趙自通，陳復(fù)生，張麗芬，郝莉花，李宇健

（河南工業(yè)大學(xué)糧油食品學(xué)院，河南鄭州450001）

酶制劑在植物油脂與蛋白質(zhì)提取過程中應(yīng)用的研究進(jìn)展

趙自通，陳復(fù)生*，張麗芬，郝莉花，李宇健

（河南工業(yè)大學(xué)糧油食品學(xué)院，河南鄭州450001）

酶制劑在植物油脂和蛋白質(zhì)的提取中發(fā)揮著越來越重要的作用，由于酶作用于底物時(shí)的特異性，選擇合適的酶制劑尤為重要。根據(jù)目前酶制劑在植物油脂和蛋白提取方面的研究，總結(jié)多種酶制劑在不同原料中的作用效果，為合理選擇酶制劑提供依據(jù)。

酶制劑；油脂；蛋白質(zhì)；應(yīng)用

Abstract：Enzyme preparation plays a key role in the extraction of vegetable oils and protein.For the specificity of the enzyme，it is really important to select suitable enzyme preparation.Based on the current study of enzyme preparation in vegetable oil and protein extraction，the effect of various enzymes in different raw materials were summarized，and the basis for reasonable selection of enzyme preparation was provided.

Key words：enzyme preparation；vegetable oil；protein；application

優(yōu)質(zhì)的植物油脂和蛋白質(zhì)已經(jīng)成為人們生活中重要的食物來源，植物蛋白中含有多種人體必需的氨基酸，而植物油脂中也含有人體所必需的一些不飽和脂肪酸如亞油酸、亞麻酸、油酸等。它們不僅能給人們提供充足的營養(yǎng)，而且植物油相比于動物脂其膽固醇和飽和脂肪酸的含量更低，對人們的健康有益，因此越來越受歡迎[1]。傳統(tǒng)的油脂提取方法有壓榨法、浸出法；但壓榨法取油的原料利用率低，浪費(fèi)大，成本高；而浸出法取油雖然油脂得率高，但有害物質(zhì)殘留高、功能性成分損失嚴(yán)重。因此傳統(tǒng)的油脂提取方法已經(jīng)不能滿足現(xiàn)代工業(yè)發(fā)展和國際競爭需求。而近些年水酶法作為一種新興的油脂和蛋白質(zhì)提取技術(shù)，由于酶的高效專一性、反應(yīng)條件溫和、提取效率高、安全、環(huán)保且可同時(shí)獲得營養(yǎng)價(jià)值較高的蛋白質(zhì)等特點(diǎn)，在植物油脂和蛋白質(zhì)的提取中有著很好的應(yīng)用前景，受到廣泛關(guān)注。根據(jù)酶制劑對植物油料油籽發(fā)生水解作用的部位不同，可將酶制劑分為油料細(xì)胞壁降解酶類、蛋白質(zhì)水解酶類、以及兩者的復(fù)合酶類等[2]。本文就不同酶制劑在植物油脂和蛋白質(zhì)提取過程中的作用原理及應(yīng)用現(xiàn)狀進(jìn)行了詳細(xì)綜述，以期為酶制劑在食品工業(yè)中的應(yīng)用提供理論指導(dǎo)。

1 細(xì)胞壁降解酶類

1.1 細(xì)胞壁降解酶類的作用原理

植物油料細(xì)胞表面都存在細(xì)胞壁，它是維持植物細(xì)胞形態(tài)和增強(qiáng)植物細(xì)胞機(jī)械強(qiáng)度的重要結(jié)構(gòu)，但在植物油脂和蛋白提取過程中，油料細(xì)胞壁阻擋了油料細(xì)胞內(nèi)油脂和蛋白質(zhì)的釋放，給油脂和蛋白的提取分離造成了困難[3]。研究發(fā)現(xiàn)用細(xì)胞壁降解酶類可以有效的降解細(xì)胞壁，將油料細(xì)胞內(nèi)的油脂和蛋白質(zhì)釋放出來[4]。根據(jù)目前的研究，在植物油脂和蛋白質(zhì)提取過程中常用細(xì)胞壁降解酶有纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶等。

從微觀上看細(xì)胞壁是一個(gè)復(fù)雜的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，各種植物的細(xì)胞壁雖有諸多差異，但其基本結(jié)構(gòu)相似。在植物細(xì)胞壁中，半纖維素包裹纖維素形成微纖絲，果膠將微纖絲粘連構(gòu)成細(xì)胞壁的網(wǎng)狀構(gòu)架，木質(zhì)素及其他物質(zhì)填充在細(xì)胞壁間隙中[5]。根據(jù)細(xì)胞壁的微觀結(jié)構(gòu)可知，纖維素酶和果膠酶在細(xì)胞壁降解中起到了關(guān)鍵作用。纖維素酶作用于油料細(xì)胞壁中纖維素，斷開β-1，4-糖苷鍵將纖維素分解為葡萄糖[6]；而果膠酶則能將果膠物質(zhì)分解，纖維素和果膠等物質(zhì)的分解使油料細(xì)胞壁的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)破壞，進(jìn)而在導(dǎo)致細(xì)胞壁破碎，細(xì)胞內(nèi)油脂和蛋白質(zhì)被釋放出來。酶破碎細(xì)胞壁的過程如圖1所示[2]，在機(jī)械粉碎的基礎(chǔ)上再對油料細(xì)胞酶解，可以使油料細(xì)胞破碎更加徹底。

圖1 酶對油料細(xì)胞的降解Fig.1 Cell degradation of oil seeds by enzymes

1.2 細(xì)胞壁降解酶類在植物油脂和蛋白質(zhì)提取中的應(yīng)用研究

1.2.1 細(xì)胞壁降解酶類對植物油脂和蛋白提取率的影響研究

有研究發(fā)現(xiàn)利用細(xì)胞壁破壞酶可顯著提高一些植物油料的油脂和蛋白得率。Bisht等[7]在野生杏仁粉中加入果膠酶，纖維素酶或者纖維素酶和果膠酶混合物來提高野生杏仁油的油脂得率；結(jié)果表明單一酶制劑與復(fù)合酶制劑在合適的濃度下，都可以提高油脂得率，纖維素酶和果膠酶復(fù)配可以使油脂得率提高14.22%。Szyd?owska-Czerniak 等[8]發(fā)現(xiàn)用果膠酶和纖維素酶提取菜籽油的得率都高于傳統(tǒng)壓榨法取油，而且相比之下果膠酶（16.5%）的作用效果比纖維素更好（15.5%）。這與菜籽中果膠的含量較高有很大關(guān)系。同樣的，zhang等[9]也發(fā)現(xiàn)使用果膠酶提取菜籽油的效果比用其它酶類好。Li等[10]做了超聲波協(xié)同水酶法提取文冠果油的研究，利用纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶在最適的試驗(yàn)條件下油脂得率為55.8%。單一酶制劑的效率如下：果膠酶＞纖維素酶＞半纖維素酶。而Jiao等用相同的酶（纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶）進(jìn)行微波協(xié)助水酶法提取南瓜籽油的研究，在最適條件下油脂回收率為64.17%[11]。耿晶娟等[12]用纖維素酶（Celluclast 1.5L）進(jìn)行酶法輔助冷榨和熱榨火麻籽油，得到的油脂提取率分別為67.1%和68.3%。

1.2.2 細(xì)胞壁降解酶類對植物油脂和蛋白質(zhì)品質(zhì)的影響研究

利用細(xì)胞壁降解酶提取植物油脂和蛋白質(zhì)，在一定程度上可以提高所得到油脂的品質(zhì)。Sharma等[13]在研究酶法輔助提取橄欖油時(shí)發(fā)現(xiàn)用果膠酶和纖維素酶不僅能夠提高油脂得率，而且使用酶制劑后可以顯著提高橄欖油的澄清度和總酚含量。同樣Chih等[14]也發(fā)現(xiàn)復(fù)合纖維素酶（Viscozymes）提取橄欖油可以增加了橄欖油的總酚含量和抗自由基活性。在水酶法提取菜籽油的研究中，Szyd?owska-Czerniak等[8]發(fā)現(xiàn)用纖維素酶和果膠酶提取的菜籽油生育酚含量最高，抗氧化能力較好。利用水酶法提取絲瓜籽油發(fā)現(xiàn)，加入纖維素酶在50℃條件下酶解6.5 h后，絲瓜籽提油率可達(dá)到29.6%。用水酶法提取的絲瓜籽油的各項(xiàng)理化性質(zhì)均符合國家標(biāo)準(zhǔn)，且比傳統(tǒng)工藝提取的絲瓜籽油品質(zhì)更好[15]。王喜波等[16]研究了不同方法提取牡丹籽油的品質(zhì)差異，發(fā)現(xiàn)超聲輔助堿性蛋白酶提取的牡丹籽油不飽和脂肪酸含量較高，所得到的油脂外觀品質(zhì)和市售牡丹籽油品質(zhì)相近。細(xì)胞壁降解酶對植物油和蛋白的提取具有重大意義，不僅能夠增加油脂和蛋白得率、提高油脂品質(zhì)，而且可廣泛應(yīng)用在各種植物油料中。

2 蛋白質(zhì)水解酶類

2.1 蛋白質(zhì)水解酶的作用原理

植物油料的細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)中都存在有蛋白質(zhì)，研究發(fā)現(xiàn)在植物油脂和蛋白質(zhì)提取過程中使用蛋白水解酶可以有效提高油脂和蛋白的得率。其作用原理可以分為以下幾個(gè)方面：第一，蛋白酶能夠作用于植物細(xì)胞壁中的結(jié)構(gòu)蛋白，使嵌在細(xì)胞壁網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中的蛋白水解，降低了細(xì)胞壁的阻礙能力，因此油料細(xì)胞內(nèi)的油脂和蛋白更容易被釋放出來[17]。用堿性蛋白酶處理前（A）和處理后（B）油茶籽細(xì)胞結(jié)構(gòu)變化如圖2所示，可以看出蛋白酶處理后細(xì)胞團(tuán)（圖2B）已成“鏤空”形態(tài)，更有利于油脂和蛋白的釋放[18]。第二，蛋白酶作用于油料細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)中的蛋白質(zhì)促使細(xì)胞膜的破碎和細(xì)胞質(zhì)內(nèi)部結(jié)構(gòu)疏松，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)容物流出，油脂和蛋白質(zhì)被釋放出來[2]。第三，蛋白酶能作用于植物油料細(xì)胞中的油脂體和蛋白體。植物油料中油脂和蛋白大部分都儲藏在油脂體和蛋白體中，油脂體是植物油脂儲存的重要器官。油料種子中幾乎都有油脂體，它是植物油脂的主要儲存場所[19-20]。油脂體是一個(gè)直徑約有1 μm的微粒，主要是由甘三酯、磷脂和蛋白組成[21]；結(jié)構(gòu)如圖3所示，油脂體的表面被一層磷脂包裹，蛋白質(zhì)鑲嵌在油脂體的表面，甘三酯包裹在油脂體內(nèi)部。油脂體表面的蛋白對油脂體的穩(wěn)定起到了重要作用，蛋白酶可以將油脂體表面的蛋白質(zhì)分解，破壞油脂體結(jié)構(gòu)從而包裹在油脂體內(nèi)的油脂釋放出來[22]。

圖2 Alcalase堿性蛋白酶處理前后油茶籽細(xì)胞結(jié)構(gòu)掃描電鏡圖Fig.2 SEM observation on cell structure of oil-tea Camellia oleifera seed hydrolyzed by alcalase

圖3 油脂體結(jié)構(gòu)示意圖Fig.3 Schematic diagram of oil body structure

2.2 蛋白質(zhì)水解酶類在植物油脂和蛋白質(zhì)提取中的應(yīng)用研究

2.2.1 蛋白質(zhì)水解酶應(yīng)用于植物油脂和蛋白的提取

蛋白酶制劑在糧油食品行業(yè)中的應(yīng)用非常廣泛，同時(shí)越來越多蛋白酶制劑被用于蛋白質(zhì)和油脂的提取中，其中堿性蛋白酶（Alcalase 2.4L）在研究中的應(yīng)用較多，Alcalase 2.4L是一種來源于枯草桿菌的食品級堿性內(nèi)切蛋白酶，由于其對底物作用范圍廣，水解蛋白質(zhì)程度較為徹底，已被廣泛應(yīng)用于植物或動物蛋白的水解中[23]。章紹兵等[24]的研究表明選取Alcalase 2.4L對烘烤后的花生進(jìn)行水酶法提取在最適條件下油脂和蛋白質(zhì)得率分別為75.8%和76.7%。而Wang等[25]用Alcalase 2.4L在pH值為8.50，溫度為60℃，酶濃度為1.5%條件下處理8 h后，花生蛋白水解產(chǎn)物產(chǎn)率為82.5%，油脂得率為92.2%。得到的油脂與溶劑浸出法相比游離脂肪酸的含量更低，且降低了食用油的精煉成本。同時(shí)花生分離蛋白水解物表現(xiàn)出良好的自由基清除能力和抑制血管緊張素I轉(zhuǎn)換酶活性的作用。

另外還有許多其他蛋白酶制劑應(yīng)用于植物油和蛋白的提取中，王瑛瑤等[25]研究了不同的蛋白酶制劑對花生水酶法同時(shí)提取油脂和蛋白質(zhì)的影響。用中性蛋白酶（As1.398）得到的游離油和蛋白質(zhì)水解物分別為85.9%和75.2%；中性蛋白酶（Protease-N）的油脂和蛋白得率為86.9%和78.1%；木瓜蛋白酶（Papain）的油脂和蛋白得率分別為84.5%和72.4%。Dotsenko等[26]利用水酶法提取白三葉草和黑麥草中的蛋白質(zhì)，在pH值為8時(shí)，加入蛋白酶（Savinase 16.0L）蛋白質(zhì)得率達(dá)到80%。而且連續(xù)的蛋白酶處理可以使蛋白質(zhì)得率達(dá)到95%。綜上可知蛋白酶能夠顯著提高植物油和蛋白的得率，滿足當(dāng)下高效、綠色的利用植物油料進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)的要求，有非常好的應(yīng)用前景。

2.2.2 蛋白水解酶類應(yīng)用于乳化液的破乳

在利用酶制劑提取油脂和蛋白質(zhì)時(shí)往往形成數(shù)量可觀的乳狀液，不僅降低了油脂和蛋白得率，而且限制了其在油脂提取工業(yè)中的廣泛應(yīng)用。如何有效地破乳，提高蛋白質(zhì)和油脂的得率，成為水酶法技術(shù)研究的重點(diǎn)之一。研究發(fā)現(xiàn)蛋白酶可以對乳狀液進(jìn)行破乳。其破乳的實(shí)質(zhì)是乳化液中的蛋白（包含界面蛋白和非界面蛋白）被水解之后其分子量減小，不能維持原有界面膜的強(qiáng)度所致[23]。酶法破乳是一種新型的生物破乳方法，有學(xué)者研究了該方法對花生油的破乳效果。其中Li等[27]比較了幾種酶制劑釋放油脂的效率；試驗(yàn)表明木瓜蛋白酶（Papain）和風(fēng)味蛋白酶（Protex 50FP）在酶濃度為1.5%時(shí)都能很好的對花生乳化液進(jìn)行破乳，但是在酶濃度為0.01%時(shí)Protex 50FP的依然能夠?qū)?2.8%左右的游離油脂釋放出來，而Papain的破乳率只能達(dá)到55.2%。而Jiang等[28]用中性蛋白酶（As1398）來水解水酶法提取花生油和蛋白后的殘余物和乳液，可以使總游離油和蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物分別提高到91.98%和88.21%。章紹兵等[23]用堿性蛋白酶2709對花生乳狀液進(jìn)行破乳，結(jié)果表明乳狀液的破乳率均可達(dá)到或超過95%。在大豆油的提取中，Chabrand等[29]用堿性蛋白酶（Protex 6L）對乳狀液進(jìn)行破乳，破乳率為72%；用Protex 6L兩步酶解的方法，總破乳率達(dá)到95%。而Jung等[30]用Protex 6L蛋白酶提取大豆油，再采用Protex 6L對乳狀液進(jìn)行破乳，破乳率達(dá)到100%。

除了蛋白質(zhì)以外磷脂也是影響乳狀液穩(wěn)定性的關(guān)鍵因素；因此磷脂酶也可以用于乳化液的破乳[31]。Chabrand 等[29]用磷脂酶 A1（G-zyme）對水酶法提取大豆油過程中產(chǎn)生的乳狀液進(jìn)行破乳，破乳率幾乎達(dá)到100%。在此之前Lamsal等也對大豆油提取過程中形成的乳狀液進(jìn)行了磷脂酶破乳的研究，結(jié)果表明磷脂酶通過切斷磷酸甘油酯位上的sn-1、sn-2、sn-3酯鍵，極大地破壞了乳狀液的穩(wěn)定性[32]。Wu等[33]選擇磷脂酶A（phospholipase A2）和蛋白酶（Protex 51FP）探究酶濃度對大豆油破乳作用的影響。研究發(fā)現(xiàn)在加酶量為2%時(shí)，兩種酶都能夠達(dá)到破乳效果。在酶濃度小于2%時(shí)蛋白酶比磷脂酶釋放出更多的游離油。在酶濃度為0.2%時(shí)蛋白酶和磷脂酶的游離油得率分別為88%和48%。Li等[27]用磷脂酶 A1（LecitaseRUltra）對水酶法產(chǎn)生的花生乳狀液進(jìn)行破乳，結(jié)果表明花生油得率隨著酶濃度的增加而升高，在酶濃度為1.5%時(shí)破乳率為56.7%。

3 復(fù)合酶類

3.1 復(fù)合酶類對植物蛋白和油脂得率的影響

由于植物油料細(xì)胞的成分和組織結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜，在提取植物油和蛋白時(shí)利用單一的酶制劑有時(shí)具有一定的局限性并不能取得理想的效果。而利用復(fù)合酶制劑時(shí)酶制劑之間可能存在協(xié)同效應(yīng)，能夠在一定程度上提高酶的作用效果，從而提高油脂和蛋白質(zhì)得率。所以在研究中有些學(xué)者將細(xì)胞壁酶和蛋白水解酶混合使用來輔助提取植物油和蛋白。Passos等[34-35]研究了使用復(fù)合酶（纖維素酶、木聚糖酶、果膠酶和蛋白酶）預(yù)處理輔助提取葡萄籽油，預(yù)處理后用超臨界二氧化碳萃取和溶劑浸出油脂得率分別為16.5%和13.7%。Yusoff等[36]利用中性蛋白酶（Neutrase 0.8L）和纖維素酶（Celluclast 1.5L）來提取辣木籽中的辣木油，在pH4.5，料液比為 8∶1（質(zhì)量比），震蕩速率為 300 r/min，理論上油脂得率可以達(dá)到72.49%。Gai等[37-38]利用混合酶（纖維素酶、果膠酶、蛋白酶）提取連翹籽和板藍(lán)根籽中的油脂，油脂得率分別為21.62%和57.29%。Hou等[39]用水酶法提取芝麻油結(jié)果表明當(dāng)使用混合酶（木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、纖維素酶）芝麻油得率可以達(dá)到87.58%。

但是并不是所有的復(fù)合酶都能顯著提高植物油脂和蛋白質(zhì)的提取效率。羅明亮等研究了細(xì)胞壁破壞酶、蛋白酶、淀粉酶單因素及其復(fù)配酶對提取蓖麻籽油提取率的影響，發(fā)現(xiàn)中性蛋白酶的提油效果最好，其總的油脂提取率達(dá)到了91.17%，遠(yuǎn)大于其它各種復(fù)配酶最高得率（86.93%）。只用中性蛋白酶的提取率高的原因可能是：第一，蓖麻剝殼后的細(xì)胞組織容易破碎，細(xì)胞壁中纖維素、半纖維素含量較低，有利于提高油脂提取率；第二，蛋白酶通過分解蛋白質(zhì)達(dá)到破乳效果，從而提高清油得率[40]。而有些植物油料，使用復(fù)配酶或者單一酶制劑并無明顯差別，例如R ovaris等[41]選用堿性蛋白酶、戊聚糖復(fù)合酶與堿性蛋白酶、纖維素復(fù)合酶分別對大豆進(jìn)行水酶法提油，發(fā)現(xiàn)油脂得率無明顯差異。同樣的在酶法輔助提取大蒜油時(shí)加入戊聚糖復(fù)合酶與使用單一的蛋白酶、果膠酶、纖維素酶相比油脂的得率沒有顯著差異[42]。

3.2 含淀粉酶的復(fù)合酶類對植物油脂和蛋白得率的影響

研究發(fā)現(xiàn)淀粉水解酶也可以輔助植物油脂和蛋白質(zhì)提取。但淀粉酶在植物油和蛋白的提取中單獨(dú)應(yīng)用不多，大多是和其他酶制劑混合使用來提高油脂和蛋白的得率。林莉等[43]研究表明，使用α-淀粉酶進(jìn)行水酶法提取薏米糠油得率為30.47%。但是用單一酶進(jìn)行水酶法提油，游離油得率是有限的，為了提高游離油得率，單一酶之間的相互作用是必不可少的。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果使用復(fù)合酶后游離油得率有顯著提高，其中α-淀粉酶與中性蛋白酶復(fù)合使用（1∶1），其游離油得率最高可接近60%。Fang等[44]研究了水酶法提取山茶籽油，結(jié)果顯示使用淀粉酶進(jìn)行提取油脂得率為31.92%。油茶籽中的淀粉含量為16.85%，在油茶籽中使用淀粉酶后懸浮液變稠，故相比于其他種類的酶而言，使用淀粉酶提取后的油茶籽更難通過離心分離出油茶籽油。羅明亮等[40]研究了纖維素酶、果膠酶、淀粉酶、中性蛋白酶和半纖維素酶單因素及其復(fù)配酶對提取蓖麻籽總油和清油提取率的影響。結(jié)果表明淀粉酶效果最差，提取率分別是64.06%和21.31%。

雖然復(fù)合酶在作用于油料時(shí)可能具有協(xié)同作用，但在油脂提取中使用單一酶或復(fù)合酶沒有統(tǒng)一的定論，酶的選擇應(yīng)該取決于油脂和蛋白在細(xì)胞內(nèi)的結(jié)構(gòu)形態(tài)及其理化性質(zhì)。為了選擇合適的酶制劑，我們應(yīng)該從植物細(xì)胞的微觀結(jié)構(gòu)入手，研究酶制劑輔助下油脂和蛋白質(zhì)釋放的分子機(jī)制，進(jìn)而找到針對特定油料的最適酶制劑。

4 結(jié)語

隨著商業(yè)化酶制劑的種類越來越多，酶制劑在實(shí)際中的應(yīng)用越來越廣泛。利用酶制劑可以同時(shí)獲得植物油脂和優(yōu)質(zhì)植物蛋白質(zhì)，具有良好的工業(yè)應(yīng)用前景；但由于酶作用于油料時(shí)具有特異性和各種植物油料在組成成分和結(jié)構(gòu)上的差異，降解不同的植物油料需要酶的種類是不同的。因此，找到最合適的酶制劑或者酶制劑組合對植物油和蛋白的提取尤為重要。但目前的研究對于酶制劑的篩選存在著一定的盲目性，很少有人根據(jù)油料細(xì)胞的微觀結(jié)構(gòu)和酶對植物油料的作用機(jī)理來選擇最適酶種類。所以對各種油料細(xì)胞結(jié)構(gòu)的細(xì)化研究是今后需要重點(diǎn)探索的一個(gè)方面。相信隨著科技的發(fā)展酶制劑在植物蛋白和油脂的提取中將會發(fā)揮越來越重要的作用。

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Advances in Application of Enzyme Preparations in the Extraction of Vegetable Oils and Protein

ZHAO Zi-tong，CHEN Fu-sheng*，ZHANG Li-fen，HAO Li-hua，LI Yu-jian
（College of Food Science and Technology，Henan University of Technology，Zhengzhou 450001，Henan，China）

2017-01-18

10.3969/j.issn.1005-6521.2017.19.045

國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（21376064、21676073）；國家“863”計(jì)劃（2013AA102208）；中國博士后科學(xué)基金（2015M582184）

趙自通（1994—），男（漢），在讀碩士，主要從事食品資源開發(fā)與利用。

*通信作者：陳復(fù)生，男，教授，博士生導(dǎo)師。