戴遠(yuǎn)洋+宋鵬飛+王京

摘要：白癜風(fēng)是一種常見獲得性、進(jìn)展性、色素脫失性皮膚病，本病為因表皮黑素細(xì)胞被破壞導(dǎo)致的皮膚黏膜白斑，進(jìn)展可造成毛發(fā)的色素脫失。關(guān)于白癜風(fēng)發(fā)病的機(jī)制存在多種學(xué)說，其中以T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫學(xué)說最為人接受。T細(xì)胞是在胸腺中發(fā)育成熟的淋巴細(xì)胞，主要介導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答。近年關(guān)于白癜風(fēng)發(fā)病的相關(guān)T細(xì)胞亞群的研究主要集中在CD8+T細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞、Th17細(xì)胞和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）等。這些細(xì)胞在功能和（或）數(shù)量的變化，與白癜風(fēng)病情的發(fā)生發(fā)展有密切聯(lián)系。

關(guān)鍵詞：白癜風(fēng)；自身免疫疾病；細(xì)胞免疫；T細(xì)胞；T細(xì)胞亞群

中圖分類號：R758.4+1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1006-1959（2017）21-0020-03

Advances in the Study of Infiltrating T Cell Subsets in Skin Lesions of Vitiligo

DAI Yuan-yang1，SONG Peng-fei2，WANG Jing2

（1.Guangdong Medical University，Zhanjiang 524000，Guangdong，China；

2.The Eighth Hospital Affiliated to Sun Yat-sen University，Shenzhen 518000，Guangdong，China）

Abstract：Vitiligo is a common acquired，progressive，depigmentation of the skin，the skin leukoplakia disease is due to melanocytes destruction，can cause hair depigmentation progress.Mechanism of vitiligo has many kinds of theories，the theory of cellular immunity mediated by T lymphocytes is the most accepted.T cell is a mature cell development in the thymus，mainly mediated by cellular immunity.Recent studies related to T cell subsets on the pathogenesis of vitiligo is mainly focused on CD8+T cells，CD4+T cells，Th17 cells and regulatory T cells（Treg）.These cells in function and（or）the number of change is closely related with the occurrence and development of vitiligo disease.

Key words：Vitiligo；Autoimmune diseases；Cellular immunity；T cells；T lymphocyte subsets

白癜風(fēng)是一種以進(jìn)行性的色素脫失為主要特征的一類常見皮膚病。我國發(fā)病率在0.1%～2.7%， 多于兒童期或青年期發(fā)病，50%的患者發(fā)病年齡在20歲以內(nèi)，25%的患者發(fā)病小于14歲[1]。具體發(fā)病機(jī)制尚不清楚，大量研究表明，細(xì)胞免疫在白癜風(fēng)的發(fā)病機(jī)制中起著重要的作用，且以T淋巴細(xì)胞參與的細(xì)胞免疫研究最為突出[2]。T細(xì)胞是皮膚細(xì)胞免疫的主要效應(yīng)細(xì)胞，臨床上觀察到白癜風(fēng)患者常有皮損區(qū)T細(xì)胞及其亞群的數(shù)量和功能的變化。為進(jìn)一步探究白癜風(fēng)發(fā)病與T細(xì)胞亞群的關(guān)系，復(fù)習(xí)近年文獻(xiàn)，現(xiàn)將相關(guān)研究進(jìn)展總結(jié)如下。

1 白癜風(fēng)與CD8+T 細(xì)胞

CD8+T細(xì)胞效應(yīng)受自身主要組織相容性復(fù)合物（major histocompatibility complex，MHC）Ⅰ類分子的限制，進(jìn)一步刺激活化為細(xì)胞毒性T細(xì)胞，可特異性殺傷黑素細(xì)胞，在白癜風(fēng)發(fā)病中占有重要的地位。

在白癜風(fēng)皮損區(qū)，皮膚黑素細(xì)胞喪失的同時，常伴隨CD8+T淋巴細(xì)胞的浸潤，白癜風(fēng)患者皮損區(qū)CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)量、CD8+/CD4+比值均高于對照組[3]。在白癜風(fēng)患者皮損處進(jìn)行皮膚活檢發(fā)現(xiàn)：皮損中T細(xì)胞比率高于非皮損處，主要由CD8+T細(xì)胞和少量CD4+T細(xì)胞組成，大多存在于色素消退的邊緣，并同時存在CD8+T/CD4+T比值升高[4]。Vanden等[5]利用激光掃描共聚焦顯微鏡，觀察到CD8+T淋巴細(xì)胞浸潤到白癜風(fēng)皮損區(qū)表皮及真皮層，致使表-真皮連接受到損害及黑素細(xì)胞的丟失，直觀地論證了CD8+T淋巴細(xì)胞在白癜風(fēng)發(fā)病中起重要作用。

進(jìn)一步觀察發(fā)現(xiàn)，皮膚歸巢細(xì)胞毒性T細(xì)胞（skin-homing cytotoxic T cells，即CD8+-CLA+T 細(xì)胞）在白癜風(fēng)患者外周血中明顯減少[6]。當(dāng)CD8+細(xì)胞毒性 T 淋巴細(xì)胞表達(dá) CLA 時，在白癜風(fēng)皮損邊緣的表皮及真皮中CD8+-CLA+T 細(xì)胞明顯增加。在針對 Melan-A/MART1、酪氨酸酶及特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞反應(yīng)的血液檢測中發(fā)現(xiàn)，所有患者循環(huán)黑素細(xì)胞特異CD8+T細(xì)胞以高頻率出現(xiàn)，此類細(xì)胞表面表達(dá)皮膚歸巢受體（CLA）和IL-2受體，可表達(dá)穿孔素和顆粒酶，同時具有破壞黑素細(xì)胞以及歸巢能力[7]。

皮損局部浸潤的CD8+T淋巴細(xì)胞能特異性識別黑素細(xì)胞分化抗原， Mandelcorn-Monson 等[8]發(fā)現(xiàn)CD8+T淋巴細(xì)胞對黑素細(xì)胞抗原gp100的反應(yīng)性與白癜風(fēng)的活動進(jìn)展呈正相關(guān)性。Lang等[9]觀察發(fā)現(xiàn)人類白細(xì)胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）-A2限制性黑素細(xì)胞特異性CD8+T 淋巴細(xì)胞與白癜風(fēng)的活動進(jìn)展相關(guān)，可直接針對自身抗原Melan-A/MART-1 產(chǎn)生細(xì)胞毒性作用，致使黑素細(xì)胞缺失。endprint

此外，通過對白癜風(fēng)患者的相關(guān)血清抗體檢測發(fā)現(xiàn)，抗黑素細(xì)胞抗體、抗酪氨酸酶抗體、抗酪氨酸酶相關(guān)蛋白-1抗體、黑素濃集素受體1（MCHR 1）抗體的水平升高，說明了存在體液免疫的異常 [10]。研究發(fā)現(xiàn)，患者皮損基底膜帶上觀察到IgG和C3的沉積，在培養(yǎng)的黑素細(xì)胞中加入IgG會促進(jìn)疾病的進(jìn)展[11]。以上過程由CD8+T 淋巴細(xì)胞抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（antibody dependent cell cytotoxicity，ADCC）造成黑素細(xì)胞的破壞。

2 白癜風(fēng)與CD4+T細(xì)胞

CD4+T 細(xì)胞效應(yīng)受 MHCⅡ類分子的限制，活化后即為效應(yīng) Th 細(xì)胞，其生物學(xué)作用主要由分泌的細(xì)胞因子決定。針對白癜風(fēng)患者行細(xì)胞因子檢測，發(fā)現(xiàn)白癜風(fēng)主要是以TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-12為主的Th 1型分泌模式。

IFN-γ通過增加細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）的表達(dá)提高T細(xì)胞歸巢能力，同時IFN-γ所誘導(dǎo)產(chǎn)生的CXCL 10可募集和激活T細(xì)胞[12]。CXCL 10作為趨化因子，介導(dǎo)Th1型淋巴細(xì)胞的歸巢并分泌IFN-γ和TNF-α[13]，這些產(chǎn)物又會促進(jìn)CXCL 10的產(chǎn)生，從而形成放大環(huán)路。

白癜風(fēng)患者皮膚組織中TNF-α水平與白癜風(fēng)病情活動呈線性相關(guān)[13]。TNF-α通過各種凋亡途徑誘導(dǎo)和破壞黑素細(xì)胞并抑制黑素細(xì)胞干細(xì)胞的分化，提示抗TNF劑（如英夫利昔一類藥物）可能對白癜風(fēng)的治療有效[14]。

白癜風(fēng)患者血清可溶性IL-2 受體表達(dá)比正常人群高，病程越短增高越明顯，提示IL-2 的敏感性在早期診斷白癜風(fēng)有重要指示作用[15]。相反，白細(xì)胞介素-2 可溶性受體在白癜風(fēng)患者中降低，泛發(fā)型及活動期的白癜風(fēng)患者降低更明顯，可能預(yù)示白癜風(fēng)患者 IL-2 SR 水平與疾病活動的嚴(yán)重程度相關(guān)[16]。

3 白癜風(fēng)與 Th17細(xì)胞

Th17細(xì)胞是CD4+T細(xì)胞亞群的一種，可以表達(dá)特征性轉(zhuǎn)錄因子ROR-γT并分化成產(chǎn)生IL-17等細(xì)胞因子而參與殺傷黑素細(xì)胞炎癥反應(yīng)，在白癜風(fēng)的發(fā)病中發(fā)揮作用[17]。有研究證明， 白癜風(fēng)患者血清IL-17水平顯著增高，并且其升高水平與白癜風(fēng)累及面積成正相關(guān)[18]，解釋了皮損區(qū)黑素細(xì)胞破壞并伴隨生成減少的現(xiàn)象。

免疫組化發(fā)現(xiàn)白癜風(fēng)患者皮損邊緣組織中IL-17A mRNA水平表達(dá)增強(qiáng)，結(jié)合免疫熒光發(fā)現(xiàn)同時存在IL-17A陽性T細(xì)胞的增多，提示白癜風(fēng)患者皮損處黑素細(xì)胞缺失與Th17活化相關(guān)，為兩者的聯(lián)系提供了直接的組織學(xué)證據(jù)[19]。

4 白癜風(fēng)與調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞

調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg 細(xì)胞）是一類具有負(fù)性調(diào)節(jié)機(jī)體免疫反應(yīng)的T細(xì)胞亞群，其免疫調(diào)節(jié)功能與FoxP3的持續(xù)表達(dá)密切相關(guān)。 FoxP3是Treg 細(xì)胞的一個特殊標(biāo)記，作為特異性標(biāo)記物和關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，F(xiàn)oxP3通過與染色體結(jié)合調(diào)節(jié)Treg細(xì)胞的發(fā)育和功能表達(dá)[20]。 RORγt是調(diào)控Th17細(xì)胞分化的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄激活因子，與FoxP3共同決定了T細(xì)胞受抗原刺激后是細(xì)胞分化方向，兩者的平衡關(guān)系決定了機(jī)體的免疫狀態(tài)。

有研究表明白癜風(fēng)患者FoxP3水平明顯下降 ，提示患者Treg 細(xì)胞功能可能發(fā)生損傷。同時有研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)oxP3在白癜風(fēng)患者皮損內(nèi)免疫染色陽性的平均面積百分比和外周血中FoxP3的細(xì)胞水平與對照組相比都明顯降低。表明FoxP3表達(dá)缺陷可以降低Treg 細(xì)胞的功能。

Treg 細(xì)胞的免疫負(fù)性調(diào)節(jié)作用和通過抑制 CD4+T 細(xì)胞和 CD8+T 細(xì)胞的活化與增殖實現(xiàn)。Treg 可以分泌具有抑制作用的細(xì)胞因子 TGF-β、 IL-10 等，可以抑制多種免疫細(xì)胞，達(dá)到免疫負(fù)調(diào)節(jié)作用。Treg 及其分泌的細(xì)胞因子的減少，可增加自身反應(yīng)性 T 細(xì)胞的應(yīng)答。

白癜風(fēng)患者皮損區(qū)Treg 細(xì)胞的數(shù)量和（或）功能降低下降，對白癜風(fēng)的疾病進(jìn)展起著重要的作用。其具體作用機(jī)制以及表達(dá)的相關(guān)產(chǎn)物尚不清楚。

5 總結(jié)

T細(xì)胞亞群參與白癜風(fēng)發(fā)病的細(xì)胞免疫機(jī)制可能包括：多種黑素細(xì)胞表面特異性抗原刺激CD8+T等的增殖及活化，使其分泌殺細(xì)胞因子，直接導(dǎo)致黑素細(xì)胞的凋亡，或可刺激其他免疫細(xì)增殖活化進(jìn)而殺傷黑素細(xì)胞。異常增加的Th17和異常減少或功能減退的Treg 細(xì)胞，直接削弱了黑素細(xì)胞的自身耐受性，并促進(jìn)了T淋巴細(xì)胞對黑素細(xì)胞的破壞及誘導(dǎo)其凋亡。近些年，關(guān)于如何確定T淋巴細(xì)胞對某一類抗原應(yīng)答時哪一些V基因被取用來研究免疫應(yīng)答，成為一個新的研究領(lǐng)域，有學(xué)者提出可通過免疫組庫方法分析。白癜風(fēng)免疫發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，針對T細(xì)胞亞群的進(jìn)一步研究，對白癜風(fēng)的治療、病情評估等有重要意義。

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