文│劉浩 齊亞輝（陜西省動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所）

謝印乾（陜西省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心）

徐小虎（陜西省漢中市漢臺(tái)區(qū)畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣中心）

鄭澤紅（陜西省漢中市南鄭縣畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣中心）

漢中市生豬規(guī)模場(chǎng)主要疫病流行病學(xué)調(diào)查

文│劉浩 齊亞輝（陜西省動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所）

謝印乾（陜西省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心）

徐小虎（陜西省漢中市漢臺(tái)區(qū)畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣中心）

鄭澤紅（陜西省漢中市南鄭縣畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣中心）

2013年9月～2014年6月，陜西省漢中市15個(gè)生豬規(guī)模場(chǎng)豬發(fā)生仔豬呼吸困難、消瘦、黃色痢疾、死亡率高，母豬產(chǎn)弱胎、死胎、木乃伊胎等現(xiàn)象，為了查明病因，提出切實(shí)可行的控制措施，通過(guò)采樣檢測(cè)、調(diào)查分析等方法對(duì)發(fā)病場(chǎng)進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)查。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，漢中市部分生豬規(guī)模場(chǎng)發(fā)病的主要原因?yàn)樨i繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）并發(fā)豬圓環(huán)病毒感染引起，且感染非常普遍；養(yǎng)豬場(chǎng)內(nèi)圓環(huán)病毒的感染與豬繁殖與呼吸綜合征病毒的感染呈顯著正相關(guān)；豬繁殖與呼吸綜合征對(duì)豬瘟免疫應(yīng)答呈現(xiàn)顯著的免疫抑制作用。此次流行病學(xué)調(diào)查為本地區(qū)生豬規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)的疫病防控提供了參考。

一、材料與方法

1.試劑。IDEXX豬瘟抗體ELISA檢測(cè)試劑盒（批號(hào)B911、有效期2014.9.3）；IDEXX豬繁殖與呼吸綜合征抗體ELISA檢測(cè)試劑盒（批號(hào)B571、有效期2014.6.3）；IDEXX豬偽狂犬病病毒gpI抗體ELISA檢測(cè)試劑盒（批號(hào)JJ154、效期2015.2.23）；瑞普豬圓環(huán)病毒2-dCap-ELISA抗體ELISA檢測(cè)試劑盒（批號(hào)131104、有效期2014.8）；TAKARA豬瘟病毒（CSFV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）、豬偽狂犬病毒（PRV）TREZOL檢測(cè)試劑盒（批號(hào)BK6602，效期2014.8）。

2.儀器設(shè)備。進(jìn)口移液器、進(jìn)口酶標(biāo)儀（Bio-Rad IMarK）、洗板機(jī)、Bio-Rad梯度PCR儀（T100）、離心機(jī)、恒溫培養(yǎng)箱。

3.樣品采集。2013年9月～2014年6月，在漢中市出現(xiàn)哺乳仔豬、保育豬呼吸障礙、消瘦、黃痢、仔豬死亡率高和母豬返情率高（＞30%）的15個(gè)生豬規(guī)模場(chǎng)，按場(chǎng)采集15～60日齡仔豬和帶仔母豬血清。具有仔豬呼吸障礙、消瘦、黃痢死亡及母豬流產(chǎn)，產(chǎn)死胎、弱胎、木乃伊胎、返情率高（＞30%）的豬群，除采集血清外，同時(shí)采集發(fā)病死亡仔豬腹股溝淺淋巴結(jié)、脾臟、腎臟、肺臟、心臟、肝臟、扁桃體和母豬流產(chǎn)胎兒及木乃伊胎等病料，與血清樣品一起進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。隨機(jī)對(duì)發(fā)病豬場(chǎng)相鄰區(qū)域的無(wú)癥狀穩(wěn)定豬場(chǎng)進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查，并采集血清和病料樣品進(jìn)行檢測(cè)。

4.檢測(cè)方法。豬瘟病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬偽狂犬病毒、豬圓環(huán)病毒抗原均采用RT-PCR方法檢測(cè)，抗體采用ELISA方法檢測(cè)。按照試劑說(shuō)明書操作。

5.現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查。對(duì)豬場(chǎng)飼養(yǎng)管理、主要臨床癥狀、免疫程序等進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查。

6.數(shù)據(jù)分析。對(duì)符合條件的數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)學(xué)中的單因素方差分析法，進(jìn)行數(shù)值和離散度分析比較。

二、結(jié)果

根據(jù)對(duì)有臨床發(fā)病癥狀豬場(chǎng)進(jìn)行問(wèn)卷調(diào)查、采樣檢測(cè)，檢測(cè)情況如下。

1.病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果。對(duì)7個(gè)發(fā)病生豬規(guī)模場(chǎng)進(jìn)行采樣檢測(cè)，均有PRRSV、PCV2和PRV檢出，具體檢測(cè)結(jié)果見表1。

2.血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果。

（1）豬瘟檢測(cè)結(jié)果。對(duì)豬繁殖與呼吸綜合征不同感染程度的豬場(chǎng)進(jìn)行豬瘟陽(yáng)性率和豬瘟抗體陽(yáng)性率檢測(cè)，剔除樣本特殊因素后，豬繁殖與呼吸綜合征陽(yáng)性活躍場(chǎng)的豬瘟抗體阻斷率平均值、陽(yáng)性率平均值均明顯低于豬繁殖與呼吸綜合征穩(wěn)定場(chǎng)，豬繁殖與呼吸綜合征對(duì)豬瘟免疫應(yīng)答呈現(xiàn)顯著的免疫抑制作用。

（2）豬繁殖與呼吸綜合征血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果。對(duì)豬繁殖與呼吸綜合征不同感染程度豬場(chǎng)進(jìn)行豬繁殖與呼吸綜合征檢測(cè)，并將S/P值進(jìn)行比較。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)豬群群體豬繁殖與呼吸綜合征檢測(cè)S/P值平均值小于2（0.4＜S/P＜1.8）時(shí)，檢測(cè)樣品個(gè)體檢測(cè)S/P值大于2.5的比率小于20%，且檢測(cè)數(shù)值離散度較小時(shí)，被檢豬群通常為豬繁殖與呼吸綜合征穩(wěn)定群；當(dāng)豬群豬繁殖與呼吸綜合征檢測(cè)S/P值平均值大于2時(shí)，檢測(cè)樣品個(gè)體檢測(cè)S/ P值大于2.5的比率大于20%，且檢測(cè)數(shù)值離散度較大時(shí)，被檢豬群通常為豬繁殖與呼吸綜合征不穩(wěn)定群；當(dāng)豬群豬繁殖與呼吸綜合征檢測(cè)S/P值平均值大于3時(shí)，檢測(cè)樣品個(gè)體檢測(cè)S/P值大于2.5的比率大于40%，且檢測(cè)數(shù)值離散度較大時(shí)，被檢豬群通常為豬繁殖與呼吸綜合征病毒近期感染群。這與朱連德2013年報(bào)道的未免疫豬群，后備種豬及成年豬S/P值接近2.5，顯示采血時(shí)可能有病毒血癥，血清S/P值在3.5到5之間或高于5.0時(shí)，很可能為最近感染豬群的報(bào)道一致。

表1 發(fā)病場(chǎng)不同疫病病原及感染抗體檢測(cè)情況

（3）豬圓環(huán)病毒血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果。通過(guò)對(duì)豬繁殖與呼吸綜合征不同感染程度豬場(chǎng)進(jìn)行豬圓環(huán)病毒2型抗體檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)內(nèi)圓環(huán)病毒2型感染的程度與豬繁殖與呼吸綜合征病毒在豬場(chǎng)內(nèi)的感染狀態(tài)呈顯著正相關(guān)，在豬繁殖與呼吸綜合征陽(yáng)性活躍場(chǎng)，豬圓環(huán)病毒2型感染也十分活躍，豬群群體S/P平均值通常大于0.5，大部分在1.0以上；豬繁殖與呼吸綜合征穩(wěn)定場(chǎng)，圓環(huán)病毒2型感染相對(duì)穩(wěn)定，豬群群體S/P平均值通常小于1.0，大部分在0.5以內(nèi)（圖1）。

圖1 豬群圓環(huán)病毒抗體檢測(cè)S/P值平均值

三、分析與討論

1.通過(guò)本次調(diào)查研究發(fā)現(xiàn)，漢中市部分生豬規(guī)模場(chǎng)發(fā)生的哺乳仔豬、保育豬表現(xiàn)的呼吸障礙、消瘦、黃痢引起的仔豬死亡率高和母豬返情率高（＞30%）的現(xiàn)象的主要原因?yàn)樨i繁殖與呼吸障礙綜合征病毒并發(fā)豬圓環(huán)病毒2型感染。根據(jù)周繼勇等（2011）報(bào)道的正常胎齡結(jié)構(gòu)母豬群所產(chǎn)仔豬在2～3周齡免疫較好，1～2胎齡母豬所產(chǎn)仔豬在1周齡內(nèi)免疫較好，以及李永友（2009）通過(guò)檢測(cè)4種免疫進(jìn)口藍(lán)耳病弱毒苗程序的免疫效果，認(rèn)為實(shí)行超免和14日齡免疫的免疫效果較好的報(bào)道。在本次疫病控制過(guò)程中，筆者采用了對(duì)產(chǎn)房初生仔豬在3日齡時(shí)進(jìn)行1頭份滴鼻免疫的方法，明顯降低了哺乳仔豬和保育豬因早期感染豬繁殖與呼吸綜合征病毒出現(xiàn)的呼吸障礙癥狀，副豬嗜血桿菌繼發(fā)感染也顯著減少。因此，建議對(duì)于豬繁殖與呼吸綜合征病毒陽(yáng)性活躍豬場(chǎng)采用弱毒疫苗早期滴鼻免疫，后期加強(qiáng)（35日齡）注射免疫的方法，降低產(chǎn)房和保育階段的發(fā)病狀況。

2.豬繁殖與呼吸綜合征對(duì)豬瘟免疫應(yīng)答呈現(xiàn)顯著的免疫抑制作用，豬繁殖與呼吸綜合征陽(yáng)性豬場(chǎng)需要高度關(guān)注豬瘟的防控水平。豬群群體豬繁殖與呼吸綜合征檢測(cè)S/P值可以用于判斷豬群豬繁殖與呼吸綜合征感染情況。15個(gè)規(guī)模場(chǎng)偽狂犬gE基因抗體總體陽(yáng)性率為10.7%（26/243），剔除8份全病毒滅活苗免疫樣品后，偽狂犬陽(yáng)性檢出率為7.66%（18/235）。但其中15份陽(yáng)性樣品主要來(lái)自同一豬場(chǎng)，該場(chǎng)陽(yáng)性率為21.74%（15/69），其余場(chǎng)陽(yáng)性率為1.81%（3/166），說(shuō)明漢中市豬偽狂犬病毒野毒帶毒率處于較低水平，但各場(chǎng)情況差異大。8個(gè)非免疫豬群豬圓環(huán)病毒感染抗體陽(yáng)性率為90%（117/130）；豬繁殖與呼吸綜合征活躍場(chǎng)送檢的病料，豬圓環(huán)病毒2型核酸檢出率為60%（12/20），充分說(shuō)明豬圓環(huán)病毒感染在漢中市的規(guī)模豬場(chǎng)中已經(jīng)成為普遍現(xiàn)象，希望引起廣大養(yǎng)殖場(chǎng)的高度重視。

3.本次調(diào)查結(jié)果顯示，豬圓環(huán)病毒感染在漢中市規(guī)模豬場(chǎng)中十分普遍，但相當(dāng)一部分未免疫豬群并沒(méi)有表現(xiàn)臨床癥狀。圓環(huán)病毒2型對(duì)豬的感染率較高，在世界范圍內(nèi)廣泛發(fā)生，已成為嚴(yán)重影響?zhàn)B豬業(yè)發(fā)展的傳染病之一，已被世界各國(guó)的獸醫(yī)與養(yǎng)豬業(yè)者公認(rèn)為是繼PRRS之后新發(fā)現(xiàn)的重要的豬傳染病，并成為當(dāng)今各國(guó)學(xué)者研究的熱點(diǎn)。豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）是斷奶后仔豬多系統(tǒng)衰弱綜合征（Postweaning multisystemic wasting syndrome， PMWS）的主要病因。2001年年底，我國(guó)南方一些地區(qū)的規(guī)?；i場(chǎng)發(fā)生PMWS，2002年疫情暴發(fā)，目前已擴(kuò)散到國(guó)內(nèi)幾乎所有的規(guī)?；i場(chǎng)。

PCV2需要一些其他誘因或病原體輔助，才能促進(jìn)PMWS的發(fā)生，使感染豬出現(xiàn)廣泛臨床癥狀和病理變化。與PCV2相關(guān)的豬PMWS已在全世界范圍內(nèi)發(fā)生和流行，病死率在10%～30%，較嚴(yán)重的地區(qū)，如豬繁殖與呼吸綜合征陽(yáng)性豬場(chǎng)死淘率高達(dá)40%左右。PCV2還具有免疫抑制特性，可使感染豬不能對(duì)其他病原體產(chǎn)生有效的免疫應(yīng)答，從而易并發(fā)其他病原感染，使規(guī)?；i場(chǎng)的疾病更加復(fù)雜化。由于PCV2感染的危害和造成的經(jīng)濟(jì)損失重大，在豬圓環(huán)病毒疫苗非免疫場(chǎng)，要重視生物安全管理措施和飼養(yǎng)管理，全方位做好全場(chǎng)的主要疫病防控工作，并在適當(dāng)?shù)臅r(shí)機(jī)進(jìn)行豬圓環(huán)病毒疫苗的免疫。