孜維地古麗·買買提，馬 芹

(新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院兒科，新疆維吾爾自治區(qū) 烏魯木齊 830001)

小兒哮喘中淋巴細(xì)胞亞群及CD4+的表達(dá)及意義

孜維地古麗·買買提，馬 芹

(新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院兒科，新疆維吾爾自治區(qū) 烏魯木齊 830001)

目的探討小兒哮喘中淋巴細(xì)胞亞群及CD4+細(xì)胞的表達(dá)及意義。方法選取新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院2015年12月至2016年12月收治的103例哮喘患兒為實驗組，另選取同期在院健康體檢兒童103例為對照組。對兩組研究對象的淋巴細(xì)胞亞群，外周血Treg，外周血TH1、TH17和TH2進(jìn)行比較分析。結(jié)果實驗組外周血Treg占CD4+細(xì)胞比例顯著高于對照組(χ2=2.021，P<0.05)，外周血TH1在兩組中占CD4+細(xì)胞比例差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，實驗組外周血TH2占CD4+細(xì)胞比例顯著高于對照組(χ2=7.179，P<0.05)，實驗組外周血TH17占CD4+細(xì)胞比例顯著高于對照組(χ2=9.664，P<0.05)，實驗組CD8+、CD4+所占比例均顯著低于對照組，CD4+/CD8+所占比例顯著高于對照組(χ2值分別為10.253、14.145、16.327，均P<0.05)。結(jié)論淋巴細(xì)胞亞群及CD4+細(xì)胞在小兒哮喘的發(fā)病中能夠作為診斷依據(jù)，對哮喘的診斷和治療等均具有重要的臨床意義。

淋巴細(xì)胞亞群；CD4+細(xì)胞；小兒哮喘；表達(dá)及意義

小兒哮喘的發(fā)病率呈逐年上升發(fā)展趨勢。國外研究資料顯示，0～3歲幼兒的發(fā)病率高達(dá)20.11%[1]。小兒哮喘是小兒呼吸系統(tǒng)中常見的疾病，哮喘的發(fā)生和發(fā)展均受到免疫系統(tǒng)的影響。隨著人們對淋巴細(xì)胞亞群及CD4+細(xì)胞研究的深入，人們逐漸將CD4+細(xì)胞分為外周血TH1、TH17、TH2和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)。本文綜合分析小兒哮喘中淋巴細(xì)胞亞群及CD4+細(xì)胞的表達(dá)及意義，為臨床治療哮喘患兒提供參考依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取新疆維吾爾自治區(qū)人民醫(yī)院2015年12月至2016年12月收治的103例哮喘患兒作為實驗組，另選取同期在院健康體檢兒童103例作為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡3～8歲；②在本次研究前2周內(nèi)未使用過糖皮質(zhì)激素和丙種球蛋白；③知情參與本次研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并心肺疾??；②合并腫瘤；③合并自身免疫性疾病。

實驗組中有70例男患兒(占67.96%)，33例女患兒(占32.04%)；平均年齡為(5.02±1.15)歲，平均體重為(22.02±5.18)kg。對照組中有68例男患兒(占66.02%)，35例女患兒(占33.98%)；平均年齡為(5.05±1.13)歲，平均體重為(22.05±5.13)kg。兩組研究對象的平均年齡、平均體重及性別比例比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)。

1.2方法

1.2.1采集標(biāo)本

對哮喘患兒入院時使用肝素鈉抗凝負(fù)壓真空方法取清晨空腹靜脈血3mL，在2小時內(nèi)檢測。對照組患者采用微量元素檢測余血。

1.2.2檢測細(xì)胞因子

對外周血Treg、外周血TH1、外周血TH17、外周血TH2細(xì)胞因子進(jìn)行檢測。

按照順序分別在流式管中加入5μL丙二醇甲醚醋酸酯(PMA)、1μL離子霉素、500μL外周全血，攪拌均勻之后，置入37°C的培養(yǎng)箱中。再標(biāo)記好抗體管和對照管，固定細(xì)胞打孔：將200μL外周血加入試管中，避光保存，在室溫下離心10分鐘左右后轉(zhuǎn)速處理，棄上清、再加入1mL洗滌液，混勻。標(biāo)記細(xì)胞膜內(nèi)的免疫熒光：在試管中加入5μL CD4+抗原肽段(CD4-APC)，在抗體管中加入單克隆抗體。流式細(xì)胞儀檢測：在試管中加入400μL磷酸鹽緩沖液(PBS)，混勻之后，上機檢測；T淋巴細(xì)胞亞群檢測按照四色免洗淋巴細(xì)胞亞群的分析方法進(jìn)行相應(yīng)檢測，該類系統(tǒng)則自動分析其結(jié)果。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

2結(jié)果

2.1兩組CD4+細(xì)胞水平的比較

實驗組外周血Treg占CD4+細(xì)胞比例顯著高于對照組(P<0.05)，外周血TH1在兩組中占CD4+細(xì)胞比例比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，實驗組外周血TH2占CD4+細(xì)胞比例顯著高于對照組(P<0.05)，實驗組外周血TH17占CD4+細(xì)胞比例顯著高于對照組(P<0.05)，見表1。

表1 兩組的CD4+細(xì)胞水平比較結(jié)果

2.2兩組淋巴細(xì)胞亞群水平的比較

實驗組CD8+、CD4+所占比例均顯著低于對照組，而CD4+/CD8+所占比例高于對照組，兩組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)，見表2。

表2 兩組淋巴細(xì)胞亞群水平比較結(jié)果

3討論

3.1 CD4+細(xì)胞在哮喘發(fā)生和發(fā)展過程的作用

有研究資料顯示，淋巴細(xì)胞亞群及CD4+細(xì)胞在小兒免疫系統(tǒng)中起到相關(guān)作用，其中外周血TH1和外周血TH2免疫反應(yīng)可能產(chǎn)生保護(hù)作用[2-3]。

哮喘本身是由多種細(xì)胞介導(dǎo)的慢性氣道性反應(yīng)炎癥，CD4+細(xì)胞在哮喘的發(fā)生和發(fā)展過程中起著重要作用[4]。CD4+淋巴細(xì)胞具有免疫調(diào)節(jié)作用，能夠積極參與機體的免疫平衡中，具有以下兩個方面的特征：其一，免疫無能性；其二，免疫抑制性[5-6]。在人類健康個體的外周循環(huán)血液中，CD4+淋巴細(xì)胞占4.2%～10.2%。雖然CD4+淋巴細(xì)胞在體內(nèi)的量比較少，但是在免疫性疾病中和過敏性疾病中發(fā)揮著重要的價值和作用[7]。

3.2 CD4+細(xì)胞及淋巴細(xì)胞亞群在哮喘患兒中的臨床意義

本研究結(jié)果顯示，實驗組患兒外周血Treg、TH2、TH17占CD4+細(xì)胞比例均顯著高于對照組(均P<0.05)。TH17細(xì)胞在病毒和真菌的病原體感染中發(fā)揮著不同的調(diào)節(jié)作用。有研究資料表明TH17與炎癥早期發(fā)揮的啟動作用較為顯著[8]。本資料實驗組TH17水平顯著高于對照組，說明TH17細(xì)胞的應(yīng)答對哮喘的氣道高反應(yīng)性起著主導(dǎo)作用。對于有家族過敏史的患兒而言，外周血Treg、CD4+等相比起正常人群更高。

本資料顯示實驗組CD8+、CD4+所占比例均顯著低于對照組(均P<0.05)，實驗組CD4+/CD8+所占比例顯著高于對照組(P<0.05)。CD4+的主要作用是抑制細(xì)胞毒性細(xì)胞亞群，CD8+在殺死靶細(xì)胞之后能夠立即溶解，發(fā)病過程中外周靜脈血含量表現(xiàn)不夠平穩(wěn)。本文研究結(jié)果顯示CD4+/CD8+所占比例高于對照組，提示哮喘患兒的淋巴細(xì)胞抑制作用非常顯著，最終能夠抑制其免疫力。哮喘患兒存在免疫學(xué)變化，CD4+/CD8+比例相比CD4+、CD8+所占比例呈現(xiàn)顯著增高趨勢。因此，在臨床治療過程中，要積極加強對免疫功能的相關(guān)治療。

呼吸道感染是引發(fā)哮喘的重要原因之一，但是哮喘和肺炎之間的關(guān)系尚無法詳細(xì)闡明。有資料顯示，急性發(fā)作期哮喘患兒感染支原體陽性率達(dá)到17.9%[9]。在臨床中，血常規(guī)檢查能夠得到更為準(zhǔn)確的結(jié)果，人們更為重視白細(xì)胞和紅細(xì)胞等檢測指標(biāo)，但未高度重視中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞的檢測指標(biāo)[10]。然而，中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞與哮喘的發(fā)生呈顯著相關(guān)性。嗜酸性粒細(xì)胞與哮喘的發(fā)生有著密切的關(guān)系，對炎癥疾病同樣具有重要的臨床意義。因此，臨床上需要結(jié)合患者的具體病情來判斷血常規(guī)結(jié)果，再作出綜合分析與判斷，以期能夠為進(jìn)一步的診斷和治療提供依據(jù)。本文在研究中由于樣本量較少，尚存在不足之處，因此還需要進(jìn)一步深入研究。

綜上所述，淋巴細(xì)胞亞群及CD4+細(xì)胞在小兒哮喘的發(fā)病中能夠作為診斷依據(jù)，對哮喘的診斷和治療均具有重要的臨床意義。

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[2]程琳,錢龍,譚悅,等.芳香烴受體在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血CD4+ CD25+ T細(xì)胞的表達(dá)及意義[J].中華疾病控制雜志,2016,20(4):379-382.

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[專業(yè)責(zé)任編輯：侯 偉]

ExpressionandsignificanceoflymphocytesubsetsandCD4+cellsinchildrenwithasthma

Ziweidiguli·MAIMAITI, MA Qin

(DepartmentofPediatrics,XinjiangUygurAutonomousRegionPeople’sHospital,XinjiangUygurAutonomousRegionUrumqi830001,China)

ObjectiveTo investigate the expression and significance of lymphocyte subsets and CD4+ T cells in children with asthma.MethodsTotally 103 children with asthma were enrolled in experimental group from Xinjiang Uygur Autonomous Region People’s Hospital from December 2015 to December 2016, and 103 healthy subjects taking health examination in the same period were selected as control group. The lymphocyte subsets, peripheral blood Treg, peripheral blood TH1, TH17 and TH2 were analyzed and compared between two groups.ResultsThe proportion of Treg in CD4+T cells in the experimental group was significantly higher than that in the control group (χ2=2.021,P<0.05). There was no significant difference in the proportion of peripheral blood TH1 between two groups (P>0.05). The proportion of peripheral blood TH2 in CD4+T cells in the experimental group was significantly higher than that in the control group (χ2=7.179,P<0.05). In the experimental group the proportion of peripheral blood TH17 in CD4+T cells was significantly higher than that in the control group (χ2=9.664，P<0.05). The proportion of CD8+ and CD4+cells was remarkably lower in the experimental group, while the proportion of CD4+/CD8+ was significantly higher (χ2value was 10.253, 14.145 and 16.327, respectively, allP<0.05).ConclusionLymphocyte subsets and CD4 + T cells can be used as diagnostic criteria in the diagnosis of childhood asthma pathogenesis, and it has important clinical significance in the diagnosis and treatment of asthma.

lymphocyte subsets; CD4+ T cells; pediatric asthma; expression and significance

R725.6

A

1673-5293(2017)10-1221-03

2017-06-15

孜維地古麗·買買提(1973—)，女，副主任醫(yī)師，主要從事兒科臨床工作。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.10.019