張棟 ，楊凱 ，劉波 ，劉娜 ，孔令靜

（1.山東省動物疫病預防與控制中心，山東 濟南 250022；2.濟南市農業(yè)局，山東 濟南 250022；3.山東匯眾獸醫(yī)技術服務有限公司，山東 濟南 250022）

一例蛋雞禽網狀內皮組織增殖病和禽白血病混合感染的診治

張棟1，楊凱2，劉波3，劉娜3，孔令靜3

（1.山東省動物疫病預防與控制中心，山東 濟南 250022；2.濟南市農業(yè)局，山東 濟南 250022；3.山東匯眾獸醫(yī)技術服務有限公司，山東 濟南 250022）

某蛋雞場80日齡蛋雞出現(xiàn)漸進性消瘦和生長發(fā)育不良，剖檢可見腺胃腫大，乳頭擠壓出現(xiàn)膿性分泌物。無菌取病死雞的腺胃進行熒光定量RT-PCR/PCR檢測，結果顯示該樣品禽網狀內皮組織增殖病病毒、禽白血病病毒均為陽性。結合臨床癥狀、剖檢病變和實驗室檢測結果，該蛋雞場發(fā)病的原因是由禽網狀內皮組織增殖病病毒和禽白血病病毒混合感染而引起的。

禽網狀內皮組織增殖病病毒；禽白血病病毒；RT-PCR/PCR

禽網狀內皮組織增殖?。≧E）和禽白血病(AL)是繼馬立克病（MD）后發(fā)現(xiàn)的兩種腫瘤性免疫抑制性疾病，其中RE是由禽網狀內皮組織增殖病病毒（REV）引起的，單REV感染禽多不表現(xiàn)出典型的臨床癥狀，主要以病雞的生長發(fā)育不良、漸進性消瘦和因免疫抑制而繼發(fā)感染其他病原引起的病死率上升為特征[1]；AL是由禽白血病病毒（ALV）引起，發(fā)病雞主要表現(xiàn)為精神沉郁、生長遲緩、雞群發(fā)育不均，感染雞群出現(xiàn)腫瘤疾病及其所導致的慢性消耗性死亡、生產性能下降和免疫抑制等。這兩種疾病均能造成禽類的免疫系統(tǒng)損傷，導致生產性能降低和死亡。近年來，ALV和REV感染有增多趨勢，這嚴重危害了養(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展并造成了巨大的經濟損失[2]。

1 雞群臨床癥狀

2016年8月，德州某蛋雞養(yǎng)殖場養(yǎng)殖蛋雞20000只，80日齡，病雞食欲下降(采食量一直不達標)，精神沉郁，羽毛蓬亂，雞冠蒼白，貧血，排飼料糞便，消瘦，生長發(fā)育不良，發(fā)病率約為30%，零星傷亡。

2 剖檢變化

病死雞腺胃腫大（圖1、圖2），如乒乓球狀，腺胃壁顯著增厚、變硬，乳頭內可擠出乳白色膿樣分泌物，個別腺胃粘膜出血脫落（圖3）、潰瘍；胸腺、脾臟萎縮。個別病雞盲腸扁桃體腫大、出血。其他器官無明顯病變。

圖1 外觀：腺胃腫大

圖2 剖解：腺胃腫大

圖3 腺胃粘膜脫落

3 實驗室檢測

3.1 材料與方法

3.1.1 試劑 禽網狀內皮組織增殖病病毒單重熒光PCR檢測試劑盒購自北京億森寶生物科技有限公司，禽白血病病毒實時熒光PCR檢測試劑盒購自世紀元亨有限公司，病毒RNA/DNA柱式提取試劑盒購自北京森康生物技術開發(fā)有限公司。

3.1.2 方法 無菌采集病死雞的腺胃，將其剪碎后，研磨并勻漿，反復凍融4次，4℃ 8000r/min離心5min，取上清液分別用病毒RNA/DNA柱式提取試劑盒提取核酸，置于-20℃保存?zhèn)溆?。REV的反轉錄、擴增，ALV的擴增均按試劑盒說明進行操作。

3.2 檢測結果

3.2.1 REV的RT-PCR檢測結果 REV陽性對照Ct值為12.909，呈 S型特異性曲線，陰性對照 Ct值為 0， 樣品 （B、C、D）Ct值分別為 15.772、15.455、16.208，樣品均呈擴增曲線，如圖4所示，表明樣品感染了REV。

圖4 REV PCR圖

3.2.2 ALV的PCR檢測結果 ALV陽性對照Ct值為15.74，呈S型特異性曲線，陰性對照Ct值為0，樣品（B、C、D）Ct值分別為 17.33、18.70、19.51，樣品均呈擴增曲線，如圖5所示，表明樣品感染了ALV。

圖5 ALV PCR圖

4 診斷結果

結合臨床癥狀、剖檢變化以及實驗室病毒RT-PCR/PCR檢測結果，可以明確該蛋雞場的發(fā)病原因是由REV和ALV混合感染所引起的。

5 討論

5.1 REV和ALV具有垂直傳播的特性，因此建議養(yǎng)殖戶從正規(guī)孵化場引進健康雞苗，避免從疫區(qū)引進種蛋和雛雞。對引進的種雞要嚴格執(zhí)行先隔離觀察，之后再轉入生產群的制度。疫苗中兩者的污染和傳播是引起其感染和流行的重要原因[3]，此外所用疫苗也應從正規(guī)廠家引進，避免免疫造成二次污染。

5.2 REV和ALV是引起雞腺胃炎的重要因素。臨床上腺胃炎病雞的腺胃組織中這兩種病原檢出率顯著升高，可能是由于這兩種病原的混合或繼發(fā)感染所致，因此對兩者的有效防控，除凈化雞群外，應防止繼發(fā)感染或混合感染。

5.3 加強飼養(yǎng)管理，改善雞舍的飼養(yǎng)環(huán)境，保證舍內溫度、濕度和合理通風，為其健康創(chuàng)造有利條件。加強生物安全措施，發(fā)現(xiàn)病雞，及早隔離，避免接觸傳播。定期消毒，尤其是各種生產用具和運輸車輛及種蛋的消毒。做好雞場的衛(wèi)生管理，墊料的消毒及處理、病死雞的無害化處理等工作。

[1] 任玉鵬,張煥容,王小楠,等.四川部分雞場禽網狀內皮組織增生癥病毒感染情況調查 [J].動物醫(yī)學進展.2015，36（6）:162-166.

[2] 沈清霞,任冬梅,丁紅雷,等.重慶市禽白血病及禽網狀內皮組織增生癥的血清流行病學調查[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2014,11,54-55.

[3] 莊金秋,畢妍麗,梅建國,等.應用PCR法檢測禽源生物制品中禽網狀內皮組織增生癥病毒[J].中國畜牧獸醫(yī),2012,39（7）：36-39.

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1673-1085（2017）10-0038-03

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