李彥宏,胡深強(qiáng),王 杰,賈先波,賴(lài)松家
(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物遺傳育種研究所,四川 成都 611130)
家兔ANGPTL4基因多態(tài)性及其與生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)性分析
李彥宏,胡深強(qiáng),王 杰,賈先波,賴(lài)松家*
(四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物遺傳育種研究所,四川 成都 611130)
【目的】探究家兔血管生成素樣蛋白4(angiopoietin-like protein 4, ANGPTL4)基因第6外顯子內(nèi)的多態(tài)性及其與家兔部分生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)性。【方法】采用PCR產(chǎn)物測(cè)序法檢測(cè)家兔ANGPTL4基因外顯子內(nèi)的單核苷酸多態(tài)性(SNPs)位點(diǎn),并應(yīng)用PCR-RFLP酶切分型技術(shù)對(duì)3個(gè)家兔品種(天府黑兔、伊拉兔和新西蘭兔)共495個(gè)群體樣本進(jìn)行酶切分型,分析SNPs與3個(gè)家兔品種部分生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)性?!窘Y(jié)果】ANGPTL4基因第6外顯子中共檢測(cè)發(fā)現(xiàn)3個(gè)遺傳變異位點(diǎn)(c.823 G>A為非同義突變,c.867 T>C和c. 975 T>C均為同義突變),且完全處于連鎖狀態(tài) (r2≥0.75),由此選擇c.823 G>A位點(diǎn)作為遺傳效應(yīng)分析位點(diǎn)。關(guān)聯(lián)性分析得出3個(gè)家兔群體內(nèi)AG基因型和GG基因型與3個(gè)品種部分生長(zhǎng)性狀具有較高的遺傳效應(yīng)?!窘Y(jié)論】ANPGTL4基因可以是與家兔生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)的候選基因,以此為培育肉兔新品種提供輔助分子遺傳選擇依據(jù)。
ANGPTL4基因;多態(tài)性;生長(zhǎng)性狀;關(guān)聯(lián)性分析;家兔
【研究意義】血管生成素樣蛋白4(Angiopoietin-like protein4,ANGPTL4)被許多研究證實(shí)并歸類(lèi)于類(lèi)血管生成素家族,是調(diào)控脂肪細(xì)胞分化的重要信號(hào)分子。而在家兔ANGPTL4基因研究中已被測(cè)出全長(zhǎng)為4971 bp,且含7個(gè)外顯子,同時(shí)可以編碼411個(gè)氨基酸。早期研究發(fā)現(xiàn)ANGPTL4蛋白的表達(dá)具有選擇性,分別在脂肪組織和胚胎中集中表達(dá)。而在不同來(lái)源的脂肪組織中表達(dá)也不一樣,如只表達(dá)于內(nèi)臟脂肪組織,其他器官脂肪組織(心臟、肝臟、肺、腎)少量表達(dá)[1]。ANGPTL4對(duì)脂肪組織的形成起抑制作用,其原因有可能是ANGPTL4蛋白產(chǎn)生水解作用,進(jìn)一步纏繞折疊成卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域和纖維蛋白原樣結(jié)構(gòu)的小片段產(chǎn)物,從而引起脂肪細(xì)胞分化發(fā)生改變[2]。脂肪酸的氧化和解耦聯(lián)作用已被證實(shí)對(duì)脂肪組織降解起重要作用。在脂肪組織形成的過(guò)程中,過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(PPAR-α、PPAR-β和PPAR-γ)可以在脂肪組織中產(chǎn)生解耦聯(lián)作用降低脂質(zhì)的含量,而ANGPTL4基因在脂肪組織中過(guò)表達(dá)后可以通過(guò)調(diào)節(jié)脂肪酶的活性去調(diào)節(jié)脂肪代謝,從而調(diào)節(jié)器官組織內(nèi)的脂肪酸和甘油三酯的形成,使組織內(nèi)脂肪含量得到有效降解[3-5]。【前人研究進(jìn)展】Yoon等[6]的研究表明ANGPTL4是PPAR-α和PPAR-γ的下游因子,對(duì)血管生成和代謝具有重要促進(jìn)作用。在肝臟、心臟、骨骼肌和腸中, PPAR-α、PPAR-γ和缺氧誘導(dǎo)因子HIF-1(hypoxiain duciblefa)可以通過(guò)激活A(yù)NGPTL4基因的轉(zhuǎn)錄,調(diào)控脂類(lèi)物質(zhì)的代謝[7]。ANGPTL4基因的cSNPs位點(diǎn)已在人類(lèi)和小鼠中發(fā)現(xiàn)其與體脂率的高低有明顯的相關(guān)性。legry等[4]在人的研究中發(fā)現(xiàn)ANGPTL4基因rs4076317位點(diǎn)的具有多態(tài)性,并與青年的體脂率顯著性相關(guān)聯(lián),這些多態(tài)性位點(diǎn)均與PPARγ表達(dá)高低有關(guān)。Kim等[8]也在小鼠的中發(fā)現(xiàn)ANGPTL4基因表達(dá)水平與小鼠的體重升高呈正相關(guān)?!颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】因此,ANGPTL4基因?qū)?dòng)物機(jī)體的脂肪能量代謝以及生長(zhǎng)發(fā)育中起重要作用。由此ANGPTL4基因可能與家兔的生長(zhǎng)性狀可能存在密切聯(lián)系?!緮M解決關(guān)鍵問(wèn)題】由此檢測(cè)了家兔ANGPTL4基因的遺傳變異位點(diǎn),并分析了與3個(gè)家兔品種生長(zhǎng)性狀的聯(lián)系,為家兔分子標(biāo)記輔助育種提供理論依據(jù)。
1.1 試驗(yàn)材料
本試驗(yàn)所選3個(gè)肉兔品種: 新西蘭兔172只、天府黑兔165只、伊拉兔158只。所有試驗(yàn)家兔均隨機(jī)從四川農(nóng)業(yè)大學(xué)教學(xué)基地選取健康無(wú)疾病、3代之內(nèi)無(wú)親緣關(guān)系的家兔。所選3個(gè)家兔群體的飼養(yǎng)和管理均保持一致,并做好防疫工作。所購(gòu)飼料購(gòu)自四川金川農(nóng)飼料有限公司的肉兔全價(jià)顆粒飼料,試驗(yàn)期間家兔自由采食飲水,并測(cè)定35、42、56、70和84日齡5個(gè)階段的個(gè)體體重?cái)?shù)據(jù)。試驗(yàn)結(jié)束后剪取家兔部分耳組織塊,放入添加有75 %酒精的1.5 mL的無(wú)菌EP管內(nèi),并盡快置于-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
1.2 基因組DNA的提取
本試驗(yàn)使用DNA試劑盒(TIANGEN, Beijing)對(duì)3個(gè)家兔品種群體內(nèi)共計(jì)495份樣本的DNA進(jìn)行了提取,并使用核酸蛋白分析儀分析DNA濃度(OD260/OD280在1.7~1.8)和1.5 %瓊脂糖電泳實(shí)驗(yàn)分析DNA的提取效果,提取完畢使其儲(chǔ)存于-20 ℃低溫冰箱備用。
1.3 引物設(shè)計(jì)和PCR擴(kuò)增
參照在NCBI上家兔ANGPTL4基因的DNA序列(GenBank 登錄號(hào):NW_003159393),利用Primer Premier5.0軟件對(duì)ANGTL4基因外顯子6設(shè)計(jì)引物(表1)。
隨機(jī)選取30個(gè)DNA樣本進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增體系為10 μl,其中包含5 μl 2×TaqPCR MasterMix,F(xiàn)/R引物各0.4 μl,DNA模板1 μl以及3.2 μl滅菌超純水,PCR反應(yīng)程序?yàn)椋?5 ℃預(yù)變性5 min,95 ℃變性30 s,退火30 s,72 ℃延伸50 s,38個(gè)循環(huán);72 ℃延伸10 min,12 ℃保存。以上引物和所得PCR擴(kuò)增產(chǎn)物均由成都市擎科生物有限公司進(jìn)行引物的合成和產(chǎn)物的測(cè)序。
1.4 PCR產(chǎn)物測(cè)序和SNP位點(diǎn)篩選
隨機(jī)選取3個(gè)家兔品種群體內(nèi)30個(gè)DNA樣本,對(duì)ANGPTL4基因的第6外顯子進(jìn)行PCR擴(kuò)增,然后收集樣品的PCR產(chǎn)物在成都市擎科生物有限公司進(jìn)行純化驗(yàn)證,并使用SeqMan軟件和Chromas軟件分析變異位點(diǎn)。應(yīng)用Haplo View軟件使所測(cè)SNP位點(diǎn)的連鎖不平衡得到確定。
1.5 PCR-RFLP基因分型
本試驗(yàn)使用在線(xiàn)軟件WatCut(http://watcut.uwaterloo.ca/template.php?act=snp_new)對(duì)所需限制性?xún)?nèi)切酶的進(jìn)行初步選擇,并使用Primer Premier5.0確定其特異性,由此本試驗(yàn)優(yōu)先選擇Cfr42I酶(SacII)(貨號(hào):ER0202)(購(gòu)自賽默飛世爾科技公司)使遺傳變異位點(diǎn)得到準(zhǔn)確的酶切分型結(jié)果。酶切體系為10 μl:10×FastDigest Green Buffer 1.0 μl,20×Oligonucleotide(0.01 mM) 0.5 μl,PCR產(chǎn)物3.0 μl,Cfr42I (SacII)酶 0.3 μl,ddH2O 5.2 μl。然后酶切體系輕輕搖勻離心后靜置于37 ℃恒溫水浴鍋中60~80 min,完畢后取出所得混合物,采用瓊脂糖凝膠電泳(1.5 %)檢測(cè)PCR產(chǎn)物片段酶切結(jié)果,并在膠圖上做好基因型標(biāo)記,以便用于統(tǒng)計(jì)分析。
表1 PCR引物引物信息
小寫(xiě)字母a、b和c分別代表c.823 G>A、c.867 T>C和c. 975 T>C The lowercase abc represent the sites c.823 G>A, c.867 T>C and c. 975 T>C, respectively圖1 ANGPTL4基因測(cè)序結(jié)果Fig.1 The sequencing consequence of ANGPTL4 gene
圖2 ANGPTL4蛋白結(jié)構(gòu)域預(yù)測(cè)Fig.2 The domain prediction of ANGPTL4 protein
1.6 數(shù)據(jù)處理
本試驗(yàn)使用SPSS 22.0軟件中的一般線(xiàn)性模型(general linear model,GLM)程序用于分析ANGPTL4基因的SNP位點(diǎn)與3個(gè)家兔品種的生長(zhǎng)性狀之間的遺傳效應(yīng),數(shù)據(jù)分析結(jié)果用最小二乘均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤(mean ± SE)表示。
Yijk=μ+Gi+Bj+Sk+eijk
其中:Yijk和Yjk代表個(gè)體生長(zhǎng)性狀測(cè)量值;μ代表群體平均數(shù);Gi代表基因型效應(yīng);Bj代表品種效應(yīng);Sk代表性別效應(yīng);eijk代表隨機(jī)誤差。
2.1 ANGPTL4基因SNP位點(diǎn)檢測(cè)
如圖1所示,第6外顯子內(nèi)存在3個(gè)遺傳變異位點(diǎn)(c.823 G>A、c.867 T>C和c. 975 T>C),其中c.823 G>A為錯(cuò)義突變,c.867 T>C和c. 975 T>C均為同義突變。
2.2 家兔ANGPTL4基因遺傳位點(diǎn)分析
如圖2所示,3個(gè)遺傳變異位點(diǎn)(c.823 G>A,c.867 T>C和c. 975 T>C)均位于FBG結(jié)構(gòu)域中,這3個(gè)突變位點(diǎn)可能會(huì)對(duì)ANGPTL4蛋白的功能產(chǎn)生影響,由此需要進(jìn)一步對(duì)SNPs進(jìn)行連鎖平衡分析。
如圖3所示,c.823 G>A與c.867 T>C、c. 975 T>C處于完全連鎖狀態(tài),且具有相似的遺傳效應(yīng),其中c.823 G>A與其余兩個(gè)SNPs連鎖程度非常強(qiáng)(r2值分別為0.89和0.82)。由此本試驗(yàn)最后選擇c.823 G>A點(diǎn)作為ANGPTL4基因的候選SNP進(jìn)行后續(xù)研究。
2.3 PCR-RFLP分型
利用PCR-RFLP分別對(duì)天府黑兔、伊拉兔和新西蘭兔共計(jì)495份樣本DNA中ANGPTL4基因c.823 G>A位點(diǎn)進(jìn)行酶切分型。所使用限制性?xún)?nèi)切酶為Cfr42I (SacII)(貨號(hào):ER0202)購(gòu)于賽默飛世爾科技公司(Thermo Fisher Scientific)。使用1.5 %瓊脂糖凝膠電泳所得酶切分型結(jié)果如圖4所示,依次分別呈現(xiàn)GG基因型、AA基因型和AG基因型。
SNP1-3分別代表c.823 G>A、c.867 T>C和c. 975 T>CSNP1-3 represent c.823 G>A, c.867 T>C and c. 975 T>C圖3 ANGPTL4基因SNPs 連鎖不平衡分析Fig.3 Linkage disequilibrium analysis of SNPs in ANGPTL4 gene
2.4 家兔ANGPTL4基因SNP位點(diǎn)與生長(zhǎng)性狀的相關(guān)性
通過(guò)統(tǒng)計(jì)所得c.823 G>A位點(diǎn)的基因頻率、基因型頻率和遺傳參數(shù)及卡方檢驗(yàn)χ2的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。
如表2所示,c.823 G>A位點(diǎn)分別在3個(gè)家兔品種內(nèi)發(fā)現(xiàn)G和A等位基因和AA、AG和GG基因型,其中G等位基因和GG基因型均具有優(yōu)勢(shì)效應(yīng)。而c.823 G>A遺傳多態(tài)性位點(diǎn)在每個(gè)家兔群體內(nèi)的PIC均為中度多態(tài)(0.25
2.5 c.823 G>A位點(diǎn)與家兔生長(zhǎng)性狀的關(guān)聯(lián)性分析
對(duì)c.823 G>A位點(diǎn)與3個(gè)品種家兔群體樣本的35~84日齡階段的個(gè)體重進(jìn)行關(guān)聯(lián)性分析(表3),表明在天府黑兔群體中AG基因型樣本群體在5個(gè)生長(zhǎng)階段個(gè)體重顯著高于其它2個(gè)基因型,但GG群體日增重呈極顯著(P<0.01);在伊拉兔樣本群體內(nèi),AG型群體樣本的體重均值在70日齡階段高于其它兩個(gè),并且日增重高于AA(P<0.05)。而GG型個(gè)體在后期3個(gè)階段(56~84日齡)的體重均值高于AA型和AG型,且日增重極顯著(P<0.01);在新西蘭兔群體內(nèi),兩組樣本群體(AG型和GG型)在84日齡階段體重均值和日增重均呈顯著(P<0.05)。
圖4 ANGPTL4基因c.823 G>A位點(diǎn)酶切分型結(jié)果Fig.4 The typing result of ANGPTL4 gene c.823 G>A loci by RFLP
3.1 ANGPTL4基因多態(tài)性分析
本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)ANGPTL4基因的第6個(gè)外顯子中存在3個(gè)變異位點(diǎn)(c.823 G>A,c.867 T>C和c. 975 T>C)均位于ANGPTL4基因所特有的FBG結(jié)構(gòu)域,該結(jié)構(gòu)域位于纖維蛋白原中的β和γ鏈的C端,其分別由α、β和γ 3條多肽鏈的N端通過(guò)二硫鍵連接組成[9]。3條鏈的C端各自形成一個(gè)球狀區(qū)域,在血液凝集過(guò)程中凝集下游信號(hào)因子的作用,其中β和γ鏈的C端結(jié)構(gòu)域基本相同,即為FBG結(jié)構(gòu)域[10]。而這3個(gè)SNPs均位于FBG結(jié)構(gòu)域,由此推測(cè)SNPs對(duì)ANGPTL4蛋白結(jié)構(gòu)域的功能具有一定影響,從而對(duì)家兔生長(zhǎng)發(fā)育具有一定影響。而進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)3個(gè)SNPs位點(diǎn)(c.823 G>A、c.867 T>C和c. 975 T>C)高度連鎖,由此這3個(gè)位點(diǎn)具有相似的遺傳效應(yīng)。因此,本試驗(yàn)最終選擇非同義突變c.823 G>A位點(diǎn)作為候選SNP進(jìn)行后續(xù)研究。
表2 ANGPTL4基因SNP c.823 G>A位點(diǎn)基因頻率與基因型頻率
表3 ANGPTL4基因c.823 G>A位點(diǎn)對(duì)生長(zhǎng)性狀的遺傳效應(yīng)分析
注:35 W、42 W、56W、70 W和84 W分別表示35日齡、42日齡、56日齡、70日和84日齡體重;ADG表示35~84日齡平均日增重;小寫(xiě)字母(ab)和大寫(xiě)字母(AB)分別表示差異性顯著(P<0.05)和差異極顯著(P<0.01);TFBR、YLR和NZR分別表示天府黑兔、伊拉兔和新西蘭兔。
Note: 35 W, 42 W, 56, 70 W, and 84 W represent the body weight of 35, 42, 56, 70 and 84 days of age respectively; ADG represents the average daily gain from 28 to 84 days of age. Lower case letters (ab) and capital letters (AB) indicated significant difference (P<0.05) and significant difference (P<0.01); TFBR, YLR and NZR represent the rabbit breed Tianfu black rabbit, IRA rabbit and New Zealand rabbit, respectively.
以參照多態(tài)信息含量(polymorphism information content,PIC)指標(biāo)為依據(jù),對(duì)c.823 G>A位點(diǎn)在3個(gè)家兔品種內(nèi)的基因多態(tài)性分析表明該位點(diǎn)在各個(gè)群體中均表現(xiàn)為中度多態(tài)(0.25
3.2 ANGPTL4基因與家兔生長(zhǎng)性狀相關(guān)性分析
ANGPTL4基因在機(jī)體的生長(zhǎng)代謝過(guò)程中具有重要作用,其可以調(diào)節(jié)血管的生成、脂類(lèi)物質(zhì)的代謝以及糖類(lèi)代謝平衡[12]。侯飛等通過(guò)檢測(cè)多個(gè)牛品種(南陽(yáng)牛、郟縣紅牛、魯西牛等)的ANGPTL4基因編碼區(qū)發(fā)現(xiàn)存在4個(gè)遺傳變異位點(diǎn),其中,1422 T>C為錯(cuò)義突變,而其它3個(gè)均為同義突變。通過(guò)關(guān)聯(lián)性分析表明c. 1422 T>C位點(diǎn)多態(tài)性與不同牛品種的體重呈正相關(guān)[13]。張靜等通過(guò)檢測(cè)ANGPTL4基因非編碼區(qū)在廣靈大尾羊和小尾寒羊的遺傳變異位點(diǎn)分析發(fā)現(xiàn)存在8個(gè)SNPs,其中-1691 C>G和-577 T>G 2個(gè)顛換的等位基因頻率在品種之間存在顯著差異。而-1691 C>G和-1625 G>A均以正向超顯性遺傳方式影響綿羊尾長(zhǎng)、宰前體重和胴體重,而以負(fù)向超顯性效應(yīng)的方式影響廣靈大尾羊的屠宰率[14]。而在本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)家兔群體樣本中非同義突變c.823 G>A位點(diǎn)對(duì)3個(gè)家兔品種的后期增重具有較高的遺傳效應(yīng),2種基因型(AG和GG)在3個(gè)家兔品種中的增重優(yōu)勢(shì)明顯,且GG基因型所占群體的日增重極顯著(P<0.01)。因此,c.823 G>A位點(diǎn)與3個(gè)家兔品種的生長(zhǎng)發(fā)育相關(guān)性明顯。ANGPTL4基因的c.823 G>A位點(diǎn)使絲氨酸(Ser)→甘氨酸(Gly),從而有可能改變了ANGPTL4蛋白的構(gòu)象和功能。這Ser和Gly在人體內(nèi)屬于非必需氨基酸,而非必需氨基酸在生物代謝過(guò)程中也具有重要影響,其中Gly是一種抑制性較強(qiáng)的神經(jīng)遞質(zhì),在信息傳導(dǎo)過(guò)程中發(fā)揮重要作用。當(dāng)細(xì)胞收到刺激后,它通過(guò)對(duì)神經(jīng)傳導(dǎo)過(guò)程中的Na+/K+離子通道的啟閉,從而抑制細(xì)胞的信號(hào)傳導(dǎo)。而研究證實(shí)Gly與動(dòng)物細(xì)胞的免疫和應(yīng)激有密切聯(lián)系,其可能是通過(guò)抑制Ca+信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、阻止炎癥因子被激活、減少氧應(yīng)激反應(yīng)等其它協(xié)同保護(hù)機(jī)制[15-16]。因此,在家兔的能量代謝中,ANGPTL4基因c.823 G>A位點(diǎn)有可能直接或間接影響了基因的轉(zhuǎn)錄翻譯過(guò)程以及蛋白質(zhì)的構(gòu)象,進(jìn)一步使蛋白功能增強(qiáng),從而使家兔在不同的生長(zhǎng)階段的日增重起促進(jìn)作用[17-18],鑒于本試驗(yàn)所選取的品種和樣本量有限,其潛在的生物學(xué)效應(yīng)仍需進(jìn)一步研究。
ANGPTL4基因的第6外顯子上存在3個(gè)SNPs,其中c.823 G>A為非同義突變,c.867 T>C和c. 975 T>C均為同義突變,且3個(gè)位點(diǎn)完全連鎖。c.823 G>A遺傳變異分析發(fā)現(xiàn)存在A和G等位基因和AA、AG和GG基因型,其中G和GG均具有優(yōu)勢(shì)遺傳效應(yīng)。該c.823 G>A位點(diǎn)的關(guān)聯(lián)性分析表明2種基因型(AG和GG)與所選3個(gè)家兔群體樣本部分生長(zhǎng)性狀呈顯著(P<0.05),且GG基因型的平均日增重呈極顯著(P<0.01)。因此,ANGPTL4基因可以作為改良家兔生產(chǎn)性能的候選基因。
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PolymorphismsofANGPTL4GeneandItsAssociationwithGrowthTraitsinRabbits
LI Yan-hong, HU Shen-qiang, WANG Jie, JIA Xian-bo, LAI Song-jia*
(Institute of Animal Genetics and Breeding, Sichuan Agricultural University, Sichuan Chengdu 611130,China)
【Objective】 The aim of this study was to investigate the association between polymorphisms in the angiopoietin like protein 4 (ANGPTL4) gene and growth traits of domestic rabbits. 【Method】 The polymerase chain reaction (PCR) products were first screened for single nucleotide polymorphisms (SNPs) of rabbitANGPTL4 gene by direct DNA sequencing, and the PCR-restriction fragment length polymorphism (RFLP) assay was further used for genotyping of a total of 459 samples from three meat rabbit breeds (Tianfu Black, IRA and New Zealand rabbits). Thereafter, the association of polymorphisms in this gene with growth traits was evaluated. 【Result】 Our results showed that three SNPs, including a non-synonymous mutation c.823 G>A and two synonymous mutations c.867 T>C, and c. 975 T>C, were detected in exon 6 ofANGPTL4. Owing to a completely linkage relationship (r2≥ 0.75) among these three SNPs, only the c.823 G>A was selected for analysis of genetic effects. The association analysis of its genotypes with growth traits revealed that the genotypes of AG and GG were strongly correlated with some growth traits in three breeds of rabbits. 【Conclusion】 These data suggested thatANPGTL4 could be a candidate gene affecting rabbit growth and the SNP c.823 G>A might be used as a potential genetic marker in rabbit breeding.
ANGPTL4 gene; Polymorphism; Growth traits; Association analysis; Rabbit
1001-4829(2017)10-2382-06
10.16213/j.cnki.scjas.2017.10.037
2016-12-26
國(guó)家兔產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)(CARS-44-A-2)
李彥宏(1990-),男,碩士研究生,從事家兔遺傳育種研究方向,417590007@qq.com,*為通訊作者,E-mail: laisj5794@163.com。
S829.1
A
(責(zé)任編輯 李 潔)