方法具有快速、靈敏、準(zhǔn)確，線性關(guān)系良好，8種化合物的方法檢測限低，回收率和精密度較好，并且每個樣品都有替代物監(jiān)控回收率也都能達(dá)到要求，適合大批植物樣品的分析測定。

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Accelerated solvent extraction（ASE)extraction-gas chromatographic determ ination of organochlorine in black Chinese wolfberry

AN Guo-rong，ZHANG Qi-yun,ZHANG Guo-long,CHEN Xiu-na
（Centre of Geological and Mineral Testing and Application of Qinghai Province,Xining 810008,China）

This paper studied the accelerated solvent extraction（ASE)extraction and rotary evaporation blowing nitrogen enrichmentwith fluorine in silica column purification pretreatmentwhile gas chromatography-electron capture detector was developed for the determination of eight kinds of organochlorine.We can completely separate eight kinds of organochlorines using peak area external standard method in gas chromatography-electronic capture analysis conditions.Results show that themethod of standard addition recoveries and relative standard deviation of sample are:76.0%～114%,2.1%～7.9%.Method detection limit is 0.13～0.22μg·kg-1.This analysismethod is rapid,effective and accurate.The analysismethod is suitable for the determination of organochlorine in black Chinese wolfberry samples.

black Chinesewolfberry;accelerated solventextraction;gas chromatographic;organochlorine

R284；O658.2

A

10.16247/j.cnki.23-1171/tq.20170725

2017-04-10

安國榮（1980-），男，青海省西寧市人，工程師，長期從事實(shí)驗(yàn)測試分析。