陶曉秋，熊巍，韶濟(jì)民，張海燕，黃玫

四川省煙草質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)站，成都市高新區(qū)世紀(jì)城路936號(hào)610041

煙草和煙氣化學(xué)

UPLC-MS/MS測(cè)定卷煙煙氣、濾嘴和煙灰中5種常用殺菌劑及其轉(zhuǎn)移行為研究

陶曉秋，熊巍，韶濟(jì)民，張海燕，黃玫

四川省煙草質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)站，成都市高新區(qū)世紀(jì)城路936號(hào)610041

建立了UPLC-MS/MS測(cè)定主流煙氣總粒相物、氣相物、濾嘴、煙蒂煙絲和煙灰中霜霉威、多菌靈、稻瘟靈、三唑醇和三唑酮含量的方法，樣品經(jīng)乙腈或甲醇提取，分散固相萃取后，進(jìn)行UPLC-MS/MS分析。5種殺菌劑在各基質(zhì)中的檢出限為0.325～1.832ng/cig，平均回收率為90.9%～111.8%，RSD為1.3%～10.1%。應(yīng)用該方法研究了標(biāo)準(zhǔn)卷煙加標(biāo)樣品和自然高殘留樣品中殺菌劑的煙氣轉(zhuǎn)移率，結(jié)果表明：標(biāo)準(zhǔn)卷煙加標(biāo)樣品中，5種殺菌劑向主流煙氣總粒相物、濾嘴中的平均轉(zhuǎn)移率分別為29.4%和11.0%，向煙蒂煙絲和煙灰中平均轉(zhuǎn)移率為1.6%和0.2%，主流煙氣氣相物中則未檢出殺菌劑；主流煙氣總粒相物中，多菌靈的轉(zhuǎn)移率較低（＜5%）,其它4種殺菌劑則接近或超過(guò)30%。自然高殘留卷煙樣品中，5種殺菌劑向煙氣總粒相物中平均轉(zhuǎn)移率為3.7%，在濾嘴中平均轉(zhuǎn)移率為2.2%。卷煙實(shí)際燃吸過(guò)程中5種殺菌劑向煙氣總粒相物轉(zhuǎn)移率明顯低于加標(biāo)研究結(jié)果；若采用加標(biāo)研究結(jié)果，成品卷煙殺菌劑殘留對(duì)吸煙者的健康風(fēng)險(xiǎn)將被高估。

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜；卷煙；殺菌劑；轉(zhuǎn)移行為

霜霉威、多菌靈、稻瘟靈、三唑醇和三唑酮是烤煙生產(chǎn)中常用殺菌劑，用于防治葉斑病和黑脛病，具有高效、低毒等特點(diǎn)。由于其施用廣泛，在烤煙中的殘留率風(fēng)險(xiǎn)較高。而轉(zhuǎn)移到煙氣中的殺菌劑會(huì)對(duì)吸煙者產(chǎn)生較大的健康風(fēng)險(xiǎn)[1]，因此，準(zhǔn)確定量分析5種常用殺菌劑并研究其煙氣轉(zhuǎn)移率意義重大。

煙葉中殺菌劑殘留量的分析方法主要有高效液相色譜法（HPLC）[2]、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（GC–MS/MS）[3-4]和液相色譜–串聯(lián)質(zhì)譜法（LC–MS/MS）[5-6]，而煙氣及濾嘴中殺菌劑的檢測(cè)方法少有報(bào)道。殺菌劑煙氣轉(zhuǎn)移率的研究主要集中在有機(jī)磷[7]、擬除蟲(chóng)菊酯[8]、氨基甲酸酯類(lèi)[9]和馬來(lái)酰肼[10-12]殺菌劑的煙氣轉(zhuǎn)移率，這些殺菌劑大部分為禁用或煙草中施用較少，在煙草中檢出率較低。前期報(bào)道的轉(zhuǎn)移率研究方法多采用成品卷煙加標(biāo)方式研究其煙氣轉(zhuǎn)移率，而直接選取高殘留量煙葉卷制卷煙研究殺菌劑真實(shí)的煙氣轉(zhuǎn)移率的未見(jiàn)報(bào)道。

本文利用UPLC–MS/MS建立了同時(shí)分析主流煙氣總粒相物、氣相物、濾嘴、煙蒂煙絲和煙灰中5種常用殺菌劑殘留量的方法，應(yīng)用該方法分析了標(biāo)準(zhǔn)卷煙加標(biāo)樣品和自然高殘留樣品中5種殺菌劑的轉(zhuǎn)移行為，可為煙氣的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑

霜霉威、多菌靈、稻瘟靈、三唑醇和三唑酮標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自L(fǎng)abor Dr.Ehrenstorfer-Schafers（化學(xué)純度：≥98.5%，Augsburg，德國(guó)），內(nèi)標(biāo)磷酸三苯酯（TPP）購(gòu)自L(fǎng)abor Dr.Ehrenstorfer-Schafers（化學(xué)純度：≥98.5%，Augsburg，德國(guó)），甲酸(HPLC級(jí)，德國(guó)Sigma公司)；甲醇，乙腈（色譜純，美國(guó)Thermo-Fisher公司）；試劑包（內(nèi)含1 g檸檬酸鈉和0.5 g檸檬酸二氫鈉，4 g無(wú)水硫酸鎂和1 g氯化鈉）和N-丙基乙二胺（PSA）購(gòu)自安捷倫公司（美國(guó)），水為超純水。標(biāo)準(zhǔn)卷煙由國(guó)家煙草標(biāo)準(zhǔn)化中心提供，63個(gè)煙葉樣品選自國(guó)內(nèi)外農(nóng)殘普查分析樣品。

超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀(Xevo TQ，美國(guó)Waters公司)，配備電噴霧電離源（ESI）；渦旋振蕩器（VtexMixer 230VeU，美國(guó)Labnet公司）；斯茹林直線(xiàn)型吸煙機(jī)（SM450，英國(guó)斯茹林公司），離心機(jī)(Sigma 3K15，德國(guó)Sigma公司)。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

分別準(zhǔn)確稱(chēng)取10 mg的殺菌劑標(biāo)準(zhǔn)品, 用乙腈溶解定容至10 mL，制得1.0 mg/mL的單一標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。用乙腈準(zhǔn)確配制混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（霜霉威：0.20 mg/mL；多菌靈和稻瘟靈：0.04 mg/mL；三唑醇和三唑酮：0.10 mg/mL）儲(chǔ)存于棕色玻璃瓶中，-20℃保存。

準(zhǔn)確配制TPP（0.99 mg/mL）內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，儲(chǔ)存于棕色玻璃瓶中，-20℃保存。取一定量的內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液，用乙腈稀釋定容，制得內(nèi)標(biāo)工作液（10 μg/mL）。所有儲(chǔ)備液-20℃保存，使用前將其恢復(fù)到室溫。

1.3 樣品的提取和凈化

按照GB/T 16447—2004平衡煙支[13]， ISO標(biāo)準(zhǔn)抽吸模式（ISO 3308:2000/ GB/T 19609—2004）捕集轉(zhuǎn)移到主流煙氣中的殺菌劑[14]，每個(gè)濾片抽吸5支煙。煙氣總粒相物捕集濾片放入50 mL具蓋離心管中，并用脫脂棉擦干凈捕集器上的煙氣總粒相物，一并加入具蓋離心管；分別收集每個(gè)孔道的濾嘴、濾嘴中殘留煙絲（煙蒂煙絲）、煙灰于不同的50 mL具蓋離心管；在每個(gè)捕集器后接100 mL吸收瓶，預(yù)先加入20 mL乙腈和100 μL內(nèi)標(biāo)，用于捕集煙氣氣相物中的殺菌劑。

煙氣總粒相物捕集濾片、煙蒂煙絲和煙灰的處理方法參考文獻(xiàn)[15-16]，樣品經(jīng)乙腈提取，基質(zhì)分散固相萃取，萃取液經(jīng)有機(jī)相濾膜過(guò)濾后用LC-MS/MS分析測(cè)定。濾嘴的處理方法：濾嘴先剔除煙絲，每個(gè)濾嘴用剪刀剪成四瓣，放入50mL旋蓋離心管（5個(gè)/管），向離心管中加入20 mL甲醇，振蕩到樣品被甲醇充分浸潤(rùn)，靜置10 min。加入200 μL內(nèi)標(biāo)（10 μg/mL），2000 r/m渦漩振蕩5 min。然后按照煙氣總粒相物捕集濾片的處理方法處理樣品，用于LC-MS/MS分析測(cè)定。煙氣氣相物的處理方法：直接吸取收集煙氣吸收瓶的乙腈1mL于1.8mL旋蓋色譜瓶，直接進(jìn)LC-MS/MS分析。

1.4 LC-MS/MS條件

色譜條件：Atiantis UPLCHSS T3 (100 mm×2.1 mm，1.8μm)；流動(dòng)相A：水（含0.1% 甲酸，體積分?jǐn)?shù)），流動(dòng)相B：甲醇（含0.1% 甲酸，體積分?jǐn)?shù)）；流速0.4 mL/min；柱溫35 ℃；進(jìn)樣量2 μL。梯度洗脫條件：梯度洗脫條件：0～2min，90%A～50%A；2～2.4min，50%A～30%A；2.4～4.0min，30%A～20%A；4.0～6.0min，20%A～5%A；6.0～9.8min，5%A～5%A；9.8～10.0min，5%A～90%A；10.0～12.0min，90%A～90%A。

質(zhì)譜條件：電噴霧離子源（ESI），噴霧電壓：2.6 kV；離子化溫度350 ℃；霧化氣流量：1000 L/h;錐孔氣（cone）流量50L/h; 碰撞氣流量為0.15 mL/min; 碰撞氣為氬氣，其余氣體為氮?dú)? 駐留時(shí)間為30 ms，正離子MRM模式采集，監(jiān)測(cè)離子對(duì)及其相應(yīng)的碰撞能量（CE），見(jiàn)表1。

表1 多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式下5種殺菌劑及其內(nèi)標(biāo)的部分質(zhì)譜參數(shù)Tab.1 Some parameters of mass spectrometry for five fungicides residues and the internal standard in multiple reaction monitoring mode

1.5 煙氣轉(zhuǎn)移率研究

1）加標(biāo)樣品：選取兩個(gè)不同焦油釋放量卷煙（1號(hào)標(biāo)煙：8.89 mg/cig；2號(hào)標(biāo)煙：11.05 mg/cig），各加入40 μL混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用微量注射器均勻旋轉(zhuǎn)注射，將加標(biāo)卷煙置于溫度為（22±1）℃，相對(duì)濕度為（60±3）%的環(huán)境中平衡48 h，按照GB/T16450調(diào)整檢查吸煙機(jī)抽吸參數(shù)，留取每輪煙蒂（包含濾嘴和煙絲）和煙灰，分別放入50 mL旋蓋離心管中；用劍橋?yàn)V片收集主流煙氣總粒相物，然后將煙氣總粒相物捕集濾片取下，用脫脂棉擦洗捕集器內(nèi)壁，合并放入50mL旋蓋離心管中；用20mL乙腈（預(yù)先加入100 μL內(nèi)標(biāo)）吸收主流煙氣氣相物。按照1.3的處理方法分別處理煙氣總粒相物捕集濾片、濾嘴、煙蒂煙絲、煙灰以及煙氣氣相物，LC-MS/MS測(cè)定。

2）自然高殘留樣品：選取國(guó)內(nèi)外煙葉樣品63個(gè)，利用建立的方法測(cè)定煙葉中的5種殺菌劑殘留量，選取殘留量較高的煙葉樣品6個(gè)，利用小型卷煙機(jī)切絲并卷制卷煙，挑選重量合格的煙支，將卷煙置于溫度為（22±1）℃，相對(duì)濕度為（60±3）%的環(huán)境中平衡48 h，按照GB/T16450調(diào)整檢查吸煙機(jī)抽吸參數(shù)，用劍橋?yàn)V片收集主流煙氣總粒相物，濾片處理方法參考已報(bào)道方法[15-16]。濾嘴按照1.3進(jìn)行處理。

2 結(jié)果與討論

2.1 方法評(píng)價(jià)

2.1.1 LC-MS/MS條件的優(yōu)化

采用針泵注射（5 μL/min）對(duì)目標(biāo)物單獨(dú)進(jìn)樣，將5種殺菌劑及內(nèi)標(biāo)（0.5 μg/mL）的標(biāo)準(zhǔn)溶液引入質(zhì)譜進(jìn)行全掃描，選取響應(yīng)最大離子[M+H]+為母離子，通過(guò)優(yōu)化噴霧電壓、錐孔電壓、CE等參數(shù)使母離子強(qiáng)度最大。在子離子掃描（PI）模式下，調(diào)整CE找到該母離子對(duì)應(yīng)的子離子，其中響應(yīng)最高的錐孔電壓和碰撞能量見(jiàn)表1。

選取3根UPLC色譜柱（UPLC HSS T3，UPLC BEH Shield RP18和Atlantis dC18）以及液質(zhì)分析常用的流動(dòng)相體系（乙腈/水體系、甲醇/水體系以及加入不同量甲酸的兩種體系）優(yōu)化色譜和流動(dòng)相條件，甲酸的加入可以為煙草常用殺菌劑的離解過(guò)程提供H+，有助于目標(biāo)物的離子化。結(jié)果顯示在UPLC HSS T3柱上，0.1%甲酸水和0.1%甲酸甲醇體系中分析物具有更好的分離度與峰形，因此選定此條件作為最終的色譜分析條件。選用了適當(dāng)?shù)奶荻认疵摮绦蚴沟?種殺菌劑完全分離，整個(gè)梯度洗脫時(shí)間為12 min（圖1）。

圖1 5種殺菌劑及TPP加標(biāo)卷煙主流煙氣樣品的選擇離子流色譜圖Fig.1 Chromatograms of five fungicides and TPP in mainstream smoke from cigarettes spiked with fungicides and TPP

2.1.2 前處理?xiàng)l件的優(yōu)化

絕大多數(shù)農(nóng)殘檢測(cè)方法都是選取乙腈作為提取溶劑，然后進(jìn)行基質(zhì)分散固相萃取凈化[15]，在煙絲、濾片和煙灰的處理中，本實(shí)驗(yàn)也選取了乙腈萃取，PSA凈化的方式進(jìn)行處理。

卷煙主流煙氣氣相物中的農(nóng)殘檢測(cè)方法未見(jiàn)報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)中選取了對(duì)5種殺菌劑溶解性相對(duì)較好的乙腈作為萃取液進(jìn)行捕集，分別選取20mL，25 mL和 30 mL乙腈進(jìn)行捕集，結(jié)果顯示捕集液中均未有5種殺菌劑檢出，選取了20 mL乙腈作為最終的捕集液，捕集液直接上UPLC-MS/MS測(cè)定。

濾嘴中殺菌劑的測(cè)定也未有報(bào)道，本實(shí)驗(yàn)選取了乙腈、丙酮和甲醇作為萃取液優(yōu)化殺菌劑萃取條件，由于濾嘴主要為醋酸纖維，在乙腈和丙酮中會(huì)產(chǎn)生溶解，從而使得整個(gè)萃取液變成均勻的膠狀物質(zhì)，嚴(yán)重影響萃取過(guò)程。而甲醇不會(huì)溶解醋酸纖維，并且對(duì)5種殺菌劑具有較好的萃取效率，因此最終選取甲醇作為濾嘴的提取溶劑，提取后按照?qǐng)?bào)道的方法進(jìn)行分散固相萃取[16]，然后用UPLC-MS/MS測(cè)定。

2.1.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)和檢出限

分別移取混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液 0μL，25μL，50μL，100μL，250μL，500μL，1000μL 和 2500μL 到 8 個(gè)10mL容量瓶中，每個(gè)容量瓶移入100μL內(nèi)標(biāo)工作液（10μg/mL），乙腈定容配制成系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液?；|(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)配制：分別移取200μL每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液于8個(gè)1.8mL旋蓋色譜瓶，加入200μL空白樣品基質(zhì)和600 μL乙腈稀釋至1mL，根據(jù)混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液中各殺菌劑濃度計(jì)算得到基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)中各殺菌劑的線(xiàn)性范圍（表2）。分別對(duì)這些標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行UPLC-MS/MS分析，并對(duì)各標(biāo)樣峰面積與內(nèi)標(biāo)的峰面積的比值（y）和其濃度（x）進(jìn)行線(xiàn)性回歸分析，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，各化合物線(xiàn)性關(guān)系良好(相關(guān)系數(shù)r≥0.99)，可以滿(mǎn)足定量分析的需要。以3倍信噪比確定方法的檢出限（LOD），10倍信噪比確定方法的定量限（LOQ），各基質(zhì)中5種殺菌劑的LOD和LOQ的范圍分別為0.325～1.832ng/cig和1.083～6.107 ng/cig（表2）。

表2 5種殺菌劑的線(xiàn)性范圍、檢出限和定量限Tab.2 Linear range, Limit of Detection (LOD) and Limit of Quantity (LOQ) of five fungicides residues

2.1.4 方法的回收率

采用直線(xiàn)型吸煙機(jī)抽吸卷煙后，分別向各個(gè)部分添加混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照1.3的方法處理樣品后上機(jī)檢測(cè)，然后計(jì)算主流煙氣總粒相物、氣相物、濾嘴、煙蒂中煙絲和煙灰的回收率。每個(gè)水平測(cè)5次，得出平均回收率（表3）。如表3所示，5種殺菌劑平均回收率在90.9%～111.8%之間，RSD范圍為1.3%～10.1%。

表3 主流煙氣總粒相物（濾片）、濾嘴、煙蒂中煙絲、煙灰和氣相物中5種殺菌劑的回收率和RSD( n =5)Tab.3 Recovery and RSD (n = 5) of five fungicides residues in TPM of cigarette mainstream smoke, filter, cut tobacco in butt, ash and gas phase

2.2 標(biāo)準(zhǔn)卷煙加標(biāo)樣品中的轉(zhuǎn)移率

在標(biāo)準(zhǔn)卷煙樣品（未檢出目標(biāo)殺菌劑）中加入40 μL 5種殺菌劑的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液進(jìn)行轉(zhuǎn)移率研究，分別計(jì)算5種殺菌劑向主流煙氣總粒相物、氣相物、濾嘴、煙蒂煙絲和煙灰中的轉(zhuǎn)移率。

結(jié)果顯示：5種殺菌劑向主流煙氣總粒相物、濾嘴中的轉(zhuǎn)移趨勢(shì)較為明顯，平均轉(zhuǎn)移率分別為29.4%和11.0%；向煙蒂煙絲、煙灰中的轉(zhuǎn)移率較低，平均轉(zhuǎn)移率為1.6%和0.2%；在氣相物中則未檢出殺菌劑（表4）。

表4 加標(biāo)樣品中5種殺菌劑向主流煙氣總粒相物（濾片）、氣相物、濾嘴、煙灰和煙蒂煙絲中的轉(zhuǎn)移率Tab.4 Transfer ratio of five fungicides residues in TPM of cigarette mainstream smoke, filter, cut tobacco in butt, ash and gas phase from standard cigarettes spiked with fungicides standard solution

在主流煙氣總粒相物中，多菌靈的轉(zhuǎn)移率較低（＜5%）,其它4種殺菌劑則接近或超過(guò)30%。主要原因可能是多菌靈遇熱（溫度＞306 ℃）易分解成其它化合物，從而導(dǎo)致其轉(zhuǎn)移率較低。各殺菌劑在不同標(biāo)煙樣品中的轉(zhuǎn)移率有所差異，對(duì)于1號(hào)標(biāo)煙（焦油8.89 mg/cig），在煙氣總粒相物中轉(zhuǎn)移率最高的為三唑醇；2號(hào)標(biāo)煙（焦油11.05mg/cig）中轉(zhuǎn)移率最高的為霜霉威；濾嘴的轉(zhuǎn)移率基本都在10%左右。可能是由于不同焦油釋放量的卷煙濾嘴和卷煙紙的通風(fēng)率有所不同，從而導(dǎo)致殺菌劑向煙氣和濾嘴的轉(zhuǎn)移率發(fā)生變化。

2.3 自然高殘留樣品中的轉(zhuǎn)移率

挑選6個(gè)殺菌劑殘留量較高的初烤煙葉樣品，利用小型卷煙機(jī)，切絲卷制卷煙，按照ISO標(biāo)準(zhǔn)方法抽吸卷煙。由于2.2中研究結(jié)果表明5種殺菌劑向煙灰、煙蒂煙絲、主流煙氣氣相物中的轉(zhuǎn)移率較低，因此針對(duì)自然高殘留樣品只研究5種殺菌劑向?yàn)V嘴和主流煙氣總粒相物中的轉(zhuǎn)移行為。

從表5可以看出，多菌靈的煙氣總粒相物轉(zhuǎn)移率明顯低于其他，這與2.2中的結(jié)果較為一致。5種殺菌劑在煙氣總粒相物中平均轉(zhuǎn)移率為3.7%，在濾嘴中平均轉(zhuǎn)移率為2.2%，與2.2加標(biāo)卷煙樣品中的轉(zhuǎn)移率差異較大。

表6顯示，自然高殘留樣品中殺菌劑轉(zhuǎn)移率明顯低于加標(biāo)樣品，主要原因可能是成品卷煙煙支加入殺菌劑標(biāo)準(zhǔn)品后，雖然經(jīng)過(guò)48 h平衡，但是標(biāo)準(zhǔn)品一般只會(huì)分散在煙絲表面，難以滲入細(xì)胞間隙或進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部。卷煙燃吸過(guò)程中，存留在煙絲表面的殺菌劑標(biāo)準(zhǔn)品會(huì)通過(guò)熱蒸餾作用進(jìn)入煙氣，通過(guò)濾嘴，從而被濾片捕集。而多菌靈等5種內(nèi)吸性較強(qiáng)的殺菌劑，主要是通過(guò)進(jìn)入植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生作用，結(jié)合較為緊密，因此在自然高殘留樣品的燃燒過(guò)程中，不容易被熱蒸餾出來(lái)，而是遇高溫分解或者直接生成其它物質(zhì)。

表5 自然高殘留樣品中5種殺菌劑向主流煙氣總粒相物和濾嘴中的轉(zhuǎn)移率Tab.5 Transfer ratio of five fungicides residues in TPM of tobacco mainstream smoke and cigarette filter from homemade cigarettes with high fungicides residue

表6 加標(biāo)樣品和自然高殘留樣品中5種殺菌劑的煙氣總粒相物和濾嘴轉(zhuǎn)移率對(duì)比Tab.6 Mean transfer ratio of five fungicides residues in TPM of tobacco mainstream smoke and cigarette filter from standard cigarettes spiked with fungicides standard solution and homemade cigarettes with high fungicides residue

3 結(jié)論

本文采用基質(zhì)分散固相萃取，建立了UPLC-MSMS測(cè)定煙氣總粒相物、氣相物、濾嘴、煙蒂煙絲和煙灰中5種重要?dú)⒕鷦┖康姆椒ǎ摲椒ǚ治鰰r(shí)間較短，5種殺菌劑平均回收率為90.9%～111.8%，RSD為1.3%～10.1%。

用該方法研究了標(biāo)準(zhǔn)卷煙加標(biāo)樣品和自然高殘留樣品中5種殺菌劑的轉(zhuǎn)移行為，標(biāo)準(zhǔn)卷煙加標(biāo)樣品中，5種殺菌劑向主流煙氣總粒相物、濾嘴中的轉(zhuǎn)移趨勢(shì)較為明顯（＞10%），向煙蒂煙絲和煙灰中的轉(zhuǎn)移率較低（＜10%），主流煙氣氣相物中未檢出5種殺菌劑；自然高殘留樣品中，5種殺菌劑在煙氣總粒相物和濾嘴中平均轉(zhuǎn)移率分別為3.7%和2.2%。

自然高殘留樣品中5種殺菌劑的煙氣總粒相物轉(zhuǎn)移率（3.7%）明顯低于加標(biāo)樣品的煙氣總粒相物轉(zhuǎn)移率（29.4%）；考慮到卷煙生產(chǎn)過(guò)程中初烤煙葉還要經(jīng)過(guò)后續(xù)的復(fù)烤、醇化和卷制等環(huán)節(jié)，成品卷煙中的這5種殺菌劑的殘留會(huì)更低，因此可以初步得出在成品卷煙實(shí)際燃吸過(guò)程中這5種殺菌劑對(duì)吸煙者的健康風(fēng)險(xiǎn)可能更小。但本研究的樣本量相對(duì)較小，也未研究市場(chǎng)在售卷煙中殘留殺菌劑的煙氣總粒相物轉(zhuǎn)移率，因此，需要進(jìn)一步進(jìn)行大量樣本的研究才能得出更為科學(xué)的結(jié)論。

[1]CORESTA.The concept and implementation of agrochemical guidance residue levels [M].CORESTA Guides: Guide No1, July 2013, Third Issue: 1-10.

[2]曹愛(ài)華, 李義強(qiáng), 徐光軍, 等.高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定煙草中吡蟲(chóng)啉、多菌靈、甲基硫菌靈的殘留量 [J].中國(guó)煙草科學(xué),2009, 01: 31-34.CAO Aihua, Li Yiqiang, XU Guangjun, et al.Determination of Imidacloprid, Carbendazim and Thiophanate-methyl inTobacco by High Performance Liquid Chromatography[J].Chinese tobacco science, 2009, 01: 31-34.

[3]陳曉水，邊照陽(yáng)，唐綱嶺，胡清源.氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)分析煙草中的 132 種農(nóng)藥殘留 [J].色譜, 2012, 30(10): 1043-1055.Chen Xiaoshui, Bian Zhaoyang, Tang Gangling, Hu Qingyuan.Determination of 132 pesticide residues in tobacco by gas chromatography-tandem mass spectrometry[J].Chinese Joural of Chromatography, 2012, 30(10): 1043-1055.

[4]樓小華，高川川，朱文靜，等.PTV-GC-MS-MS 同時(shí)測(cè)定煙草中202 種農(nóng)藥殘留 [J].煙草科技, 2013, 8(013): 45-57.Lou Xiaohua, Gao Chuanchuan, Zhu Wenjing, et al.Simultaneous determination of 202 pesticide residues in tobacco by PTV gas chromatography-tandem mass spectrometry[J].Tobacco Science,2013, 8(013): 45-57.

[5]王駿, 鐘青.煙草中“多菌靈”殘留量的液相色譜-質(zhì)譜測(cè)定[J].煙草科技, 2008, 11: 44-47.Wang Jun, Zhong Qing, Determination of Carbendazol residues in tobacco by LC-MS[J].Tobacco Science,2013, 8(013): 45-57.

[6]楊飛, 邊照陽(yáng), 唐綱嶺，等.LC-MS-MS同時(shí)檢測(cè)煙草中的6種殺菌劑 [J].煙草科技, 2012, 11: 45-50.Yang Fei, Bian Zhaoyang, Tang Gangling, et al.Simultaneous determination of 6 antiseptics in tobacco with LC-MS-MS method[J].Tobacco Science,2012, 11: 45-50.

[7]張洪非, 胡清源, 唐綱嶺，等.29種有機(jī)磷農(nóng)藥向卷煙主流煙氣總粒相物和煙蒂中的轉(zhuǎn)移率 [J].煙草科技, 2010, 07: 39-42.Zhang Hongfei, Hu Qingyuan, Tang Ganglin, et al.Transfer of 29 Organophosphorus pesticides in cut tobacco to particulate matter in mainstream cigarette smoke and cigarette butt[J].Tobacco Science,2010, 07: 39-42.

[8]蔡繼寶, 劉百戰(zhàn), 朱曉蘭, 等.煙草中菊酯類(lèi)農(nóng)藥殘留量及其捕集轉(zhuǎn)移率的測(cè)定[J].分析測(cè)試學(xué)報(bào), 2002, 02: 29-32.Cai Jibao, Liu Baizhan, Zhu Xiaolan, et al.Determination of residuces of pyrethriods in tobacco and their collection of shifting ef fi ciency by capillary gas chromatography[J].Joural of instrumetal analysis,2002, 02: 29-32.

[9]時(shí)亮, 寧淑東, 丁佳, 等.煙草中氨基甲酸酯農(nóng)藥殘留量在卷煙煙氣中捕集轉(zhuǎn)移率的測(cè)定 [J].分析測(cè)試學(xué)報(bào), 2001, 04: 53-55.Shi Liang, Ling Shudong ,Ding Jia, et al.Determination of collection of shifting ef fi ciency for carbamate pesticides residue in cigarette smoke[J].Joural of instrumetal analysis, 2001, 04: 53-55.

[10]CHOPRA N M, VERMA M M, ZUNIGA T H.Fate of maleic hydrazide in tobacco smoke [J].Journal of Agricultural and Food Chemistry, 1982, 30(4): 672-676.

[11]HAEBERER A F, CHORTYK O T.Gas-liquid chromatographicdetermination of maleic hydrazide in tobacco and tobacco smoke [J].Journal of the Association of Of fi cial Analytical Chemists, 1979,62:171-175.

[12]LIU YuYing, HOFFMANN D.Chemical studies on tobacco smoke.XIX.Quantitative chromatographic determination of maleic hydrazide in cigaret smoke [J].Analytical chemistry, 1973, 45(13):2270-2273.

[13]中國(guó)煙草標(biāo)準(zhǔn)化研究中心.GB-T 16447-2004煙草及煙草制品調(diào)節(jié)和測(cè)試的大氣環(huán)境 [S].2004.China Tobacco Standardization Research Center, GB-T 16447-2004 Tobacco and tobacco products-Atmosphere for conditioning and testing.[S].2004.

[14]國(guó)家煙草質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心.GB-T 19609-2004卷煙用常規(guī)分析用吸煙機(jī)測(cè)定總粒相物和焦油 [S].2004.National Tobacco Quality Supervision & Inspection Center, GB-T 19609-2004 Cigarette-Determination of total and nicotine-free dry particulate matter using a routine analytical smoking machine, 2004.

[15]中國(guó)煙草總公司鄭州煙草研究院.YC-T 405.1-2011煙草及煙草制品多種農(nóng)藥殘留量的測(cè)定第1部分：高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 [S].2011.Zhengzhou Tobacco Research Institute of China National Tobacco Corporation, YC-T 405.1-2011 Tobacco and tobacco products determination of multi-pesticide Part 1: highperformance liquid chromatography-tandem mass spectrometry[S].2011.

[16]熊巍, 韶濟(jì)民, 龐夙, 等.UPLC-MS-MS法測(cè)定煙草中12種常用農(nóng)藥殘留量 [J].中國(guó)煙草科學(xué), 2015, 01: 5-9.Xiong Wei,Shao Jimin, Pang Su, et al.Determination of Twelve Common Pesticides Residues in Tobacco by Using Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry, [J].Chinese tobacco science, 2015, 01: 5-9.

Determination of fi ve commonly uesd fungicides in cigarette smoke， fi lter and ash by UPLC-MS/MS and study on their migration behaviors

TAO Xiaoqiu*, XIONG Wei, SHAO Jimin, ZHANG Haiyan, HUANG Mei
Sichuan Provincial Tobacco Quality Supervision and Testing Station, Chengdu 610041, China

A study was conducted for the determination of propamocarb, carbendazim, isoprothiolane, triadimenol and triadimefon in cigarette smoke total particulate matter (TPM), gas phase, fi lters, cut tobacco leaves in butts and cigarette ash by UPLC-MS/MS.Test samples were extracted with acetonitrile or methanol, prepared by matrix dispersive solid phase extraction, subsequently analyzed by UPLC-MS/MS.Results showed that the average recoveries ranged from 90.9% to 111.8% with relative standard deviation (RSD) of 1.3%-10.1%. Limit of detection (LOD) values ranged from 0.325ng/cig to 1.832ng/cig.This method was applied to study migration behaviors of fi ve commonly uesd fungicides in standard cigarettes spiked with fungicides and homemade high fungicides residue cigarettes.In standard cigarettes spiked with fungicides, fi ve fungicides were signi fi cantly transferred to TPM with mean migration ratio of 29.4% and cigarette fi lter with mean transfer ratio of 11.0%.as well as few fungicides transferred into cut tobacco leaves in cigarette butts and cigarette ash.No fungicides were found transferring into gas phase..In homemade high fungicides residue cigarettes, mean migration ratios of five fungicides in TPM (3.7%) and cigarette fi lter (2.2%) were much lower than standard cigarettes spiked with fungicides.In summary, transfer ratios of carbendazim, isoprothiolane and triadimenol in actual smoking would be obviously lower than standard cigarettes spiked with fungicides.The health risk of fungicide residues in cigarettes might be overestimated from the test results.

liquid chromatography-tandem mass spectrometry; cigarette; fungicides; migration behavior

陶曉秋，熊巍，韶濟(jì)民，等.UPLC-MS/MS測(cè)定卷煙煙氣、濾嘴和煙灰中5種常用殺菌劑及其轉(zhuǎn)移行為研究[J].中國(guó)煙草學(xué)報(bào)，2017,23（4）

四川省煙草專(zhuān)賣(mài)局（公司）科技計(jì)劃項(xiàng)目“基于UPLC-MS/MS的煙葉多農(nóng)殘檢測(cè)方法及卷煙多農(nóng)殘煙氣轉(zhuǎn)移率研究”（201301003）

陶曉秋（1968—），碩士，四川省煙草質(zhì)量監(jiān)督檢測(cè)站，高級(jí)工程師，主要從事煙草和土壤化學(xué)分析工作，Email: txq@sctobacco.com.cn

2016-01-22；< class="emphasis_bold">網(wǎng)絡(luò)出版日期：

日期：2017-03-09

：TAO Xiaoqiu, XIONG Wei, SHAO Jimin, et al.Determination of fi ve commonly uesd fungicides in cigarette smoke， fi lter and ash by UPLC-MS/MS and study on their migration behaviors [J].Acta Tabaccaria Sinica, 2017, 23(4)

*Corresponding author.Email：txq@sctobacco.com.cn