徐國良，袁菊如，涂招秀，李雄輝，胡居吾

（江西省科學院，江西南昌 330096）

降總膽紅素、降甘油三脂、降尿酸和護肝保健茶包的研制

徐國良，袁菊如，涂招秀，李雄輝，胡居吾

（江西省科學院，江西南昌 330096）

研究了以茵陳、車前草、荷葉，堿為主要原料進行配制，篩選出保健茶的配方為茵陳3g、車前草3g、荷葉3g、堿0.3g。通過對原料的氧化性及藥理作用進行綜合評價、茶包確有降總膽紅素，降甘油三脂、降尿酸和護肝保健作用。

茵陳；車前草；荷葉；堿；茶包；氧化性；藥理作用

總膽紅素高產(chǎn)生的原因及危害：總膽紅素偏高主要是肝內(nèi)疾患與肝外疾患引起的。肝臟疾患：急性黃疸型肝炎、急性黃色肝壞死、慢性活動性肝炎、肝硬化等。肝外的疾?。喝苎忘S疸、血型不合的輸血反應、膽囊炎、膽石癥等。

甘油三酯高產(chǎn)生的原因及危害：甘油三酯是人的身體內(nèi)部含量比較多的一種脂肪類，人體的器官組織都可以利用甘油三酯提供能量，肝臟可以進行甘油三酯的合成，在肝臟中貯存。如果甘油三酯升高，則表示肝臟堆積脂肪過多，就是脂肪肝。高甘油三酯是作為高血脂癥的一種，對人體的主要危害主要是引起動脈粥樣硬化、造成血管堵塞和形成血栓，但甘油三酯的血液濃度不偏太高時，人體對其沒察覺，但當其一旦引起動脈粥樣硬化，導致血管嚴重堵塞時便會危及生命。

尿酸高產(chǎn)生的原因及危害：人體尿酸來來源分為內(nèi)源性和外源性兩部分。其中，外源性尿酸占20%，是通過食物中的嘌呤經(jīng)過肝臟氧化生成尿酸；內(nèi)源性尿酸占80%，是體內(nèi)核酸（DNA和RNA）進行氧化分解產(chǎn)生嘌呤，嘌呤再通過肝臟氧化生成尿酸。由此可知采取抗氧化措施，可以減少尿酸的產(chǎn)生。對控制尿酸而言，內(nèi)源性代謝紊亂比外源性因素更重要。尿酸在體內(nèi)堆積導致痛風。

1 實驗部分

1.1 材料與試劑

茵陳、車前草、荷葉產(chǎn)地：購于江西南昌市黃慶棧藥店；食用堿網(wǎng)購。

甲醇、無水乙醇、三氟乙酸、正己烷、Vc、二氯甲烷、BHT、乙酸乙酯、正丁醇、硝酸鋁、氫氧化鈉、亞硝酸鈉、氯化鐵、鐵氰化鉀和福林試劑均為分析純，購于國藥集團化學試劑有限公司；蘆丁標準品、沒食子酸標準品、二苯基苦味?；诫拢―PPH）均購于Sigma公司。

1.2 實驗儀器

Vacucella 22L真空干燥箱，德國MMM公司；Ecan In finite M200PRO酶標儀，瑞士Tecan公司；Direct-Q3CHAO超純水系統(tǒng)，美國密理博公司；ALPHA 1-2LDPLUS冷凍干燥機，德國Alpha公司；KQ-500B超聲波清洗器：昆山市超聲儀器有限公司；QRE-3000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，上海榮生生化儀器廠；250B3高速多功能粉碎機，上海冰都電器有限公司；SHZ-Ⅲ循環(huán)水真空泵，鄭州長城科工貿(mào)有限公司；分析天平，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司。

1.3 實驗方法

1.3.1 工藝流程

以茵陳、車前草、荷葉，堿，作為一種苦丁茶被人們飲用，是我國傳統(tǒng)中醫(yī)藥典籍中記載的藥用植物資源，具有很好的開發(fā)利用價值。確定配方為；茵陳3g、車前草3g、荷葉3g，堿0.3g將干燥的茵陳、車前草、荷葉烘干、機械粉碎、加堿調(diào)配，包裝茶包。

操作要點：①原料烘干、粉碎、將所用的植物原料烘干至水分含量低于5%，然后粉碎，過4目篩。②合料、拌勻按比例投入粉碎好的物料，混合拌勻。③包裝以自動充填包裝機，將物料先用紙袋包裝，外層再以鋁箔袋密封，每袋裝料定量為9.5g。

1.3.2 茶包總黃酮含量的測定

黃酮含量的測定根據(jù)Do[1]描述并稍作修改，具體來說，先向4mL離心管中加入1mL的不同萃取液（1mg/mL），再向每管中加入0.3mL的5%的亞硝酸鈉溶液，混合液在避光下靜止反應5min后，加入0.3mL的10%的硝酸鋁和4%的氫氧化鈉溶液2mL，待反應15min結束后，每管中取200L溶液加入到96孔板中，采用酶標儀在510nm下測其吸光度。標準品采用蘆丁，根據(jù)其標準曲線計算茵陳、車前草、荷葉不同萃取相的總黃酮含量，以mg RU/g 干重樣品為單位。標準曲線為y=0.002x-0.011，y代表樣品的吸光度，x為樣品濃度，在濃度范圍0到500 g/mL線性良好，R2=0.999 88。

1.3.3 茶包多酚含量的測定

多酚含量的測定采用福林酚試劑法根據(jù)Rekha[2]描述并稍作修改，具體來說，先向離心管中加入200L的茵陳、車前草、荷葉不同萃取液（1mg/mL），再向每管中加入1mL的蒸餾水和0.2mL的福林酚試劑，混合液在避光下靜止反應3min后，加入600mL的7.5%的碳酸鈉溶液反應，待反應結束后，每管中取200L溶液加入到96孔板中，采用酶標儀在765nm下測其吸光度。標準品采用沒食子酸，根據(jù)其標準曲線計算茵陳、車前草、荷葉不同萃取相的總酚含量，以mg GAE/g干重樣品為單位。標準曲線為y=0.005x-0.030，y代表樣品的吸光度，x為樣品濃度，在濃度范圍0到400g/mL線性良好，R2=0.999 8。

1.3.4 茶包清除DPPH自由基能力

按照Rekha[2]方法，取茵陳、車前草、荷葉不同萃取液100L加到96孔透明板中，分別加入100L 0.2mM的DPPH溶液。依照相同的操作方法，將不同濃度的樣品液分別與甲醇混勻作為空白組，采用酶標儀在波長517nm處測其吸光值，重復3次實驗，每次3組平行，取平均值。

DPPH清 除 率（%）=[1-（Asample-Ablank）/Acontrol]*100%

式中，Asample-DPPH溶液與樣品液的吸光度之和；Ablank-樣品與提取溶劑的吸光度之和；Acontrol-DPPH溶液與提取溶劑的吸光度之和。

1.3.5 茶包還原能力測定

還原能力的測定采用Do[1]方法并稍作修改，在濃度為20～320g/mL，測定茵陳、車前草、荷葉不同萃取液的還原能力值，吸光度越大，說明還原能力越強。

2 結果與討論

2.1 茶包各萃取相總酚與總黃酮含量

植物體內(nèi)多酚和黃酮作為植物最主要的次級代謝產(chǎn)物，具有多種生理活性，茵陳、車前草、荷葉不同極性部位多酚和總黃酮含量見表1。由表可知，不同極性部位中總黃酮含量差異較大。對于總黃酮而言，含量從高到低依次為乙酸乙酯萃取相（EF）＞正丁醇萃取相（NBF）＞粗提物（CE）＞二氯甲烷萃取相（CH）＞水萃取相（HF）＞正己烷萃取相（NHF）。多酚含量的結果呈現(xiàn)出于總黃酮含量結果基本一致的趨勢，乙酸乙酯萃取相中含有較高的總酚含量，最少含量出現(xiàn)在正己烷和二氯甲烷萃取相中，這種原因的出現(xiàn)可能是由于黃酮本身就是一種酚類物質(zhì)，而且黃酮和多酚在某些結構劃分上并不明顯。正己烷和二氯甲烷萃取相中含有少量的多酚類物質(zhì)，一方面這可能由于萃取過程中萃取并不完全造成的，另一方面可能是由于存在極性相對較弱的多酚類物質(zhì)的緣故。

茵陳、車前草、荷葉中含有豐富的黃酮類物質(zhì)，本文研究了茵陳、車前草、荷葉中總黃酮的含量，由茵陳、車前草、荷葉粗提物得率為24.95%可知，茵陳、車前草、荷葉樣品中總黃酮的含量得率為2.50%。

表1 茵陳、車前草、荷葉不同極性相態(tài)總黃酮、多酚含量

2.2 茶包清除DPPH自由基能力

清除DPPH自由基是一種用途最為廣泛的抗氧化模型，由于其快捷、高效、穩(wěn)定的特點常被用來檢測各種樣品的清除自由基的能力。由表2可知，以BHT、Vc為陽性對照，茵陳、車前草、荷葉不同萃取相對DPPH的清除能力以IC50表示，結果顯示，正己烷和二氯甲烷萃取相表現(xiàn)出較弱的清除DPPH自由基的能力，其IC50值都大于300g/mL，水相和粗提物表現(xiàn)出相對較強的清除DPPH自由基的能力，其IC50值分別為295.61和254.23g/mL，而乙酸乙酯萃取相對DPPH清除的能力與BHT基本一致，小于Vc的清除能力IC50其IC50為（51.86±6.32）g/mL，正丁醇萃取相也表現(xiàn)出一定的抗氧化能力，其IC50為（76.45±3.24）g/mL。各萃取部位表現(xiàn)出清除DPPH自由基的能力不同，這可能與其含有的化學成分不同所致，結果表明茵陳、車前草、荷葉清除DPPH自由基的活性段主要是乙酸乙酯段和正丁醇萃取相。

表2 茵陳、車前草、荷葉不同極性部位對DPPH自由基清除能力

2.3 茶包還原能力

Fe3+還原能力是酚類物質(zhì)抗氧作用的重要機制，其表現(xiàn)形式通過電子轉(zhuǎn)移，化合物還原能力主要是通過氫質(zhì)子的傳遞破壞自由基鏈來發(fā)揮其抗氧化作用的，茵陳、車前草、荷葉主要的抗氧化活性段，這可能與其部位中含有的總黃酮、總酚類物質(zhì)有關。

3 茶包的藥理作用

3.1 茵陳功效[3]

清熱利濕；退黃。主治：黃疸；小便不利；濕瘡瘙癢等。茵陳具有保護肝細胞膜完整性及良好的通透性、防止肝細胞壞死，促進肝細胞再生及改善肝臟微循環(huán)，抑制葡萄糖醛酸酶活性，增強肝臟解毒等功能[4]、降血脂、抗凝血和抗病毒等藥理作用，當然，這只是西醫(yī)學提取茵陳成分做出來的研究，茵陳有顯著的保肝作用，對甲，乙型肝炎，黃疸型肝炎，有顯著的療效。有利膽，促進膽汁分泌，增加膽汁中膽酸和膽紅素排出的作用。能增加心臟冠脈血流量，改善微循環(huán)，并有降血壓，降血脂，抗凝血，利尿解熱平喘，驅(qū)除蛔蟲及抑制多種致病性皮膚真菌與細菌的作用。茵陳分布廣泛，由于其藥效明確，無毒及不良反應，在我國用藥歷史悠久。文獻調(diào)研顯示，該藥材富含香豆素、黃酮、酚酸類、色原酮等成分。藥理活性包括保肝利膽、抗炎鎮(zhèn)痛、抗菌、細胞保護、抗腫瘤疾病等多個方面，其中在保肝利膽方面研究的較多，為治療肝膽疾病及其并發(fā)癥提供了參考。

3.2 車前草的功效[5]

車前草，甘，寒，歸手日頭，陽明經(jīng)，利水，清熱，明目，祛痰，用于小便不通，淋濁，帶下，尿血，黃疸，浮腫，熱痢泄瀉，鼻衄，目赤腫痛，喉痛，咳嗽，皮膚潰瘍。對車前草化學分析，車前草嫩葉含水分、碳水化合物、卵白質(zhì)、脂肪、鈣、磷、鐵、胡蘿卜素、維生素C，還含有膽堿、鉀鹽、寧檬酸、草酸、桃葉珊瑚甙等營養(yǎng)身分。其性寒、味甘，具有幫助水通淋、清熱明目、清肺化痰的功效。主治小便倒霉，盛夏氣溫高的氣候泄瀉，目赤腫痛等癥。車前草即可食用又有藥用價值。其性味甘寒，無毒，具有清熱住進排尿，祛痰止咳，清肝明目，除濕痹功效?！侗静菥V目》認為：久服輕身耐老。因為車前具有大好的療治效用

3.3 荷葉的功效[6]

荷葉，是一味中藥，含有多種同類生物堿，如蓮堿、原荷葉堿和荷葉堿等，另外，還含有維生素C、檸檬酸、蘋果酸、葡萄糖酸、草酸、琥珀酸及其它抗有絲分裂作用的堿性成分?！侗静菥V目》中記載，“荷葉：苦、平、無毒”。鮮葉具有解暑、清熱、利濕等作用。經(jīng)過炮制后的荷葉具有降血脂、升陽發(fā)散、主脾開胃等作用?！侗静菥V目》中對荷葉功效的描述為：“止渴，落胞破血，治產(chǎn)后口干，心肺躁煩（大明）。治血脹腹痛，產(chǎn)后胎衣不下，酒煮服之。荷鼻∶安胎，去惡血，留好血，止血痢，殺菌蕈毒，并煮水服（藏器）。生發(fā)元氣，裨助脾胃，澀精滑，散瘀血，消水腫癰腫，發(fā)痘瘡，治吐血咯血衄血，下血溺血血淋，崩中產(chǎn)后惡血，損傷敗血（時珍）。”

4 結論

本文對茵陳、車前草、荷葉進行初步分離得到不同萃取相，進而對不同萃取相進行初步的成分測定及抗氧化活性評價，篩選出活性強的萃取相，發(fā)現(xiàn)茵陳、車前草、荷葉中主要的有效活性物質(zhì)總黃酮與總酚多富集在乙酸乙酯和正丁醇萃取相；茵陳、車前草、荷葉不同部位具有良好的抗氧化活性，其中乙酸乙酯和正丁醇萃取相具有最強的清除DPPH自由基的能力和還原能力，這與其含有的豐富的黃酮、多酚類物質(zhì)有關。對于各部位的抗氧化活性有了比較清晰的了解，便于解析茵陳、車前草、荷葉的藥理作用；通過實驗：茵陳、車前草、荷葉還可以提取出其他成分，如多糖類，可溶性膳食纖維，無機鹽等。

本文以茵陳3g、車前草3g、荷葉3g，堿0.3g制作而成的茶包對降總膽紅素、降甘油三脂、降尿酸和護肝保健作用。

[1] Do Q D，Angkawijaya A E，Tran-Nguyen P L，et al. Effect of extraction solvent on total phenol content，total flavonoid content，and antioxidant activity of Limnophila aromatica[J].Journal of Food & Drug Analysis，2014，22（3）：296-302.

[2] Rekha C，Poornima G，Manasa M，et al.Ascorbic acid，total phenol content and antioxidant activity of fresh juices of four ripe and unripe citrus fruits[J].Chemical Science Transactions，2012，1（2）.

[3] 曹錦花.茵陳的化學成分和藥理作用研究進展[J]沈陽藥科大學學報，2013，30（6）：489-493.

[4] 唐凱.經(jīng)方合用治慢性乙型肝炎高膽紅素血 40 例[J].國醫(yī)論壇，2002，17（1）：6-8.

[5] 夏玲紅，金冠欽，孫黎，等.前草的化學成分與藥理作用研究進展[J]中國藥師，2013，16（2）：294-295.

[6] 陳海光，余以剛，曾慶孝.荷葉保健茶的研制及其功效研究[J]食品工業(yè)科技，2002，23（1）：53-54.

Lowering the Total Bilirubin，Lowering the Triglycerides，Lowering Uric Acid and Liver Health Care Tea Bag Development

Xu Guo-liang，Yuan Ju-ru，Tu Zhao-xiu，Li Xiong-hui，Hu Ju-wu

The preparation of health tea with cinnamon，plantain，lotus leaf and alkali was studied.The formula for selecting healthy tea was 3g，3g of plantain，3g of lotus leaf and 0.3g of alkali，Oxidation and pharmacological effects，a comprehensive evaluation，tea bags do have reduced total bilirubin，lowering triglycerides，lowering uric acid and liver protection role.

capillaris；plantain；lotus leaf；alkali；tea bag；oxidizing；pharmacological action

R285.1

B

1003–6490（2017）10–0003–03

2017–07–19

國家自然科學基金項目（31260400）。

徐國良（1964—），男，江西南昌人，副研究員，主要研究方向為天然產(chǎn)物化學。