王洪萍，鄭婷婷，王 芝，曾凡明

（遠(yuǎn)大醫(yī)藥＜中國(guó)＞有限公司，湖北 武漢 430040）

吲達(dá)帕胺片含量測(cè)定方法改進(jìn)研究

王洪萍，鄭婷婷，王 芝，曾凡明

（遠(yuǎn)大醫(yī)藥＜中國(guó)＞有限公司，湖北 武漢 430040）

目的對(duì)吲達(dá)帕胺片的含量測(cè)定方法進(jìn)行研究，找出分析方法的關(guān)鍵控制點(diǎn)。方法 按照2015年版《中國(guó)藥典（二部）》吲達(dá)帕胺片含量測(cè)定方法，將吲達(dá)帕胺片研細(xì)后的粉末全部過(guò)6號(hào)篩，加乙醇適量，水浴加熱溶解一定時(shí)間，按紫外－可見(jiàn)分光光度法[2015年版《中國(guó)藥典(四部)》（通則0401）]，在242 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。結(jié)果 吲達(dá)帕胺片的含量在90．0% ～110．0%之間，符合《中國(guó)藥典》的要求。結(jié)論 經(jīng)過(guò)改進(jìn)的測(cè)定方法能確保在不同實(shí)驗(yàn)室、不同型號(hào)的儀器，以及不同分析人員等影響因素下，始終能準(zhǔn)確地檢測(cè)出吲達(dá)帕胺片的含量。

吲達(dá)帕胺片；含量測(cè)定；研細(xì)過(guò)篩；方法改進(jìn)

Abstract：Ob jective To study the method for content determination of Indapamide Tablets，and to find out the critical point control of analytical methods．M ethods According to the method of China Pharmacopoeia（2015 Edition，VolumeⅡ）to determine the content of Indapamide Tablets，the porphyrization powder of Indapamide Tablets was over the No．6 sieve，the right amount of alcohol was added and heated up in water bath for a certain time．Absorbance was measured at the wavelength of 242 nm by ultraviolet－visible spectrophotometry of China Pharmacopoeia（2015 Edition，VolumeⅣ，General 0401）．Results The content of Indapamide Tablets ranged from 90．0% to 110．0%，which was in accordance with the requirements of Chinese Pharmacopoeia．Conclusion The improved method can always accurately determine the content of Indapamide Tablets in influence factor of different laboratories，different types of instruments and different analysts．

Key words：Indapamide Tablets；content determination；fine screening；improvement method

吲達(dá)帕胺為非噻嗪類吲哚衍生物，具有擴(kuò)張血管平滑肌及利尿的作用[1－3]，是目前臨床廣泛應(yīng)用的一線抗高血壓藥，可單獨(dú)用于輕、中、高度高血壓，降壓溫和，療效確切，為理想的長(zhǎng)效降壓藥[4－10]。本公司曾安排不同的化驗(yàn)人員按照2015年版《中國(guó)藥典(二部)》[11]含量測(cè)定項(xiàng)下方法檢測(cè)，結(jié)果含量差異較大。對(duì)生產(chǎn)的吲達(dá)帕胺片（批號(hào)為15110303）留樣檢測(cè)，不同的化驗(yàn)人員檢測(cè)結(jié)果不同：新化驗(yàn)員檢測(cè)含量為87．2%，不符合《中國(guó)藥典》標(biāo)準(zhǔn)90．0%～110．0%的要求，為不合格產(chǎn)品；有經(jīng)驗(yàn)的化驗(yàn)員檢測(cè)含量為96．7%，符合《中國(guó)藥典》規(guī)定。最初認(rèn)為是含量均勻度問(wèn)題，后通過(guò)不同化驗(yàn)員進(jìn)行同批隨機(jī)抽檢，對(duì)含量均勻度進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，雖新老化驗(yàn)員含量均勻度檢測(cè)值均在藥典規(guī)定范圍，但新化驗(yàn)員10片中每1片含量均比老化驗(yàn)員含量檢測(cè)低近10%，10片含量平均值也相差10%，從而排除含量均勻性問(wèn)題。故筆者著手對(duì)該產(chǎn)品的產(chǎn)品性質(zhì)，英國(guó)藥典(BP2015)、美國(guó)藥典(USP38－NF33)、日本藥典(JP17)中提及的檢測(cè)方法進(jìn)行相關(guān)文獻(xiàn)查閱，發(fā)現(xiàn)本品難溶于水，在乙醇中溶解[3，12]，而英國(guó)藥典對(duì)吲達(dá)帕胺片劑的含量測(cè)定溶解時(shí)間也有具體規(guī)定。本研究中從藥片研磨細(xì)度、溶解溫度、溶解時(shí)間等方面進(jìn)行試驗(yàn)研究，探尋檢驗(yàn)方法的關(guān)鍵控制點(diǎn)，以準(zhǔn)確尋找關(guān)鍵控制參數(shù)，保證本品含量檢測(cè)的準(zhǔn)確性?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

1．1 儀器

UV2450型紫外 －可見(jiàn)分光光度計(jì)（日本島津公司）；Evolution220型紫外－可見(jiàn)分光光度計(jì)（美國(guó)賽默飛世爾公司）；MS105DU型電子天平（梅特勒－托利多公司，精度為0．01 mg）；FA2104N型電子天平（上海精密科學(xué)儀器廠，精度為0．1mg）；DK－98－Ⅱ型恒溫水浴鍋（武漢恒信世紀(jì)科技公司）。

1．2 試藥

吲達(dá)帕胺片（薄膜衣片，遠(yuǎn)大醫(yī)藥＜中國(guó)＞有限公司制劑分公司，批號(hào)為15110303和17010303，規(guī)格為2．5mg）；吲達(dá)帕胺對(duì)照品(中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)為 100257－201605，規(guī)格為 100 mg／支，含量為97．9%）；95%乙醇（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)制劑公司，批號(hào)為20160302，規(guī)格為500mL／瓶）；水（遠(yuǎn)大醫(yī)藥 ＜中國(guó)＞有限公司制劑分公司自制純凈水）。

2 方法與結(jié)果

2．1 溶液制備

對(duì)照品溶液：稱取吲達(dá)帕胺對(duì)照品20 mg，精密稱定，置200mL容量瓶中，加乙醇充分溶解后，定容至刻度，精密量取5mL，置100m L容量瓶中，用乙醇溶解并定量稀釋制成每1mL中含5μg的溶液，即得。

供試品溶液：取本品20片（批號(hào)為17010303），精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于吲達(dá)帕胺5mg），置100m L容量瓶中，加乙醇適量，充分振搖，使吲達(dá)帕胺溶解，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液5mL，置50mL容量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

陰性對(duì)照溶液：按處方比例稱取空白輔料，置100 m L容量瓶中，加乙醇充分溶解后，定容至刻度，搖勻，過(guò)濾，即得。

2．2 含量檢測(cè)方法的建立

2．2．1 測(cè)定波長(zhǎng)確定

取對(duì)照品溶液，在200～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行紫外掃描，結(jié)果吲達(dá)帕胺的最大吸收波長(zhǎng)為242 nm。

2．2．2 方法學(xué)考察

陰性干擾試驗(yàn)：取空白溶劑及陰性對(duì)照溶液，同法操作。結(jié)果在242 nm波長(zhǎng)處幾乎無(wú)吸收，不干擾主藥測(cè)定，故選擇242 nm為吲達(dá)帕胺片含量測(cè)定波長(zhǎng)。

重復(fù)性試驗(yàn)：按供試品溶液的配制方法平行配制溶液6份，照紫外－可見(jiàn)分光光度法[2015年版《中國(guó)藥典(四部)》（通則0401）]，在242 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度；同法測(cè)定對(duì)照品溶液，計(jì)算6份供試品溶液的含量。結(jié)果6份供試品溶液的含量分別為99．7%，99．2%，98．6%，99．2%，98．7%，99．8%，RSD為 0．5%(n＝6)，表明重復(fù)性合格。

中間精密度試驗(yàn)：取重復(fù)性試驗(yàn)配制的6份供試品溶液，改變分析日期、人員、設(shè)備，照紫外－可見(jiàn)分光光度法[2015年版《中國(guó)藥典(四部)》（通則0401）]，在242 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。結(jié)果用紫外分光光度法測(cè)定吲達(dá)帕胺片含量的中間精密度的 RSD為1．2%（n＝6）。

溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)：將對(duì)照品溶液分別于0，1，2，4，6，12 h，照紫外－可見(jiàn)分光光度法[2015年版《中國(guó)藥典(四部)》（通則0401）]，在242 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。結(jié)果對(duì)照品溶液吸光度的 RSD為0．8%（n＝6），穩(wěn)定性符合規(guī)定。

回收率試驗(yàn)：稱取吲達(dá)帕胺對(duì)照品 10．0，12．5，15．0mg各3份，精密稱定，置50m L容量瓶中，加入處方比例的空白輔料，加乙醇適量，充分振搖，使吲達(dá)帕胺溶解，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液1m L，置50m L容量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，照紫外－可見(jiàn)分光光度法[2015年版《中國(guó)藥典(四部)》（通則0401）]，在242 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度；同法測(cè)定對(duì)照品溶液，計(jì)算9份供試品溶液的含量，并計(jì)算回收率。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 吲達(dá)帕胺回收率試驗(yàn)結(jié)果(n＝9)

2．3 含量測(cè)定改進(jìn)方法分析

2015年版《中國(guó)藥典（二部）》凡例中6號(hào)篩為“100目”，粉末等級(jí)至少為“細(xì)粉”；8號(hào)篩為“150目”，粉末等級(jí)至少為最細(xì)粉。2種過(guò)篩粉末均符合吲達(dá)帕胺片含量測(cè)定項(xiàng)下描述的“研細(xì)”。

不同細(xì)粉粒度的含量比較：取本品20片（批號(hào)為17010303），精密稱定，研細(xì)，將細(xì)粉過(guò)100目篩，細(xì)粉能全部通過(guò)，精密稱取適量（約相當(dāng)于吲達(dá)帕胺5mg），置100 mL容量瓶中，加乙醇適量，充分振搖，使吲達(dá)帕胺溶解，即為A組樣品。同法配制B組樣品，將細(xì)粉過(guò)150目篩，細(xì)粉不能完全通過(guò)，精密稱取過(guò) 150目的粉末適量（約相當(dāng)于吲達(dá)帕胺5mg），同法配制，即為B組樣品。將兩組樣品置相同室溫條件下，分別于20min，1 h，3 h時(shí)用紫外分光光度法測(cè)定含量，結(jié)果見(jiàn)表2。將B組粉末繼續(xù)研細(xì)至全部能通過(guò)8號(hào)篩，再次將樣品置相同室溫條件下，分別于20 min，3 h依法測(cè)定含量，結(jié)果見(jiàn)表3。

粉末過(guò)不同篩的含量比較：取本品20片（批號(hào)為17010303），精密稱定，研細(xì)，將細(xì)粉過(guò)2號(hào)篩(24目)，即得A組樣品，同法配制B組樣品(過(guò)4號(hào)篩，65目)，C組樣品(過(guò)6號(hào)篩，100目)，精密稱取3組樣品適量（約相當(dāng)于吲達(dá)帕胺5 mg），置100 m L容量瓶中，加乙醇適量，充分振搖，使吲達(dá)帕胺溶解，置相同室溫條件下，分別于20min，3 h時(shí)依法測(cè)定含量，結(jié)果見(jiàn)表4。

不同溶解方法的含量比較：取本品20片（批號(hào)為17010303），精密稱定，研細(xì)，將細(xì)粉過(guò)100目篩后精密稱取適量（約相當(dāng)于吲達(dá)帕胺5mg），置100mL容量瓶中，加乙醇適量，分別在不同條件下溶解樣品，依法測(cè)定含量，結(jié)果見(jiàn)表5。

表2 相同研磨條件不同放置時(shí)間的含量測(cè)定結(jié)果(%)

表3 不同細(xì)粉粒度的含量測(cè)定結(jié)果(%)

表4 粉末過(guò)不同型號(hào)篩的含量測(cè)定結(jié)果(%)

表5 不同溶解方法的含量測(cè)定結(jié)果(%)

3 討論

本試驗(yàn)中設(shè)置了2個(gè)影響因素，旨在考察細(xì)粉粒度和樣品溶解時(shí)間對(duì)吲達(dá)帕胺片含量的影響。吲達(dá)帕胺片研細(xì)后，只有部分粉末（約72%）過(guò)150目篩，含量明顯低于過(guò)100目篩粉末的含量，因此可初步判斷未過(guò)150目篩的粉末中吲達(dá)帕胺的含量高于通過(guò)150目篩粉末吲達(dá)帕胺的含量，且吲達(dá)帕胺輔料比主藥更易通過(guò)篩網(wǎng)。

將粉末研細(xì)，全部過(guò)150目篩，比較過(guò)100目篩和150目篩粉末的含量。結(jié)果表明，在相同溶解時(shí)間下，通過(guò)100目篩和150目篩粉末的含量無(wú)明顯差異，建議將粉末研細(xì)后全部通過(guò)100目篩。

同一篩網(wǎng)粒度下的粉末，室溫放置3 h的含量略高于20min的含量，但將樣品溶解3 h后進(jìn)行檢測(cè)，操作時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，建議采取其他方式如適當(dāng)提高溶解溫度，從而促使吲達(dá)帕胺快速溶解，縮短試驗(yàn)時(shí)間。

過(guò)24目篩和65目篩粉末的含量在同一放置時(shí)間下，含量無(wú)明顯差異（小于1%），但比過(guò)100目篩的含量低，故需將粉末研細(xì)后過(guò)100目篩。

由于吲達(dá)帕胺在乙醇中溶解，但在室溫下溶解速率較慢，稍微提高溫度后溶解速率明顯加快。故本試驗(yàn)中將樣品研細(xì)后，全部通過(guò)100目篩，分別進(jìn)行3組試驗(yàn)。結(jié)果表明，45℃水浴20min與1 h后含量無(wú)明顯差異，但略高于室溫放置3 h的含量，建議將樣品溶解條件定為“45℃水浴20min”。

綜合以上試驗(yàn)，建議在吲達(dá)帕胺片的含量測(cè)定中，將樣品的處理方式修訂為：“取本品20片，精密稱定，研細(xì)，細(xì)粉應(yīng)全部過(guò)100目篩，將細(xì)粉攪拌均勻，精密稱取適量（約相當(dāng)于吲達(dá)帕胺5mg），置100m L容量瓶中，加乙醇適量，微溫（40～50℃）20min，使吲達(dá)帕胺充分溶解?！?/p>

2015年版《中國(guó)藥典（二部）》在測(cè)定吲達(dá)帕胺片劑的含量時(shí)采用的是將吲達(dá)帕胺片研細(xì)后加乙醇振搖溶解，測(cè)得的含量偏低?，F(xiàn)將該方法的關(guān)鍵分析點(diǎn)進(jìn)行控制，研細(xì)后的吲達(dá)帕胺片細(xì)粉應(yīng)全部過(guò)100目篩，加乙醇適量，于45℃水浴加熱溶解，與普通研細(xì)后加乙醇振搖溶解相比，含量能得到明顯提高。因此，本試驗(yàn)中找出了分析方法的關(guān)鍵控制點(diǎn)，能夠確保在不同的實(shí)驗(yàn)室、不同型號(hào)的儀器及不同的分析人員等影響因素下，始終能準(zhǔn)確地檢測(cè)出吲達(dá)帕胺片的含量。

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Im provem ent M ethod for Content Determ ination of Indapam ide Tablets

Wang Hongping，Zheng Tingting，Wang Zhi，Zeng Fanming
（Grand Pharma＜China＞Co．，Ltd．，Wuhan，Hubei，China 430040）

R927.2；R972+.4

A

1006-4931(2017)18-0011-04

10．3969／j．issn．1006－4931．2017．18．004

2017－04－10)

王洪萍（1977－），女，大學(xué)本科，工程師、執(zhí)業(yè)藥師，主要從事藥物制劑的研究和開(kāi)發(fā)工作，（電話）027－83382760（電子信箱）362600512＠qq．com。