林艷艷， 楊雪梅， 楊云貴

(西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院， 陜西 楊凌712100)

草地早熟禾(Poapratensis)是常用的草坪草種，他具有根莖發(fā)達(dá)、分蘗能力極強(qiáng)、青綠期長(zhǎng)等優(yōu)良性狀，能迅速形成密而整齊的草坪，但其對(duì)鹽脅迫敏感[1]，所以目前對(duì)草地早熟禾的研究主要集中在鹽堿脅迫及水肥管理等方面[2]。

伴隨著工業(yè)化的發(fā)展，土壤重金屬污染程度日益加重，其中金屬鎘(Cd)污染不僅具有不可逆性、持久性，且毒性大，難降解，污染面積大[3-4]。根據(jù)2014年國(guó)家環(huán)保部門(mén)發(fā)布的《全國(guó)土壤污染狀況調(diào)查公報(bào)》顯示，金屬Cd的污染位于無(wú)機(jī)污染物點(diǎn)位超標(biāo)率之首。金屬Cd污染對(duì)農(nóng)田及林地的影響受關(guān)注度較高，但對(duì)草坪的影響并未引起廣泛的重視，因此文章針對(duì)Cd污染對(duì)草地早熟禾的影響設(shè)計(jì)試驗(yàn)。另外據(jù)聯(lián)合國(guó)教科文組織(UNESCO)和聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織(FAO)不完全統(tǒng)計(jì)[5]，全世界鹽漬土面積約為 9.543 8億 hm2，而鹽漬土地主要分布在世界各地的干旱、半干旱地區(qū)[6-7]，陜西省大部分地區(qū)均屬于干旱半干旱地區(qū)，降水量少，且水分蒸發(fā)量大。

五氨基乙酰丙酸(5-ALA)普遍存在于動(dòng)、植物和微生物細(xì)胞內(nèi)，是生物體內(nèi)葉綠素、血紅素和維生素B12等物質(zhì)合成前體[8]。但5-ALA的效果發(fā)揮程度很大程度取決于5-ALA的施用濃度、方式、時(shí)間及作物種類(lèi)[9]。當(dāng)?shù)蜐舛鹊?-ALA作用于根后表現(xiàn)為減少作物根系對(duì)Na+、K+的吸收，促進(jìn)對(duì)N、P、Mg及Fe等的吸收[10]。噴施適宜濃度的5-ALA能促進(jìn)低溫脅迫下煙草(NicotianatabacumL.)可溶性糖和游離脯氨酸的積累,減緩葉綠素含量的下降,降低煙草葉片相對(duì)電導(dǎo)率和MDA含量，從而提高煙草植株的抗寒能力[11]。

綜上所述，本試驗(yàn)探討了草地早熟禾生長(zhǎng)在Cd，NaCl和PEG脅迫的環(huán)境中時(shí)，外源噴施5-ALA對(duì)草地早熟禾生長(zhǎng)產(chǎn)生的影響，最終提供一種保護(hù)草地早熟禾草坪的科學(xué)方法。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)采用草地早熟禾‘午夜’品種為材料，種子2015年10月購(gòu)于江蘇沭陽(yáng)縣卓天花卉園藝場(chǎng)。

1.2 試驗(yàn)方法

用0.5%的NaClO溶液泡種子10 min進(jìn)行消毒[12]，浸泡后用自來(lái)水反復(fù)沖洗數(shù)次，再用蒸餾水清洗3次。

晾干后，將種子放在以雙層濾紙為發(fā)芽床的培養(yǎng)皿內(nèi)，皿內(nèi)事先分別加蒸餾水(無(wú)脅迫)、100 mmol·L-1的NaCl、2 mg·L-1的Cd及15%PEG逆境處理液5 mL，每種處理液內(nèi)分別添加不同濃度的5-ALA(0，5，25，50，100 mg·L-1)。每皿內(nèi)放置100粒種子，每個(gè)處理3次重復(fù)，放入恒溫光照培養(yǎng)箱中發(fā)芽，培養(yǎng)條件：溫度為晝夜25℃，光照8 h，每天稱(chēng)重補(bǔ)水，每隔3天更換1次濾紙及逆境處理溶液。每天觀察發(fā)芽情況，記錄發(fā)芽種子的數(shù)量，連續(xù)觀察萌發(fā)情況到不再變化為止。

1.3 試驗(yàn)測(cè)定指標(biāo)

可溶性蛋白的測(cè)定：待14天發(fā)芽試驗(yàn)結(jié)束后，第16天稱(chēng)取幼苗0.02 g，放入預(yù)冷的研缽中，加入少量石英砂及1 mL蒸餾水研磨充分，并用2 mL蒸餾水將研缽洗凈合并提取液轉(zhuǎn)入離心管中，于5 000 g轉(zhuǎn)速下離心10 min，之后取上清液0.1 mL，加入0.9 mL蒸餾水和5 mL考馬斯亮藍(lán)G-250試劑，混勻，放置2 min在595 nm波長(zhǎng)下比色，記錄吸光值，根據(jù)方程計(jì)算可溶性蛋白含量[13]。用Synergy HT多功能酶標(biāo)儀測(cè)定吸光值，具體操作為，從每個(gè)待測(cè)混合液中用移液槍抽取200 μL，加入到96孔酶標(biāo)板中，然后放入酶標(biāo)儀中測(cè)定。

樣品中可溶性蛋白質(zhì)的含量(μg·g-1FW)=C*Vt·FW-1*Vs-1

式中，C：查標(biāo)準(zhǔn)曲線值(μg)；Vt：提取液總體積；Vs：測(cè)定時(shí)加樣量(mL)；FW：樣品鮮重(g)。

每天記錄各培養(yǎng)皿的發(fā)芽狀況，直到第14天結(jié)束發(fā)芽試驗(yàn)，在發(fā)芽結(jié)束后從各培養(yǎng)皿中隨機(jī)選取10株幼苗測(cè)定根長(zhǎng)和芽長(zhǎng)，并計(jì)算發(fā)芽勢(shì)(%)、發(fā)芽率(%)、芽長(zhǎng)、根長(zhǎng)、芽促進(jìn)率(%)、根促進(jìn)率(%)。

發(fā)芽率=n14/M×100%

發(fā)芽勢(shì)=n7/M×100%

芽促進(jìn)率=(處理芽長(zhǎng)-對(duì)照芽長(zhǎng))/對(duì)照芽長(zhǎng)×100%

根促進(jìn)率=(處理根長(zhǎng)-對(duì)照根長(zhǎng))/對(duì)照根長(zhǎng)×100%

公式中，n7,n14分別為發(fā)芽第7天和第14天的發(fā)芽種子數(shù)，M為供試種子總數(shù)(100粒)。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用Excel 2010進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)處理和制圖；采用SPSS 17.0進(jìn)行單因素方差分析(ANOVA)，研究同一脅迫下不同濃度5-ALA對(duì)草地早熟禾種子萌發(fā)及幼苗生長(zhǎng)之間的差異關(guān)系，用Duncan’s進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果分析

2.1 不同濃度5-ALA對(duì)逆境脅迫下草地早熟禾種子萌發(fā)的影響

由圖1、圖2可知，5，25 mg·L-1的5-ALA對(duì)不同脅迫下早熟禾的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率大致呈促進(jìn)趨勢(shì)，而50，100 mg·L-1的5-ALA對(duì)發(fā)芽率發(fā)芽勢(shì)呈抑制狀態(tài)或差異不顯著。當(dāng)無(wú)脅迫(H2O)存在時(shí)0，5，25 mg·L-1的5-ALA對(duì)發(fā)芽勢(shì)(66%，70.7%，68%)發(fā)芽率(81.7%，79.3%，85.7%)的效應(yīng)不存在顯著差異，而50，100 mg·L-1的5-ALA顯著(P<0.05)抑制發(fā)芽勢(shì)(42. 7%，70%)和發(fā)芽率(13. 7%，54%)。2 mg·L-1的Cd脅迫下，5，25 mg·L-15-ALA顯著(P<0.05)提高了種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率；當(dāng)5-ALA濃度為 50 mg·L-1時(shí)對(duì)發(fā)芽勢(shì)有顯著(P<0.05)抑制作用，發(fā)芽勢(shì)降到23.3%，而對(duì)發(fā)芽率有顯著(P<0.05)促進(jìn)作用；當(dāng)5-ALA濃度為100 mg·L-1時(shí)對(duì)發(fā)芽勢(shì)亦有顯著(P<0.05)抑制作用，而對(duì)發(fā)芽率的影響和組內(nèi)對(duì)照相比差異不顯著。

100 mmol·L-1的NaCl脅迫下，添加5，25，50 mg·L-1的5-ALA與對(duì)照相比均顯著(P<0.05)提高了種子發(fā)芽勢(shì)、發(fā)芽率，此3種濃度的5-ALA作用效果之間差異不顯著，但50 mg·L-1的5-ALA促進(jìn)作用高于5，25 mg·L-1；當(dāng)5-ALA濃度達(dá)到100 mg·L-1時(shí)，無(wú)論對(duì)發(fā)芽勢(shì)還是發(fā)芽率與組內(nèi)對(duì)照相比均不存在顯著差異。15%PEG脅迫下，5，50，100 mg·L-1的5-ALA對(duì)發(fā)芽勢(shì)的影響不存在顯著差異；而當(dāng)5-ALA 濃度為25 mg·L-1時(shí)發(fā)芽勢(shì)顯著(P<0.05)提高到33%，比對(duì)照提高16.3%，但對(duì)發(fā)芽率無(wú)明顯作用。

圖1 不同脅迫處理下5-ALA對(duì)草地早熟禾種子發(fā)芽勢(shì)的影響Fig.1 Effects of 5-ALA on germination energy of Poa pratensis under different stress treatments

圖2 不同脅迫處理下5-ALA對(duì)草地早熟禾種子發(fā)芽率的影響Fig.2 Effects of 5-ALA on germination rate of Poa pratensis under different stress treatments

2.2 不同濃度5-ALA對(duì)逆境脅迫下草地早熟禾幼苗芽長(zhǎng)、根長(zhǎng)的影響

通過(guò)比較不同濃度5-ALA對(duì)不同脅迫下種子萌發(fā)狀況的影響可以發(fā)現(xiàn)，在無(wú)脅迫時(shí)，5 mg·L-1的5-ALA對(duì)芽長(zhǎng)的促進(jìn)作用不顯著；25 mg·L-1的5-ALA能顯著促進(jìn)幼苗芽的生長(zhǎng)(P<0.05)，其芽長(zhǎng)比對(duì)照長(zhǎng)0.43 cm；而50，100 mg·L-1的5-ALA對(duì)芽長(zhǎng)有顯著抑制效應(yīng)(P<0.05)，其中100 mg·L-1的抑制作用強(qiáng)，其芽長(zhǎng)比對(duì)照短1.31 cm。在2 mg·L-1Cd脅迫下，未添加5-ALA的一組芽長(zhǎng)(1.92cm)顯著比無(wú)脅迫條件下芽長(zhǎng)(0.71 cm)短；當(dāng)添加了5，25，50 mg·L-15-ALA后Cd對(duì)芽長(zhǎng)的抑制作用顯著(P<0.05)得到緩解，其中25 mg·L-1的緩解作用最強(qiáng)，芽長(zhǎng)可達(dá)到2.01 cm。100 mmol·L-1的NaCl脅迫下芽長(zhǎng)的變化與Cd相似(圖3)。

15%PEG脅迫下，添加5，25 mg·L-15-ALA均能顯著(P<0.05)增加芽長(zhǎng)(2.08 cm，2.20 cm)，二者的作用效果無(wú)顯著差異；50 mg·L-15-ALA對(duì)芽長(zhǎng)的作用效果不顯著；當(dāng)濃度達(dá)到100 mg·L-1時(shí)芽的生長(zhǎng)被顯著(P<0.05)抑制，其長(zhǎng)度為0.90 cm(圖3)。

圖3 不同脅迫處理下5-ALA對(duì)草地早熟禾幼苗芽長(zhǎng)的影響Fig.3 Effects of 5-ALA on bud length of Poa pratensis seedling under different stress treatments

由圖4可知，無(wú)脅迫存在時(shí)添加5 mg·L-15-ALA后的根長(zhǎng)(1.71 cm)與對(duì)照(1.65 cm)相比促進(jìn)作用不顯著；當(dāng)濃度增加到25 mg·L-1時(shí)，5-ALA顯著促(P<0.05)進(jìn)了根的生長(zhǎng)，根長(zhǎng)為1.91 cm；隨著濃度的繼續(xù)增加，50，100 mg·L-1時(shí)對(duì)根的生長(zhǎng)起到顯著的抑制作用(0.34 cm，0.29 cm)。在2 mg·L-1Cd脅迫下，不施加五氨基乙酰丙酸時(shí)早熟禾的根生長(zhǎng)被顯著抑制，施加5，25 mg·L-15-ALA時(shí)，這種抑制作用被顯著緩解，根的長(zhǎng)度分別比對(duì)照增加(0.73 cm，0.67 cm)，而施加50，100 mg·L-1的5-ALA時(shí)，不但對(duì)根的生長(zhǎng)沒(méi)有緩解作用，反而抑制了根的伸長(zhǎng)。

在100 mmol·L-1的NaCl脅迫下，施加5，25，50 mg·L-1的5-ALA與組內(nèi)對(duì)照相比均未能顯著促進(jìn)根的生長(zhǎng)，其中濃度為5，25 mg·L-1時(shí)，雖有提高根的伸長(zhǎng)效應(yīng)，但效果不顯著，濃度為50 mg·L-1抑制作用亦不顯著；當(dāng)濃度增加到100 mg·L-1時(shí)對(duì)根長(zhǎng)(0.17 cm)的抑制作用變得顯著。在15%PEG脅迫下，0，5，25，50，100 mg·L-1的5-ALA每一組之間對(duì)根長(zhǎng)的影響均存在顯著(P<0.05)差異；其中未添加5-ALA組平均根長(zhǎng)比無(wú)脅迫存在下未添加5-ALA組平均根長(zhǎng)增加0.82 cm，添加5 mg·L-1的5-ALA后，根長(zhǎng)達(dá)到2.84 cm，顯著高于組內(nèi)對(duì)照；當(dāng)5-ALA濃度為25，50，100 mg·L-1時(shí)根長(zhǎng)的徒增效應(yīng)被顯著抑制。

圖4 不同脅迫處理下5-ALA對(duì)草地早熟禾幼苗根長(zhǎng)的影響Fig.4 Effects of 5-ALA on root length of Poa pratensis seedling under different stress treatments

2.3 不同濃度5-ALA對(duì)逆境脅迫下草地早熟禾幼苗根、芽促進(jìn)率的影響

通過(guò)分析根促進(jìn)率及芽促進(jìn)率，可以更進(jìn)一步了解5-ALA對(duì)不同脅迫下幼苗生長(zhǎng)的緩解作用。從圖5可以看出，在無(wú)脅迫及Cd和NaCl的脅迫下，5，25 mg·L-1的5-ALA對(duì)根的生長(zhǎng)均有促進(jìn)作用，而50，100 mg·L-1的5-ALA對(duì)根的生長(zhǎng)具有抑制作用；其中在無(wú)脅迫存在時(shí)5，25 mg·L-1的5-ALA對(duì)根的促進(jìn)率分別為6%，15%，50，100 mg·L-1的5-ALA對(duì)根的抑制率分別為80%和83%，二者之間差異不顯著。當(dāng)存在Cd脅迫時(shí)，添加較低濃度的5-ALA能顯著降低脅迫對(duì)根的抑制作用，當(dāng)濃度升到50，100 mg·L-1時(shí)，這種抑制作用不能得到改善。在NaCl脅迫下5，25 mg·L-1的5-ALA對(duì)根的促進(jìn)作用不存在顯著差異，而100 mg·L-1時(shí)的抑制作用顯著(P<0.05)強(qiáng)于50 mg·L-1。PEG脅迫下，只有5 mg·L-1的5-ALA對(duì)根的生長(zhǎng)有促進(jìn)作用，且顯著高于其他濃度。

圖5 不同脅迫處理下5-ALA對(duì)草地早熟禾幼苗的根促進(jìn)率的影響 Fig.5 Effects of 5-ALA on inhibition rate of root length of Poa pratensis seedling under different stress treatments

而對(duì)比芽促進(jìn)率(圖6)可知，無(wú)論在哪種脅迫下,4個(gè)濃度的5-ALA對(duì)芽促進(jìn)率的趨勢(shì)是一致的，其中25 mg·L-1時(shí)的促進(jìn)作用最強(qiáng)。當(dāng)無(wú)脅迫時(shí)濃度為50，100 mg·L-1的5-ALA對(duì)芽起抑制作用；當(dāng)存在Cd及PEG脅迫時(shí)，只有100 mg·L-1的5-ALA對(duì)芽的生長(zhǎng)起顯著(P<0.05)，而其他3種濃度的5-ALA均能在一定程度上緩解脅迫的抑制作用；而對(duì)于NaCl脅迫下的芽生長(zhǎng)情況來(lái)說(shuō)，4中濃度的5-ALA均能有效緩解干旱脅迫對(duì)芽生長(zhǎng)的抑制作用。

圖6 不同脅迫處理下5-ALA對(duì)草地早熟禾幼苗芽促進(jìn)率的影響 Fig.6 Effects of 5-ALA on inhibition rate of bud length of Poa pratensis Poa seedling under different stress treatments

2.4 不同濃度5-ALA對(duì)逆境脅迫下草地早熟禾幼苗可溶性蛋白的影響

可溶性蛋白含量在不同脅迫下呈現(xiàn)的趨勢(shì)不一致，無(wú)脅迫時(shí)添加25 mg·L-15-ALA后,可溶性蛋白的含量顯著降低(P<0.05)，與對(duì)照相比下降了5.6 μg·g-1，而添加其他濃度的5-ALA對(duì)可溶性蛋白含量沒(méi)有顯著影響。在Cd脅迫下，添加4種濃度的5-ALA后,可溶性蛋白含量均比對(duì)照升高，5-ALA濃度為100 mg·L-1時(shí)可溶性蛋白含量為487 μg·g-1，顯著高于對(duì)照(P<0.05)。NaCl脅迫下可溶蛋白含量的變化趨勢(shì)也呈現(xiàn)出均比對(duì)照高，添加5，25和100 mg·L-1的5-ALA后含量顯著高于對(duì)照(P<0.05)。而PEG脅迫下可溶性蛋白含量呈先降再升再降的趨勢(shì)，添加25 mg·L-1的5-ALA后可溶性蛋白含量顯著上升，添加100 mg·L-1的 5-ALA后可溶性蛋白含量顯著降低(P<0.05)。

表1 不同脅迫處理下5-ALA對(duì)草地早熟禾幼苗可溶性蛋白含量的影響/μg·g-1Table 1 Effects of 5-ALA on soluble protein of Poa pretensis seedling under different stress treatments

3 討論

五氨基乙酰丙酸(5-ALA)很早就受到研究者的重視[14]。他具有調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)發(fā)育的功能，被視為一種新的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)，5-ALA在高濃度下作為無(wú)污染的天然除草劑，在低濃度下可明顯增強(qiáng)多種植物的抗逆性[15]。所以5-ALA在當(dāng)今生態(tài)環(huán)境嚴(yán)重惡化背景下，對(duì)提高作物生產(chǎn)水平具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。本試驗(yàn)研究了金屬脅迫、鹽脅迫、干旱脅迫及無(wú)脅迫條件下，添加外源5-ALA對(duì)草地早熟禾幼苗產(chǎn)生的影響。

3.1 不同濃度5-ALA對(duì)逆境脅迫下草地早熟禾萌發(fā)的影響

外源添加較低濃度(5，25 mg·L-1)的5-ALA當(dāng)無(wú)脅迫條件存在時(shí)，能提高幼苗的發(fā)芽勢(shì)及發(fā)芽率，但效應(yīng)不顯著；當(dāng)施加5-ALA的濃度逐漸升高(50，100 mg·L-1)時(shí)，顯著抑制了種子的發(fā)芽勢(shì)及發(fā)芽率，且濃度越高抑制作用越強(qiáng)，同時(shí)表現(xiàn)出發(fā)芽勢(shì)弱于發(fā)芽率，導(dǎo)致發(fā)芽不整齊，幼苗苗弱的較多。而當(dāng)重金屬、鹽及干旱脅迫存在時(shí)，隨著5-ALA濃度從低到高發(fā)芽勢(shì)及發(fā)芽率呈先增后降的趨勢(shì)，表現(xiàn)出低濃度促進(jìn)高濃度抑制(或效應(yīng)不顯著)，其中5-ALA的濃度為25 mg·L-1時(shí)表現(xiàn)出的緩解作用最好(鹽脅迫下50 mg·L-1時(shí)表現(xiàn)的促進(jìn)作用最優(yōu))，試驗(yàn)結(jié)果與李小玲等[16]研究外源ALA對(duì)鹽脅迫下商洛黃芩生理特性的影響時(shí)得出的一定濃度5-ALA能提高植物抗逆性結(jié)果一致，同時(shí)印證了劉暉等[17]提出的5-ALA濃度不宜過(guò)高的結(jié)論。

3.2 不同濃度5-ALA對(duì)逆境脅迫下草地早熟禾幼苗的影響

試驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著5-ALA濃度的增加，幼苗的根長(zhǎng)、芽長(zhǎng)呈現(xiàn)出先上升后下降的趨勢(shì)，且5-ALA濃度越高對(duì)根及芽的抑制作用越強(qiáng)，其中25 mg·L-1的5-ALA表現(xiàn)出的促進(jìn)作用最好。羅家傳等[18]研究ALA在小麥上的生產(chǎn)應(yīng)用效果試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，小麥株高隨5-ALA劑量增加呈先增后減趨勢(shì)，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。

Cd不是植物生長(zhǎng)必須的微量元素，其存在會(huì)對(duì)植物產(chǎn)生毒害[19-20]，試驗(yàn)中未添加5-ALA的對(duì)照組草地早熟禾的幼苗變矮、根系變短，導(dǎo)致幼苗的活力下降。添加了較低濃度的5-ALA后，Cd對(duì)早熟禾的毒害作用明顯得到緩解，俞建良等[21]表明低濃度ALA具有促進(jìn)作物應(yīng)對(duì)各種惡劣生長(zhǎng)條件(如鹽堿、低溫、弱光照和干旱等)的作用，但并未提到對(duì)重金屬脅迫下植物的保護(hù)作用，本試驗(yàn)進(jìn)一步證明了5-ALA提高植物應(yīng)對(duì)各種逆境的能力，且與5-ALA的濃度緊密相關(guān)。

5-ALA對(duì)于鹽脅迫及干旱脅迫植物的保護(hù)作用的相關(guān)研究較多，劉暉等人[18]發(fā)現(xiàn)，125 mmol·L-1NaCl處理下添加15～30 mg·L-1ALA可以明顯緩解鹽脅迫對(duì)西瓜種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)的抑制效應(yīng)；外源ALA可減輕鹽脅迫對(duì)菠菜生長(zhǎng)的抑制作用[22]。張春平等[23]研究外源5-ALA對(duì)干旱脅迫下甘草種子萌發(fā)及幼苗生理特性的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過(guò)5，10，15，30 mg·L-1的5-ALA處理后幼苗的胚根、胚芽均比對(duì)照長(zhǎng)，但較高濃度(30 mg·L-1)處理效果不如低濃度，這與本試驗(yàn)結(jié)果相同；另外張春平等[23]劉長(zhǎng)利[24]等的研究發(fā)現(xiàn)，干旱脅迫下胚芽生長(zhǎng)受到的抑制作用程度大于胚根，這與本試驗(yàn)結(jié)果一致。

3.3 不同濃度5-ALA對(duì)逆境脅迫下草地早熟禾幼苗可溶性蛋白含量的影響

脅迫條件下植物積累蛋白是一種適應(yīng)機(jī)制，這些蛋白不僅與調(diào)控膜的透水性有關(guān)[25]，在一定程度上還代表著植物體光合性能[26]。本試驗(yàn)中，Cd及NaCl處理下添加5-ALA均能導(dǎo)致早熟禾幼苗中可溶性蛋白含量顯著升高，其中Cd脅迫下只有100 mg·L-1的5-ALA處理下可溶性蛋白含量顯著(P<0.05)高于對(duì)照。在PEG模擬的干旱脅迫下，25，50 mg·L-1的5-ALA可提高幼苗的可溶性蛋白，且25 mg·L-1時(shí)提高效果顯著(P<0.05)，但100 mg·L-1時(shí)可溶性蛋白含量顯著低于對(duì)照(P<0.05)。這表明合理濃度的外源5-ALA可促進(jìn)脅迫下早熟禾植株蛋白合成，維持植株的水分運(yùn)輸和葉片光合功能，從而促進(jìn)植株生長(zhǎng)并提高抗逆性。

4 結(jié)論

不同脅迫(2 mg·L-1Cd，100 mmol·L-1NaCl，15%PEG)下，外源施加相對(duì)低濃度(5，25 mg·L-1)5-ALA均能起到緩解脅迫傷害效應(yīng)，而濃度逐漸升高后(50，100 mg·L-1)則起到抑制作用。具體表現(xiàn)為促進(jìn)早熟禾種子萌發(fā)、幼苗生長(zhǎng)和可溶性蛋白積累，其中對(duì)種子萌發(fā)及幼苗的生長(zhǎng)作用顯著，對(duì)可溶性蛋白含量的影響在不同脅迫下表現(xiàn)不盡相同。

綜合比較4種不同濃度5-ALA對(duì)草地早熟禾萌發(fā)的作用后發(fā)現(xiàn)，3種脅迫處理下，以25 mg·L-1的5-ALA抗脅迫效果最優(yōu)。