劉 超，董孝元，袁 媛，吳 昊，李 良

（1.湖北工業(yè)大學(xué)工程技術(shù)學(xué)院，湖北武漢430064； 2.武漢天龍黃鶴樓酒業(yè)有限公司，湖北武漢430050；3.湖北省疾病預(yù)防控制中心，湖北武漢430079)

復(fù)方葛根飲料對(duì)小鼠酒精肝損傷的保護(hù)作用

劉 超1，董孝元2，袁 媛3，吳 昊2，李 良2

（1.湖北工業(yè)大學(xué)工程技術(shù)學(xué)院，湖北武漢430064； 2.武漢天龍黃鶴樓酒業(yè)有限公司，湖北武漢430050；3.湖北省疾病預(yù)防控制中心，湖北武漢430079)

研究復(fù)方葛根飲料對(duì)酒精所致的急性酒精肝損傷小鼠的保護(hù)作用。將SPF級(jí)昆明種小鼠，隨機(jī)分為空白對(duì)照組，模型對(duì)照組，復(fù)方葛根飲料低、中、高3個(gè)不同劑量組(5.17mL/kg·BW、10.34 mL/kg· BW、15.51 mL/kg·BW)，建立兩組小鼠急性肝損傷模型，第1組為小鼠禁食不禁水12 h，一次性灌胃給藥(20 mL/kg·BW)，給藥30 min后均以50%vol乙醇(16 mL/kg·BW)灌胃1次，第2組為各劑量組每日經(jīng)口灌胃相應(yīng)濃度的受試物(20 mL/kg·BW)，試驗(yàn)第31天除空白組外其余各組給予50%vol乙醇，將小鼠脫臼處死后，第1組模型檢測血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase，ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate transaminase，AST)活性、肝組織乙醇脫氫酶(alcohol dehydrogenase，ADH)活性、甘油三酯(triglyceride，TG)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)含量；第2組模型檢測血清(alanine aminotransferase，ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate transaminase，AST)活性、肝組織甘油三酯(triglyceride，TG)含量、丙二醛(malondialdehyde，MDA)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性及肝臟病理組織學(xué)檢查。結(jié)果表明，與模型對(duì)照組相比，兩組小鼠模型中，各劑量組均能降低血清中ALT和AST活性，降低小鼠肝組織中的ADH活性，提高小鼠肝組織中GSH-px和SOD活性，降低肝組織中TG和MDA含量；各劑量組中肝臟脂肪細(xì)胞變性評(píng)分在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異(P＜0.01)，肝細(xì)胞脂肪變性程度減輕。復(fù)方葛根飲料對(duì)酒精性肝損傷小鼠具有明顯的保護(hù)作用。

復(fù)方葛根飲料； 酒精性肝損傷； 保護(hù)作用

隨著社會(huì)和經(jīng)濟(jì)發(fā)展，飲酒已成為一種人們的普遍行為，長期過量的飲酒導(dǎo)致的問題已成為全世界關(guān)注的公共衛(wèi)生問題[1]。研究表明，飲酒與冠心病、高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病的發(fā)生呈“J”型曲線[2]。

根據(jù)乙醇在體內(nèi)的代謝特點(diǎn)，主要從兩方面發(fā)揮解酒作用：其一，抑制乙醇的吸收，加強(qiáng)胃腸首過效應(yīng)，降低血液中的乙醇含量；其二，藥物直接作用于肝代謝酶系，加速乙醇及其代謝產(chǎn)物的消除速率，減輕乙醇對(duì)組織和細(xì)胞的損害[3]。

復(fù)方葛根飲料主要原料為葛根、枳椇子、枸杞、山楂、金銀花，這些原料全部為國家衛(wèi)生部批準(zhǔn)的“藥食同源”的食材，這些食材都具有明顯的解酒的功效，改善酒精中毒的癥狀[4-8]。葛根素是葛根的主要活性成分之一[9]，屬于異黃酮類化合物[10]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，葛根素具有以下藥理作用：擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、抗心肌缺血、減慢心率、降低心肌耗氧量[11]；抗脂質(zhì)過氧化和消除自由基、降血糖、降血脂[12-14]；抑制血小板凝集、改善微循環(huán)、抗動(dòng)脈粥樣硬化、改善腦循環(huán)[15]，并對(duì)腦缺血及缺血再灌注引起的神經(jīng)細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用[16-18]，可對(duì)抗慢性乙醇中毒引起的記憶減退，提高腦SOD活性，減少腦內(nèi)脂褐素累積，逆轉(zhuǎn)乙醇導(dǎo)致的海馬突出界面細(xì)微結(jié)構(gòu)的衰退性變化[19]；葛根素腹腔注射可顯著降低大鼠酒精攝入量，作用機(jī)制可能與其抑制線粒體醛糖還原酶有關(guān)[20]。

枸杞多糖是枸杞子的主要有效成分，臨床研究表明，枸杞多糖具有免疫促進(jìn)和免疫調(diào)節(jié)能力、保肝、抗應(yīng)激作用以及輻射防護(hù)等藥理作用[21]。

枳椇子含葡萄糖、果糖、硝酸鉀、過氧化酶等成分，能清除飲酒后體內(nèi)產(chǎn)生的過量自由基，阻礙過氧化脂質(zhì)的形成，從而降低乙醇在血液中的濃度，減輕乙醇對(duì)肝組織的損傷[22]。枳椇子能明顯縮短乙醇誘導(dǎo)的小鼠睡眠時(shí)間，并能降低血中乙醇的濃度[23]。

山楂黃酮是山楂的主要有效成分之一，山楂黃酮提取物使大鼠血脂中的總膽固醇、低密度脂蛋白含量明顯降低，對(duì)甘油三酯、高密度脂蛋白有調(diào)節(jié)作用[24]。

本研究利用葛根、枳椇子、枸杞、山楂、金銀花等藥食同源的食材生產(chǎn)復(fù)方葛根飲料，依照《食品安全性毒理學(xué)評(píng)價(jià)程序和方法》，對(duì)其進(jìn)行保肝護(hù)肝的試驗(yàn)，旨在為復(fù)方葛根飲料作為解酒飲料提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料處理工藝流程

1.1.1 復(fù)方葛根飲料生產(chǎn)工藝流程

植物浸提→過濾→調(diào)配→過濾→滅菌→灌裝→二次滅菌→冷卻→裝箱→入庫貯存→檢驗(yàn)→出廠

1.1.2 植物浸提

在浸提罐中放入1 t的純凈水，加熱到85～90℃，然后加入3 kg金銀花，保溫30 min，攪拌。

1.1.3 過濾

將浸提后的溶液用100～200目濾網(wǎng)進(jìn)行過濾，去除濾渣。

1.1.4 二次浸提

將第1次浸提過的金銀花再投入到浸提罐中，在85～90℃的1 t純凈水中浸提20 min，然后用100～200目過濾網(wǎng)過濾。

1.1.5 溶糖

將溶糖缸加500 L純凈水，升溫至60～65℃后加入2.0 kg葛根提取物、0.25 kg山楂提取物、1.0 kg枸杞提取物、1.0 kg枳椇子提取物，高速攪拌15 min完成后通過5μm過濾。將溶糖缸加500 L純凈水，升溫至80℃，先加入白糖溶解，待溫度下降到50～55℃后再加入蜂蜜溶解，完成后通過5μm濾膜過濾。

1.1.6 調(diào)配及定容

加入第2次浸提液以及溶糖缸料液，然后用純凈水將料液定容到“升”。

1.1.7 過濾

將定容好的飲料雙聯(lián)過濾（5μm/1μm）以及用0.45 μm的過濾膜進(jìn)行過濾。

1.1.8 滅菌

將過濾后的物料通過UHT進(jìn)行殺菌，條件為：90℃，5 s。

1.1.9 灌裝封口

將物料控溫到85～88℃進(jìn)行灌裝，二重卷封符合要求。

1.1.10 二次滅菌

將灌裝好的產(chǎn)品放入滅菌釜進(jìn)行二次滅菌，滅菌條件為121℃±1℃，保溫25 min。

1.1.11 冷卻

將滅菌后的產(chǎn)品迅速冷卻到常溫。

1.1.12 裝箱

將灌裝合格的產(chǎn)品打印日期，并按規(guī)定數(shù)量進(jìn)行裝箱。

1.1.13 入庫貯存

貯存溫度為常溫，避免陽光直射。

1.1.14 檢驗(yàn)

按成品的質(zhì)量要求進(jìn)行檢驗(yàn)。

1.1.15 出廠

產(chǎn)品檢測合格后方可投放市場。

復(fù)方葛根飲料，成人推薦攝入量為310 mL/60 kg·BW。受試物采用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀60～70℃減壓蒸餾得到10倍的濃縮液。

1.2 試劑與設(shè)備

無水乙醇(分析純)，國藥集團(tuán)；ADH測定試劑盒，批號(hào)20150420；MDA測定試劑盒，批號(hào)20150312，GSH-px測定試劑盒，批號(hào)20150417；SOD測定試劑盒，批號(hào)20150106，均購自南京建成生物工程研究所；AST測定試劑盒，批號(hào)150169；ALT測定試劑盒，批號(hào)150389；TG測定試劑盒，批號(hào)150386，均購自上海豐匯醫(yī)學(xué)科技有限公司；7020型全自動(dòng)生化分析儀，日立公司。

1.3 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及飼養(yǎng)

SPF級(jí)昆明種小鼠，由湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK(鄂)2008-0005，質(zhì)量合格證號(hào)：NO.42000600009233；飼養(yǎng)環(huán)境：SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，溫度20～26℃，濕度40%～70%，使用許可證號(hào)為SYXK(鄂)2012-0065，設(shè)施使用證號(hào)：NO.00135021。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 治療性給藥對(duì)急性酒精中毒小鼠的影響

SPF級(jí)昆明種雄性小鼠130只，體重為20～24 g，分為2批實(shí)驗(yàn)組，每批實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物數(shù)為65只。每個(gè)實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為5組，每組13只。按照人群推薦用量0.517 mL/kg·BW(10倍濃縮液)擴(kuò)大10倍、20倍、30倍設(shè)置5.17 mL/kg·BW、10.34 mL/kg·BW、15.51 mL/kg·BW 3個(gè)不同劑量組，同時(shí)設(shè)正常對(duì)照組和模型對(duì)照組。

各組小鼠禁食不禁水12 h后，除正常對(duì)照組外以50%vol乙醇(16 mL/kg·BW)灌胃1次，30 min后一次性灌胃給藥(20 mL/kg·BW)或純水，6 h后眼眶取血并頸椎脫臼處死小鼠，立即剖取肝臟，取0.5 g肝臟制備肝勻漿后，檢測血清ALT、AST活性，肝組織ADH活性，TG、MDA含量。ADH、MDA的檢測方法及計(jì)算方法均參照南京建成生物工程研究所的試劑盒說明，ALT、AST、TG采用日立公司生產(chǎn)的7020型全自動(dòng)生化分析儀檢測。

1.4.2 酒精肝損傷保護(hù)試驗(yàn)

SPF級(jí)昆明種雄性小鼠75只，體重為20～24 g，隨機(jī)分為5組，每組15只。按照人群推薦用量0.517 mL/kg·BW(10倍濃縮液)擴(kuò)大10倍、20倍、30倍設(shè)計(jì)5.17 mL/kg·BW、10.34 mL/kg·BW、15.51 mL/kg·BW 3個(gè)不同劑量組，同時(shí)設(shè)正常對(duì)照組和模型對(duì)照組。

表1 治療性給藥對(duì)急性酒精中毒小鼠血清ALT、AST活性及TG含量的影響(±s,n=13)

表1 治療性給藥對(duì)急性酒精中毒小鼠血清ALT、AST活性及TG含量的影響(±s,n=13)

注：與正常對(duì)照組比較，#為p＜0.05，##為p＜0.01；與模型對(duì)照組比較，**為p＜0.01，*為p＜0.05。

組別正常模型低劑量中劑量高劑量TG(mmol/L) 0.91±0.28 3.13±0.87## 2.60±0.79 2.06±0.83** 1.86±0.83**劑量(mL/kg·BW) 0.00 0.00 5.17 10.34 15.51 ALT(U/L) 19.1±8.8 41.8±15.3# 32.9±7.3 31.3±16.9 28.4±11.8 AST(U/L) 133.2±41.8 162.1±47.9 142.2±39.6 142.2±34.1 124.8±38.6*

各劑量組每日經(jīng)口灌胃相應(yīng)濃度的受試物，小鼠灌胃容量均為20 mL/kg·BW，正常對(duì)照組和模型對(duì)照組給予等量純水。動(dòng)物每周稱重2次，按體重變化調(diào)整受試物灌胃量，試驗(yàn)第30天模型組及各劑量組一次灌胃給予50%vol乙醇，正常對(duì)照組給予等量的純水，禁食16 h稱重后，眼眶取血并頸椎脫臼處死動(dòng)物，立即剖取肝臟。取0.5 g肝臟制備肝勻漿后，檢測血清ALT、AST活性，肝組織TG含量，MDA、GSH-px、SOD活性及肝臟病理組織學(xué)檢查。MDA、GSH-px、SOD的檢測方法及計(jì)算方法均參照南京建成生物工程研究所的試劑盒說明，ALT、AST、TG采用日立公司生產(chǎn)的7020型全自動(dòng)生化分析儀檢測。

1.4.3 肝臟病理組織學(xué)檢查

1.4.3.1 病理觀察材料

將實(shí)驗(yàn)1.4.2中動(dòng)物肝臟從肝左葉中部做橫切面取材，冰凍切片，油紅O染色。在光學(xué)顯微鏡下觀察肝細(xì)胞損傷程度。

1.4.3.2 評(píng)價(jià)方法

鏡檢，從肝臟的一端視野開始記錄細(xì)胞的病理變化，用40倍物鏡連續(xù)觀察整個(gè)組織切片，主要觀察脂滴在肝臟的分布、范圍和面積。

1.4.3.3 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

分別記錄每個(gè)視野中的各種病變所占視野的面積，累計(jì)所觀察視野的病變總分。

肝細(xì)胞內(nèi)脂滴分散、稀少0分；含脂滴的肝細(xì)胞不超過1/4計(jì)1分；含脂滴的肝細(xì)胞不超過1/2計(jì)2分；含脂滴的肝細(xì)胞不超過3/4計(jì)3分；肝組織幾乎被脂滴替代計(jì)4分。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS19.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，單因素方差分析檢驗(yàn)組間數(shù)據(jù)是否具有顯著性差異，數(shù)據(jù)用±s表示，以P＜0.05及P＜0.01為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 治療性給藥對(duì)小鼠急性酒精中毒作用研究結(jié)果

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示(見表1)，肝損傷模型對(duì)照組與正常對(duì)照相比，酒精可導(dǎo)致模型對(duì)照組小鼠血清中ALT和AST活性升高，且ALT存在顯著性差異(P＜0.05)。與模型對(duì)照組比較，高劑量組小鼠血清中AST活性有顯著降低(P＜0.05)。

肝損傷模型對(duì)照組與正常對(duì)照組相比，酒精可使模型對(duì)照組小鼠血清TG水平顯著上升(P＜0.01)。與模型對(duì)照組比較，復(fù)方葛根飲料中、高劑量組治療性給藥可明顯降低肝組織TG含量(P＜0.01)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示(見表2)，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組肝組織ADH有所降低，但并無顯著性差異（P＞0.05）。與模型對(duì)照組比較，中、高劑量組有所升高，但并無顯著性差異（P＞0.05）。

表2 治療性給藥對(duì)急性酒精中毒小鼠肝組織ADH活性、MDA含量的影響(±s，n=13)

表2 治療性給藥對(duì)急性酒精中毒小鼠肝組織ADH活性、MDA含量的影響(±s，n=13)

注：與正常對(duì)照組比較，##為p＜0.01。

組別正常模型低劑量中劑量高劑量肝組織MDA (nmol/mgprot) 4.16±1.36 5.60±0.66## 4.78±0.71 4.88±0.69 4.83±0.71劑量(mL/kg·BW) 0.00 0.00 5.17 10.34 15.51肝組織ADH (U/mgprot) 3.9±1.2 2.7±1.5 2.3±1.2 3.0±1.5 2.8±1.3

肝損傷模型對(duì)照組與正常對(duì)照組相比，酒精可導(dǎo)致模型對(duì)照組小鼠肝組織中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量顯著升高，存在極顯著性差異(P＜0.01)。

2.2 對(duì)酒精肝損傷的輔助保護(hù)作用

表3 復(fù)方葛根飲料在護(hù)肝實(shí)驗(yàn)中小鼠血清ALT、AST活性，TG含量的影響(±s，n=15)

表3 復(fù)方葛根飲料在護(hù)肝實(shí)驗(yàn)中小鼠血清ALT、AST活性，TG含量的影響(±s，n=15)

注：與正常對(duì)照組比較，#為p＜0.05，##為p＜0.01；與模型對(duì)照組比較，*為p＜0.05。

TG(mmol/L) 0.90±0.28 1.96±0.65## 1.62±0.71 1.36±0.37* 1.56±0.43組別正常模型低劑量中劑量高劑量劑量(mL/kg·BW) 0.00 0.00 5.17 10.34 15.51 ALT(U/L) 34.5±8.7 51.6±10.4## 50.9±12.1 50.7±17.1 45.2±10.9 AST(U/L) 98.6±25.9 138.6±46.8# 136.1±30.5 137.2±42.3 122.5±31.2

表4 復(fù)方葛根飲料在護(hù)肝實(shí)驗(yàn)中小鼠肝組織MDA含量、SOD、GSH-px活性的影響(±s，n=15)

表4 復(fù)方葛根飲料在護(hù)肝實(shí)驗(yàn)中小鼠肝組織MDA含量、SOD、GSH-px活性的影響(±s，n=15)

注：與正常對(duì)照組比較，#為p＜0.05，##為p＜0.01；與模型對(duì)照組比較，*為p＜0.05。

組別正常模型低劑量中劑量高劑量肝組織GSH-px(酶活力單位) 1017.9±138.1 855.6±120.6# 891.0±152.6 964.1±162.7 987.1±159.9劑量(mL/kg·BW) 0.00 0.00 5.17 10.34 15.51肝組織MDA(nmol/mgprot) 5.58±0.82 7.07±1.24## 6.78±1.15# 6.01±0.70* 6.21±1.44肝組織SOD(U/mgprot) 262.7±27.3 213.8±37.8## 229.6±35.1 236.3±42.8 248.5±59.0 -

表5 復(fù)方葛根飲料對(duì)急性酒精性肝損傷的保護(hù)作用評(píng)分統(tǒng)計(jì)(±s，n=15)

表5 復(fù)方葛根飲料對(duì)急性酒精性肝損傷的保護(hù)作用評(píng)分統(tǒng)計(jì)(±s，n=15)

注：與正常對(duì)照組比較，##為p＜0.01。

組別高劑量組2.52±0.71 0.054病變類型評(píng)分P值正常對(duì)照組1.20±1.01 0.000模型對(duì)照組3.08±0.81##—低劑量組2.75±0.57 0.187中劑量組2.95±0.76 0.646

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示(見表3)，肝損傷模型對(duì)照組與正常對(duì)照組相比，酒精可導(dǎo)致模型對(duì)照組小鼠血清中ALT和AST活性升高，存在顯著性差異(P＜0.01，P＜0.05)。與模型對(duì)照組比較，各劑量組血清ALT和AST活性均有降低，但無顯著性差異（P＞0.05）。

肝損傷模型對(duì)照組與正常對(duì)照組相比，酒精可使模型對(duì)照組小鼠血清TG水平顯著上升(P＜0.01)。與模型對(duì)照組比較，葛根復(fù)方飲料中劑量可明顯降低肝組織TG含量(P＜0.05)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示(見表4)，肝損傷模型對(duì)照組與正常對(duì)照組相比，酒精可導(dǎo)致模型對(duì)照組小鼠肝組織中脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量顯著升高，存在極顯著性差異(P＜0.01)。與模型對(duì)照組比較，中劑量組可顯著降低小鼠肝組織MDA含量(P＜0.05)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果(見表4)顯示，肝損傷模型對(duì)照組與正常對(duì)照組相比，酒精可導(dǎo)致模型對(duì)照組小鼠肝組織中SOD和GSH-px活性顯著降低，存在顯著性差異(P＜0.01，P＜0.05)。與模型對(duì)照組比較，各劑量組小鼠肝組織SOD、GSH-px活性均有升高，但無顯著性差異(P＞0.05)。

2.3 復(fù)方葛根飲料對(duì)小鼠肝臟病理組織學(xué)的影響

各實(shí)驗(yàn)組切片統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表5。正常對(duì)照組小鼠(見圖1a)肝組織結(jié)構(gòu)整齊，胞漿內(nèi)幾乎不存在脂肪滴；模型對(duì)照組肝細(xì)胞(見圖1b)大多發(fā)生嚴(yán)重的氣球樣變和透明性變，胞核周圍聚集著大量的大泡性脂肪滴。模型對(duì)照組(圖1b)與正常對(duì)照組(圖1a)比較，肝臟脂肪細(xì)胞變性評(píng)分在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著性差異(P＜0.01)，該動(dòng)物試驗(yàn)?zāi)Ｐ统闪ⅲ晒?fù)制出了實(shí)驗(yàn)小鼠酒精性肝損傷模型。從鏡檢上看，各劑量組與模型組相比較(見圖1c、圖1d、圖1e)，肝細(xì)胞脂肪變性程度減輕，但統(tǒng)計(jì)學(xué)上無顯著性差異(P＞0.05)。

各組病理組織學(xué)檢查圖片見圖1，依次為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組。

3 結(jié)論

本試驗(yàn)研究治療性給藥后小鼠血清ALT、AST活性以及肝細(xì)胞TG、MDA含量，與模型對(duì)照組比較，復(fù)方葛根飲料各劑量組均可降低小鼠血清ALT活性以及肝組織MDA含量，復(fù)方葛根飲料高劑量組可明顯降低小鼠血清AST活性，表明其對(duì)急性酒精中毒引起的肝損傷有一定的修復(fù)作用；中、高劑量組可明顯降低肝組織TG含量(P＜0.01)，表明肝臟脂質(zhì)化有明顯改善。

圖1 各組病理組織學(xué)檢查圖片

本試驗(yàn)研究長期給予受試物對(duì)酒精性肝損傷的輔助保護(hù)作用，與模型對(duì)照組比較，復(fù)方葛根飲料各劑量組均可降低小鼠血清ALT、AST活性，肝組織SOD、GSH-px活性均有升高；中劑量可明顯降低肝組織TG含量(P＜0.05)及顯著降低小鼠肝組織MDA含量(P＜0.05)，表明從氧化應(yīng)激方面看，復(fù)方葛根飲料可提高肝組織的抗氧化能力，降低自由基的產(chǎn)生，從而減輕氧化應(yīng)激導(dǎo)致的肝損傷。從肝臟病理切片鏡檢上看，與模型組相比較，各劑量組肝細(xì)胞脂肪變性程度均有一定程度的減輕。

[1]李欣.全球葡萄酒及烈酒市場發(fā)展展望[J].中國食品, 2013(7)：50-53.

[2]楊明亮,尹章漢,吳炎忠,等.飲酒與健康[J].中國衛(wèi)生監(jiān)督雜志,2002,9(4)：196-201.

[3]方芳,王鳳忠.醉酒與解酒的研究[J].農(nóng)產(chǎn)品加工(學(xué)刊), 2013,22：59-61.

[4]許耀宗.酒精性中毒患者應(yīng)用中藥葛根治療的藥效與藥理研究[J].北方藥學(xué),2016(2)：108-109.

[5]嵇揚(yáng),李俊,楊平.枳椇子對(duì)急性酒精中毒的作用[J].中藥材,2001(2)：126-128.

[6]齊越,秦杰,邱坤鵬,等.枸杞茶飲聯(lián)合綜合護(hù)理對(duì)非酒精性脂肪肝臨床研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2014(3)：560-563.

[7]常陸林.山楂黃酮提取、純化工藝及其對(duì)酒精性肝損傷影響的研究[D].鄭州：鄭州大學(xué),2010.

[8]馮娜.金銀花葛花解酒功能的研究及功能性飲料的開發(fā)[D].濟(jì)南：山東師范大學(xué),2013.

[9]XU X H,ZHENG N,CHEN Z N,et al.Puerarin, isolated from Pueraria lobata(Willd.),protects against diabetic nephropathy by attenuating oxidative stress[J].Gene,2016,591(1)：411-416.

[10]TIAN T,CAI X J,ZHU H.Puerarin,an isoflavone compound extracted from Gegen(Radix Puerariae Lobatae),modulates sclera remodeling caused by extremely low frequency electromagnetic field[J]. Journal of traditional Chinese medicine,2016,26(5)：678-682.

[11]WEI S Y,CHEN Y,XU X y.Progress on the pharmacological research of puerarin:a review[J]. Chinese journal of natural medicines,2014,12(6)：407-414.

[12]ZHEN H.Study on the development of Pueraria lobata [J].Amino acids&biotic res,2006,28(2)：24-26.

[13]崔樹明.中藥葛根的藥理研究及進(jìn)展[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥,2005(1)：58-60.

[14]周玉娟,魏繼承.葛根素預(yù)處理對(duì)小兒先心病根治術(shù)中血流動(dòng)力學(xué)的影響[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2010,26(22)：138-142.

[15]茅彩萍，顧振倫.葛根素的藥理作用和臨床應(yīng)用研究[J].中國血液流變學(xué)雜志,2004,14(1)：138-142.

[16]夏華玲.葛根素的藥理作用研究進(jìn)展[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2006,17(3)：434-435.

[17]潘洪平.葛根總黃酮和葛根素的藥理作用和臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J].廣西醫(yī)藥,2003,25(10)：1941-1944.

[18]TIAN F,XU L H,ZHAO W,et al.The neuroprotecttive mechanism of puerarin treatment of acute spinal cord injury in rats[J].Neuroscience letter,2013,543(24)：64-68.

[19]徐曉虹.葛根素注射液對(duì)慢性乙醇中毒小鼠記憶障礙的改善作用[J].中國藥學(xué)雜志,2003,38(1)：31.

[20]SHEN X L,WIFF M R,NIELSEN M,et al.Inhibition of[3H]Flunltrazepam binding to rat brain membranes in vitro by puerarin and daidzin[J].Acta pharmaceutica sinica,1996,31(1)：59-63.

[21]YANG X K,BAI H,CAI W X,et al.Lycium barbarum polysaccharides reduce intestinal inchemia/reperfusion injuries in rats[J].Chemico-biological interactions,2013, 204(3)：166-172.

[22]解酒良藥枳椇子[J].中醫(yī)藥通報(bào),2016(2)：17.

[23]柳海艷,鐘贛生,李怡文,等.醇提和水提葛花枳椇子及其配伍對(duì)酒精性肝損傷大鼠肝臟抗氧化功能的影響[J].中華中醫(yī)藥雜志,2012(4)：1181-1184.

[24]張明,陳珍.山楂黃酮提取物降血脂研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2016,16：109-110.

Protective Effects of Compound Pueraria Drink on Mice with Alcoholic Liver Injury

LIU Chao1,DONG Xiaoyuan2,YUAN Yuan3,WU Hao2and LI Liang2
(1.Engineering and Technology College,Hubei University of Technology,Wuhan,Hubei 430064; 2.Tianlong Huanghelou Distillery Co.Ltd.,Wuhan,Hubei,430050;3.Hubei Provincial Center for Disease Control and Prevention,Wuhan,Hubei 430079,China)

In this study,the protective effects of compound pueraria drink on mice with acute alcoholic liver injury were investigated. SPF Kunming mice were randomly divided into blank control group,alcoholic injury model group and compound pueraria drink group(low,medium and high dose group respectively as 5.17 mL/kg·BW,10.34 mL/kg·BW and 15.51 mL/kg·BW).Two models of acute alcoholic liver injury were established as follows:the first group of mice,after 12 hours of fasting but with access to water,disposable gavage administration(20 mL/kg·BW),30 min later,administered with 50%vol ethanol(16 mL/kg·BW);the second group of mice were administered with appropriate concentration of subjects for 30 days.On the 31st day,the mice from all groups exceptthe blank control group were administered with 50%vol alcohol(16 mL/kg·BW),and then the first group of mice were subjected to dislocation death to assay the activities of ALT and AST in serum,the contents of TG and MDA and the activities of ADH in hepatic tissue.The second group of mice were subjected to dislocation death to assay the activities of ALT and AST in serum,the contents of TG and MDA and the activities of GSH-px and SOD in hepatic tissue,and the pathologic examination of hepatic tissue.The results suggested that,compared with the alcoholic injury model group,the activities of ALT and AST in serum ADH in each compound pueraria drink group presented evident decrease,besides,the activities of ADH decreased significantly,and the activities of GSP-px and SOD in liver tissue increased and TG and MDA content in liver tissue decreased(P＜0.01).There was statistically significant difference in liver fat cells degeneration score between the two groups.Accordingly,compound pueraria drink had significant protective effects on mice with alcoholic liver injury.

compound pueraria drink;alcoholic liver injury;protective effects

TS971；TS27

A

1001-9286（2017）09-0131-07

10.13746/j.njkj.2017142

2017-05-23

劉超（1982-），女，講師，從事天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，E-mail：416649994@qq.com。

李良(1982-)，男，工程師，碩士研究生，白酒研究與開發(fā)，E-mail：h-liliang@gujing.com.cn。

優(yōu)先數(shù)字出版時(shí)間：2017-07-21；地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/52.1051.TS.20170721.1106.010.html。