徐沛東，朱植銀，黃加誠，肖永良，謝遠(yuǎn)芳，魏方林

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新型生物農(nóng)藥棘孢木霉菌防治辣椒疫病應(yīng)用研究

徐沛東1,2，朱植銀1，黃加誠1，肖永良2，謝遠(yuǎn)芳2，魏方林2

(1. 江西勁農(nóng)化工有限公司，江西九江 332500；2. 江西省農(nóng)藥工程技術(shù)研究中心，江西南昌 330096）

通過室內(nèi)盆栽試驗(yàn)和大田試驗(yàn)驗(yàn)證3億CFU/g棘孢木霉菌WP對辣椒疫病的防控效果。盆栽試驗(yàn)結(jié)果：3億CFU/g棘孢木霉菌WP用量2 000倍液、3 000倍液灌根處理防治辣椒疫病，藥后7~21 d防效分別為91%~100%、87%~93%，同類競品3億CFU/g哈茨木霉菌制劑2 000倍液防效80%~93%。大田試驗(yàn)結(jié)果：藥后15 d、30 d，3億CFU/g棘孢木霉菌WP灌根施藥的防效均顯著高于噴霧施藥，相同用藥方式下3億CFU/g棘孢木霉菌WP用量2 000倍液防效（97%、89%）高于3億CFU/g哈茨木霉菌WP 2 000倍液的防效（91%、85%），3億CFU/g哈茨木霉菌WP灌根處理藥后30 d的防效高于化學(xué)藥劑烯酰嗎啉效果（90%），表明該生物藥劑持效期較長。

生物農(nóng)藥；棘孢木霉菌；辣椒疫??；防效

辣椒疫病是由辣椒疫霉菌（L.）引起的，它是世界范圍內(nèi)的一種毀滅性病害[1]。辣椒疫病在辣椒的整個生育期均可發(fā)生，根、莖、葉、果實(shí)均可發(fā)病，發(fā)病周期短、傳播速度快，是造成辣椒嚴(yán)重減產(chǎn)的重要土傳性病害[2]。疫病高發(fā)期，3~5 d即可造成辣椒全株死亡，發(fā)生嚴(yán)重的田塊死秧率達(dá)30%以上，甚至全田死亡，極大的損害了農(nóng)民的收益[3]。目前，辣椒疫病的防治主要采用種植抗病品種和化學(xué)防治等方法。化學(xué)防治是控制辣椒疫霉菌的重要技術(shù)，且見效最快。但是，化學(xué)殺菌劑的大量使用嚴(yán)重影響了環(huán)境安全和食品安全。同時，辣椒疫霉菌對化學(xué)殺菌劑的抗性發(fā)展迅速[4]。因此，生物防治已經(jīng)慢慢發(fā)展成為防治辣椒疫病的重要措施。

木霉菌（spp.）是一類被研究和應(yīng)用較早的生防菌。木霉菌可以有效防治子囊菌、擔(dān)子菌、卵菌綱等多種植物真菌，例如齊整核菌() ,腐霉菌(spp)、立枯絲核菌()、鐮刀菌(spp.)等病原菌引起的瓜類枯萎病、水稻紋枯病、棉花立枯病、辣椒的白絹病以及番茄的碎倒病等植物病害[5]。目前木霉菌類形成商品且銷售最多的是哈茨木霉菌（），產(chǎn)品商標(biāo)為美國“拜沃”[4]。據(jù)報道，棘孢木霉菌（）對辣椒疫病有很高的拮抗作用，可以通過重寄生、代謝產(chǎn)物抑制孢子囊產(chǎn)生和游動孢子釋放來抑制疫霉菌活性，達(dá)到防控辣椒疫病的目的[6-7]。目前，棘孢木霉菌在國內(nèi)尚未形成正規(guī)產(chǎn)品。筆者開展本次試驗(yàn)，旨在研究3億CFU/g棘孢木霉菌WP對辣椒疫病的防治效果及其應(yīng)用技術(shù)，為辣椒疫病的生物防治提供新的優(yōu)秀產(chǎn)品。

1 材料與方法

1.1 室內(nèi)盆栽試驗(yàn)

1.1.1 供試藥劑、菌種及作物 辣椒疫霉由浙江農(nóng)林大學(xué)農(nóng)業(yè)與食品科學(xué)院惠贈；供試藥劑3億CFU/g棘孢木霉菌WP，由江西正邦生物化工有限責(zé)任公司研究所配制[8]，對照藥劑3億CFU/g哈茨木霉菌WP（美國“拜沃”）和50%烯酰嗎啉WG為市購；供試?yán)苯肥匈徲酌?，品種為常規(guī)感病品種“新育22號尖椒”。

1.1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)設(shè)4個藥劑處理，1個清水對照，每個處理做4次重復(fù)，小區(qū)面積8棵辣椒/盆。具體處理，處理1-5分別為：3億CFU/g棘孢木霉菌WP 3 000倍液、3億CFU/g棘孢木霉菌WP 2 000倍液、3億CFU/g哈茨木霉菌WP 2 000倍液、50%烯酰嗎啉WG 1 500倍液、清水對照，施藥方法每株灌根50 mL藥液。

1.1.3 接種體制備 辣椒疫霉菌接種到V8培養(yǎng)基[9]上放置在人工氣候培養(yǎng)箱內(nèi)，25 ℃黑暗培養(yǎng)3 d，光照培養(yǎng)3 d，產(chǎn)生孢子囊后用無菌水沖洗平板，將孢子囊液放置4 ℃、30 min誘導(dǎo)游動孢子產(chǎn)生，無菌水稀釋孢子液至1×105個/mL，待用[10]。

1.1.4 盆栽試驗(yàn)方法及病情調(diào)查 2016年4月20日將購買的辣椒苗栽種在36 cm×58 cm的盆栽盆內(nèi)，8棵苗/盆，本次試驗(yàn)栽種40盆。5月1日根據(jù)試驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行施藥。5 d后在辣椒主根處接種辣椒疫霉菌，每株接種1×105個/mL游動孢子懸浮液3 mL[11]。接種辣椒疫霉菌后7 d、14 d、21 d調(diào)查辣椒疫病的病情指數(shù)，分級標(biāo)準(zhǔn)如下[5]：0級，無?。?級，僅有1~2片葉片萎蔫或水浸狀；3級，50%以下的葉片萎蔫，或1~2片葉萎蔫但莖變黑褐色而不溢縮；5級，50%以上的葉片全萎蔫，或莖基部變色乃至輕微溢縮但不倒伏；7級，葉片全萎蔫，莖基部褐變，溢縮而直立或倒伏而不枯死；9級，植株枯死而呈細(xì)線狀。藥效計(jì)算方法：病情指數(shù)/%=∑(各級病株數(shù)×相對級值)/(調(diào)查總株數(shù)×9)×100；防效/%=(空白對照區(qū)病指-處理區(qū)病指)/(空白對照區(qū)病指)×100。

1.2 田間藥效試驗(yàn)

1.2.1 試驗(yàn)材料及環(huán)境 試驗(yàn)安排在江西省南昌縣武陽鎮(zhèn)蔬菜基地的塑料大棚進(jìn)行。試驗(yàn)地為辣椒疫病常發(fā)田塊。2016年5月6日進(jìn)行移植，移栽時辣椒苗齡50 d，667 m2移栽3 000棵。各試驗(yàn)小區(qū)的土壤類型、栽培條件及水肥管理等均勻一致。

1.2.2 試驗(yàn)方法 辣椒定植后15 d進(jìn)行施藥處理，試驗(yàn)設(shè)7個藥劑處理，1個清水對照，每個處理作4次重復(fù)，小區(qū)面積25 m2，小區(qū)隨機(jī)排列。具體處理如下[12]，處理1-4分別為：3億CFU/g棘孢木霉菌WP 3 000倍液、3億CFU/g棘孢木霉菌WP 2 000倍液、3億CFU/g哈茨木霉菌WP 2 000倍液、50%烯酰嗎啉WG 1 500倍液，進(jìn)行灌根處理，每株灌窩200 mL；處理5-7分別為：3億CFU/g棘孢木霉菌WP 600倍液、3億CFU/g棘孢木霉菌WP 300倍液、50%烯酰嗎啉WG 800液，進(jìn)行莖葉噴霧。藥后15 d、30 d對各個小區(qū)辣椒疫病的發(fā)生情況進(jìn)行調(diào)查，并計(jì)算病情指數(shù)和防效。

1.2.3 田間試驗(yàn)調(diào)查及計(jì)算方法 調(diào)查方法參照農(nóng)藥藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則[13]。小區(qū)內(nèi)隨機(jī)選取5點(diǎn)，每點(diǎn)調(diào)查5株辣椒，記錄病株數(shù)、死株數(shù)或明顯枯萎的植株數(shù)。分級方法（按癥狀類型分級）：0級為健康無病；1級為地上部僅葉果有病斑；3級為地上莖枝有褐腐斑；5級為莖基部有褐腐斑；7級為地上莖、枝與莖基部均有褐腐斑，并且部分枝條枯死；9級為全株枯死。藥效計(jì)算方法同上。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)盆栽試驗(yàn)

由表1可知，棘孢木霉菌制劑對辣椒疫病有很好的防控作用，預(yù)防效果顯著，棘孢木霉制劑藥后7~14 d防效與對照哈茨木霉和烯酰嗎啉相比無顯著性差異；藥后21 d，棘孢木霉制劑的防效顯著高于烯酰嗎啉，且同劑量下棘孢木霉制劑效果優(yōu)于哈茨木霉制劑。

表1 棘孢木霉制劑對防治辣椒疫病盆栽試驗(yàn)結(jié)果

同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示<0.05水平下差異顯著，下同。

2.2 田間藥效試驗(yàn)防效

由表2可知，灌根處理時，藥后15 d，棘孢木霉制劑對辣椒疫病的防治效果達(dá)90%以上，與同類生物農(nóng)藥哈茨木霉菌和化學(xué)藥劑烯酰嗎啉無顯著性差異；藥后30 d，棘孢木霉菌對辣椒疫病的防效仍達(dá)85%以上，持效期較長，且顯著優(yōu)于對照藥劑烯酰嗎啉。

噴霧處理時，棘孢木霉菌對辣椒疫病藥后15 d的防效略低于烯酰嗎啉，但無顯著性差異；藥后30 d，棘孢木霉菌的防效顯著高于烯酰嗎啉，表明棘孢木霉菌的持效期優(yōu)于烯酰嗎啉。

綜上所述，棘孢木霉菌對防治辣椒疫病效果優(yōu)異，且持效期較長。施藥方式灌根優(yōu)于噴霧。

表2 棘孢木霉制劑防治辣椒疫病田間效果結(jié)果

3 討 論

木霉菌是一種對作物安全、對病原菌高效拮抗的生防菌株，它能通過重寄生、產(chǎn)生溶解酶、激發(fā)免疫反應(yīng)等一系列拮抗作用，抑制或殺死病原菌[14]。木霉菌分生孢子可以在自然界中大量增殖因而達(dá)到對病原菌長期控制的效果[8]。棘孢木霉菌同樣具有極高的存活潛力和適應(yīng)各種生態(tài)環(huán)境的能力，可以廣泛存在于土壤、植物根際和葉面[15]。表2可以看出，3億CFU/g棘孢木霉菌WP在同等劑量下對辣椒疫病的防治效果優(yōu)于3億CFU/g哈茨木霉菌WP（美國“拜沃”）。因此，試驗(yàn)測定的3億CFU/g棘孢木霉菌WP具有很大的應(yīng)用價值和市場推廣潛力。

3億CFU/g棘孢木霉菌WP對辣椒疫病的防控效果顯著，且持效期長達(dá)30 d以上，優(yōu)于對照藥劑烯酰嗎啉。該生物藥劑的施藥方式以灌根或噴淋莖基部為主，施藥量2 000~3 000倍液。同時，棘孢木霉菌具有分生孢子萌發(fā)和侵染受外界環(huán)境因素的影響較大、對病害控制的速效性較差的缺點(diǎn)，棘孢木霉菌和化學(xué)藥劑復(fù)配以提高速效性有待進(jìn)一步深入的研究。

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Application ofto Control Pepper Blight

XU Pei-dong1, 2, ZHU Zhi-geng1, HUANG Jia-cheng1,XIAO Yong-liang2, XIE Yuan-fang2, WEI Fang-lin2

(1. Jinnong Chemical Co., Ltd of Jiangxi, Jiujiang 332500, Jiangxi, China; 2. Jiangxi Research Centre for Pesticide Engineering Technology, Nanchang 330096, China)

Indoor potting experiments and field trails were conducted to study the control effects of 300 million cfu/g ofWP on Pepper blight. Results from potting tests indicated the control efficiency had no significant difference between root-irrigating the liquid of 300 million cfu/gWP diluted to 2 000-3 000 times after 7-21 d and the competing producton Pepper blight. On the other hand, field trails revealed that the control efficiency of root-irrigating was significant better than spaying of 300 million cfu/gWP after 15 and 30 days. And under the same circumstances,performed slightly better thanthe control effect of 30 d of 300 million cfu/g ofWP was equivalent to that of irrigating dimethomorph, and the duration of efficacy was better than dimethomorph.

biological pesticide;; pepper blight; control efficiency

S436.418.1

A

2095-3704（2017）03-0172-04

2017-07-25

江西省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（20161BBF60020）

徐沛東，碩士，主要從事生物農(nóng)藥及化學(xué)殺菌劑產(chǎn)品開發(fā)、生測試驗(yàn)工作，xupeidong@zheng bang.com。

徐沛東, 朱植銀, 黃加誠, 等. 新型生物農(nóng)藥棘孢木霉菌防治辣椒疫病應(yīng)用研究[J]. 生物災(zāi)害科學(xué), 2017, 40(3): 172-175.