李廣宏，陳 杰，劉婷婷，王方海

(中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院昆蟲(chóng)學(xué)研究所/有害生物控制與資源利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州 510275)

保幼激素促進(jìn)昆蟲(chóng)桿狀病毒增殖效果及機(jī)制的研究進(jìn)展

李廣宏，陳 杰，劉婷婷，王方海*

(中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院昆蟲(chóng)學(xué)研究所/有害生物控制與資源利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州 510275)

保幼激素除了對(duì)昆蟲(chóng)生長(zhǎng)發(fā)育具有重要的調(diào)節(jié)作用外，還能促進(jìn)昆蟲(chóng)桿狀病毒的增殖。本文重點(diǎn)綜述了保幼激素對(duì)昆蟲(chóng)桿狀病毒的具體增殖效果和可能的機(jī)制。目前認(rèn)為保幼激素促進(jìn)病毒增殖的主要機(jī)制是延長(zhǎng)宿主幼蟲(chóng)歷期、提高宿主幼蟲(chóng)取食量和食物轉(zhuǎn)化率等。最后建議今后應(yīng)從DNA甲基化的角度探討保幼激素促進(jìn)病毒增殖的可能表觀遺傳機(jī)制。

保幼激素；桿狀病毒；增值；DNA甲基化

許多昆蟲(chóng)桿狀病毒已被開(kāi)發(fā)成重要的微生物殺蟲(chóng)劑，在防治某些特定的農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)中發(fā)揮出巨大的作用(高博等，2008)，高效增殖昆蟲(chóng)桿狀病毒的研究一直是生物防治領(lǐng)域高度關(guān)注的方向，昆蟲(chóng)桿狀病毒殺蟲(chóng)劑只有在具備了大量增殖昆蟲(chóng)桿狀病毒的技術(shù)基礎(chǔ)上才能大面積推廣應(yīng)用，也才能在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮出明顯的優(yōu)勢(shì)和作用。結(jié)合本課題組多年研究的成果，本綜述擬先簡(jiǎn)要介紹一下保幼激素和昆蟲(chóng)桿狀病毒，然后重點(diǎn)總結(jié)昆蟲(chóng)保幼激素在昆蟲(chóng)桿狀病毒增殖中的作用及機(jī)制，并指出將來(lái)應(yīng)從表觀遺傳的角度來(lái)探討保幼激素促進(jìn)昆蟲(chóng)桿狀病毒增殖的可能機(jī)制，從而可在深層次上進(jìn)一步認(rèn)識(shí)保幼激素促進(jìn)昆蟲(chóng)桿狀病毒增殖的內(nèi)在機(jī)制，同時(shí)也為探索進(jìn)一步提高昆蟲(chóng)桿狀病毒增殖效率的新途徑和新方法提供一定的理論指導(dǎo)，服務(wù)于生物防治產(chǎn)業(yè)。

1 保幼激素

保幼激素(juvenile hormone，JH)是通過(guò)甲羥戊酸途徑合成的倍半萜類(lèi)化合物，由昆蟲(chóng)腺體器官咽側(cè)體合成和分泌，目前發(fā)現(xiàn)的有JH 0、JH Ⅰ、JH Ⅱ、JH Ⅲ、4-methyl-JH Ⅰ、JH Ⅲ-bisepoxide和Methyl farnesoate 7種結(jié)構(gòu)形式(李娟等，2012)。保幼激素的結(jié)構(gòu)和含量在不同種類(lèi)和不同發(fā)育期往往有所不同，常常具有種的特異性。但在多數(shù)情況下，昆蟲(chóng)成蟲(chóng)期只含有JH Ⅱ。直翅目昆蟲(chóng)中主要含有JH Ⅲ，而鱗翅目中則主要含有JH 0、JH Ⅰ和JH Ⅱ的混合物，在高等雙翅目中存在JH Ⅲ雙環(huán)氧化物，在蜚蠊胚胎和幼蟲(chóng)中發(fā)現(xiàn)了少量的JH Ⅲ的直接前體—甲基法呢醇(劉永平和張慧琴，2007)。保幼激素具親脂特性，在血淋巴中有較高的溶解度，常與載體蛋白質(zhì)形成復(fù)合體，可有效防止非特異性脂酶的水解，起到一定的保護(hù)作用(許再福，2009)。

保幼激素具有維持幼蟲(chóng)特征、阻止變態(tài)發(fā)生的作用(Wenetal.，2015)。通常幼蟲(chóng)期保幼激素的滴度較高，當(dāng)缺乏保幼激素時(shí)，幼蟲(chóng)就會(huì)早熟，提前變?yōu)槌上x(chóng)。保幼激素在雌成蟲(chóng)體內(nèi)可以刺激卵巢發(fā)育和卵黃形成，同時(shí)也對(duì)雌蟲(chóng)副性腺的真皮細(xì)胞發(fā)生作用，在其影響下，活化的真皮細(xì)胞可合成卵殼，形成所必須的特殊物質(zhì)并運(yùn)送到腺體腔內(nèi)(李娟等，2012)。在蜚蠊、黃粉甲和小蠹蟲(chóng)等一些昆蟲(chóng)中，保幼激素還可調(diào)節(jié)雌蟲(chóng)性信息素的合成和分泌(Rafaeli，2005)。此外，保幼激素在昆蟲(chóng)多型形象(張瓊秀等，2007，2008)、品級(jí)決定(徐希蓮等，2015)、休眠和滯育(Lyoussoufietal.，1994；徐晶晶等，2012)等方面均有一定的作用。同時(shí)人們發(fā)現(xiàn)保幼激素還具有促進(jìn)昆蟲(chóng)桿狀病毒增殖的作用(劉永平等，2007；Elviraetal.，2010)。

2 昆蟲(chóng)桿狀病毒

昆蟲(chóng)桿狀病毒是發(fā)現(xiàn)最早、研究最多且實(shí)用意義較大的專(zhuān)門(mén)感染昆蟲(chóng)的病毒(劉高強(qiáng)和余曉丹，2006)。通常分為核型多角體病毒、顆粒體病毒和非包涵體型桿狀病毒三大類(lèi)，基因組為80-180 kb的雙鏈環(huán)狀DNA，遺傳和生化背景較清楚(Okanoetal.，2006；高博等，2008)。桿狀病毒可作為真核表達(dá)載體系統(tǒng)表達(dá)外源基因，在藥物研發(fā)、疫苗生產(chǎn)等方面有廣泛的應(yīng)用(于永利，2015)；還可作為基因轉(zhuǎn)移載體用于基因治療；特別有意義的是桿狀病毒作為一類(lèi)重要的微生物殺蟲(chóng)劑，可有效地控制農(nóng)林害蟲(chóng)的發(fā)生，且對(duì)環(huán)境不造成污染，對(duì)人、畜安全，被視為非常有潛力的安全可靠的生物殺蟲(chóng)劑(孫修煉和胡志紅，2006；Lapiedetal.，2009)。事實(shí)上，國(guó)內(nèi)外已在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中大量使用桿狀病毒殺蟲(chóng)劑，特別是巴西利用桿狀病毒防治大豆害蟲(chóng)取得了巨大成功，每年可節(jié)省費(fèi)用1100萬(wàn)美元，同時(shí)還免去了1700萬(wàn)噸化學(xué)農(nóng)藥的使用，獲得了巨大的經(jīng)濟(jì)和生態(tài)效益(高博等，2008)。目前，國(guó)內(nèi)外正式注冊(cè)商品化的桿狀病毒殺蟲(chóng)劑雖已超過(guò)30種(Szewczyketal.，2006；秦啟聯(lián)等，2012；韓書(shū)友，2015)，但由于生產(chǎn)成本高，多數(shù)桿狀病毒殺蟲(chóng)劑難以大面積推廣，應(yīng)用受限，因此，如何進(jìn)一步提高昆蟲(chóng)桿狀病毒增殖效率，從而有效降低生產(chǎn)成本已成為桿狀病毒殺蟲(chóng)劑生產(chǎn)過(guò)程中亟待解決的問(wèn)題。

3 保幼激素促進(jìn)昆蟲(chóng)桿狀病毒增殖的效果

早在1984年Kloc就報(bào)道了保幼激素能夠影響大蚊虹彩病毒Tipula iridescent virus在鹽澤燈蛾Estigmeneacrea細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中的增殖。王厚偉等人于2001年發(fā)現(xiàn)保幼激素能夠促進(jìn)野生型家蠶核型多角體病毒增殖，他們?cè)?齡家蠶幼蟲(chóng)感染野生型病毒24 h后，用100 ppm的JH處理蟲(chóng)體表面，從病毒感染后60 h開(kāi)始收集病蠶血樣，經(jīng)超聲波破碎細(xì)胞和稀釋后，記數(shù)多角體數(shù)目，發(fā)現(xiàn)在JH處理的前期(病毒感染90 h之前)，多角體蛋白基因的表達(dá)量與對(duì)照沒(méi)有明顯差異，但在以后的6 h內(nèi)，兩者的多角體數(shù)目迅速出現(xiàn)顯著差異，至病毒感染后96 h時(shí)，JH處理的蟲(chóng)體每毫升血淋巴多角體數(shù)目比對(duì)照蟲(chóng)體多角體數(shù)目高出35%以上，如果考慮到病蠶體重的增加，每條經(jīng)JH處理蠶的多角體數(shù)目至少比對(duì)照高出40%。

我們課題組分別用5×106，1×107，5×107，1×108PIBs/mL四種濃度的斜紋夜蛾核多角體病毒(SpltNPV)感染斜紋夜蛾末齡幼蟲(chóng)(第6齡)，并于同齡期以10 μg/頭的保幼激素類(lèi)似物methoprene分別對(duì)各感染組進(jìn)行表面點(diǎn)滴處理，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與對(duì)照組相比，各不同濃度處理組病毒總產(chǎn)量分別提高227.06%、128.71%、52.62%、33.15%，平均單頭病毒含量分別提高49.15%、48.40%、36.40%和31.11%,其中以1×107PIBs/mL感染再經(jīng)保幼激素類(lèi)似物methoprene處理的病毒總產(chǎn)量和平均單頭病毒含量最高，分別為1701.8×108PIBs和60.1×108PIBs，并且各處理組的病毒總產(chǎn)量和平均單頭病毒含量均顯著高于對(duì)照組，充分說(shuō)明保幼激素類(lèi)似物可顯著提高斜紋夜蛾核多角體病毒增殖的產(chǎn)量(劉永平等，2005)。應(yīng)用免疫印跡和熒光定量PCR法，分析了保幼激素類(lèi)似物methoprene對(duì)SpltNPV多角體蛋白(polyhedron，POLH)在宿主斜紋夜蛾6齡幼蟲(chóng)血淋巴中合成的影響，結(jié)果表明：經(jīng)methoprene處理后2-3 d可明顯促進(jìn)幼蟲(chóng)血淋巴液中POLH的合成，且發(fā)現(xiàn)methoprene對(duì)SpltNPV在幼蟲(chóng)血淋巴液復(fù)制的影響主要發(fā)生在處理后的第4天和第5天，該期間polh基因的拷貝數(shù)比對(duì)照顯著增加，拷貝數(shù)的峰值達(dá)1.22×1010/mL(劉永平等，2007)。

隨后Lasa等(2007)則發(fā)現(xiàn)保幼激素類(lèi)似物也能夠促進(jìn)野生型甜菜夜蛾核多角體病毒的增殖，他們用保幼激素類(lèi)似物fenoxycarb和methoprene分別處理甜菜夜蛾末齡幼蟲(chóng)后再感染SeMNPV，發(fā)現(xiàn)：與對(duì)照相比，用fenoxycarb和methoprene處理過(guò)的幼蟲(chóng)病毒產(chǎn)量分別提高了2.7倍和2.9倍。來(lái)自Elvira等(2010)的試驗(yàn)同樣證明了保幼激素類(lèi)似物能夠促進(jìn)野生型甜菜夜蛾核多角體病毒的增殖，處理組與對(duì)照相比病毒產(chǎn)量可提高5倍左右，且發(fā)現(xiàn)經(jīng)保幼激素類(lèi)似物處理的幼蟲(chóng)取食量與對(duì)照組幼蟲(chóng)相似，并沒(méi)有增加，同時(shí)研究表明經(jīng)保幼激素類(lèi)似物處理的幼蟲(chóng)生產(chǎn)出的病毒和未經(jīng)激素處理的幼蟲(chóng)生產(chǎn)出的病毒作為殺蟲(chóng)劑效果等同，認(rèn)為保幼激素類(lèi)似物可用于大量生產(chǎn)病毒。此外，也有人報(bào)道了保幼激素類(lèi)似物對(duì)重組甜菜夜蛾核多角體病毒SeXD1增殖的影響，用重組甜菜夜蛾核多角體病毒感染甜菜夜蛾幼蟲(chóng)，并于同齡期點(diǎn)滴保幼激素類(lèi)似物(Methoprene，ZR-515)，研究其對(duì)SeXD1增殖的影響，結(jié)果表明，用5×107PIB/mL的SeXD1感染甜菜夜蛾五齡幼蟲(chóng)，并以2 μg/頭Methoprene點(diǎn)滴處理效果最佳，其感染死亡率、平均單頭病毒含量、病毒總產(chǎn)量分別為95.3%、8.6×108PIBs/頭和2.45×1011PIBs；比對(duì)照提高65.1%、115.0%和264.1%。提出用保幼激素類(lèi)似物處理斜紋夜蛾和甜菜夜蛾幼蟲(chóng)不僅是提高野生型病毒也是提高重組病毒增殖效率的有效途徑之一(李充璧等，2009)。

4 保幼激素促進(jìn)病毒增殖的主要機(jī)制

4.1 延長(zhǎng)宿主幼蟲(chóng)歷期

外源病毒感染的幼蟲(chóng)，其歷期被延長(zhǎng)，自然就會(huì)增加病毒繁殖的時(shí)間，產(chǎn)量也就會(huì)有所提高。在斜紋夜蛾的試驗(yàn)中，用不同劑量的methoprene處理6齡幼蟲(chóng)，發(fā)現(xiàn)幼蟲(chóng)歷期隨methoprene處理劑量的增加而逐漸延長(zhǎng)，當(dāng)劑量達(dá)到10 μg/頭時(shí)，延長(zhǎng)期基本達(dá)到峰值，與對(duì)照相比，此時(shí)被methoprene處理的6齡幼蟲(chóng)發(fā)育期平均延長(zhǎng)了16 d(劉永平等，2005)。在甜菜夜蛾的試驗(yàn)中，分別用1、2、3、4 μg/頭劑量的Methoprene處理甜菜夜蛾五齡幼蟲(chóng)，幼蟲(chóng)歷期分別被延長(zhǎng)了0.9 d、2.6 d、3.5 d和4.7 d，顯然幼蟲(chóng)歷期同樣隨methoprene處理劑量的增加而逐漸延長(zhǎng)(李充璧等，2009)。此外也有人觀察到用保幼激素類(lèi)似物fenoxycarb和methoprene分別處理甜菜夜蛾5齡幼蟲(chóng)，分別有90%和70%的處理蟲(chóng)子蛻皮到額外的6齡階段(Lasaetal.，2007)。

4.2 提高宿主幼蟲(chóng)的取食量

用保幼激素類(lèi)似物處理不同種類(lèi)的幼蟲(chóng)，發(fā)現(xiàn)均能提高被處理蟲(chóng)子的取食量，而取食量的增加自然會(huì)增加蟲(chóng)體內(nèi)供給病毒增殖的原料，病毒增殖產(chǎn)量相應(yīng)也就會(huì)有所提高。在斜紋夜蛾的試驗(yàn)中，用Methoprene處理感染病毒的6齡幼蟲(chóng)，試驗(yàn)結(jié)果表明，各處理組平均單頭幼蟲(chóng)總?cè)∈沉颗c對(duì)照組差異極顯著，其中保幼激素組、保幼激素+病毒組和病毒組的總?cè)∈沉糠謩e比對(duì)照組高100.00%、70.97%、58.06%，可見(jiàn)保幼激素處理和病毒感染均可促進(jìn)幼蟲(chóng)取食，而保幼激素處理又比病毒感染更明顯(劉永平等，2005)。同樣，在甜菜夜蛾的試驗(yàn)中，用Methoprene處理五齡幼蟲(chóng)，共分4個(gè)處理組：Methoprene組、SeXD1組、Methoprene+SeXD1組、對(duì)照組，結(jié)果Methoprene組的平均單頭幼蟲(chóng)總?cè)∈沉棵黠@高于其他3組，且差異極顯著，說(shuō)明Methoprene處理可通過(guò)促進(jìn)甜菜夜蛾幼蟲(chóng)取食以獲得更多營(yíng)養(yǎng)，從而提高病毒產(chǎn)量(李充璧等，2009)。

4.3 提高宿主幼蟲(chóng)的食物轉(zhuǎn)化率

此外，研究發(fā)現(xiàn)外源保幼激素的處理還能提高宿主幼蟲(chóng)的食物轉(zhuǎn)化率。如斜紋夜蛾6齡幼蟲(chóng)經(jīng)不同處理之后，各處理組間的食物消化率無(wú)明顯差異，但食物轉(zhuǎn)化率差異顯著，其中保幼激素處理組的食物轉(zhuǎn)化率為36.16%，明顯高于對(duì)照組的食物轉(zhuǎn)化率(32.18%)，而保幼激素+病毒處理組的食物轉(zhuǎn)化率為40.82%，則明顯高于病毒處理組的食物轉(zhuǎn)化率32.15%，說(shuō)明保幼激素不僅能提高健康幼蟲(chóng)而且也能提高病毒感染幼蟲(chóng)的食物轉(zhuǎn)化率。在每克蟲(chóng)尸病毒含量方面進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)保幼激素+病毒處理組和病毒處理組的每克蟲(chóng)尸病毒含量分別為5.53×109PIBs 和4.62×109PIBs，存在顯著差異，表明保幼激素促進(jìn)了病毒的增殖(劉永平等，2005)。在甜菜夜蛾的試驗(yàn)中，得到類(lèi)似的結(jié)果，不同處理組的食物轉(zhuǎn)化率差異顯著。其中Methoprene處理組和Methoprene+SeXD1處理組的食物轉(zhuǎn)化率(42.9%，44.2%)均極顯著高于SeXD1處理組(37.1%)和對(duì)照組(37.5)，說(shuō)明Methoprene可顯著提高甜菜夜蛾的食物轉(zhuǎn)化率，促進(jìn)幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)，從而提高蟲(chóng)體內(nèi)病毒增殖的效率(李充璧等，2009)。

4.4 提高宿主幼蟲(chóng)的絕對(duì)體重

多個(gè)試驗(yàn)結(jié)果已證明保幼激素類(lèi)似物可以提高被處理試蟲(chóng)的體重。用Methoprene和桿狀病毒分別處理斜紋夜蛾6齡幼蟲(chóng)，觀察對(duì)其體重的影響，發(fā)現(xiàn)保幼激素處理組、保幼激素+病毒處理組、病毒處理組的平均最大體重均顯著高于對(duì)照組，其分別比對(duì)照組高60.88%、51.36%和34.80%(劉永平等，2005)。而在甜菜夜蛾中，用Methoprene和SeXD1處理五齡幼蟲(chóng)，經(jīng)Methoprene處理組、Methoprene+SeXD1處理組和SeXD1組處理后的最大體重均顯著高于對(duì)照組，分別高出103.2%、73.4%和31.5%(李充璧等，2009)。Lasa等(2007)用fenoxycarb和methoprene分別處理甜菜夜蛾5齡幼蟲(chóng)，在處理后的8-10 d內(nèi)，則觀察到其重量大概是對(duì)照所觀察到的最大重量的2倍。

5 展望

綜觀現(xiàn)有文獻(xiàn)資料，普遍認(rèn)為保幼激素促進(jìn)病毒增殖的原因主要是延長(zhǎng)宿主幼蟲(chóng)歷期、提高宿主幼蟲(chóng)取食量和食物轉(zhuǎn)化率等(王厚偉等，2001；劉永平等，2005；Zibaeeetal.，2011)。但已有研究表明保幼激素可以促進(jìn)病毒基因的表達(dá)(王厚偉等，2001；劉永平等，2007；Hepat，etal.，2015；Zhang,etal.，2015)，那么保幼激素是通過(guò)什么途徑促進(jìn)病毒基因表達(dá)的？其具體的分子機(jī)制是什么？目前還不清楚，有待進(jìn)一步研究。

DNA甲基化是表觀遺傳修飾的主要形式，真核細(xì)胞DNA的甲基化現(xiàn)象最早發(fā)現(xiàn)于上世紀(jì)40年代(沈秀平等，2012)。從上世紀(jì)70年代起，就有不少關(guān)于病毒DNA甲基化對(duì)其復(fù)制影響的研究(Hoelzeretal.，2008)。近年來(lái)隨著亞硫酸氫鹽處理方法、甲基化芯片、甲基免疫沉淀等DNA甲基化研究技術(shù)的發(fā)展，對(duì)病毒DNA甲基化現(xiàn)象及其生物學(xué)作用的研究迅速增加(Barbierietal.，2014；Simanavicieneetal.，2015；Khanetal.，2016)。越來(lái)越多的證據(jù)表明，病毒基因組DNA在病毒侵染的動(dòng)、植物中普遍發(fā)生甲基化，且通過(guò)對(duì)病毒全基因組的甲基化水平測(cè)定，發(fā)現(xiàn)甲基化主要集中于病毒的啟動(dòng)子區(qū)(Fernandez1etal.，2009；Yangetal.，2011；Toth,etal.，2013)。目前有關(guān)昆蟲(chóng)桿狀病毒復(fù)制過(guò)程中的DNA甲基化動(dòng)態(tài)變化研究?jī)H見(jiàn)零星報(bào)導(dǎo)，尚缺乏系統(tǒng)的研究。復(fù)旦大學(xué)鐘江課題組首次報(bào)道DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑azacytidine和decitabine可以提高苜蓿尺蠖核型多角體病毒(AcNPV)在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中介導(dǎo)基因表達(dá)的水平(Wangetal，2010)，并檢測(cè)到ie0啟動(dòng)子區(qū)域甲基化程度較高(唐夢(mèng)瑤和鐘江，2013)；而且已有報(bào)道斜紋夜蛾核型多角體病毒II型某些基因位點(diǎn)也確實(shí)存在DNA甲基化現(xiàn)象(石美麗等，2012)。加上最近在蜿豆蚜中已經(jīng)鑒定出的許多甲基化基因中，驚奇地發(fā)現(xiàn)某些甲基化基因與保幼激素存在相互作用關(guān)系(Walshetal.，2010)。因此我們推測(cè)保幼激素還有可能通過(guò)改變DNA甲基化譜式來(lái)促進(jìn)昆蟲(chóng)桿狀病毒增殖。今后如能弄清保幼激素促進(jìn)桿狀病毒增殖過(guò)程中的病毒基因組特定啟動(dòng)子的DNA甲基化動(dòng)態(tài)變化過(guò)程及相關(guān)基因的表達(dá)譜，則可探討保幼激素促進(jìn)病毒增殖的可能表觀遺傳機(jī)制，從而可在分子水平上進(jìn)一步解析保幼激素促進(jìn)昆蟲(chóng)桿狀病毒增殖的本質(zhì)，同時(shí)也為探索進(jìn)一步提高昆蟲(chóng)桿狀病毒增殖效率的新途徑和新方法提供一定的理論指導(dǎo)。

References)

Barbieri D, Nebiaj A, Strammiello R,etal. Detection of HPV16 African variants and quantitative analysis of viral DNA methylation in oropharyngeal squamous cell carcinomas [J].JournalofClinicalVirology, 2014, 60 (3): 243-249.

Elvira S, Williams T, Caballero P.Juvenile hormone analog technology: Effects on larval cannibalism and the production ofSpodopteraexigua(Lepidoptera: Noctuidae) nucleopolyhedrovirus [J].JournalofEconomicEntomology, 2010, 103 (3): 577-582.

Fernandez AF, Rosales C, Lopez-Nieva P,etal. The dynamic DNA methylomes of double-stranded DNA viruses associated with human cancer [J].GenomeResearch, 2009, 19 (3): 438-451.

Gao B, Deng LH, Yi XP,etal. Review on development and application of baculovirus insecticides [J].ModernAgriculturalScienceandTechnology, 2008, 8: 66-67. [高博, 鄧柳紅, 易小平, 等. 昆蟲(chóng)桿狀病毒殺蟲(chóng)劑研究與應(yīng)用綜述[J]. 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技, 2008, 8: 66-67]

Han SY. China’s present situation and the trend of development of the biological pesticide [J].PesticideMarketNews, 2015, 27: 6-9. [韓書(shū)友. 中國(guó)生物農(nóng)藥發(fā)展現(xiàn)狀與趨勢(shì)[J]. 農(nóng)藥市場(chǎng)信息, 2015, 27: 6-9]

Hepat R, Lee D, Kim Y. Juvenile hormone regulates an expression of a late gene encoded in a polydnavirus, Cotesia plutellae bracovirus[J].ComparativeBiochemistryandPhysiology-PartAMolecular&IntegrativePhysiology, 2015, 80 (SI): 71-80.

Hoelzer K, Shackelton LA, Parrish CR. Presence and role of cytosine methylation in DNA viruses of animals[J].NucleicAcidsResearch, 2008, 36 (9): 2825-2837.

Khan MS, Gupta AK, Kumar M. ViralEpi v1.0: A high-throughput spectrum of viral epigenomic methylation profiles from diverse diseases[J].Epigenomics, 2016, 8 (1): 67-75.

Kloc M, Lee PE, Tajbakhsh S.The effect of two insect hormones on the replication of Tipula iridescent virus inEstigmeneacreacells in suspension culture [J].JournalofInvertebratePathology, 1984, 43 (1), 114-123.

Lapied B, Pennetier C, Apaire-Marchais V,etal. Innovative applications for insect viruses: Towards insecticide sensitization [J].TrendsinBiotechnology, 2009, 27 (4): 190-198.

Lasa R, Caballero P, Williams T. Juvenile hormone analogs greatly increase the production of a nucleopolyhedrovirus [J].BiologicalControl, 2007, 41 (3): 389-396.

Li CB, Cai Y, Ding CQ,etal. Effect of juvenile hormone analogues on multiplication of recombinant Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus (SeXD1)[J].ChineseJournalofBiologicalControl, 2009, 25 (3): 209-214. [李充璧, 蔡毅, 丁春欽, 等. 保幼激素類(lèi)似物對(duì)重組甜菜夜蛾核多角體病毒SeXD1增殖的影響[J]. 中國(guó)生物防治, 2009, 25 (3): 209-214]

Li J, Zhou J, Luo YQ,etal. Advances in studies on insect juvenile hormone and vitellogenesis regulated by juvenile hormone [J].MedicalInnovationofChina, 2012, 9 (3): 154-157. [李娟，周嬌, 駱有慶, 等. 保幼激素及其生理學(xué)作用的研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新, 2012, 9 (3): 154-157]

Liu GQ, Yu XD. Advances in molecular biology and application of insect baculovirus [J].JournalofAnhuiAgriculturalScience, 2006, 34 (9): 1748-1750. [劉高強(qiáng), 余曉丹. 昆蟲(chóng)桿狀病毒分子生物學(xué)及其應(yīng)用研究的新進(jìn)展[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2006, 34 (9): 1748-1750]

Liu YP, Wang FH, Su ZJ,etal. Effect of juvenile hormone analogues on multiplication of Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus [J].ActaEntomologicaSinica, 2005, 48 (6): 866-870. [劉永平, 王方海, 蘇志堅(jiān), 等. 保幼激素類(lèi)似物對(duì)斜紋夜蛾核多角體病毒增殖的影響[J]. 昆蟲(chóng)學(xué)報(bào), 2005, 48 (6): 866-870]

Liu YP, Wang FH, Su ZJ,etal. Effect of the juvenile hormone analogue methoprene on multiplication of Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus in the host hemolymph [J].ActaEntomologicaSinica, 2007, 50 (4): 343-348. [劉永平, 王方海, 蘇志堅(jiān), 等. 保幼激素類(lèi)似物對(duì)斜紋夜蛾核型多角體病毒在宿主血淋巴中增殖動(dòng)態(tài)的影響[J]. 昆蟲(chóng)學(xué)報(bào), 2007, 50 (4): 343-348]

Liu YP, Zhang HQ. Research and application of juvenal hormone and its analogues [J].ShanxiChemicalIndustry, 2007, 27 (4): 28-31. [劉永平, 張慧琴. 保幼激素及其類(lèi)似物的研究與應(yīng)用[J]. 山西化工, 2007, 27 (4): 28-31]

Lyoussoufi A, Gadenne C, Rieux P,etal. Effects of an insect growth regulator, fenoxycarb, on the diapause of the pear psylla,Cacopsyllapyri[J].Entonal.Exp.Appl., 1994, 72 (3): 239-244.

Qin QL, Chen QQ, Zhang JH,etal. Industrialization of insect virus biological pesticides and its prospects [J].ChineseJournalofBiologicalControl, 2012, 28 (2): 157-164. [秦啟聯(lián), 程清泉, 張繼紅, 等. 昆蟲(chóng)病毒生物殺蟲(chóng)劑產(chǎn)業(yè)化及其展望[J]. 中國(guó)生物防治學(xué)報(bào), 2012, 28 (2): 157-164]

Okano K, Vanarsdall AL, Mikhailov VS,etal. Conserved molecular systems of the Baculoviridae [J].Virology, 2006, 344 (1): 77-87.

Rafaeli A. Mechanisms involved in the control of pheromone production in female moths: Recent developments [J].EntomologiaExperimentalisetApplicata, 2005, 115 (1): 7-15.

Shen XP, Lin YX, Xu Q. DNA methylation and its biological function [J].ChinaAnimalHusbandry&VeterinaryMedicine, 2012, 39 (6): 83-85. [沈秀平, 林月霞, 徐琪. DNA甲基化及其生物學(xué)功能[J]. 中國(guó)畜牧獸醫(yī), 2012, 39 (6): 83-85]

Shi ML, Yao R, Li YN,etal. The genomic DNA methylation of Spodoptera litura nucleopolyhedrovirusⅡ [J].Biotechnology. 2012, 22 (3): 58-61. [石美麗, 姚冉, 李軼女, 等. 斜紋夜蛾核型多角體病毒II型DNA甲基化研究[J]. 生物技術(shù), 2012, 22 (3): 58-61]

Simanaviciene V, Popendikyte V, Gudleviciene Z,etal. Different DNA methylation pattern of HPV16, HPV18 and HPV51 genomes in asymptomatic HPV infection as compared to cervical neoplasia [J].Virology, 2015, 484: 227-233.

Sun XL, Hu ZH. Research and application progress of insect virus pesticides in China [J].China’sAgriculturalScienceandTechnologyLeader, 2006, 8 (6): 33-37. [孫修煉, 胡志紅. 我國(guó)昆蟲(chóng)病毒殺蟲(chóng)劑的研究與應(yīng)用進(jìn)展[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào), 2006, 8 (6): 33-37]

Szewczyk B, Hoyos-Carvajal L, Paluszek M,etal. Baculoviruses—re-emerging biopesticides [J].BiotechnologyAdvances, 2006, 24 (2): 143-160.

Tang MY, Zhong J. The effect of DNA methylation in AcMNPVie0/ie1 promoter on IE0/IE1 novel regulation [J].JournalofFudanUniversity(NaturalScience), 2013, 52 (6): 717-730. [唐夢(mèng)瑤, 鐘江. 桿狀病毒AcMNPVie0/ie1啟動(dòng)子區(qū)域甲基化對(duì)自身調(diào)控作用的影響[J]. 復(fù)旦學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2013, 52 (6): 717-730]

Toth R, Meszaros I, Stefancsik R,etal. CpG distribution and methylation pattern in porcine parvovirus [J].PLoSONE, 2013, 8 (12): e85986.

Walsh TK, Brision JA, Robertson HM,etal. A functional DNA methylation system in the pea aphid,Acyrthosiphonpisum[J].InsectMolecularBiology, 2010, 19 (Suppl. 2): 215-228.

Wang HW, Zhang ZF, Xiao QL,etal. Insect juvenile hormone enhancing gene expression in silkworm baculovirus vector system [J].ChineseJournalofBiotechnology, 2001, 17 (5): 590-593. [王厚偉, 張志芳, 肖慶利,等. 昆蟲(chóng)保幼激素促進(jìn)家蠶桿狀病毒系統(tǒng)的基因表達(dá)[J]. 生物工程學(xué)報(bào), 2001, 17 (5): 590-593]

Wang X, Yin J, Huang XX, Zhong J. DNA methyltransferase inhibitors increase baculovirus-mediated gene expression in mammalian cells when applied before infection [J].AnalyticalBiochemistry, 2010, 396 (2): 322-324.

Wen D, Rivera-Perez C, Abdou M,etal. Methyl farnesoate plays a dual role in regulating Drosophila metamorphosis [J].PLoSGenetics, 2015, 11 (3): e1005038.

Xu XL, Wang FH, Wang H. Research progress on caste differentiation in bumblebees [J].ActaEntomologicaSinica, 2015, 58 (12): 1356-1361. [徐希蓮, 王鳳賀, 王歡. 熊蜂級(jí)型分化研究進(jìn)展[J]. 昆蟲(chóng)學(xué)報(bào), 58 (12): 1356-1361]

Xu ZF. General Entomology [M]. Beijing: Science Press, 2009. [許再福. 普通昆蟲(chóng)學(xué)[M]. 北京: 科學(xué)出版社, 2009]

Xu JJ, Chen B, Hao YJ,etal. Research progress of the hormone regulation of insect diapauses [J].JournalofChongqingNormalUniversity(NaturalScience), 2012, 29 (4): 29-33. [徐晶晶, 陳斌, 郝友進(jìn), 等. 昆蟲(chóng)滯育相關(guān)激素調(diào)節(jié)的研究進(jìn)展[J]. 重慶師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2012, 29 (4): 29-33]

Yang X, Xie Y, Raja P,etal. Suppression of methylation-mediated transcriptional gene silencing by βC1-SAHH protein interaction during geminivirus-betasatellite infection [J].PLoSPathog., 2011, 7 (10): e1002329.

Yu YL. Retrospective consideration on development of baculovirus expression vector system and related vaccine research in passed thirty years [J].ProginMicrobiol.Immunol., 2015, 3 (4): 1-15. [于永利. 昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)載體系統(tǒng)與疫苗研制的30年回顧[J]. 微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展, 2015, 43 (4): 1-15]

Zhang QX, Sun ZX, Li GH,etal. The Effects of exogenous hormones ZR-515 and RH-2485 on wing Dimorphism ofNilaparvatalugens[J].ActaScientiarumNaturaliumUniversitatisSunyatseni, 2007, 46 (3): 76-78. [張瓊秀, 孫梓暄, 李廣宏, 等. 外源激素對(duì)褐飛虱翅型分化的影響[J]. 中山大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版), 2007, 46 (3): 76-78]

Zhang QX, Sun ZX, Li GH,etal. Effects of three kinds of exogenous hormones on wing dimorphis m ofSogatellafurcifera(Horvath) [J].ActaEcologicaSinica, 2008, 28 (12): 5994-5998. [張瓊秀, 孫梓暄, 李廣宏, 等. 三種外源激素對(duì)白背飛虱翅型分化的影響[J]. 生態(tài)學(xué)報(bào), 2008, 28 (12): 5994-5998]

Zhang SD, Wu FM, Li Z,etal. Effects of nucleopolyhedrovirus infection on the development ofHelicoverpaarmigera(Lepidoptera: Noctuidae) and expression of its 20-hydroxyecdysone-and juvenile hormone-related genes [J].FloridaEntomologist, 2015, 98 (2): 682-689.

Zibaee A, Zibaee I, Jalali Sendi J.A juvenile hormone analog, pyriproxifen, affects some biochemical components in the hemolymph and fat bodies ofEurygasterintegricepsPuton (Hemiptera: Scutelleridae) [J].PesticideBiochemistryandPhysiology, 2011, 100 (3): 289-298.

Researchadvancesoneffectsandmechanismofinsectbaculovirusmultiplicationpromotedbyjuvenilehormone

LI Guang-Hong, CHEN Jie, LIU Ting-Ting, WANG Fang-Hai*

(State Key Laboratory for Biocontrol and Institute of Entomology, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510275, China)

s: Juvenile hormone of insects plays an important role in regulating the growth and development of insects, and also has a role in promoting multiplication of insect baculovirus. This review is focused on effects and mechanism of insect baculovirus multiplication promoted by Juvenile hormone. Now it is thought that the main mechanism of insect baculovirus multiplication promoted by juvenile hormone is to extend the host larva stage, improving the host larva food intake and food conversion rate. In the future, we should explore the epigenetic mechanisms of insect baculovirus multiplication promoted by juvenile hormone basing on DNA methylation.

Juvenile hormone; baculovirus; multiplication; DNA methylation

李廣宏，陳杰，劉婷婷，等.保幼激素促進(jìn)昆蟲(chóng)桿狀病毒增殖效果及機(jī)制的研究進(jìn)展[J].環(huán)境昆蟲(chóng)學(xué)報(bào)，2017,39(5):977-982.

Q965;S476

A

1674-0858(2017)05-0977-06

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(30170628)；廣東省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2015A030313114)

李廣宏，男，1964年生，博士，研究方向?yàn)槔ハx(chóng)病理，E-mail：lsslgh@ mail.sysu.edu.cn

*通訊作者Author for correspondence, E-mail: lsswfh@mail.sysu.edu.cn

Received: 2016-09-16; 接受日期Accepted: 2016-12-20