曹鷗婕

（云南省曲靖市第一人民醫(yī)院，云南 曲靖 655000）

結核感染T細胞檢測在結核病診斷中的意義

曹鷗婕

（云南省曲靖市第一人民醫(yī)院，云南 曲靖 655000）

目的分析結核病診斷中結核感染T細胞檢測的意義。方法選擇本院2015年10月至2017年4月接收的經(jīng)影像學檢查及組織病理學檢查確診的結核病患者117例，分別應用結核感染T細胞檢測、涂片抗酸染色與聚合酶鏈式反應（PCR）熒光探針檢測，對比三種方法診斷準確率。結果結核感染T細胞檢測診斷準確率高于涂片抗酸染色及PCR熒光探針，且PCR熒光探針檢測診斷準確率高于涂片抗酸染色，均具有統(tǒng)計學差異（P＜0.05）。結論結核病診斷中，結核感染T細胞檢測可進一步提升檢出率及診斷準確率，具有較高的臨床應用價值。

結核感染T細胞檢測；結核??；診斷；意義

0 引言

在全球范圍內，成年人傳染性疾病死亡原因中，首要的即為結核病。結核病主要的引發(fā)原因為結核分歧桿菌感染，治療該疾病時，快速、準確的診斷具有十分重要的作用?，F(xiàn)階段，臨床診斷結核病時，金標準為細菌學檢查及病理學檢查，但細菌學檢查法需要較長的時間，而且高要求實驗室，不適合作為常規(guī)檢驗方法[1]。研究表明，結核病診斷中應用結核感染T細胞檢測方法后，可提升診斷準確率。本院以經(jīng)病理組織學檢查確診的結核病患者為研究對象，分析結核感染T細胞檢測的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院2015年10月至2017年4月接收的經(jīng)影像學檢查及組織病理學檢查確診的結核病患者117例，男61例，女56例；年齡32-76歲，平均（48.6±2.8）歲；繼發(fā)型肺結核70例，結核性胸膜炎21例，淋巴結核10例，腎結核8例，結核性腹膜炎4例，結核性腦膜炎4例。納入標準[2]：（1）符合結核病的診斷標準；（2）經(jīng)影像學檢查、組織病理學檢查確診；（3）癥狀表現(xiàn)均具有典型性，如咳嗽、咯血、乏力等；（4）患者及家屬均對本研究知情。排除標準：（1）肝腎伴有嚴重損害；（2）近期使用免疫抑制劑；（3）人類免疫缺陷病毒抗毒檢測結果顯示為陽性。

1.2 方法

所有患者均接受結核感染T細胞檢測、涂片抗酸染色與PCR熒光探針檢測，具體方法如下：

表1 三種檢測方法診斷準確率比較[n（%）]

（1）結核感染T細胞檢測。采集患者靜脈血時，利用綠色真空采血管，血量至少4 ml。采集后2 h內，向本底對照培養(yǎng)管、測試培養(yǎng)管、陽性對照培養(yǎng)管中分別加入全血，于37℃恒溫箱中放置，給予培養(yǎng)，完成后離心10 min，速度3000-5000 r/min，接著開展酶聯(lián)免疫吸附試驗。檢測吸光度時，采用酶標儀，標準曲線確定后，線性回歸方程計算出來，計算出血漿γ-干擾素含量。分析結核感染T細胞檢測結果時，以淋巴細胞培養(yǎng)分別與干擾素（刺激水平T）、干擾素（基礎水平N）的和、兩個和的差值為依據(jù)。

（2）涂片抗酸染色檢測。清晨時，采集患者濃痰樣本，或胸腹腔積液、尿液等非呼吸道樣本。如采集濃痰標本，應先讓患者理應清水漱口，之后指導患者用力咳嗽，以將呼吸道深部痰液咳出1-2口，收集后放置在收集器中，加蓋，立即送到檢驗科中。若采集的為非呼吸道樣本，需離心處理10 min，速度3000 r/min，于兩根試管中分裝標本，其中一管上清液全部取出，蒸餾水加入其中后，充分搖勻，另外一根沉淀圖涂片直接進行。

（3）PCR熒光探針檢測。選擇熒光雙標記探針與PCR引物一對，與引物擴增區(qū)域中間的一段DNA模板特異性結合。收集標本時，包含痰液、腦脊液、胸腹水。以試劑盒要求為參照，對標準進行相應的處理，向標本中加入DNA提取液，離心10 min，速度 3000-5000 r/min，2μl上清液加入PCR反應液中，循環(huán)處理利用PCR儀進行。

1.3 觀察指標

觀察三種檢測方法結果的陽性情況，即結核分歧桿菌感染情況。（1）結核感染T細胞檢測：N低于8 IU/ml，T-N在0.35 IU/ml之上且比25%N大時，檢測結果為陽性，否則為陰性；（2）涂片抗酸染色檢測：油鏡下，若抗酸桿菌可以被觀察到，檢測結果為陽性，觀察不到結果為陰性；（3）PCR熒光探針檢測：樣本CT=37時，檢測結果為陽性，樣本CT＞37時給予復檢，復檢CT＜40結果為陽性，＞40為陰性[3-5]。

1.4 統(tǒng)計學分析

采用SPSS 18.0統(tǒng)計分析，數(shù)（n）和率（%）表示計數(shù)資料，利用 檢驗，P＜0.05表明差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

結核感染T細胞檢測診斷準確率高于涂片抗酸染色及PCR熒光探針，且PCR熒光探針檢測診斷準確率高于涂片抗酸染色，均具有統(tǒng)計學差異（P＜0.05），具體見表 1。

3 討論

近年來，我國明顯的提升結核病的發(fā)病率，對居民身體健康及生活質量均產(chǎn)生嚴重影響。及早發(fā)現(xiàn)結核病患者及潛伏感染患者后，有利于對結核病傳染源有效控制，使其傳播途徑被切斷[6]。目前，臨床診斷結核病時，常用方法包含細菌培養(yǎng)、痰菌涂片抗酸染色法等，痰菌涂片抗酸染色法不需要較高的技術及特殊的儀器設備，但漏檢較易發(fā)生，而且鏡檢需連續(xù)多次進行，同時，此種方法的敏感性過低，對死菌及活菌無法區(qū)分，即使抗酸桿菌未能發(fā)現(xiàn)，并不能說明結核感染一定不存在；鑒定結核分枝桿菌時，細菌培養(yǎng)方法的準確率比較高，可對菌種進一步的鑒定，并開展藥敏試驗，但檢測需要長時間的進行，不利于早期診斷[7]。另外，PCR熒光探針檢測也為比較常用的方法，盡管提高了陽性檢出率，但假陽性率較高，影響診斷結果的準確性[8]。由于上述方法的檢測結果均不理想，國內外一直致力于尋找更為可靠的檢測方法，以提升結核病的診斷準確率。經(jīng)研究，學者提出，結核病診斷時，結核感染T細胞檢測具有良好的診斷結果[9]。結核分歧桿菌感染后，特異性T淋巴細胞會在人體中形成，存在于外周血中，與結合抗原再次接觸后，其被激活，并將γ-干擾素分泌出來，而結核感染T細胞檢測時，即是利用上述變化[10]。結核感染T細胞檢測過程中，使用結核分歧桿菌特異抗原作為試劑盒，對待測全血產(chǎn)生刺激，經(jīng)培養(yǎng)后，特異性T細胞免疫應答產(chǎn)生，如果感染并不是結核分歧桿菌引起，可將其排除，同時，對干擾素釋放水平定量分析后，可對結核分歧桿菌感染情況作出判斷，提升診斷的準確性[11]。本研究結果顯示，結核感染T細胞檢測的陽性率明顯高于另外兩種檢測方法。

綜上所述，臨床診斷結核病時，結核感染T細胞檢測具有較高的診斷準確率，可盡早的發(fā)現(xiàn)結核病，及時做出控制，避免結核病傳播感染，臨床應用價值較大，應廣泛的推廣于臨床當中。

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Significance of Tuberculosis Infected T-cells Detection in Tuberculosis Diagnosis

CAO Ou-jie
(Qujing City the First People's Hospital of Yunnan, Qujing, Yunnan, 655000)

ObjectiveTo analyze significance of tuberculosis infected T cells detection in tuberculosis diagnosis.MethodsChoose 117 cases tuberculosis patients diagnosed by imaging and histological examination

in our hospital from October 2015 to April 2017, carry on tuberculosis infected T cells detection, smear acid-fast staining and polymerase chain reaction (PCR) fluorescent probe detection, compare accuracy of three diagnosis methods.ResultsAccuracy of tuberculosis infected T cells detection was higher than smear acid-fast staining and PCR fluorescent probe,and diagnostic accuracy of PCR fluorescent probe was higher than smear acid fast staining, difference showed statistical significance(P＜0.05).ConclusionTuberculosis infected T cells detection can improve detection rate and diagnostic accuracy further of tuberculosis diagnosis, which has high clinical value.

T cell detection of tuberculosis infection; Tuberculosis; Diagnosis; Significance

10.19335/j.cnki.2096-1219.2017.15.005

曹鷗婕，女，云南省昆明人，畢業(yè)于昆明醫(yī)學院，主治醫(yī)師，本科，研究方向：傳染病。