黃錫璽，李萍，楊宇

胰島素樣因子3用于青少年精索靜脈曲張評估

黃錫璽，李萍，楊宇

目的：探討胰島素樣因子3（INSL-3）應(yīng)用于青少年精索靜脈曲張評估的可行性。方法：將80例青少年精索靜脈曲張患者作為陽性組，另外納入80例健康青少年志愿者作為正常對照組，對比分析兩組左側(cè)睪丸體積，睪丸萎縮指數(shù)（AI）、血清促卵泡激素（FSH）、黃體生成素（LH）、睪酮（T）、精液量、精子密度、精子活力（a+b）、正常形態(tài)精子率及INSL-3等參數(shù)，統(tǒng)計分析陽性組和對照組在INSL-3表達(dá)是否存在差異，分析INSL-3與其他檢測指標(biāo)的相關(guān)性。結(jié)果：和對照組比較，陽性組左側(cè)睪丸體積、睪丸萎縮指數(shù)顯著偏小（P＜0.05）。陽性組血清促卵泡激素（6.21±2.41）IU/L、黃體生成素（6.02±1.47）IU/L、睪酮（7.87±1.66）μg/L顯著升高；而精液量(2.86±1.19)mL、精子密度(60.77±35.97)M/mL、精子活力（a+b）(29.14±16.77)%和正常形態(tài)精子率(60.31±18.66)%明顯降低（P＜0.05）；INSL-3水平(259.6±30.7)pg/mL明顯下降（P＜0.01）；INSL-3的濃度與精子活力（a+b）和正常形態(tài)精子率顯著相關(guān)（P＜0.05）。結(jié)論：血清INSL-3水平與青少年精索靜脈曲張緊密相關(guān)，相比于常規(guī)指標(biāo)與疾病的相關(guān)性更強，有望用于青少年精索靜脈曲張的診斷和干預(yù)。

青少年；精索靜脈曲張；胰島素樣因子3；激素；診斷

精索靜脈曲張青春期發(fā)生率與成年相似[1]。男子性器官發(fā)育成熟，性激素等有關(guān)激素分泌旺盛，性功能活躍，性沖動容易激發(fā)，可成為精索靜脈曲張的誘發(fā)因素[2]。目前，主要的檢查方法包括精液分析、多普勒超聲檢查、精索內(nèi)靜脈造影[3]。在青春期促黃體生成素（luteinizing hormone，LH）的作用下，睪丸間質(zhì)干細(xì)胞增值分化為成人型Leydig細(xì)胞后胰島素樣因子3（insulin-like factor 3，INSL-3）才在血液中再次出現(xiàn)，這也使其成為男性進(jìn)入青春期最早的血清學(xué)指標(biāo)之一[4]。其后血清INSL-3的濃度不斷上升，直到18歲左右達(dá)到成人水平[5]。血液中INSL-3的濃度反映了Leydig細(xì)胞的數(shù)量和分化狀態(tài)[6]。2015年3月—2015年9月，我們對80例青少年精索靜脈曲張患者進(jìn)行了檢測，分析INSL-3應(yīng)用于青少年精索靜脈曲張診斷的可行性。

1 資料和方法

1.1 研究對象及診斷標(biāo)準(zhǔn)本組共80例，年齡15～18歲，平均（16.2±1.1）歲。均未婚育；均因體檢發(fā)現(xiàn)或陰囊墜脹、脹痛就診，經(jīng)體格檢查及彩色超聲檢查證實；均同時符合精索靜脈曲張的臨床和超聲診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]。招募80例年齡在15～18歲的健康男性志愿者，平均（16.5±1.3）歲，均未婚育。兩組人群的年齡比較無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 納入排除標(biāo)準(zhǔn)陽性組的納入標(biāo)準(zhǔn)為經(jīng)上述方法診斷為精索靜脈曲張的患者，對照組為經(jīng)體格檢查為健康的男性志愿者。兩組排除標(biāo)準(zhǔn)為：合并重度高血壓，重度心肺功能不全，重度心律失常，肝、腎、造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病，精神病患者，不能配合臨床試驗者。

1.3 血清樣本檢測采用ELISA商品試劑盒（phoenix pharmaceuticals,burlingame，CA，USA）檢測血清INSL-3（檢測范圍0.1～100 ng/mL，批內(nèi)變異系數(shù)＜10%，批間變異系數(shù)＜15%）。采用電化學(xué)免疫發(fā)光法檢測血清中的性激素含量。

1.4 精液常規(guī)檢測檢查前5 d內(nèi)不排精。精液常規(guī)檢測依據(jù)2010年WHO頒布的第五版《人類精液實驗室檢驗手冊》正常精液標(biāo)準(zhǔn)。

1.5 睪丸、陰囊檢查采用多普勒超聲?？v斷掃查以左手食、拇指適當(dāng)固定睪丸，進(jìn)行縱斷多平面掃查，以顯示睪丸、附睪頭尾部及部分精索的超聲結(jié)構(gòu)。橫斷掃查雙側(cè)，比較觀察陰囊皮膚、睪丸和附睪形態(tài)、大小、內(nèi)部回聲，觀察睪丸周圍鞘膜嗆內(nèi)有無液體及回聲有無異常。睪丸萎縮指數(shù)（AI）=（右側(cè)睪丸容積-左側(cè)睪丸容積）/右側(cè)睪丸容積×100%

1.6 統(tǒng)計學(xué)處理計量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x± s)表示，使用SPSS 17.0成組t檢驗（independent samples test）分析陽性組與對照組間指標(biāo)的差異性。P＜0.05為顯著性差異，P＜0.01為非常顯著性差異。使用Pearson相關(guān)分析分析INSL-3與左側(cè)睪丸體積，睪丸萎縮指數(shù)（AI），血清促卵泡激素（FSH），黃體生成素（LH），睪酮（T），精液量，精子密度，精子活力（a+b）和常形態(tài)精子率等參數(shù)之間的相關(guān)性。

2 結(jié)果

2.1 左側(cè)睪丸體積、睪丸萎縮指數(shù)和對照組比較，陽性組左側(cè)睪丸體積、睪丸萎縮指數(shù)明顯偏小（P＜0.05）。見表1。

2.2 血清促卵泡激素（FSH）、黃體生成素（LH）和睪酮（T）和對照組比較，陽性組FSH、LH和T水平明顯升高（P＜0.05）。如表2。

表1 兩組受試者左側(cè)睪丸體積、睪丸萎縮指數(shù)比較(±s)

表1 兩組受試者左側(cè)睪丸體積、睪丸萎縮指數(shù)比較(±s)

注：與對照組比較，aP＜0.05

組別陽性組對照組n 8080左側(cè)睪丸體積(mL) 7.45±2.95a 10.84±3.07睪丸萎縮指數(shù)(%) 2.21±0.92a -1.30±0.55

表2 兩組受試者的FSH、LH和T濃度比較(±s)

表2 兩組受試者的FSH、LH和T濃度比較(±s)

注：與對照組比較，aP＜0.05

組別陽性組對照組n 8080 FSH(IU/L) 6.21±2.41a 3.30±1.64 LH(IU/L) 6.02±1.47a 2.11±0.80 T(μg/L) 7.87±1.66a 3.98±1.11

2.3 精液分析參數(shù)和對照組比較，陽性組精液量、精子密度、精子活力（a+b）和正常形態(tài)精子率明顯降低（P＜0.05）。如表3。

2.4 胰島素樣因子3和對照組比較，陽性組胰島素樣因子3（INSL-3）水平明顯下降（P＜0.01）。如表4。

2.5 血清胰島素樣因子3（INSL-3）濃度與其他指標(biāo)的相關(guān)性根據(jù)陽性組和對照組的左側(cè)睪丸體積、睪丸萎縮指數(shù)（AI）、血清促卵泡激素（FSH）、黃體生成素（LH）、睪酮（T）、精液量、精子密度、精子活力（a+b）和常形態(tài)精子率的檢測結(jié)果，通過Pearson相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)血清INSL-3濃度與這些指標(biāo)均存在相關(guān)性（P＜0.05）。如表5。

表3 兩組受試者精液分析參數(shù)比較(±s)

表3 兩組受試者精液分析參數(shù)比較(±s)

注：與對照組比較，aP＜0.05

組別陽性組對照組n 精液量(mL) 80802.86±1.19a 3.87±1.21精子密度(M/mL) 60.77±35.97a 85.55±37.21精子活力(a+b)(%) 29.14±16.77a 41.33±17.22正常形態(tài)精子率(%) 60.31±18.66a 80.22±11.21

表4 兩組受試者INSL-3比較(±s)

表4 兩組受試者INSL-3比較(±s)

注：與對照組比較，aP＜0.01

組別陽性組對照組n 8080 INSL-3(pg/mL) 259.6±30.7a 562.3±86.5

表5 INSL-3濃度與其他指標(biāo)的相關(guān)性分析(n=80)

2.6 INSL-3、睪丸體積、精液和血清性激素與疾病的相關(guān)性精索靜脈曲張患者的INSL-3、左側(cè)睪丸體積、睪丸萎縮指數(shù)（AI）、血清促卵泡激素（FSH）、黃體生成素（LH）、睪酮（T）、精液量、精子密度、精子活力（a+b）和常形態(tài)精子率的檢測結(jié)果，通過Pearson相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)精索靜脈曲張與INSL-3強相關(guān)性（r=0.654），與其余指標(biāo)均存在正負(fù)相關(guān)性，如表6。

表6 INSL-3、睪丸體積、精液和血清性激素與精索靜脈曲張的相關(guān)性分析

3 討論

隨著男科學(xué)的發(fā)展，精索靜脈曲張與不育的關(guān)系引起了廣泛重視。然而，精索靜脈曲張引起不育的原因至今尚未明確，可能與下列因素有關(guān)：⑴陰囊溫度升高。精索靜脈曲張后，精索靜脈內(nèi)血流淤滯，可引起陰囊內(nèi)溫度升高，平均高于正常0.6℃，從而影響精子生成[8]。⑵營養(yǎng)障礙。由于靜脈血流淤滯，睪丸、附睪的血液循環(huán)受到影響，其所需的營養(yǎng)和氧氣供應(yīng)缺乏，從而影響精子發(fā)生[9]。⑶睪丸內(nèi)分泌功能障礙。陰囊內(nèi)局部溫度升高、睪丸的供血和供氧不足，必然影響睪丸曲細(xì)精管內(nèi)間質(zhì)細(xì)胞的內(nèi)分泌功能，從而干擾精子發(fā)生[10]。⑷毒素作用。由于精索靜脈與睪丸靜脈之間有豐富的側(cè)支循環(huán)，發(fā)生精索靜脈曲張后，引起血液逆流，左腎上腺及左腎靜脈血中攜帶的高濃度毒性代謝產(chǎn)物，如類固醇、兒茶酚胺、5-羥色胺及前列腺素等，在未解毒前即流入雙側(cè)睪丸，影響精子生成，造成不同程度的精子過少、形態(tài)異常、運動障礙等[11]。⑸氧自由基的破壞作用。一些研究表明，當(dāng)發(fā)生精索靜脈曲張時，睪丸組織內(nèi)氧自由基增加，脂質(zhì)過氧化作用加重，從而影響精子發(fā)生及精子功能[12]。此外，雙側(cè)睪丸的血管系統(tǒng)之間交通支豐富，一側(cè)病變同樣會導(dǎo)致對側(cè)睪丸的生精功能降低，從而影響生育功能。精索靜脈曲張長期存在，可引起睪丸萎縮，影響精子功能[13]。

青少年精索靜脈曲張的發(fā)病率與成人相當(dāng)[1]。目前青少年精索靜脈曲張評估方法主要包括體格檢查、超聲檢查和內(nèi)分泌檢查，檢測指標(biāo)包括睪丸的體積和形態(tài)、精液常規(guī)檢查、LH、FSH和陰囊溫度[14]。但內(nèi)分泌檢查中血清激素水平經(jīng)常波動，且受其他眾多因素的影響，缺少特異性和準(zhǔn)確性。INSL-3是成熟睪丸間質(zhì)細(xì)胞（Leydig細(xì)胞）特異性分泌的一種蛋白類激素。在正常男性體內(nèi)，INSL-3水平隨性腺功能成熟而升高，隨衰老后性腺功能減退而降低。因此，INSL-3可用作反映男性生殖內(nèi)分泌功能的一種新型生物標(biāo)志物[15]。血清INSL-3可以反映睪丸間質(zhì)細(xì)胞的功能狀態(tài)，對于性腺功能減退的患者，血清INSL-3濃度出現(xiàn)明顯的下降[14]。該因子用于診斷性腺功能減退至少有兩個明顯優(yōu)勢，一是不會受到一些常見因素的干擾（如性激素結(jié)合球蛋白濃度波動、煙酒、糖尿病等），二是與血清性激素有很強的相關(guān)性[14]。目前認(rèn)為，INSL-3可作為一種新型的青春期睪丸功能和分化的標(biāo)記物。

本研究發(fā)現(xiàn)，血清INSL-3水平在健康青少年和青少年精索靜脈曲張患者中存在顯著性差異（P＜0.01），通過分析發(fā)現(xiàn)，血清INSL-3水平與現(xiàn)有的常規(guī)檢測指標(biāo)（精液量、精子密度、精子活力、常形態(tài)精子率）之間均存在相關(guān)性。而且用于診斷青少年精索靜脈曲張的相關(guān)性高于體格檢查（P＜0.05）、超聲檢查（左側(cè)睪丸體積，睪丸萎縮指數(shù)）（P＜0.05）和內(nèi)分泌檢查（FSH、LH、睪酮T）（P＜0.05）。因此，血清INSL-3水平作為青少年精索靜脈曲張的診斷指標(biāo)要優(yōu)于現(xiàn)有的血清學(xué)指標(biāo)。

檢測青少年精索靜脈曲張患者血清INSL-3水平，較正常人群水平低。INSL-3的檢測較目前現(xiàn)有的指標(biāo)如睪丸體積測量和血清性激素檢測等與疾病的相關(guān)性更強，為青少年精索靜脈曲張的治療指證提供新的標(biāo)準(zhǔn)，從而提高患者遠(yuǎn)期的生育能力，減少全社會醫(yī)療成本支出，帶來顯著的經(jīng)濟(jì)及社會效益。

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Feasibility Study of Insulin Like Factor 3 in Evaluation of Adolescent Juvenile Varicocele

HUANG Xi-xi,LI Ping,YANG Yu Department of Urinary Surgery,The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical Uni?versity,Wenzhou(32500),China

ObjectiveTo study the feasibility of insulin like factor 3(INSL-3)in evaluation of adolescent juvenile varicocele.MethodsEighty cases of ado?lescent varicocele patients were admitted to positive group,while 80 healthy young volunteers were admit?ted to normal control group.The left testicular volume,testicular atrophy index(AI),serum follicle stimulating hormone(FSH),luteinizing hormone(LH),testosterone(T),semen volume,sperm density,sperm motility(a+b), normal sperm morphology and INSL-3 were compared between two groups.The difference of INSL-3 expression between two groups was statistically analyzed.The correlation between INSL-3 and other indexes was analyzed.ResultsCompared with the control group,patients in positive group had smaller left testicular volume and tes?ticular atrophy index.For positive group,serum follicle stimulating hormone(6.21±2.41)IU/L,luteinizing hor?mone(6.02±1.47)IU/L and testosterone(7.87±1.66)μg/L increased significantly,but semen volume(2.86±1.19) mL,sperm density(60.77±35.97)M/mL,sperm motility(a+b)(29.14±16.77)%and the normal form of sperm (60.31±18.66)%were significantly decreased(P＜0.05).INSL-3 levels(259.6±30.7)pg/mL were significantly decreased(P＜0.01).The concentration of INSL-3 correlated with sperm motility(a+b)and normal morphologi?cal sperm rate.ConclusionSerum INSL-3 levels are closely related to juvenile varicocele,and can be used for the diagnosis and intervention of juvenile varicocele.

Adolescence;varicocele;insulin like factor 3;hormone;diagnosis

R697+.24

A

1007-6948(2017)05-0502-04

10.3969/j.issn.1007-6948.2017.05.011

溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院泌尿外科（溫州325000）

楊宇,E-mail：83292199@qq.com

（收稿：2017-05-26 修回：2017-09-20）

（責(zé)任編輯 張亞強）