朱鈺鈺　林芬　吳教仁　黃澤偉　陳偉立

【摘要】 目的 研究潮州地區(qū)糖尿病與葡萄糖-6-磷酸脫氫酶（G6PD）缺乏癥的相關(guān)性。方法 在

全自動(dòng)生化分析儀上應(yīng)用速率法定量檢測(cè)潮州地區(qū)1166例糖尿病患者的G6PD活性， 應(yīng)用膜反向斑點(diǎn)雜交法檢測(cè)常見(jiàn)的6個(gè)G6PD基因突變位點(diǎn)， 應(yīng)用DNA測(cè)序技術(shù)分析未知突變樣本。另取潮州地區(qū)4221例健康體檢者作為研究對(duì)象， 記錄G6PD缺乏癥發(fā)生情況。結(jié)果 在1166例糖尿病患者中檢出G6PD缺乏癥41例， 男15例， 女26例。G6PD缺乏癥在潮州地區(qū)糖尿病人群的發(fā)生率為3.52%， 其中男性發(fā)生率為2.53%， 女性發(fā)生率為4.53%。在41例G6PD缺乏癥患者中檢出9種基因突變的類型， 分別是c.1376G>T、c.1388G>A 、c.1024C>T 、c.392G>T 、c.95A>G、c.871G>A、 c.517T>C、c.1376G

>T/ⅣSX1193T>C/c.1311C>T和c.1311C>T/ⅣSX1193T>C。潮州地區(qū)健康體檢人群G6PD缺乏癥的發(fā)生率（3.36%）與糖尿病人群（3.52%）比較， 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 而且女性的發(fā)生率都高于男性。

結(jié)論 潮州地區(qū)糖尿病患者G6PD缺乏癥的發(fā)生率與本地區(qū)健康體檢人群G6PD缺乏癥的發(fā)生率很接近， 顯示兩者之間無(wú)明顯的相關(guān)性。

【關(guān)鍵詞】 糖尿?。黄咸烟?6-磷酸脫氫酶缺乏癥；相關(guān)性

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.23.004

Study on correlation between diabetes and glucose - 6 - phosphate dehydrogenase deficiency in Chaozhou area ZHU Yu-yu， LIN Fen， WU Jiao-ren， et al. Department of Clinical Laboratory， Nanfang Medical University Affiliated Chaozhou Central Hospital， Chaozhou 521021， China

【Abstract】 Objective To study the correlation between diabetes and glucose - 6 - phosphate dehydrogenase （G6PD） deficiency in Chaozhou area. Methods Quantitative detection of G6PD activity in 1166 diabetic patients in Chaozhou area was performed on the automatic biochemical analyzer. 6 common G6PD mutation sites were detected by membrane reverse dot blotting. Unknown mutant samples were analyzed by DNA sequencing technology. There were another 4221 healthy physical examination persons in Chaozhou District as study subjects， and the occurrence of G6PD deficiency was recorded. Results Among 1166 diabetic patients， there were 41 G6PD deficiency cases， including 15 male cases and 26 female cases. Incidence of G6PD deficiency was 3.52% in diabetic population of Chaozhou area， with incidence of male as 2.53%， and incidence of female as 4.53%. There were 9 mutations in 41 G6PD deficiency cases， respectively as c.1376G>T， c.1388G>A， c.1024C>T， c.392G>T， c.95A>G， c.871G>A， c.517T>C， c.1376G>T/ⅣSX1193T>C/ c.1311C>T and c.1311C>T/ⅣSX1193T>C. Physical examination population had no statistically significant difference in incidence of G6PD deficiency （3.36%） comparing with diabetic population （3.52%） in Chaozhou area （P>0.05）， and the female had higher incidence than male. Conclusion The incidence of G6PD deficiency in diabetes patients in Chaozhou area is close to the incidence of G6PD deficiency in the local physical examination population， indicating no significant correlation between the two.

【Key words】 Diabetes； Glucose - 6 - phosphate dehydrogenase deficiency； Correlation

糖尿病是以高血糖為特征的慢性代謝性疾病， 近年來(lái)在廣東省的患病率成倍增長(zhǎng)， 是危害嚴(yán)重的疾病之一。G6PD缺乏癥是一種最常見(jiàn)的遺傳性溶血性紅細(xì)胞酶缺陷病， 在我國(guó)呈南高北低的分布特點(diǎn)， 廣東省是G6PD缺乏癥的高發(fā)區(qū)。國(guó)外研究認(rèn)為G6PD缺乏癥是糖尿病發(fā)病的危險(xiǎn)因素[1]， 國(guó)內(nèi)對(duì)兩者的相關(guān)性研究較少， 在廣東省粵東地區(qū)則尚未見(jiàn)報(bào)道。因此， 作者通過(guò)生化及分子生物學(xué)的手段研究廣東省潮州地區(qū)糖尿病患者G6PD缺乏癥的發(fā)生率及基因突變類型， 探討糖尿病與G6PD缺乏癥之間的相關(guān)性。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取經(jīng)本院確診， 符合世界衛(wèi)生組織（WHO）診斷標(biāo)準(zhǔn)的潮州地區(qū)糖尿病患者1166例， 其中男592例， 女574例， 年齡20～85歲， 經(jīng)戶籍調(diào)查98%為講潮州方言的潮籍人， 相互之間無(wú)血緣關(guān)系。另取潮州地區(qū)4211例健康體檢者， 將其G6PD缺乏癥發(fā)生情況作為對(duì)照[2]。

1. 2 方法

1. 2. 1 標(biāo)本采集 清晨空腹采集靜脈血2 ml置EDTA-K2抗凝的真空管， 保存于4℃ 冰箱。

1. 2. 2 G6PD活性定量檢測(cè) 應(yīng)用速率法在日立全自動(dòng)生化分析儀上檢測(cè)G6PD活性， 應(yīng)用HiCN法檢測(cè)血液中血紅蛋白濃度， 以G6PD<6.3 U/gHb判斷為G6PD缺乏。

1. 2. 3 基因組DNA提取 采用深圳亞能生物科技有限公司的試劑盒提取DNA。

1. 2. 4 G6PD基因突變檢測(cè) 采用膜反向斑點(diǎn)雜交法進(jìn)行基因檢測(cè)， 檢測(cè)常見(jiàn)的6個(gè)G6PD基因突變位點(diǎn)：c.1376G>T、c.1388G>A 、c.1024C>T 、c.1004C>T 、c.871G>A、 c.95A>G。

1. 2. 5 DNA測(cè)序 部分膜反向斑點(diǎn)雜交法未能檢測(cè)出基因突變類型的標(biāo)本， 設(shè)計(jì)10對(duì)引物用于第2～13號(hào)外顯子的擴(kuò)增及基因測(cè)序。

1. 2. 6 鑒定基因突變類型 將測(cè)序序列用BLAST進(jìn)行比對(duì)， 同時(shí)對(duì)測(cè)序圖譜應(yīng)用Chromas軟件直接分析， 從而鑒定基因突變類型。

2 結(jié)果

2. 1 在1166例糖尿病患者中檢出G6PD缺乏癥41例， 男15例， 女26例。G6PD缺乏癥在潮州地區(qū)糖尿病人群的發(fā)生率為3.52%， 其中男性發(fā)生率為2.53%（15/592）， 女性發(fā)生率為4.53%（26/574）。

2. 2 在41例G6PD缺乏癥患者中檢出9種基因突變的類型， 分別是c.1376G>T、c.1388G>A、c.1024C>T、c.392G>T、c.95A>G、c.871G>A、c.517T>C、c.1376G>T/ⅣSX1193T>C/ c.1311C>T和c.1311C>T/ⅣSX1193T>C。見(jiàn)表1。

2. 3 作者調(diào)查了近年來(lái)潮州地區(qū)健康體檢人群G6PD缺乏癥的發(fā)生情況， 與潮州籍糖尿病人群進(jìn)行比較。潮州地區(qū)健康體檢人群G6PD缺乏癥的發(fā)生率（3.36%）與糖尿病人群（3.52%）比較， 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 而且女性的發(fā)生率都高于男性。見(jiàn)表2。

3 討論

國(guó)外研究認(rèn)為糖尿病患者G6PD缺乏癥的發(fā)生率高于正常人群[3]， 國(guó)內(nèi)的報(bào)道卻有爭(zhēng)議， 韓家蓮等[4]研究顯示糖尿病與G6PD缺乏癥無(wú)遺傳關(guān)聯(lián)性， 而闞麗娟等[5]的研究跟國(guó)外一致， 也顯示糖尿病患者的G6PD缺乏發(fā)生率高于健康人群， 因此探索糖尿病與G6PD缺乏癥之間的相關(guān)性具有重要的意義。作者從1166例潮州籍糖尿病患者中檢出G6PD缺乏癥41例， 發(fā)生率為3.52%， 與本地區(qū)體檢人群G6PD缺乏癥的發(fā)生率（3.36%）很接近， 顯示兩者之間無(wú)相關(guān)性。作者認(rèn)為與國(guó)外文獻(xiàn)的報(bào)道不一致[3， 6]， 可能是種族的差異導(dǎo)致的結(jié)果不一致。而國(guó)內(nèi)的研究對(duì)象無(wú)種族差異， 但研究人群所在地域不同， G6PD缺乏癥的發(fā)生率也相差甚遠(yuǎn)[7]， 地域的差異性也可能是導(dǎo)致結(jié)果不一致的因素。

通過(guò)檢測(cè)， 糖尿病患者G6PD缺乏癥中最常見(jiàn)的基因突變類型分別是c.1376G>T、c.1388G>A 、c.1024C>T和c.392G>T

（并列）， 也與潮州地區(qū)健康人群的基因突變類型基本一致[2]。

國(guó)內(nèi)多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道認(rèn)為G6PD缺乏癥的發(fā)生率男性高于女性， 而作者無(wú)論是在潮州地區(qū)調(diào)查的健康人群還是糖尿病人群， 均檢測(cè)出女性明顯高于男性。作者認(rèn)為可能與檢測(cè)方法有關(guān)， 以往部分女性雜合子用常規(guī)生化檢測(cè)無(wú)法確認(rèn)。本研究能通過(guò)定量檢測(cè)G6PD活性， 較好確定截?cái)嘀担?并通過(guò)分子生物學(xué)的手段檢測(cè)基因突變的類型。作者檢測(cè)出c.1376G>T/ⅣSX1193T>C/ c.1311C>T和c.1311C>T/ⅣSX1193T>C，

為女性雜合子復(fù)合突變類型。

臨床研究表明糖尿病患者合并G6PD缺乏癥時(shí)， 應(yīng)用磺脲類等降糖藥容易誘發(fā)急性溶血的發(fā)生[8-10]。因此， 對(duì)于已明確診斷的糖尿病患者， 有必要篩查是否合并G6PD缺乏癥， 謹(jǐn)慎用藥， 避免使用抗氧化藥物， 警惕并發(fā)癥的發(fā)生。

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[收稿日期：2017-06-20]